自动图像分析方法在体外染色体畸变分析中的应用

以往实验室的细胞遗传毒理学试验全部是在普通显微镜下由人工操作完成分析的,比较耗费时间和人力。在我中心毒理所购进了蔡司全自动图像分析仪后,我们通过实践摸索出一套方法,即以自动图像扫描加人为判断的方式进行染色体畸变试验分析,方法简单、快速,为了与相关的操作技术人员进行经验交流,以利共同提高,现将其简要介绍如下。     

应用QF-PCR和CNV-seq以及染色体核型分析检测羊水的染色体畸变及结果分析

目的评价定量荧光PCR(QF-PCR)在染色体畸变中诊断的准确性,探讨QF-PCR、基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)和染色体核型分析(核型分析)这3种技术在染色体畸变的产前诊断中的应用价值以及多方法联合诊断的优势和必要性。方法采用QF-PCR检测106例产前筛查高风险孕妇的产前羊水的染色体畸变,同时使用CNV-seq(102例)及核型分析(4例)检测;统计QF-PCR与后两者之间的阳性符合率。结果在21、18、13、X、Y共5种染色体非整倍体检测方面,QF-PCR与CNV-seq及核型分析的阳性符合率均为100%。对于所有46条染色体畸变的检测,CNV-seq阳性但QF-PCR无法检出的共21例,其中20例微缺失或微重复均小于5 Mb,核型分析可能均无法检出。结论 QF-PCR对5种染色体非整倍体的检测具有很高的准确性。QF-PCR结合CNV-seq,相互补充和印证,快速且覆盖面广,具有部分替代核型分析的潜力;多方法联合诊断对染色体畸变的检出具有很大的优势和必要性。     

201例放射工作人员淋巴细胞染色体畸变和微核检测分析

２０１例放射工作人员淋巴细胞染色体畸变和微核检测分析韩良兵孙宝禄王丽（山东省德州市卫生防疫站，德州市２５３０１４）人体外周血淋巴细胞染色体畸变和微核细胞率，作为放射工作人员健康查体的特检指标之一，对于放射损伤的诊断具有重要价值。为此，我站自１９９４年...     

染色体畸变在职业辐射损伤诊断中的价值

本文报道了济南地区放射工作人员的细胞遗传学变化，结果表明，从事医用X线工作者，工业探伤，同位素应用及综合性作业人员的染色体畸变率分别为0．32％，0．33％，0．37％和0．24％，均明显高于正常对照组（0．14％），本文还重点讨论了染色体畸变（CA）及微核（MC）在职业辐射损伤诊断中的价值。     

300例放射工作人员淋巴细胞微核及染色体畸变情况调查

目的 观察和研究放射工作人员外周血淋巴细胞微核和染色体畸变情况,探讨不同性别、不同工种、工龄与染色体畸变之间的关系。方法 用常规方法检测300名放射工作人员的外周血淋巴细胞染色体畸变和微核情况并分析。结果 300名放射工作人员染色体平均畸变率、检出率分别为0.042%和3.68%;平均微核率、检出率分别为0.0437%和24.62%;染色体畸变率和微核率都明显高于对照组,差异有显著性意义。不同工龄段无统计学差异,不同工种之间无统计学差异;其畸变率随工龄增高明显,结论 放射工作人员染色体畸变率和微核率高于正常人群,应加强对放射工作人员的辐射防护工作。     

光谱式染色体自动核型分析简介

光谱染色体自动核型分析（SKY－Spectral Karyotying)是近年来在国际上迅速发展的一项技术。自问世以来，即以其检测灵敏度高，操作简单等优势得到了广泛应用，在我国部分医院也已经开始应用该项技术。本文从SKY技术的原理、发展前景、优越性以及与同类技术的性能比较等方面对该技术进行了介绍。     

人类染色体畸变核型分布特点的研究

[目的]明确染色体畸变的不同类型分布特点. [方法]取受检者外周血,进行淋巴细胞培养,常规制备染色体,G显带,镜下计数50个中期分裂相,显微摄影分析10个核型. [结果]在1065例生殖咨询者中,染色体畸变率为15.7%.其中按畸变类型分类,数目畸变率为9.9%,结构畸变率为2.3%,染色体多态性异常率为3.5%;按染色体不同分类,常染色体畸变率为11.7%,性染色体畸变率为4.0%. [结论]人类常染色体易发生畸变,数目畸变是人类染色体畸变的主要类型,结构畸变多发生在常染色体中,染色体多态性以大Y和小Y为主.其中3侧染色体平衡易位属世界首报.     

