不同细胞系对胃癌来源外泌体的吸收差异北大核心CSCD

目的：分析不同细胞系对胃癌细胞外泌体的摄取差异。方法：使用荧光蛋白融合hCD63分子标记外泌体,并筛选标记的稳定细胞株。使用超速离心收集外泌体,电镜观察荧光蛋白标记外泌体外形。标记的外泌体与不同细胞系细胞孵育后,使用流式细胞术分析细胞携带荧光的差异。结果：通过流式细胞分析证明荧光蛋白在hCD63分子的羧基端进行标记,可以获得最大的荧光强度。不同细胞系对MGC-803外泌体的摄取存在差异。结论：单核细胞样的THP-1细胞摄取胃癌细胞外泌体的能力强于其他组织来源的细胞系。     

外泌体在骨再生领域的应用进展

外泌体(Exos)是一种由细胞分泌的具有脂质双分子层结构的囊泡,形态似杯状,分子直径在30～140 nm。目前,外泌体在疾病的早期诊断、药物靶向运输、组织再生上已经表现出了强大的潜力。在骨组织工程中,外泌体能够传递特殊的蛋白、miRNAs、生物活性因子等促使间充质干细胞朝着成骨细胞分化,通过激活某些信号通路来上调成骨相关的基因,修复骨缺损和实现骨再生。     

外泌体miRNAs在器官纤维化中作用的研究进展

外泌体是由多种细胞主动分泌产生的可携带蛋白质、脂质、miRNAs等生物分子的微小囊泡。外泌体微小RNAs(miRNAs)稳定的存在于体液循环中,参与器官多项病理过程。在器官纤维化疾病中,外泌体miRNAs的含量与正常组织相比呈现出明显的差异性表达,通过调控不同信号通路促进或抑制器官纤维化。外泌体miRNAs可作为临床诊断器官纤维化及判断其纤维化程度的最新生物指标和纤维化疾病新的治疗靶点。     

外泌体在新型冠状病毒感染和传播中作用的研究进展

外泌体在COVID-19的病理过程中起着重要作用,与其携带的核酸、蛋白质等物质,共同调控SARS-CoV-2的感染和传播。病毒感染细胞通过内体途径产生含SARS-CoV-2病毒颗粒的外泌体,介导病毒向健康细胞感染和传播,造成组织损伤和多器官功能障碍。同时,外泌体作为细胞间通讯的关键介质,起到免疫激活作用,促进机体产生免疫反应,抵抗病毒入侵。此外,外泌体协助病毒逃避机体免疫,是SARS-CoV-2再感染的潜在手段。总之,外泌体在新型冠状病毒感染和传播中的作用为其在诊断、防治COVID-19等方面的应用提供新思路。     

外泌体及其对调节性T 细胞作用的研究进展

调节性T 细胞(regulatory T cell,Treg cell)是T 细胞中一类具有免疫抑制功能的T 细胞亚型,其中最关键的亚型是胸腺起源并表达CD4、CD25 以及转录因子FOXP3+的CD4+ CD25+ FOXP3+调节性T 细胞(CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg cell)。调节性T 细胞对维持体内免疫稳态极其重要,与多种重大疾病如恶性肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、过敏性疾病、移植排斥的发生发展密切相关。外泌体(Exosome)是一种可由多种细胞分泌的微型盘状囊泡,通过其囊内包裹的蛋白质、mRNA、微小RNA(microRNA)等物质,在细胞间通信,特别是非接触性的细胞远程调控发挥作用。目前研究发现:外泌体对调节性T细胞的诱导发育,增殖及发挥免疫抑制能力具有一定的影响,深入了解两者之间的联系有利于为将来治疗恶性肿瘤、自身免疫性等疾病提供创新性线索。     

