系统性红斑狼疮患者单个核细胞（PBMC）中ITGAL的表达及意义

目的 探讨ITGAL基因在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达及其意义.方法 分离SLE患者及正常人群PBMC,采用Qiagen RNA/DNA mini kit提取RNA,实时-定量PCR检测ITGAL mRNA的表达,对SLE患者的ITGAL表达与红斑狼疮疾病活动指数（采用SLEDAI评分）进行相关分析.结果 活动性SLE患者中ITGAL mRNA表达较正常对照组明显升高,两组比较有统计学意义（P〈0.001）,与SLEDAI评分呈正相关（r=0.376,P〈0.05）.结论 活动性SLE患者PBMC的ITGAL mRNA表达明显上升,其变化与疾病活动程度呈正相关,ITGAL表达可能与SLE发病有关.     

增殖诱导配体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的 检测增殖诱导配体（APRIL）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平，探讨APRIL在SLE发病中的意义。方法 采用半定量RT-PCR法检测36例SLE患者及17例正常人PBMC的APRILmRNA表达，并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者活动期组和非活动期组APRIL mRNA表达水平均明显高于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），活动期组较非活动期组增高更明显（P〈0．01）；SLE患者APRILmRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关（r=0．6725，P〈0．01）。结论 SLE患者APRILmRNA表达水平的增高，可能在SLE的发病机制中具有重要作用。     

单核细胞趋化蛋白-1表达与狼疮肾炎

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在狼疮肾损伤中的作用.方法应用ELISA方法测定112例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例类风湿性关节炎患者、11例非SLE肾损伤患者及40例正常健康者血清MCP-1水平;应用RT-PCR方法,测定以上各组外周血单个核细胞(PBMCs)MCP-1 mRNA表达.结果狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,尤其是狼疮肾炎活动组患者PBMCs MCP-1 mRNA表达增加最为显著(P＜0.001),PBMCs MCP-1 mRNA表达不仅与总狼疮疾病活动指数评分呈正相关(r=0.6245,P＜0.001),而且与狼疮疾病活动指数肾评分呈正相关(r=0.6808,P＜0.001),而在类风湿性关节炎组和非狼疮肾脏疾病组仅低水平表达,与正常对照组水平相近似(P＞0.05).狼疮活动组血清MCP-1水平较非活动组及正常对照组均明显升高(P＜0.001),但活动性狼疮肾炎组与无肾损伤组之间血清MCP-1水平的差异无显著性(P＞0.05).结论狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,并与狼疮肾炎的疾病活动情况密切相关.     

系统性红斑狼疮患者外周血IL-17表达及其与疾病活动性的关系

 目的 研究系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周血白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）蛋白及基因的表达水平及其与疾病活动性的关系。方法 用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测26例SLE患者及21例健康对照者血浆中IL-17的蛋白水平;以β-actin为内参照,采用荧光实时定量反转录聚合酶链式反应（Real-time PCR,RT-PCR）检测两组外周血中IL-17 mRNA表达水平。结果 SLE组患者血浆IL-17含量明显高于健康对照组［(18.04±6.04)pg/mL vs (12.73±6.81)pg/mL,P<0.01］;SLE组患者外周血IL-17 mRNA表达水平高于对照组;IL-17蛋白含量与mRNA表达水平呈正相关（r=0.7,P=0.007 0）。SLE组血浆IL-17水平与SLE疾病活动性指数（SLEDAI）积分和抗dsDNA抗体水平呈正相关（r=0.459,P<0.05;r=0.487,P<0.05）;与血清C3水平呈负相关（r=-0.373,P<0.01）。结论 SLE患者体内IL-17蛋白分泌及基因表达水平存在明显异常,两者呈正相关,且与疾病活动性有明显相关性,提示IL-17可能在SLE发病中起重要作用。     