油漆工淋巴细胞染色体畸变率和微核率的变化

目的　探讨居室装饰油漆工外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核发生率的变化。方法　应用气相色谱法测定工作场所苯等有机溶剂浓度 ,按常规方法检测外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核发生率。结果　在工作场所空气中苯等有机溶剂浓度超标 2～ 2 5倍 ,接触组工人外周血淋巴细胞微核发生率为 7 12‰ ,对照组为 1 5 6‰ ;染色体畸变率接触组为 2 62 % ,对照组为 0 62 % ,接触组均显著高于对照组 (P <0 0 1)。结论　油漆工作业场所苯等有机溶剂浓度严重超标 ,致使作业工人外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核发生率升高。     

苯作业工人外周血淋巴细胞染色体畸变分析

目的 研究苯接触工人外周血淋巴细胞染色体畸变的水平,以及接苯工人的工种、工龄等对结构畸变细胞率的影响.方法 选取130名接触苯作业工人进行基本情况调查.并抽取每人外周静脉血0.5 ml,加入含有植物血凝素和小牛血清的1640培养基中培养52～54 h,终止培养4～6 h前加入秋水仙素.收获细胞,染色,用自来水、单蒸水冲洗,干后封片光学显微镜下观察.以非分带染色的方法检测外周血淋巴细胞染色体畸变种类和异常率.结果 苯接触工人的染色体畸变异常人数在包括裂隙时有40人,在不包括裂隙时有22人,分别占总人数的31.7%与16.9%.在分析不同工种、性别、工龄、饮酒、吸烟、防护知识的掌握程度不同对染色体畸变的影响时,无论包括不包括裂隙这种畸变种类,工种是其影响因素.染色体结构畸变类型主要是单体裂隙31.77%、单体缺失30.75%和断裂25.41%.没有发现上龄、性别、饮酒、吸烟和防护知识对染色体畸变率有明显影响.结论 苯接触工人的染色体异常率在包括裂隙时为31.7%,在不包括裂隙时为16.9%.油漆工人的染色体畸变异常率高于其他苯作业工人.     

焊工外周血淋巴细胞微核率和染色体畸变率观察

焊工外周血淋巴细胞微核率和染色体畸变率观察曾延淑，熊亚隆，罗勇昆明医学院预防医学系劳卫教研室６５００３１随着遗传毒理学的发展，发现许多化学物质具有细胞遗传毒理效应。锰是常见的工业毒物，在工业生产中广泛存在。认识和控制其危害，无论从职业卫生或环境保护角...     

全自动染色体收获仪在淋巴细胞微核试验中的价值

目的 探讨全自动染色体收获仪在淋巴细胞微核试验中的优势。方法 采集80名放射工作人员的外周血,分别用全自动染色体收获仪和手工法收获淋巴细胞,吉姆萨染片后,在显微镜下观察淋巴细胞的微核。结果 对同一批标本收获淋巴细胞,全自动收获仪用时（185 min）小于人工组（350 min）,使用收获仪得到的微核率（1.04‰ ±0.63‰）、微核细胞率（0.89‰ ±0.69‰）和微核阳性率（70.0%）均高于手工法（0.60‰ ±0.68‰,0.51‰ ±0.55‰,48.8%）,差异均有统计学意义（P < 0.01）。结论 全自动染色体收获仪可以缩短实验操作的时间,减轻实验室人员的工作量,保护实验人员的身心健康;同时提高淋巴细胞微核的检出率,为临床提供更为准确的检测数据。     

山东省部分放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变分析

目的 了解山东省部分放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变情况,为放射工作人员职业健康监护及后续研究工作提供理论基础。方法 随机选取2016至2017年度在本机构进行职业健康检查的放射工作人员共819人,其年龄22~59岁,包括工业应用组190人（工业探伤、核电站）,医疗应用组629人（放射诊断、治疗、核医学、介入等）,为观察组;同时选取100人为对照组。按《外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价》进行染色体畸变分析及结果判定,采用SPSS 22.0统计软件进行分析,计数资料采用百分比表示,率的比较采用χ²检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果 观察组染色体总畸变率（0.11%）明显高于对照组（0.33%）,差异有统计学意义;对照组及其他医学应用组均未发现异常。观察组中工业应用组发现1例双着丝粒型染色体畸变,介入科医护人员56人,发现2例双着丝粒畸变,观察组共发现3例异常。结论 山东省部分放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变率明显高于正常人群,介入组工作人员的染色体畸变异常率明显高于其他放射工作人员。     