外泌体在电针抑制脓毒症小鼠炎症反应及提高生存率中的作用

目的：探讨外泌体在电针抑制脓毒症小鼠炎症反应及提高生存率中的作用。方法：选取雄性C57BL/6J小鼠,检测电针介入时间[设模型组（Sepsis组）、电针（EA）预处理组、EA后处理组]、回输外泌体[设对照组（E0）、电针1 d(E1)、电针4 d(E4)及电针7 d(E7)回输外泌体组]、拮抗外泌体（设Sepsis+DMSO组、Sepsis+DMSO+EA组、Sepsis+GW4869+EA组）对小鼠生存率的影响,并检测小鼠血清炎症因子变化[设PBS对照组、模型组（Sepsis组）和EA预处理组]。各组小鼠造模处理后分别观察小鼠7 d生存率;采用透射电镜观察外泌体并进行纳米颗粒跟踪分析与鉴定;于处理2 h、4 h、6 h取小鼠血清,ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β含量。结果：与Sepsis组相比,EA预处理组小鼠生存率提高（P<0.05）,2 h、4 h、6 h血清IL-6、IL-1β均明显降低（P<0.05,P<0.01）,2 h、4 h血清TNF-α明显降低（P<0.001）,6 h未见明显变化;电针处理前后生存率差异无统计学意义（P&...     

外泌体标记方法的研究现状

外泌体是细胞分泌的直径为30～150 nm的胞外囊泡,可以运送多种生物活性分子(如RNA、脂质和蛋白质),介导细胞间的信息交流。现已发现,外泌体在各种生理和病理过程中发挥着重要的作用。为了研究外泌体的生物学作用,现已开发出了多种外泌体标记方法进行外泌体的功能研究。根据现有的文献报道,文章将结合外泌体自身的结构特点,对不同的外泌体标记方法,包括荧光染料、荧光蛋白、荧光素酶和物理标记等作一综述。     

机械应力对拇外翻足截骨端成纤维细胞外泌体的调控机制

背景:微创治疗拇外翻术后“裹帘”外固定(通过趾蹼间夹垫“8”字绷带弹性外固定实现),为截骨端愈合提供适宜的力学环境。可见应力刺激对截骨端愈合至关重要,但其机制尚未明确。目的:探索机械应力对成纤维细胞来源外泌体的调控机制。方法:取拇外翻手术取得的第1跖骨头内侧骨组织,采用组织直接贴壁培养的方法进行成纤维细胞体外培养获取传代细胞,模拟拇外翻患者术后“8”字绷带包扎法截骨端所受力学刺激,提取外泌体。利用电镜、纳米粒径追踪分析、Western blot检测外泌体大小分布、形态及外泌体标志物的差异。研究方案于2013-03-21经中国中医科学院望京医院伦理委员会批准,批准编号为2013-03-21。结果与结论:拇外翻足截骨块培养的成纤维细胞加载15%的静态拉伸作用后,分泌的外泌体增加,且外泌体中均存在CD9和CD81。2组外泌体的粒径分布范围相符,且15%的静态拉伸作用使得外泌体的浓度增高。说明15%的拉伸力有助于成纤维细胞分泌生长因子,进而有助于促进成骨细胞成骨。     

外泌体在骨不连治疗中的作用机制及进展

文题释义：外泌体：是细胞外囊泡小体,由不同类型的细胞释放,根据其自身各种特性,可运用于损伤组织间药物的传递,作为生物标志物,介导细胞间信息交流等巨大作用。 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种蛋白激酶,其催化亚单位是2种生化上截然不同的复合物mTORC1和mTORC2,对骨形成的调节非常重要。背景：骨不连是骨折术后常见的并发症,给患者带来了极大的困扰。随着外泌体技术的不断研发,外泌体在骨不连的治疗中逐渐显露优势,成为医疗工作新的研究方向。 目的：从国内外研究中归纳总结,探讨外泌体在骨不连治疗中的作用。 方法：中文以“外泌体,骨不连,骨重塑,骨再生,血管损伤,成骨细胞,破骨细胞”检索万方、中国知网、维普文献数据2003至2019年的相关文献,英文以“exosomes,nonunion,bone remodelling”,检索PubMed数据库2003至2019年的相关文献,根据纳入及排除标准摘选50篇文章。结果与结论：①近年来,外泌体作用于骨不连的研究得到越来越多的重视,外泌体中的miRNA及蛋白质可以通过影响骨细胞的分化作用于骨不连;②随着进一步的研究发现,外泌体可通过调节骨重塑,促进血管修复,改善系统性疾病等方面治疗骨不连;③但是目前对于外泌体的研究仍处于实验阶段,如何将其更好地应用于临床治疗还需进一步的探究。ORCID: 0000-0003-0172-7642(赖渝) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