SLE患者外周血单个核细胞中信号转导子及转录激活因子4mRNA的表达及其与血清IFN-γ水平之间的相关性

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)外周血单个核细胞(PBMC)中信号转导子及转录激活因子4(STAT4)mRNA表达及其与血清干扰素(IFN-γ)水平之间的相关性。方法用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测60例SLE患者及30例正常对照者PBMC中STAT4mRNA表达水平,用酶联免疫吸附法检测SLE患者血清中IFN-γ的水平,并分析两者之间的相关性。结果 PBMC中STAT4mRNA表达水平在SLE患者组中要显著高于正常对照组(P<0.05),并且在SLE患者病情活动组中显著高于病情非活动组(P<0.05)。SLE患者血清中IFN-γ水平检测结果为(12.71±5.68)ng/ml,并与患者PBMC中STAT4mRNA表达呈正相关(r=0.769,P<0.05)。结论 SLE患者PBMC中STAT4mRNA的表达水平高于正常,并与病情活动性及患者血清中IFN-γ水平相关。     

原发性高血压患者外周血单核细胞趋化因子-1基因表达及意义

目的：观察原发性高血压（EH）患者外周血单核细胞趋化因-1（MCP-1）基因表达,探讨其与EH的关系及意义。方法：用酶联免疫吸附（ELISA）法测定62例EH患者和30例正常对照者外周血MCP-1蛋白含量,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测外周血单个核细胞中MCP-1 mRNA表达。结果：与对照组比较,EH组外周血MCP-1蛋白含量及外周血单个核细胞MCP-1 mRNA表达均显著增高（P〈0.01）。结论：（1）MCP-1可能参与了EH的病理生理过程;（2）外周血单个核细胞的MCP-1 mRNA表达上调可能是EH患者外周血MCP-1蛋白含量增高的机制之一。     

稳定性心绞痛患者SIRT1表达与氧化应激的相关性研究

目的：检测冠心病稳定性心绞痛患者外周血单个核细胞(PBMC)中沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)蛋白表达和血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶（SOD）水平,探讨SIRT-1和氧化应激的相关性。方法：选择稳定性心绞痛患者25例,并与20名健康者（对照组）做比较。采用Western blot法检测PBMC中SIRT1蛋白表达和血清MDA、SOD水平,分析SIRT1蛋白表达和氧化应激相关性。结果：与对照组相比,稳定性心绞痛患者PBMC中SIRT1蛋白表达显著降低（P＜0.05）;血清MDA升高,SOD降低（P均＜0.05）;Pearson直线相关法分析稳定性心绞痛患者的SIRT1蛋白表达水平与血清MDA呈显著负相关（r=-0.539,P＜0.05）,与SOD呈正相关（r=0.630,P＜0.05）。结论：冠心病稳定性心绞痛患者SIRT1蛋白表达水平降低,与血清MDA呈负相关,与SOD呈正相关,提示SIRT1与稳定性心绞痛患者机体内氧化应激关系密切。     

高危或极高危原发性高血压患者外周血单核细胞趋化因子-1基因的表达

目的：探讨高危或极高危原发性高血压（EH）患者外周血单核细胞趋化因子-1（MCP-1）表达,为寻找高危或极高危EH患者的治疗手段提供理论依据。方法：运用酶联免疫吸附（ELISA）法测定高危或极高危EH患者65例（EH1组）、低或中危EH患者35例（EH2组）和30例正常对照者外周血MCP-1蛋白含量,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测外周血单个核细胞中MCP-1 mRNA的表达。结果：与对照组比较,EH1组和EH2组外周血MCP-1蛋白含量和单个核细胞中mRNA表达均显著升高,具有统计学差异（P〈0.05orP〈0.01）;与EH2组比较,EH1组患者外周血MCP-1蛋白含量和单个核细胞中mRNA表达均显著升高,具有统计学差异（P〈0.01）。结论：外周血单个核细胞中MCP-1可能参与了高危或极高危EH的病理生理过程,外周血单个核细胞的MCP-1 mRNA表达上调可能是高危或极高危EH患者外周血MCP-1蛋白含量增高的机制之一。     

