抗艾滋病候选药物DCK系列化合物毒性评价*

目的:利用短期毒性检测方法对3种具有抗HIV活性的DCK系列化合物的一般毒性和特殊毒性进行检测。方法:采用MTT比色法、上下法和Ames波动试验对3种DCK系列化合物3-CH2NO2-4-CH3-DCK(N-DCK),3-CH2CN-4-CH3-DCK(C-DCK),3-F-4-CH3-DCK(F-DCK)的细胞毒性、急性毒性和遗传毒性进行检测。结果:3个化合物中,N-DCK和C-DCK对CHL细胞毒性相似,F-DCK细胞毒性最大,半数抑制浓度(IC50)分别为0.43,0.49,0.18 mg.mL-1;3种化合物对小鼠半数致死剂量(LD50)均>2 000 mg.kg-1;对沙门菌TA100诱变作用均与溶剂对照组相似,无明显致突变作用。结论:3种DCK系列化合物均为低毒物质,无明显遗传毒性。     

FK系列化合物的早期毒性评价

目的FK系列化合物是我所在研的一类新药。可能作用机制是FK506/FK复合物作用于2种钙释放通道ryanodine受体和IP3受体,使钙内流增加;或激活TGF-β1受体,促进神经胶质细胞生长因子的合成。目前尚处于研发的早期阶段,其毒性作用还不清楚。本次研究利用短期毒性筛选方法对其可能毒性进行初步筛选,及早发现和淘汰不适合继续开发的化合物。方法采用MTT比色法观察5种新化学实体对CHL细胞的毒性作用,并利用细胞毒性IC50值对急性毒性LD50值进行预测;上下法检测化学物质对小鼠的急性毒性;Ames波动试验和体外微核试验检测其遗传毒性;利用大鼠胚胎中脑细胞微团培养法,对其致畸性进行预测。结果FK(Z48、3081、308、L04和1205)系列化合物对CHL细胞的半数抑制剂量(IC50)分别为0.67、1.79、1.68、3.04和3.62mg/ml。急性毒性LD50的预测值分别为2087.6、3300.7、3331.8、4904.3和>5000mg/kg。上下法检测5种化合物对小鼠的急性毒性LD50,除Z48为1634.0mg/kg外,其余均大于2000mg/kg。以急性毒性LD50预测值和检测值为基础对化合物进行毒性分级,二者相比,仅Z48分级略有差异,其他4种化合物的毒性分级基本一致。提示体外细胞毒性数据对化学物质的体内急性毒性具有良好的预测性。无论有无S9的代谢活化,5种新化学物质均未显示出遗传毒性和明显的致畸作用。结论短期毒性筛选体系可从不同的毒性终点对新化学实体进行比较和筛选,为候选化合物的选择提供重要的技术体系。5种FK系列化合物毒性均较低,从毒理学角度考虑,均适合做进一步研发。     

7种化合物细胞毒性与小鼠急性毒性的相关性研究

目的：为减少实验动物的使用,利用化学物质的体外细胞毒性数据对体内急性毒性进行预测。方法：MTT比色法检测7种新化学实体对CHL细胞的毒性作用,利用RC（Registry of Cytotox-icity）预测模型对急性毒性LD50值进行预测,并使用小鼠急性毒性上下法进行验证。结果：各化合物（1～7）细胞毒性IC50值分别为0.43、0.49、0.18、0.67、3.03、1.68、1.79mg/mL;根据RC预测模型,急性毒性LD50的预测值分别为2376.4、2478.3、1574.8、2087.6、4897.3、3331.8、3300.7mg/kg。经上下法检测,4号化合物的LD50值为1634.0mg/kg,其余6种化合物的LD50值均大于2000.0mg/kg。分别以预测值和实测值为依据对化合物毒性进行分级,二者相比,仅3号和4号化合物毒性分级略有差异,其它5种化合物的毒性分级基本一致。结论：体外细胞毒性数据可用来预测体内急性毒性,减少实验动物使用。     

