新型冠状病毒检测方法及其生物传感器的研究进展

新型冠状病毒是一种具有高感染性、高传播性和高死亡率的严重急性呼吸道传染病,严重威胁着人类的生命安全,针对新型冠状病毒尚无特效治疗方法。新型冠状病毒在全球范围内持续传播,变异毒株不断出现,病毒检测面临巨大挑战。目前绝大多数实验室应用荧光-定量PCR法进行核酸检测,方法耗时3～4 h,准确率在60%～80%,患者需要多次检测才能确诊,极大增加了检验人员的工作强度和职业暴露风险。本文基于新型冠状病毒的检测方法,对基于免疫反应和核酸检测技术构建的生物传感器进行了总结并为进一步开发冠状病毒的生物传感器检测技术提供思路。     

新型冠状病毒检测技术的研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)具有高传染性和高隐蔽性,并且不断发生变异,产生不同类型病毒变异株,其主要传播途径是呼吸道飞沫传播、接触传播、气溶胶传播。快速准确的病毒检测技术对疫情防控工作具有重要意义。本文就SARS-CoV-2的病原学结构特点和当前实验室主要检测技术(病毒分离鉴定、高通量测序、荧光定量PCR、反转录环介导恒温扩增、基因芯片、抗原抗体检测和基于CRISPR/Cas系统的核酸检测)作一综述。     

新型冠状病毒实验室检测方法及应用

随着新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus?2,SRAS?CoV?2）分离培养与基因组测序的完成,新型冠状病毒肺炎（corona virus disease,COVID?19）的确诊主要依靠RT?PCR 法检测SARS?CoV?2 核酸基因,重组酶介导等温核酸扩增技术（recombinase aided amplification,RAA）等新型常温核酸扩增技术也得到进一步应用。免疫学诊断包括胶体金和ELISA IgM 和IgG 抗体检测技术,主要用于人群的筛查和辅助诊断。基于CRISPR技术的新型诊断技术等也在进一步完善过程中。     

酶联免疫吸附测定法与荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用

目的分析酶联免疫吸附测定法与荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用。方法选取我院2014年1月到2015年12月期间收治的310例乙型肝炎病毒携带者或患者,对该病分别采取ELIS法通过HBV-M检测与PCR技术的定量HBV-DNA检测法检测,比较两组检测方法对乙型甲肝病毒检测的情况。结果 ELIS法通过HBV-M检测与PCR技术的定量HBV-DNA检测法的阳性概率分别为60.0%和98.0%,组间差异具有统计学意义(P0.05)。结论通过荧光定量的PCR检测法对乙型肝炎病毒的检测与酶联免疫吸附测定法能够更有效、精准的检测,对临床的指导、确诊治疗的方法有更多的帮助,值得临床的推广与使用。     

检测严重急性呼吸综合征相关冠状病毒的通用模板信号扩增技术

严重急性呼吸综合征 (SARS)是由一种新型冠状病毒(Co V)引起的急性传染性疾病 ,建立快速、准确的 SARS-Co V检测技术是应对 SARS的重要措施之一。目前有关SARS- Co V检测方法的建立主要集中在 EL ISA和 PCR技术的应用方面。以 Taqman为代表的荧光定量 PCR技术已成为分子生物学诊断的重要手段 ,但无论在科研还是临床应用过程中 ,目前的 PCR技术仍存在一些不足 [1 ] 。通用模板信号扩增技术 (universal template signal amplification technol-ogy,UT- PCR) [2 ]是在 Taqman技术基础上发展起来的检测技术 ,克服了 Taqman探…     

一起无症状感染者引起的新型冠状病毒肺炎疫情的跟踪检测报告

目的分析绵阳市一起由无症状感染者引起的新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)疫情的实验室跟踪检测结果,为制定病人及无症状感染者的防治措施、精准施策提供科学依据。方法采用实时荧光定量PCR技术对采集的咽拭子、痰液、粪便及外环境等标本进行新型冠状病毒核酸检测。结果本起疫情共波及92人;发现1例确诊病例、4例无症状感染者,外环境样本1份核酸阳性、2份可疑(N靶标阳性);无症状感染者持续排毒时间长达47天。结论本次疫情以无症状感染者为主,且具有较强传播性。加强病人和无症状感染者的发现与管理,密切接触者的追踪、管理及病原学筛查;加强健康教育宣传,养成良好个人卫生习惯是新型冠状病毒肺炎防控的关键措施。     

2019-nCoV检测方法的研究进展

新型冠状病毒(2019-nCoV)是一种具有极高传染性的呼吸道RNA病毒,由于尚未存在批准上市的疫苗用于预防,为了提高疾病的确诊率诊断和改善治疗效果,避免扩散,病毒的筛查检测工作极为关键。本文综述了2019-nCoV的核酸检测技术、免疫学检测技术和联合诊断的实验室和临床方法,以期为病毒检测和疾病防控提供参考。     