过敏性紫癜患儿外周血VDBP VDR表达水平与Th17/Treg相关性研究

目的 探讨维生素D结合蛋白(VDBP)、维生素D受体(VDR)在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血中的水平变化及与Th17/Treg平衡的关系。方法 选取2019年12月至2020年12月南京医科大学附属儿童医院就诊并确诊的55例HSP患儿为HSP组，并以同期50例健康体检儿童为对照组。采用定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测外周血中VDR mRNA水平，酶联免疫法检测VDBP水平，蛋白印迹法检测VDR蛋白的表达；流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例；Pearson法分析VDBP与VDR表达的相关性以及二者与Th17/Treg的相关性；受试者工作特征曲线(ROC)评价血清VDBP和VDR水平对HSP发生的诊断价值。结果 与对照组比较，HSP组患儿外周血中VDBP表达水平明显下调，VDR表达水平上调，差异均有统计学意义(P<0.05);HSP组患儿Th17、Th17/Treg均高于对照组，Treg均低于对照组(P<0.05);VDBP与Treg呈正相关(r=0.358,P<0.05),与Th17、Th17/Treg呈负相关(r=-0.436、-0.606,P...     

紫外线对SLE白介素-6和白介素-10mRNA表达的影响

目的探讨紫外线对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）表达白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）mRNA的影响。方法提取SLE患者及健康对照的PBMC,用不同剂量311nm窄谱中波紫外线（NB-UVB）照射,以实时荧光相对定量聚合酶链反应分析照射前后PBMC IL-6、IL-10mRNA的相对表达。结果 SLE患者中狼疮肾炎（LN）患者PBMC高表达IL-6、IL-10mRNA,与非狼疮肾炎（非LN）患者及正常人差异很大,分别是正常人的（105.44±112.94）倍和（1.82±3.41）倍、（28.41±21.14）倍和（1.17±1.43）倍,其中狼疮肾炎（LN）患者PBMC高表达IL-6、IL-10 mRNA,且与临床中24h尿蛋白定量高度相关（r=0.82,0.87,P〈0.05）,而非狼疮肾炎系统性红斑狼疮患者与正常人相比,差异无统计学意义（t’=0.43,0.87,P〉0.05）;在紫外线照射后LN患者PBMC IL-6、IL-10mRNA的表达有升高也有降低,升高组SLE疾病活动指数、抗SSA抗体阳性率以及光敏性发生率明显高于降低组。结论紫外线可改变SLE患者PBMC表达IL-6、IL-10mRNA,紫外线可能通过此途径影响SLE病情。     

狼疮性肾炎外周血单个核细胞B7-1和B7-2 mRNA表达异常及其与疾病活动的关系

目的观察活动期和静止期狼疮肾炎(LN)外周血单个核细胞(PBMC)B7-1(CD80)和B7-2(CD86)mRNA表达及其与疾病活动的关系,以探讨B7-1和B7-2mRNA表达异常在LN自身免疫发生中的作用及临床意义.方法以正常人为对照,分离15例活动期和13例静止期的LN患者PBMC,采用半定量反转录PCR的方法,检测PB-MC的B7-1和B7-2mRNA表达.B7-1和B7-2mRNA表达与SLE疾病活动评分指数(SLEDAI)的相关关系用直线相关分析.结果静止期LN组B7-1和B7-2mRNA表达与正常人对照组相比无显著性差异(P＞0.05),活动期LN组B7-1mRNA有明显的上升(P＜0.05),B7-2mRNA表达增高更加显著(P＜0.01).B7-2mRNA的增高与SLEDAI呈直线正相关关系(r＝0.8641,P＜0.05).结论活动期狼疮性肾炎存在着B7mRNA表达的异常,B7-2mRNA的增高与SLEDAI呈直线正相关关系.     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞分泌IL-12的水平及其临床意义