抗乙肝病毒新药Bay41-4109的发现毒理学研究

目的:利用发现毒理学中的临床前先导化合物优化技术(preclinical lead optimization technolo-gies,PLOTs)对抗乙肝病毒候选新药Bay41-4109的一般毒性、遗传毒性和生殖毒性进行研究,为早期发现候选新药的毒性提供实验依据.方法:一般毒性研究中分别以MTT比色法和上下法检测Bay41-4109的体外细胞毒性和小鼠LD50;遗传毒性研究中分别以Ames波动试验、SOS显色试验、双核细胞微核试验检测Bay41-4109诱发鼠伤寒沙门菌基因回复突变的能力、诱发大肠杆菌的原发DNA损伤效应以及对CHL细胞的染色体断裂效应;生殖毒性研究中以大鼠胚胎中脑细胞微团培养试验来检测Bay41-4109的致畸性.结果:Bay41-4109对CHL细胞的IC50为54.0 μmol·L-1,对雌性小鼠的LD50大于2 000 mg·kg-1.无论有无S9活化,Bay41-4109均不引起沙门菌回复突变,也不导致DNA损伤和染色体断裂.Bay41-4109对大鼠胚胎中脑细胞亦无致畸作用.结论:早期毒性筛选结果表明:Bay41-4109未表现明显的遗传毒性和生殖毒性.     

黄蜀葵花提取物金丝桃苷的急性毒性和遗传毒性评价(英文)

研究黄蜀葵花提取物金丝桃苷的急性毒性和遗传毒性,对其安全性进行评价。急性毒性试验中,选用健康BALB/c小鼠40只,雌雄各半,灌胃给药(5000mg/kg),连续观察14天,记录中毒和死亡情况,测定小鼠的半数致死量(LD50)。用目前新药遗传毒性评价中推荐使用的3种试验方法,营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验),中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验研究金丝桃苷的遗传毒性。在急性毒性试验中,所有实验动物都存活,且行为活泼,未见明显异常。Ames试验中,金丝桃苷在加或不加肝微粒体酶(S9)时均未见引起TA97、TA98、TAl00和TAl02试验菌株基因突变(P>0.05)。体外CHL细胞染色体畸变试验中,金丝桃苷在加或不加S9时均未引起CHL细胞的染色体畸变(P>0.05)。小鼠微核试验中,金丝桃苷各剂量组小鼠骨髓多染红细胞微核率与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在本实验条件下,金丝桃苷对于BALB/c小鼠的LD50大于5000mg/kg,金丝桃苷没有遗传毒性。     

纳米铜体内体外急性毒性对比研究

目的分别使用昆明小鼠急性经口毒性试验、秀丽隐杆线虫毒性试验及CHL体外细胞毒性试验研究纳米铜的急性毒性作用。方法小鼠急性经口毒性试验采用霍恩氏法;线虫急性毒性试验对秀丽隐杆线虫L4期幼虫进行24 h染毒;体外细胞毒性试验采用CHL细胞中性红染色法。结果纳米铜小鼠急性经口毒性试验雌性小鼠经口半数致死量LD50为14.0 mg/kg·bw,雄性小鼠经口半数致死量LD50为8.8 mg/kg·bw;线虫急性毒性试验显示,随着纳米铜染毒剂量的增加,线虫死亡率呈上升趋势,纳米铜对线虫IC50为12.6μg/ml;细胞毒性试验显示,随着纳米铜染毒剂量的增加,CHL细胞存活率呈下降趋势,纳米铜对CHL细胞IC50为2.33μg/ml。结论根据化学品急性经口毒性试验方法(GB/T 21603-2008)的分级标准判定,纳米铜小鼠急性经口毒性属高毒;12.9和30μg/ml纳米铜对线虫有毒性作用;大于3.75μg/ml纳米铜细胞毒性为4级。     

3种急性经口毒性试验方法的比较

传统的急性经口毒性试验多采用霍恩氏法。该法使用动物较多，造成人力和物力的浪费，固定剂量法和毒性等级法是2种主要的LD50测试替代方法。固定剂量法由英国毒理学会（BTS）于1984年正式提出，目前Bmsels委员会也承认其具有一定的实用价值。毒性等级法最初由Samiey提出，现已被许多欧美国家作为公认的LD50测试修正方法之一。此2种方法主要流行于欧洲国家，目前在国内还较少使用。     

BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的验证研究

目的探讨BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的可行性,为建立细胞毒性试验预测急性毒性试验平台,开展化合物急性毒性筛查提供理论依据。方法选取11种受试物,开展BALB/c 3T3中性红摄取试验,以IC50结果与急性毒性试验LD50进行线性回归,将拟合的曲线与RC模型曲线进行比较。同时,将受试物的IC50值代入RC模型方程获得急性毒性LD50的预测值,依据GHS急性毒性分级法进行分级,与急性毒性试验的LD50和分级进行比较,同时对结果进行相关性分析。结果阳性对照十二烷基硫酸钠的结果符合试验质量控制的要求。受试物拟合曲线与RC模型曲线几乎平行,11种受试物中,LD50预测值与急性经口毒性试验分级一致的有9种。BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验IC50值与急性毒性试验LD50值存在相关性(Pearson r=0.997,P<0.01)。受试物分级结果与实际分级具有等级相关性(Spearman r=0.905,P<0.01)。结论在本试验体系下,BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验能够较好地预测急性毒性。既可以作为化合物急性毒性的快速初筛,又可为动物试验起始剂量的选择提供依据。     

薏苡仁多糖急性毒性及遗传毒性试验研究

目的了解薏苡仁多糖的毒理学安全性。方法小鼠急性毒性试验和遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验）。结果薏苡仁多糖的小鼠经口LD50〉20g·kg^-1;在Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验中均呈阴性反应,未显示有遗传毒性作用。结论薏苡仁多糖基本无毒性。     

2015毒性测试替代方法与转化毒理学学术研讨会(第一轮会议通知)

为了促进国内外学术交流,宣传和推广毒理学替代法与21世纪毒性测试新策略及转化毒理学科技成果的转化与应用,促进科技工作者、企业和政府进行深入的学习和交流,中国毒理学会毒理学替代法与转化毒理学专业委员会和中国环境诱变剂学会毒性测试与替代方法专业委员会拟于2015年7月26-29日在西安召开"2015年毒性测试替代方法与转化毒理学学术研讨会"。(具体地点见第二轮通知)     

新型环氧合酶-2抑制剂Ia-10和Ib-10的生殖毒性的早期评价

目的化合物Ia-10和Ib-10为我所研发的一类全新的化合物,拟开发为一类环氧合酶-2(COX-2)抑制剂类非甾体类抗炎药。本研究采用体外替代方法,评价该新型COX-2抑制剂类化合物的潜在生殖毒性,初步评价其开发前景。方法采用原代微团培养法培养大鼠胚胎中脑神经细胞,分别采用中性红吸收法和微团集落计数法,观察化合物Ia-10、Ib-10、已上市COX-2抑制剂赛来昔布以及生殖毒性阳性对照药羟基脲暴露后对细胞增殖和分化的影响,计算受试物对中脑神经细胞微团的半数增殖抑制浓度(IV50)和半数分化抑制浓度(ID50),并根据IV50与ID50的比值R来评价化合物的潜在生殖毒性(R>2.0,化合物具有潜在生殖毒性;R<2.0,化合物无潜在生殖毒性)。结果化合物Ia-10对中脑神经细胞微团的IV50为31.48μg/ml,ID50为8.76μg/ml(R=3.59);化合物Ib-10的IV50为35.46μg/ml,ID50为23.55μg/ml(R=1.51);COX-2抑制剂赛来昔布的IV50为28.89μg/ml,ID50为36.55μg/ml(R=0.79);阳性药羟基脲的IV50为6.64μg/ml,ID50为2.52μg/ml(R=2.63)。结论根据R值进行判断,阳性药物羟基脲具有生殖毒性,赛来昔布无潜在的生殖毒性;化合物Ia-10具有潜在的生殖毒性,而化合物Ib-10无潜在生殖毒性,提示具有市场开发前景。     

橙汁粉末香精毒理学研究及安全性评价

目的研究橙汁粉末香精的毒性和安全性。方法按照《食品安全毒理学评价程序和方法》进行试验。结果橙汁粉末香精对小鼠急性毒性实验LD50=9600mg·kg-1,属实际无毒级;通过Ames试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验;传统致畸实验,发现橙汁粉末香精无遗传毒性;30天喂养实验以及90天喂养实验,发现对动物的体重、血液常规及血清生化指标均无明显毒性作用(P>0.05)。结论根据以上结果可基本断定橙汁粉末香精是一种安全、无毒的食品、药品矫味剂。     

驱铅益智口服液的安全性毒理学评价

目的通过动物实验初步探讨驱铅益智口服液（口服液）的安全性,旨在开发一种安全有效的驱铅产品。方法依据《食品安全性毒理学评价程序和方法》的要求,采用霍恩氏法进行急性毒性试验,应用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和30d喂养试验进行遗传毒性和安全性评价。结果急性毒性试验显示小鼠经口的LD50〉10g·kg^-1·bw^-1;3种遗传毒性试验均显示口服液组与阴性对照纽相比差异均无统计学意义（P〉0．05）;30d喂养试验期间大鼠一般状况、体重、食物利用率、外周血常规和生化指标、脏体比均与阴性对照组相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。光镜下病理学检查组织结构均未见异常。结论从食品毒理学角度出发,可以认为口服液无毒、无致突变作用。     

