高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星原料药中的有关物质#br#

目的 建立盐酸莫西沙星原料药有关物质的HPLC测定方法。方法 采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6mm×250mm, 5μm)对有关物质A~H进行定量分析,以0.1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至3.5)-乙腈(70:30)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长293nm(检测杂质A、B、C、D、F),280nm(检测杂质G和H),243nm(检测杂质E),柱温30℃,进样量10μL。结果 盐酸莫西沙星与各杂质峰及各杂质峰之间的分离度均大于1.5,杂质A~H的线性范围分别是0.153~1.534、0.506~1.517、0.252~1.510、0.393~1.474、0.486~1.458、0.153~1.526、0.095~1.426和0.160~1.602μg/mL,各杂质在线性范围内均与峰面积成良好的线性关系(r>0.99),杂质A~H的检测限分别为0.0511、0.1517、0.1006、0.1474、0.2430、0.0509、0.0285和0.0481μg/mL,定量限分别为0.1534、0.5056、0.2516、0.3932、0.4859、0.1526、0.0950和0.1602μg/mL,分别加入80%、100%和120%指标浓度的杂质考察回收率,结果各个杂质的回收率均在80%~120%范围内,定量限和回收率的RSD均符合验证要求。3批样品有关物质测定的结果显示,已知杂质的含量均低于0.1%。结论     

HPLC法测定盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中有关物质的含量

目的建立高效液相法测定盐酸葡萄糖注射液中有关物质。方法采用高效液相色谱法测定已知杂质A,B,C,D,E和未知单杂。使用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇(0.50g/L四丁基硫酸氢铵,1.0g/L磷酸二氢钾和3.4g/L磷酸混合溶液;28∶72)为流动相。流速:1.5mL/min,检测波长:293nm。结果盐酸莫西沙星进样质量在0.1259~5.036μg/mL(r=0.9992),浓度范围内,供试品溶液的浓度与峰面积线性良好。精密度:RSD为0.78%;最小检出限为0.74ng。定量限:供试品溶液峰面积的RSD%为4.24,最小定量限为2.53ng。溶液稳定性:供试品溶液及其对照溶液在8h内稳定。结论该方法简便、专属性好、灵敏度高,可用于盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中有关物质的检测。     

HPLC法测定盐酸莫西沙星有关物质

目的 建立高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星原料有关物质。方法 采用Inertsil Phenyl柱苯基键合硅胶(4.0 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以四丁基硫酸氢铵缓冲液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1.3 mL/min,柱温50℃,检测波长293 nm。结果 盐酸莫西沙星与15个已知杂质A～O均能良好分离。6个厂家盐酸莫西沙星样品测定结果显示,已知杂质及其他最大单个杂质含量均小于0.05%,杂质总含量小于0.06%。结论 本方法灵敏、专属性强,准确度高,可用于盐酸莫西沙星原料药有关物质测定。     

莫匹罗星软膏有关物质测定方法的建立

目的 建立莫匹罗星软膏有关物质HPLC分析方法。方法 采用Agilent Zorbax C8(250mm×4.6mm, 5μm)色谱柱,柱温：30℃,流动相：以pH5.7乙酸铵溶液-四氢呋喃不同比例线性梯度洗脱,流速：0.8mL/min,检测波长：240nm,进样量：20μL。结果 莫匹罗星及莫匹罗星杂质C、D、E分别在25~100μg/mL浓度范围内线性关系良好;定量限分别为0.016、0.047、0.019及0.020μg;杂质C、D和E的平均回收率分别为103.7%、98.6%和93.9%;重复性RSD均小于1.0%;酸、碱、高温、氧化、光照强制降解试验证明方法的专属性良好。结论 所建立的方法专属性、准确性及耐用性均良好,可用于莫匹罗星软膏有关物质的检测。     

骨水泥链珠中莫西沙星体外洗提动力学研究

目的建立测定不同时间盐酸莫西沙星骨水泥链珠体外洗提液中莫西沙星含量的方法,研究其体外洗提动力学特征。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3柱(4.6×150mm,5μm),流动相为1%三乙胺溶液(磷酸调节pH 3.8)-乙腈(83∶17),流速为1.0mL·min^-1,检测波长为296nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果盐酸莫西沙星在1~80μg·mL^-1范围内线性关系很好(r=1);精密度RSD<2.0%;加样回收率为98.75%~100.84%(RSD=1.21%,n=9)。盐酸莫西沙星骨水泥链珠中莫西沙星在336h内的释放总量为48mg,释放率26.7%,释放过程中T 1/2为118h,T max为24h,C max为32.92μg·mL^-1,AUC 0-t为3576μg/(mL·h),AUC 0-∞为4378μg/(mL·h),莫西沙星的体外洗提符合二室模型特征。结论该方法操作简便,重复性好,灵敏度高,可用于莫西沙星的体外测定。本研究可为盐酸莫西沙星骨水泥链珠的临床使用时长、用量及制备莫西沙星骨水泥链珠缓释制剂提供参考。     