214例新型冠状病毒肺炎疑似病例临床分析

目的 回顾分析214例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似病例的流行病学史、临床表现、CT影像学、血常规和核酸检测结果,为COVID-19防治提供参考资料。 方法 收集2020年1月24日—3月5日三亚市人民医院收治的214例新型冠状病毒肺炎疑似病例临床和实验室及新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸检测结果资料,分析疑似病例在不同性别和年龄的分布情况。 结果 214例新型冠状病毒肺炎疑似病例中,SARS-CoV-2核酸检测阳性24例,SARS-CoV-2核酸阳性率为11.2%。不同性别和不同年龄段确诊感染率差异无统计学意义（P>0.05）。白细胞计数、淋巴细胞计数和C反应蛋白的变化在新型冠状病毒肺炎确诊病例和排除的疑似病例中差异无统计学意义（P>0.05）。24例确诊病例中,有明确的流行病学史23例（占95.8%）,呼吸道症状以发热和咳嗽为主。CT影像学表现为肺内可见不同程度的磨玻璃样密度影或双侧浸润等。 结论 新型冠状病毒肺炎疑似病例的确诊,在综合考虑其流行病学史和相应临床表现的基础上,仍需依靠病原学核酸检测。     

化学发光法检测新型冠状病毒抗体的临床评价及应用

目的:探讨化学发光微粒子免疫法对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)总抗体及IgM抗体的检测效果及两种抗体的产生规律.方法:选取武汉大学中南医院收治的197例确诊新型冠状病毒肺炎患者,其中包含了24例核酸检测阴性但通过临床症状和CT检测确诊的患者;已排除新型冠状病毒感染的其他就诊患者142例作为对照组,通过化学发光法对...     

应用荧光定量PCR检测SARS康复者血浆冠状病毒RNA

目的　通过对SARS临床诊断康复者血浆中冠状病毒RNA的检测 ,观察SARS临床诊断康复者血浆中携带冠状病毒的情况 ,对SARS临床诊断康复者血浆临床应用的安全性提供实验室依据。方法　采用荧光定量PCR仪 ,分别用两种不同厂家荧光定量PCR试剂、对 2 6份SARS康复者血浆进行冠状病毒RNA检测。结果　两种不同试剂检测 2 6份SARS临床诊断康复者血浆冠状病毒RNA均为阴性。结论　实验室检测发现 ,SARS临床诊断康复者血浆冠状病毒RNA为阴性 ,为进一步临床采用SARS临床诊断康复者血浆辅助治疗SARS患者的安全性提供一定的实验室证据。     

PCR技术在支原体检测中的应用

致病性支原体感染造成的危害非常广泛，在人类、动物、植物和昆虫中，可引起多种疾病。但在支原体的诊断中，因其生长缓慢、营养要求高以及交叉抗原的存在，限制了培养法和血清学方法在支原体诊断中的应用。随着分子生物学技术的发展，PCR技术已广泛应用于支原体的诊断中。本文主要概述了普通PCR、PCR—ELISA、巢式PCR、实时荧光定量PCR、逆转录PCR、多重PCR技术在支原体检测中显示的优越性，这些技术为支原体的检测提供了快速、灵敏、特异的检测方法。     

丙型肝炎分子生物学、血清学诊断方法的研究和临床应用

Using techniques of molecular biology and serology, we research on the establishment of HCV diagnotic quality control standard, HCV diagnostic materials, anti-HCV EIA diagnostic method, detection of serum HCV RNA,detection of HCV RNA in liver tissue by in situ PCR, and the establishment of monoclonal hybridoma cell line of HCV C33c and NS5a. Successfully prepared diagnostic kits have applied in screening of blood donor, clinical diagnosis,observation of treatment effect and research on pathogenesis of hepatitis C. After the use of these reagents, the transmission rate of HCV through blood product has been dramatically reduced.     

Progress in diagnosing herpesvirus infections

As molecular biology has developed, several new diagnostic techniques have found application in the clinical setting. The use of the polymerase chain reaction (PCR) assay to study the molecular biology of microbial organisms has led to unparalleled advances, largely due to the rapidity with which results can be obtained. The sensitivity and specificity of PCR detection of viral DNA for diagnostic purposes are remarkable. With such excellent sensitivity, PCR is destined to become a useful diagnostic tool in herpesvirus infections. However, it is well known that herpesviruses establish latency after primary infections and that they can often be reactivated under various conditions. Because of the high sensitivity of PCR, detection of virus sequences by this method does not necessarily imply a disease state. We must be careful not to overdiagnose conditions in a clinical setting based on a PCR assay.     