上调骨形态发生蛋白2促进成骨细胞增殖分化的硅酸钙类材料Biodentine北大核心

背景:Biodentine是一种具有生物相容性的新型硅酸钙口腔修复材料,它不仅可以增加牙髓细胞中生长因子的分泌,也可以诱导牙本质的矿化,但是其在骨修复方面的研究较少。目的:通过构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,研究Biodentine对于干扰骨形态发生蛋白2小鼠成骨前体细胞株的增殖及分化能力的影响。方法:将0.1,1,10,100 g/L的Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞24 h,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验筛选最佳的作用质量浓度10 g/L,用于以下实验。将Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞1,3,5,7 d,以未干预组为对照,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察作用前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察干扰前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,Biodentine组加入10 g/L的Biodentine浸提液,设置单纯干扰组为对照,作用24,48 h后,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察细胞的增殖及成骨分化;作用24 h后,Real-time PCR、Western blot检测碱性磷酸酶mRNA与蛋白的表达。结果与结论:(1)10 g/L的Biodentine浸提液在1,3,5,7 d可促进小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;(2)干扰骨形态发生蛋白2可抑制小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;(3)Biodentine组作用24,48 h后的细胞增殖与成骨分化能力高于干扰组(P <0.05),作用24 h后的碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达高于干扰组(P <0.05);(4)结果表明,10 g/L的Biodentine可以通过骨形态发生蛋白2增强成骨细胞的增殖及成骨分化。     

Selection of fetal bovine serum for use in the C3H/10T1/2 CL8 cell transformation assay system

The purpose of this communication is to report our experience concerning the variation in cloning efficiency and transformation frequency utilizing C3H/10T1/2 CL8 cells with 23 different lots of fetal bovine sera. These sera were purchased from five different commercial sources. The standard cell transformation assay using 1,000 cells per dish and 3-methylcholanthrene (7.5 μg/ml) as the transforming agent was performed. The chemical exposure period was 3 days. The cloning efficiency was determined in parallel toxicity tests using 200 cells per dish. Only three out of 23 serum lots supported a strong response in cell transformation. The results indicated that variation in the ability of sera to support cell transformation was not supplier dependent. In addition, our results showed that serum lots exhibiting the best cloning efficiencies did not necessarily support cell transformation. It is apparent that reliance on cloning efficiency alone would be inadequate as a means of selecting a serum lot. We therefore recommend that a complete cell transformation assay be performed when selecting fetal bovine serum for use in this assay.     

Asxl1在炎性微环境中对成骨细胞增殖分化的作用

背景:研究表明Asxl1的缺失可导致骨质发育不全、骨质缺损类疾病的发生,但目前在根尖周炎环境下该因子与骨破坏之间的关系暂无相关报道。目的:探讨炎性微环境下Asxl1对成骨细胞增殖分化的影响。方法:实验选用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立体外炎性微环境,通过CCK-8实验筛取脂多糖最佳质量浓度和最佳作用时间,然后用20 mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1细胞24 h,免疫荧光检测Asxl1的蛋白表达水平,Real Time-PCR检测Asxl1 mRNA的表达水平。为进一步验证Asxl1基因在炎性微环境中影响成骨细胞的增殖与分化,脂多糖刺激形成炎性微环境后转染Asxl1-SiRNA 24 h,采用CCK-8检测细胞增殖活性,RealTime-PCR检测Asxl1及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平。结果与结论:①脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,Asxl1蛋白和mRNA表达水平呈降低趋势;②脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,转染Asxl1-SiRNA 24 h,细胞增殖活性下降趋势明显,Asxl1基因及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平明显降低;③结果提示,Asxl1可能通过参与炎性反应过程,影响成骨细胞的增殖与分化,进而参与骨破坏进程。     