介入放射工作人员染色体畸变和微核观察

目的 探讨X射线对介入放射工作者外周血淋巴细胞染色体和微核的影响，确保介入放射工作人员的健康与安全。方法 选择363名从事介入放射学的工作人员作为研究对象，未接触电离辐射的435名健康从业人员为对照组，采取微量全血培养法对外周血淋巴细胞染色体和微核进行培养、检测和分析。结果 介入放射组的淋巴细胞染色体总畸变率（0.11% ±0.373%）显著高于对照组（0.02% ±0.126%），结果差异有统计学意义（t = 5.080, P< 0.01）；无着丝粒体率（0.04% ±0.199%）和双着丝粒体率（0.06%±0.234%），也明显高于对照组（0.01% ±0.107%）、（0.00% ±0.068%），差异均有统计学意义（t = 2.693，4.529，P 均< 0.01）；微核率（0.78‰ ±0.996‰）与对照组（0.65‰ ±0.853‰）比较，差异亦有统计学意义（t = 2.000，P< 0.05）。不同工龄间的染色体畸变率、无着丝粒体率和双着丝粒体率差异均无统计学意义（P > 0.05）；微核率的差异具有统计学意义（P < 0.01）。其中工龄 ≥ 20a工龄组与其他组的微核率差异有统计学意义（P < 0.01）。介入组与普通放射组（放射诊断、放射治疗、工业应用）相比，染色体总畸变率、双着丝粒体率差异均具有统计学意义（P < 0.01，P < 0.05），组间两两比较，介入组染色体总畸变率（0.10% ±0.299%）显著高于放射诊断（0.06% ±0.312%）、放射治疗（0.03% ±0.170%）和工业应用组（0.04% ±0.189%），差异均有统计学意义（P < 0.01）；介入组染色体双着丝粒体率（0.06% ±0.234%）亦显著高于放射诊断（0.03% ±0.239%）、放射治疗（0.01% ±0.121%）和工业应用组（0.02% ±0.135%），差异均有统计学意义（P< 0.05）；介入组与各组之间的染色体无着丝粒体率和微核率差异无统计学意义。结论 X射线对介入放射工作人员染色体畸变率及微核率有一定的影响。长期接触低剂量的电离辐射，可以导致外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核率显著增加，并随着工作年龄的增加而逐渐增加。     

核型分析联合拷贝数测序在颈项透明层增厚胎儿染色体异常中的应用研究

目的  探究核型分析联合基因组拷贝数测序(copy number variation sequencing, CNV-seq)在早孕期颈项透明层(nuchal translucency, NT)增厚胎儿染色体异常检测中的应用价值。 方法  选取2018年1月-2019年10月因NT≥2.5 mm就诊于中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)产前诊断中心的164例孕妇, 获取知情同意后行羊膜腔穿刺术, 抽取羊水分别进行染色体核型分析及CNV-seq检测。 结果  164例NT增厚胎儿中, 24例核型异常, 包括15例21三体、2例18三体、4例性染色体异常、1例21三体嵌合以及2例其他染色体异常。不同NT值:2.5 mm≤NT < 3.5 mm组、3.5 mm≤NT < 4.5 mm组和NT≥4.5 mm组的核型异常检出率分别为9.38%(9/96)、18.60%(8/43)和28.00%(7/25)。不同产前诊断指征:单纯NT增厚组、NT增厚合并其他组的核型异常检出率分别为10.24%(13/127)、29.73%(11/37), 差异有统计学意义(P=0.003)。CNV-seq检出29例已知致病性及可疑致病性CNVs, 占17.68%(29/164), 但不能检测罗氏易位、平衡易位等。 结论  产前NT增厚胎儿, NT值增大且合并其他多项指征时, 胎儿染色体异常风险增高。核型分析和CNV-seq联合应用能有效提高胎儿染色体异常检出率, 有利于产前遗传咨询。     