线栓法致大鼠MCAO/IR模型缺血/再灌时间与发病机制研究进展

目的：建立盐酸莫西沙星氯化钠注射液有关物质检查的方法。方法采用苯基柱（4.6 mm ×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-盐溶液（30：70）,检测波长为293 nm,流速为1.30 mL·min-1,柱温为30℃。结果莫西沙星与各已知杂质及降解产物均分离良好,系统适用性良好,杂质A、B、C、D、E线性良好。杂质B、杂质E校正因子分别为1.42、3.40。结论本方法检查盐酸莫西沙星氯化钠注射液有关物质专属性强、灵敏度高、准确可靠、重现性好。     

HPLC测定复方莫西沙星滴耳液中的莫西沙星和地塞米松

目的 采用HPLC法同时测定复方莫西沙星滴耳液中的盐酸莫西沙星和醋酸地塞米松.方法 采用Shim-Pack VP-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),柱温30℃,流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇(40;60,磷酸调pH3.0);流速为1.0 ml·min-1;检测波长为241 nm;进样量20μl.结果 盐酸莫西沙星0.3-2.4μg(r=0.9999,n;5)、醋酸地塞米松0.03-0.24 μg(r=0.9999,n=5)与峰面积的线性关系良好,平均回收率分别为98.73%(RSD=0.89%)、98.24%(RSD=0.75%).结论 所建方法 简便、快速、准确、重复性好,可用于复方莫西沙星滴耳液的质量控制.     

反相高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星氯化钠注射液的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星氯化钠注射液的含量.方法:色谱柱为DIKMA Inertsil Ph,4.6 mm～250 mm 5μm,流动相为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾1.0 g、四丁基硫酸氢铵0.5 g和磷酸3.4 g,加水溶解并稀释至1000 mL)-甲醇=72:28;检测波长293nm;流速1.3mL/min;柱温45℃;进样量10μL.结果:盐酸莫西沙星在82.12～110.35μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9992,日间、日内RSD均小于1.5%.结论:本方法准确可靠,可用于盐酸莫西沙星氯化钠注射液的质量控制.     

HPLC测定盐酸莫西沙星的含量和有关物质

目的 采用HPLC法测定盐酸莫西沙星的含量及其有关物质.方法 采用Hypersil ODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10％四丁基氢氧化铵水溶液、硫酸和磷酸二氢钾的混合溶液-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长296 nm,流速1.0 mL· min-.结果 1 ～ 200 μg· mL-盐酸莫西沙星与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),精密度试验的RSD=0.6％,重复性试验的RSD =0.6％ (n =6);平均回收率为99.4％,RSD =0.5％ (n =9).结论 所用方法具有良好的稳定性、精密度及重复性,适用于测定盐酸莫西沙星的含量及其有关物质.     

反相高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星原料药中醋酸残留量

目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定盐酸莫西沙星原料药中醋酸的残留量。方法采用Welch Xtimate C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.07%磷酸(氢氧化钠调pH至2.50,水相)-乙腈(有机相)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),柱温30℃,紫外检测器,检测波长210 nm,进样量10μL。结果空白、供试品溶液中无杂峰干扰醋酸检测;醋酸定量限(LOQ)为1.36μg·mL~(-1),检测限(LOD)为0.51μg·mL~(-1);在1.36～125.47μg·mL~(-1)与峰面积线性关系良好,线性方程y=0.3302x-0.0429(r=1.000,n=6);醋酸低、中、高3个浓度水平的加样回收率分别为95.1%、95.8%、96.3%(n=3);醋酸的稳定性、重复性和精密度试验均符合要求。结论该方法简单、方便,准确性、重复性及稳定性均良好,适用于测定盐酸莫西沙星原料药中醋酸残留量。     