Complete Regeneration of Bone in the Baboon by Recombinant Human Osteogenic Protein-1 (hOP-1, Bone Morphogenetic Protein-7)

Abstract

We examined the efficacy of a single application of recombinant human osteogenic protein-1 (hOP-1, bone morphogenetic protein-7) for its ability to regenerate large calvarial defects in adult male baboons (Papio ursinus). Recombinant hOP-1, in conjunction with baboon or bovine guanidinium-extracted insoluble collagenous bone matrix (0.1, 0.5 and 2.5 mg per g of collagenous matrix as carrier), was implanted in 46 calvarial defects surgically prepared in 14 baboons, whilst 18 defects were implanted with the carrier matrix without hOP-1. Specimens were harvested on d 15, 30, 90 and 365 and subjected to histomorphometry on serial undecalcified sections cut at 7 pm to study the temporal sequence of tissue morphogenesis after the single application of hOP-1. Histological analysis indicated that the induction of new bone formation proceeded from the periphery to the central core of hOP-1 treated specimens after rapid angiogenesis and mesenchymal cell migration in apposition to the collagenous matrix. Whilst chondrogenesis was limited, newly formed bone has already filled with fully differentiated bone marrow elements as early as d 15, even with the 0.1 mg dose of hOP-1. On d 30 and 90, doses of 0.1 and 0.5 mg of hOP-1 showed greater amounts of bone than controls, and on d 90, they induced complete regeneration of the defects. Doses of 2.5 mg hOP-1 per g of matrix induced extensive osteogenesis initially with heterotopic ossification and displacement of the temporalis muscle above the defects. One year after implantation of hOP-1 there was restoration of the internal and external cortices of the calvaria. These results show that hOP-1 induces complete regeneration of calvarial bone in the adult primate, and suggest that the optimal activity of hOP-1 to achieve regeneration is between 100 and 500 pg of hOP-1 per g of matrix. These results in the primate may form the scientific basis for future clinical applications of hOP-1.     

不同血清浓度对bFGF联合EGF诱导BMSCs向神经细胞分化的影响

目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响。方法:全骨髓贴壁法体外分离培养BMSCs,流式细胞法检测BMSCs表面骨髓基质标志CD90和造血细胞标志CD45,MTT法绘制第3(P3)代BMSCs生长曲线。取P4代细胞分为3组给予不同诱导条件,分别给予含20 ng/ml的bFGF和20 ng/ml EGF的无胎牛血清(A组)、10 ml/L胎牛血清(B组)及100 ml/L胎牛血清(C组)的DMEM/F-12培养液进行诱导,倒置显微镜观察细胞的形态变化,诱导6 d时免疫组织化学法检测细胞内神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,台盼蓝染色检测各组细胞的活力。结果:BM-SCs经3-4次传代培养后形态大致呈单一的长梭形或扁平形,流式细胞鉴定显示CD90阳性,CD45阴性;细胞生长曲线近似呈"S"形;诱导后可见细胞胞体收缩,呈双极、多极并伸出突起;诱导6 d时3组活细胞率分别为:86.57%、95.29%、97.32%;免疫组化各组均见NSE、GFAP表达,3组NSE阳性率高于GFAP,A组NSE阳性率高于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组NSE阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01),A组GFAP阳性率低于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组GFAP阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:bFGF联合EGF可诱导BMSCs向神经细胞分化,在无血清条件下趋向于向神经元分化,在高浓度血清条件下趋向胶质细胞分化。     

Synthesis of the antigen bovine serum albumin‐ergosterol and its immunocharacterization