目的检测系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－１２的水平,探讨其与ＳＬＥ活动性的关系。 方法　体外培养ＰＢＭＣ,予脂多糖（ＬＰＳ）刺激后用夹心ＥＬＩＳＡ法检测其上清中的ＩＬ－１２水平,用系统性红斑狼疮疾病活 动性指数（ＳＬＥＤＡＩ）估计ＳＬＥ的病情活动性。结果ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－１２水平［（６４５．０５±１３．８５）ｐｇ／ｍｌ］较正常对照 ［（６５７．９６±６．９１）ｐｇ／ｍｌ］低（ｔ＝３．６９５,Ｐ＝０．０１）,且与ＳＬＥＤＡＩ呈负相关（ｐ＝０．８７３,ｔｒ＝８．２０５,Ｐ＜０．０１）。结论ＳＬＥ患者存在 ＩＬ－１２水平的异常,且ＩＬ－１２水平可作为评价ＳＬＥ患者病情活动性大小的一个有效指标。     

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型microRNA-26a（miR-26a）及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮（SLE）的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-26a、外周血单个核细胞（PBMC）中PTEN 的表达,统计分析miR-26a、PTEN 与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为miR-26a 的靶基因。结果SLE 患者血清miR-26a mRNA 的表达高于健康人群（P <0.05）,PBMC 中PTEN mRNA 的表达低于健康人群（P <0.05）。SLE 患者miR-26a、PTEN 的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。miR-26a 转染BaF3 细胞后,PTEN 表达下调,PI3K 表达上调,转染组荧光素酶活性下降（P <0.05）。结论SLE 患者血清中过表达的miR-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。     

Expression of Inducible Co-stimulator in Peripheral Blood T Lymphocytes in the Patients with Systemic Lupus Erythematosus

Systemic lupus erythematosus (SLE) is a pro-totypic systemic autoi mmune disease[1], whichcharacterized by B cell hyperactivity in associationwith the generation of autoantibodies .In both hu-man SLEand the murine model of lupus nephritis ,it has been shown that activation of autoantibody-producing B cells is dependent on T cell helpthrough cytokines and costi mulatory molecules .Recent report demonstrated that the anergic stateof autoreactive B cells is reversed by T helper cellsand regul…     

红细胞1型补体受体在系统性红斑狼疮患者中的表达及意义

目的通过检测红细胞1型补体受体(CR1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的表达,探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测50例SLE患者和30例健康对照者红细胞CR1表达的水平,并对SLE患者病情活动程度行SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分,分为活动期组与稳定期组,同时将活动期组红细胞CR1表达与稳定期组相比较;并分析SLE活动度指标与CR1表达的相关性。结果①SLE患者组红细胞CR1表达明显低于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。②SLE患者活动期组红细胞CR1表达明显低于稳定期组,两组间CR1表达有显著性差异(P<0.01)。③SLE患者SLEDAI积分与CR1表达呈显著负相关(r=-0.971,P<0.01)。结论 SLE患者红细胞CR1表达的变化与疾病活动有明显的相关性,可以作为评判SLE病情活动的指标之一。     

腺苷、白介素—1及茶碱对哮喘患者外周血单核细胞A2腺苷受体mRNA表达的影响

目的 通过研究腺苷、白介素（IL）－1、茶碱对哮喘患者外周血单个核细胞（PBMCs)表达A2a及A2b腺苷受体（A2aAR及A2bAR)mRNA的影响,探讨A2aAR及A2bAR在哮喘发病中的作用,为临床使用茶碱提供理论依据。方法 11例正常人及哮喘患者PBMCs经Ficoll液分离,分对照组,腺苷组、腺苷＋IL－1组及腺苷＋茶碱4组,体外培养18小时,收集细胞,采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法和图象分析半定量法检测A2aAR及A2bAR mRNA表达。结果 正常人及哮喘患者各组PBMCs表达A2aARmRNA无明显差异（P＞0．05）。哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达较正常人增加（P＜0．01）,腺苷、IL－1促进哮喘患者（P＜0．01）。腺苷及IL－1对哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 PBMCs A2bARmRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 哮喘患者PBMCs表达A2bmRNA增加,腺苷及IL－1促进其表达,且与患者机体过敏状态及气道阻塞程度相关,茶碱能抑制A2bAR mRNA表达;腺苷、IL－1及茶碱对PBMCs表达A2aAR mRNA无明显影响。