HPLC测定盐酸克林霉素原料和制剂的有关物质

摘要：目的 建立盐酸克林霉素有关物质HPLC测定方法,并比较国产盐酸克林霉素杂质含量的差异。方法 采用CAPCELL PAK C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)为流动相A,以乙腈为流动相B,按线性梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为210nm,流速1.0mL/min,测定9批盐酸克林霉素原料及75批制剂中的杂质含量。结果 3种已知杂质[林可霉素、克林霉素B(RRT 0.80)、7-差向克林霉素(RRT 0.89)]和其余未知杂质及克林霉素峰间的分离度大于1.5。林可霉素校正因子为0.68,采用外标法计算含量。国内仅1个生产企业不同批次的盐酸克林霉素胶囊杂质水平差异较小,其余生产企业杂质水平批间差异均较大。结论 本方法灵敏度高,分离效果好,能同时测定盐酸克林霉素原料及制剂的杂质。     

注射用哌拉西林钠/三唑巴坦钠有关物质测定方法的研究

目的建立适合国内各生产企业注射用哌拉西林钠/三唑巴坦钠有关物质测定的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Thermo Hypersil-ODS(4.6mm×25cm, 5μm);以乙腈-4g/L磷酸二氢钠溶液溶液(2:98)(用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0)为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱;检测波长220nm;流速1.5mL/min。结果与中国药典2015年版所收载的有关物质检查法比较,梯度洗脱方法提高了杂质检出能力,共检出14个已知杂质,杂质分离完全,杂质谱更加完整,能够同时控制二聚体等聚合物杂质。经方法学验证,各杂质在线性范围内线性关系良好,回收率结果方法准确可靠。结论该方法能够全面的反应本品的杂质情况,适合国内各企业样品的检测。     

阿莫西林克拉维酸钾复方制剂中克拉维酸钾杂质分析

摘要：目的 建立HPLC双波长同时测定阿莫西林克拉维酸钾复方制剂的有关物质,并对克拉维酸钾的杂质谱进行分析。方法 采用YMC ODS-AQ C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以缓冲液[取磷酸二氢钠7.8 g,加水1000 mL使溶解后,用磷酸调节pH值至(3.7±0.1)]为流动相A,以甲醇-缓冲液(90:10, V/V)为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为220和275 nm。通过降解试验及影响因素试验对克拉维酸钾的杂质归属进行分析。结果 克拉维酸钾对酸、碱、氧化、高湿及高温均不稳定,特别是对湿度极为敏感,杂质的含量与水活度成正相关;确定了复方制剂中克拉维酸钾的4个主要降解杂质与1个主要工艺杂质。结论 现行标准缺失克拉维酸钾杂质的有效控制方法,本方法能同时有效控制两个活性成分的降解杂质与工艺杂质。各企业进行该品种一致性评价时应关注其降解杂质与水活度,以保证产品安全性。     

克拉霉素干混悬剂有关物质方法研究

目的 建立RP-HPLC法,测定克拉霉素干混悬剂的有关物质。方法 采用Agilent 1260 Infinity LC液相色谱仪,色谱柱为YMC C18(250mm×4.6mm, 5μm)柱,以0.033mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(55:45)(用85%磷酸溶液或2mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.4)为流动相,检测波长205nm,柱温50℃。结果 克拉霉素与9个已知杂质及其他未知杂质均能达到有效分离,克拉霉素及杂质E的线性范围分别为2~1000μg/mL(r=1.000)、0.9~6.75μg/mL(r=0.998);供试品溶液在室温25℃下的12h基本稳定。结论 本方法灵敏,准确,专属性强,重现性好,可用于克拉霉素干混悬剂有关物质的测定。     

高效凝胶色谱法测定头孢替唑钠及其注射剂中的聚合物类杂质

目的 建立高效凝胶色谱法测定头孢替唑钠及其注射剂中的聚合物杂质,并采用二维液质联用法对聚合物杂质的结构进行推断。方法 采用TSK-Gel 2000SWXL凝胶色谱柱(7.8mm×300mm, 5μm),0.005mol/L磷酸盐缓冲液[0.005mol/L磷酸氢二钠-0.005mol/L磷酸二氢钠(61:39)]-乙腈(95:5)为流动相,流速为0.7mL/min,检测波长254nm,进样量20μL;二维色谱采用Waters HSS T3(100mm×2.1mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;质谱采用ESI离子源,正离子模式检测。结果 主成分前后共分离得到6个杂质峰;头孢替唑检测浓度的线性范围为0.5~20μg/mL(r=1.0000),检测限与定量限分别为0.015和0.05μg/mL,重复性试验各杂质含量的RSD均在合理范围内(n=6);采用LC-MS推定了3个聚合物类杂质的结构。结论 本方法灵敏度和准确度好,适用于头孢替唑钠及其制剂中聚合物杂质的控制。     