血流感染的分子诊断研究进展

血流感染是指病原微生物进入血液循环并生长繁殖,产生毒素、代谢产物,导致全身炎症反应的感染性疾病,是当前全世界临床医生面临的重大挑战之一。早期诊断并使用有效的抗感染方案能缩短抗生素使用时长、降低患者死亡率。血培养及药物敏感试验是目前临床诊断血流感染的金标准,但其存在病原学检测结果时间长、阳性率低等缺点,不能满足血流感染危重患者快速及精准治疗的需求。近年来随着分子检测技术的发展,涌现出DNA 微阵列、质谱分析、数字PCR、二代高通量测序等分子诊断技术,较血培养能更快速地识别病原菌及耐药基因、提高检测的阳性率,指导临床医师早期进行目标抗生素干预,对改善血流感染患者临床预后具有潜在价值,并可降低病原菌耐药性。     

分子生物学技术在隐孢子虫病研究中的应用进展

隐袍子虫是一种属于顶端复合物门的寄生性原虫，感染此虫引起的隐孢子虫病是一种全球性的人畜共患寄生虫病。免疫力低下、功能缺陷或免疫抑制的患者感染此虫后，可引起严重胃肠炎并伴有水样腹泻。导致大量体液丢失而危及生命。艾滋病患者中感染率高达48％左右，长期的严重腹泻是艾滋病病人的重要致死因素之一。该病对人类公共卫生造成很大威胁，国外暴发流行时有报告。国内外一些学者相继利用核酸限制性片段长度多态性分析、基因克隆、分子杂交和聚合酶链式反应等分子生物学技术，对隐孢子虫核酸分子进行了大量的研究并取得了一些重要进展，并在隐孢子虫卵囊检测、隐孢子虫病的诊断、流行病学调查及虫种鉴定和虫株分型中得到广泛应用。     

Transport of digested decontaminated sputum specimens to a central laboratory for testing forM. tuberculosis by amplicor MTB test

Rapid diagnosis of tuberculosis may improve management of infected patients and facilitate infection control procedures The relatively slow growth rate ofM. tuberculosis and the limited sensitivity and specificity of microscopy make rapid diagnosis difficult. Nucleic acid amplification techniques have been extensively studied for the detection ofM. tuberculosis DNA and a number of commercial products for detection of M.tuberculosis nucleic acid in clinical specimens are now available. As performance of diagnostic PCR at central reference laboratories may be desirable, the impact of specimen transport on the performance of the Amplicor MTB PCR assay is of practical importance. We have assessed the performance of the Amplicor MTB PCR on specimens submitted and initially processed in laboratories in 3 cities and then transported to a single laboratory for PCR assay. The overall sensitivity of the PCR test was 97 per cent and the corrected specificity was 100 per cent. All of 23 culture positive specimens collected locally were PCR positive compared with 10 of 11 culture positive specimens transported from elsewhere. In this study transportation of digested decontaminated specimens to a central laboratory either frozen at -20°, or overnight at room temperature had no apparent effect on the performance characteristic of the Amplicor MTB PCR assay.     

三种监测技术在宁夏鼠疫监测中的应用效果分析

目的观察金标记检测技术、酶联免疫检测技术和PCR 3种新技术在鼠疫监测工作中的实际应用效果,探讨适合宁夏鼠疫监测的新方法,同时也为我国制定新的鼠疫监测实验室操作规程、鼠疫检测方法和诊断标准提供基础资料。方法对相同样本运用新、老技术进行检测,分析新老方法的检验效果。结果金标记检测技术和酶联免疫检测技术与血凝抑制实验的检出结果相吻合,PCR技术检出阳性率较低。结论金标记法和酶联免疫检测技术容易掌握而且出结果快、特异性和稳定性好,适合向基层推广应用;PCR技术还需要进一步实践并在技术上不断完善,才能在鼠疫监测中实际应用。     

分子和细胞遗传学新技术在出生缺陷诊断及防治中的应用

SincePinkelandGray[1] firstappliedFluorescenceinsituhybridization (FISH)techniquestocytogeneticdiagnosis ,FISHtechnology ,acombinationofmolecu larandconventionalcytogenetictechniques (molecularcytogenetics) ,hasbroughtmoderncytogeneticstoanewerawithsignif…     

乳腺癌超声诊断新进展

乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,超声检查是诊断乳腺癌的主要影像学检查方法之一。常规的二维超声和多普勒超声是乳腺癌超声诊断的基础,但它存在一些局限性,这使其诊断的敏感性、特异性及准确性不高。随着超声诊断技术的不断发展,出现了超声弹性成像、超声造影及三维成像等新技术,这些新技术作为常规超声的补充,各具优缺点,现就这些技术应用于乳腺癌的诊断予以概述。     

COVID-19 rhapsody: Rage towards advanced diagnostics and therapeutic strategy

The deadly global outbreak of coronavirus disease-2019 (COVID-19) has forged an unrivaled threat to human civilization. Contemplating its profuse impact, initial risk management and therapies are needed, as well as rapid detection strategies alongside treatments with existing drugs or traditional treatments to provide better clinical support for critical patients. Conventional detection techniques have been considered but do not sufficiently meet the current challenges of effective COVID-19 diagnosis. Therefore, several modern techniques including point-of-care diagnosis with a biosensor, clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-associated proteins that function as nuclease (Cas) technology, next-generation sequencing, serological, digital, and imaging approaches have delivered improved and noteworthy success compared to that using traditional strategies. Conventional drug treatment, plasma therapy, and vaccine development are also ongoing. However, alternative medicines including Ayurveda, herbal drugs, homeopathy, and Unani have also been enlisted as prominent treatment strategies for developing herd immunity and physical defenses against COVID-19. All considered, this review can help develop rapid and simplified diagnostic strategies, as well as advanced evidence-based modern therapeutic approaches that will aid in combating the global pandemic.