铜陵市150例放射人员淋巴细胞微核及染色体畸变情况调查

目的探讨放射工作人员外周血淋巴细胞微核和染色体畸变的变化情况,为当前放射人员的卫生防护工作提供依据。方法用常规方法检测150名放射工作人员的外周血淋巴细胞染色体畸变和微核情况并分析。结果医务组与工业组微核阳性检出率和染色体畸变阳性检出率分别为8.5%、2.9%和4.5%、2.9%,随工龄的增加而增高。结论低剂量电离辐射对放射工作人员遗传物质有一定影响,不同暴露条件下的机体的损伤程度有所不同。     

人羊膜间充质干细胞体外传代培养对染色体核型的影响

目的:分离培养人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)并进行体外长期传代培养,通过对连续传代的细胞形态、膜表面标志、增殖、分化特性以及染色体核型进行研究,以观察体外培养对该细胞的影响,为其储备和临床应用提供实验依据。方法:无菌条件下从新鲜人胎盘组织分离羊膜,采用组织贴壁法分离培养hAMSCs,并对原代细胞～P11代细胞利用流式细胞技术检测其膜表面标志物;取P3～P4代细胞向神经细胞和成骨细胞诱导,免疫组化染色、PCR检测基因表达情况;采用染色体G显带法制备染色体核型。结果:hAMSCs形态似长梭型,呈流水状生长,细胞活性高,冻存复苏后仍能保持正常形态,并可在体外稳定扩增,细胞生长曲线呈"S"型;细胞高表达CD90、CD73、CD44、CD105;细胞经诱导后可以向神经细胞和成骨细胞分化,神经元特异性烯醇化酶和成骨细胞矿化结节检测为阳性,PCR检测巢蛋白和骨桥蛋白基因表达为阳性;P3～P10代的hAMSCs染色体核型均为正常二倍体核型。结论:hAMSCs在体外经数代培养后能保持间充质干细胞的外显和遗传特性,并且未见染色体核型异常改变。     

池州地区63例智力低下儿童的细胞遗传学分析

目的：探讨染色体异常在智力低下、先天畸形和发育异常等病人中的发生情况。方法：取患者外周血进行淋巴细胞培养,常规收获,R显带,显微镜下进行核型分析。结果：在63例先天性智力低下儿童中,发现染色体异常34例,检出率53.97%。21-三体综合征核型32例,占总检出率的94.12%,其中21-三体标准型22例,嵌合型6例,易位型4例。此外还检出非21-三体核型2例,占总检出率的5.88%。结论：先天性智力低下与染色体核型异常密切相关;表明染色体异常多伴有多发畸形及智力低下。做好遗传咨询,将有助于减少先天缺陷儿的出生。     

三氯乙烯接触工人外周血淋巴细胞染色体畸变分析

目的探讨三氯乙烯(TCE)对接触工人有否致淋巴细胞染色体畸变作用.方法选接触TCE工人32名,另选对照工人30名.用人外周血体外培养法检测淋巴细胞染色体畸变(CA)率,并用气相色谱法测定车间空气中TCE浓度和分光光度吡啶法测定尿中三氯乙酸(TCA)含量.结果车间空气中TCE浓度分别为41.2mg/m3和83.1mg/m3,均超过国家最高容许浓度,接触组尿中TCA含量为对照组的81.5倍,并与个体接触TCE浓度成正相关(r＝0.761,P＜0.001);接触组人外周血淋巴细胞CA率(1.15±0.84)%与对照组CA率(1.06±0.78)%比较差异无显著性(P＞0.05).结论未见接触TCE工人外周血淋巴细胞染色体畸变率增加.接触人群尿中TCA含量随接触TCE浓度的增加而升高,有较好的相关,提示暴露者尿中TCA含量能反映TCE的接触水平.     

世界首报染色体畸变核型遗传特点的研究

目的分析世界首报3例染色体畸变核型的遗传特点，为进一步研究染色体病的预防和治疗提供理论基础。方法取受检者外周血，进行淋巴细胞培养，常规制备染色体，G显带，镜下计数50个中期分裂相，显微摄影分析10个核型。结果例1为4号染色体长臂部分三体综合征，例2为t（2；9）平衡易位携带者，例3为t（1；8）平衡易位携带者。结论首次发现的3例染色体畸变核型遗传特点是：其畸变核型均来自于母亲的平衡易位，造成的痴呆儿、自然流产、畸形儿。