高效凝胶色谱法测定头孢替唑钠及其注射剂中的聚合物类杂质

目的 建立高效凝胶色谱法测定头孢替唑钠及其注射剂中的聚合物杂质,并采用二维液质联用法对聚合物杂质的结构进行推断。方法 采用TSK-Gel 2000SWXL凝胶色谱柱(7.8mm×300mm, 5μm),0.005mol/L磷酸盐缓冲液[0.005mol/L磷酸氢二钠-0.005mol/L磷酸二氢钠(61:39)]-乙腈(95:5)为流动相,流速为0.7mL/min,检测波长254nm,进样量20μL;二维色谱采用Waters HSS T3(100mm×2.1mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;质谱采用ESI离子源,正离子模式检测。结果 主成分前后共分离得到6个杂质峰;头孢替唑检测浓度的线性范围为0.5~20μg/mL(r=1.0000),检测限与定量限分别为0.015和0.05μg/mL,重复性试验各杂质含量的RSD均在合理范围内(n=6);采用LC-MS推定了3个聚合物类杂质的结构。结论     

HPLC法测定注射用盐酸头孢吡肟中2-巯基苯并噻唑

摘要：目的 建立HPLC法测定注射用盐酸头孢吡肟中2-巯基苯并噻唑基因毒性杂质含量的方法。方法 HPLC法,采用 Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以50 mmol/L磷酸氢二钠溶液(用磷酸调pH值至6.25)-甲醇-80%乙腈(60:10:30, V/V/V) 为流动相,等度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为320 nm,进样体积为10 μL。结果 2-巯基苯并噻唑在浓度 0.01~102.9 μg/mL范围内,呈良好的线性关系,回归方程y= 70652x+2167.2,相关系数r=0.9999;定量限为0.3 ng,检测限为 0.1 ng, 回收率均值(n=9)为91.7%。结论 本方法专属性强、准确、快捷、灵敏且耐用性良好,为测定注射用盐 酸头孢吡肟中2-巯基苯 并噻唑含量的有效补充检测与定量方法,并为该产品临床应用安全性提供保障。     

高效液相色谱法测定醋酸来法莫林的有关物质

摘要：目的 建立高效液相色谱法测定醋酸来法莫林的有关物质。方法 采用C18色谱柱(25 cm×4.6 mm,5 μm),流动相 A：60 mmol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至2.5)-乙腈(80:20,V/V),流动相B：60 mmol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至2.5)-乙腈 (50:50,V/V),梯度洗脱;流速1 mL/min;检测波长210 nm;柱温30℃;进样体积20 μL。结果 醋酸来法莫林与各有关物质分 离良好;醋酸来法莫林在0.50~75.33 μg/mL的浓度范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为1.000,醋酸来法莫林 的检测限为0.20 μg/mL。结论 该方法专属、可靠,可用于醋酸来法莫林有关物质的测定。     

二维超高效液相色谱质谱联用技术测定注射用头孢地嗪钠的杂质谱

目的 建立二维超高效液相色谱质谱联用法研究注射用头孢地嗪钠的杂质谱。方法 一维色谱采用Waters HSS T3 C18(100mm×2.1mm, 1.8μm);以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾0.87g,无水磷酸氢二钠0.22g,加水溶解并稀释至1000mL)为流动相A,乙腈为流动项B,梯度洗脱;柱温：35℃;流速：0.4mL/min;检测波长：215nm;进样量：3μL;二维色谱采用Waters BEH C18(50mm×2.1mm, 1.7μm);以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的乙腈为流动项B,切峰后开始B相3min由2%到95%;柱温：35℃;流速：0.4mL/min;质谱采用Xevo G2-XS QTof MS系统,离子源为ESI源,离子源温度：110℃,毛细管电压：3.0KV,雾化器温度：450℃,雾化器流速：800L/h,扫描范围：m/z 100~2000,测定头孢地嗪主要杂质的一级和二级质谱,进行结构解析。结果 采用UPLC梯度洗脱方法可检出多种头孢地嗪异构体、降解杂质和高分子杂质等,检出杂质的个数和总量均较现行法定标准多。结论 本品的杂质在原料合成、制剂分装及运输储藏过程中均可产生,因此,应对原料和制剂生产过程中的关键技术指标和环境条件加以控制。