Fungal contamination of agricultural commodities leads to their spoilage and renders them unfit for human consumption. Ergosterol, a predominant sterol in most fungi and a major constituent of the cell membrane, has been established as a reliable biochemical marker for fungal growth. Various chemical and physico‐chemical methods to quantify ergosterol as an index of fungal contamination are in practice. Yet, immunoassays are the methods of choice in food analysis due to their increased specificity, sensitivity and rapidity. This paper reports the synthesis of an antigen, bovine serum albumin‐ergosterol conjugate, and its immunocharacterization. Ergosterol was converted to ergosterol hemisuccinate (EHS) by succinylation. Subsequently, EHS was conjugated to bovine serum albumin by the mixed anhydride reaction. The molar ratio was found to be 1:28. Antisera raised against the synthesized antigen in rabbits was characterized by the Ouchterlony double‐diffusion technique and an antibody capture assay. Ouchterlony analysis showed a titre of 1:2. Further, characterization by an antibody capture assay, using 50 ng well (10 ng equivalent of ergosterol) of the antigen, gave a titre of 1:4000 dilution of antiserum, with an absorbance of 1.0 at 405 nm. The synthesized antigen may find an application in the development of an immunoanalytical method for ergosterol quantification as a measure of food quality in relation to fungal contamination.     

Bone Morphogenetic Protein-9 Induces Osteogenic Differentiation of Rat Dental Follicle Stem Cells in P38 and ERK1/2 MAPK Dependent Manner

Dental follicle stem cells are a group of cells possessing osteogenic, adipogenetic and neurogenic differentiations, but the specific mechanism underlying the multilineage differentiation remains still unclear. Great attention has been paid to bone morphogenetic protein-9 (BMP-9) due to its potent osteogenic activity. In the present study, rat dental follicle stem cells were isolated and purified, and cells of passage 3 underwent adenovirus mediated BMP-9 gene transfection to prepare dental follicle stem cells with stable BMP-9 expression. Detection of alkaline phosphatase (ALP) and calcium deposition showed dental follicle stem cells transfected with BMP-9 gene could significantly promote the osteogenesis. In addition, SB203580 and PD98059 were employed to block the p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) and extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2), respectively. Detection of ALP and calcium deposition revealed the BMP-9 induced osteogenic differentiation of dental follicle stem cells depended on MAPK signaling pathway.     

低血清浓度下骨形成蛋白2对软骨细胞的作用

目的:研究骨形成蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP-2)对SD乳鼠下颌骨髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes,MCCs)黏附和增殖作用并探索BMP-2的最佳实验浓度.方法:在低血清浓度(含2.5％胎牛血清培养基)培养条件下,分为4组(n=3):对照组(未添加BMP-2)、BMP40组(添加40 ng/mL的BMP-2)、BMP100组(添加100 ng/mL的BMP-2)、BMP200组(添加200 ng/mL的BMP-2).通过甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法测量8h,12h,1d,3d,5d,7d活细胞数并描绘生长曲线.结果:在1d时BMP 100组MTT吸光度(0.497±0.010)较对照组(0.345±0.024)、BMP40组(0.475±0.007)及BMP200组(0.471±0.013)均高,差异具有统计学意义(P＜0.05).细胞数未呈指数增长.结论:低血清浓度下,BMP-2用于MCCs的最佳实验浓度为100 ng/mL,可促进MCCs的初期黏附但增殖作用并不明显.     

间充质干细胞源性外泌体在骨科疾病治疗中的作用与应用前景

文题释义：外泌体：是30-150 nm的细胞外囊泡,因其包含有大量的蛋白分子、DNA、RNA、mRNA 及 microRNA等,能够通过细胞间的传递发挥重要作用。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型,可参与到机体免疫应答、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等多个方面。间充质干细胞：是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层,属于多能干细胞,以骨髓中含量最多,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。   摘要背景：间充质干细胞源性外泌体具有多种与间充质干细胞相似的生物学功能。近年来大量研究证实干细胞源性外泌体可在诸如心肌、肝脏、皮肤等损伤修复中发挥重要作用,有望成为新的疾病诊疗方法,但其在骨科领域应用相对较少,值得深入研究和探索。 目的：综述间充质干细胞源性外泌体用于骨及软组织损伤修复的最新研究成果及治疗进展。 方法：以“间充质干细胞,外泌体,骨,软骨,椎间盘,关节炎,神经,肌腱”为中文检索词,检索中国知网数据库,以“mesenchymal stem cells,exosomes,bone cartilage,arthritis, intervertebral disc,tendon,nerve”为英文检索词,检索PubMed数据库,检索语种为中文和英文,共检索文献388篇,依据纳入和排除标准,最终纳入相关文献50篇。结果与结论：①间充质干细胞源性外泌体在一定条件下能够促进软骨细胞和成骨细胞生成,延缓骨关节炎进程;②间充质干细胞源性外泌体通过抗氧化和抗炎作用改善椎间盘退变;③间充质干细胞源性外泌体可通过多种途径促进骨折愈合,是潜在的促骨折愈合生物学材料。 ORCID: 0000-0003-1973-4082(李嘉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

骨形态发生蛋白2及碱性成纤维生长因子2对大鼠骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响

文题释义：细胞膜片技术：是在体外接种培养高密度的细胞,使其相互融合生长至100%而形成的透明致密膜状物。该技术不需要胰酶消化即可收集细胞,因此保留了大量的胞外基质、细胞间连接以及细胞-基质连接等结构。目前细胞膜片技术已成为组织工程领域的研究热点,已被推广应用于牙周膜、角膜、心脏、软骨、食管等多种组织器官修复。成骨细胞：主要由内外骨膜和间充质始祖细胞分化而来,在复杂的骨形成过程中发挥着主要的功能,承担着骨基质的合成、分泌和矿化。骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,能定向分化为成骨细胞,其成骨分化过程可受多种因素的影响,如细胞因子的调控、遗传因素和激素水平等。背景：现阶段骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖、成骨分化的影响和作用机制还尚未可知,如何将生长因子与组织工程细胞膜片技术相整合,最终将其用于骨缺损修复具有重要意义。目的：探讨单独及联合应用骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2对骨髓间充质干细胞膜片增殖和成骨分化的影响。方法：体外分离培养鉴定SD大鼠骨髓间充质干细胞并构建细胞膜片,选用不同质量浓度的骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2单独及联合诱导骨髓间充质干细胞膜片,CCK-8法结合碱性磷酸酶活性检测确定2种因子促进膜片增殖和成骨分化的最佳有效质量浓度;然后对骨髓间充质干细胞膜片进行成骨诱导,通过大体及显微镜观察、Vonkossa染色、茜素红染色、RT-PCR检测相关成骨标志物来评估诱导效果。结果与结论：单独应用骨形态发生蛋白2可增强骨髓间充质干细胞膜片的碱性磷酸酶活性,最佳质量浓度为100 μg/L(P < 0.001),单独应用碱性成纤维生长因子2能加速骨髓间充质干细胞膜片的增殖,最佳质量浓度为20 μg/L(P < 0.001),而联合应用既可以促进膜片增殖又能提高其碱性磷酸酶活性(P < 0.001);经成骨诱导后,4组膜片在形态学上无明显差异,均能诱导骨髓间充质干细胞膜片的成骨分化,其中联合组钙结节最明显(P < 0.001),可显著促进膜片晚期成骨分化并抑制其早期成骨分化,具有明显的协同促进作用(P < 0.001)。结果表明,骨形态发生蛋白2和碱性成纤维生长因子2联合应用时具有协同作用,既可以促进骨髓间充质干细胞膜片增殖,又能显著增强其成骨诱导能力。ORCID: 0000-0003-1918-579X(何惠宇)中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

骨髓间充质干细胞来源外泌体保护软骨细胞延缓骨关节炎的发生发展

背景:骨关节炎是最常见的关节退行性疾病,目前骨髓间充质干细胞已应用于骨关节炎治疗中,但与骨髓间充质干细胞相比,骨髓间充质干细胞来源外泌体移植具有更多优势,例如非免疫原性、非致瘤性以及储存和运输方便.目的:探索骨髓间充质干细胞来源外泌体对骨关节炎的保护作用.方法:①提取SD大鼠骨髓间充质干细胞并通过细胞形态及流式细胞学进...