山豆根水提组分对咽喉实热证小鼠急性毒性实验研究

目的进行山豆根水提组分对咽喉实热证小鼠的急性毒性研究,以阐释清热解毒类有毒中药"毒性-证候"相关性。方法制备山豆根水提组分样品,建立小鼠咽喉实热证模型,采用经典的小鼠急性毒性实验方法给模型小鼠灌胃山豆根水提组分进行急性毒性实验,连续观察14天,观察其急性毒性症状、体征,记录累积死亡率和小鼠体重变化,计算LD50。结果山豆根水提组分给咽喉实热证模型小鼠灌胃后小鼠出现烦躁、呼吸抑制等急毒症状、体征,LD50及其95%可信限为20.63(17.94~23.92)g·kg-1。结论山豆根水提组分对咽喉实热证模型小鼠的急性毒性明显小于正常动物,毒性症状出现时间延后,毒性症状减轻,LD50值增大。     

体外方法在化学物质急性毒性评价中的应用

急性毒性分析是评估化学物质健康危害的第一步，主要研究24h内单次或多次给药后动物所产生的毒性反应及死亡情况。半数致死剂量（LD50），即能引起实验动物50％死亡的受试物剂量，是其检测的重要指标。急性毒性试验可对物质进行分类和标记，并为其他毒性试验剂量选择提供依据，但其动物消耗量大，利用动物数据评价人体毒性，存在一定程度的不确定性，     

竹芪口服液的毒性作用研究

目的 观察竹芪口服液对动物神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响及急性毒性。方法将小鼠和兔分别以竹芪口服液9.0 g·kg^-1灌胃，并与以戊巴比妥钠、苯丙胺、可乐定、美芬丁胺、咖啡因等灌胃后比较，观察其对动物神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响及急性毒性，并计算半数致死量(LD50)。 结果竹芪口服液对动物神经系统、心血管系统、呼吸系统无明显影响，急性毒性试验LD50为112．4 g·kg^-1。结论竹芪口服液应用安全，无明显毒性作用。     

昂丹斯琼杂质的小鼠急性毒性和细胞毒性研究

目的研究昂丹斯琼杂质的急性毒性和细胞毒性。方法预实验确定用药剂量,正式实验120只动物随机分组（雌雄各半,每组20只）,给药后连续观察14d,记录动物反应及死亡情况。应用成纤维细胞（L929）、狗肾细胞（MDCK）及人脐静脉内皮细胞（HUVEC）观察化合物的细胞毒性。结果昂丹斯琼杂质1灌胃给药对小鼠的LD50及95％置信限为1798．8±178．2mg·kg^-1,解剖未见明显内脏损伤。昂丹斯琼杂质2静脉注射给药对小鼠的LD50及95％置信限为49．63±7．63mg·kg^-1,静注后出现呼吸急促、抽搐等现象,解剖未见明显内脏损伤。昂丹斯琼杂质32000mg·kg^-1。灌胃给予小鼠,每天1次,连续给药3天,动物全部存活且无明显中毒表现,解剖未发现明显内脏损伤。昂丹斯琼杂质1,2,3均对成纤维细胞（L929）有一定的细胞毒作用（P〈0．05）。昂丹斯琼杂质3显著促进人脐静脉内皮细胞的增殖（P〈0．05）。结论昂丹斯琼杂质1和杂质2对小鼠和细胞具有一定毒性,昂丹斯琼杂质3毒性低。本研究为制定昂丹斯琼质量标准提供实验依据,提高临床使用安全。     

用QSTR模型预测苯酚类化合物大鼠经口的急性毒性△

对39种苯酚类化合物大鼠经口急性毒性(LD50)的定量结构-毒性效应关系(Quantitative Structure-Toxicity Relation-ships,QSTR)进行了研究。采用HyperChem7.5中MOPAC-AMI量子化学法计算了39种苯酚类化合物的13种量子化学结构参数。其中取22个化合物作为样本集对LD50进行多元逐步回归分析,得到最佳方程,该方程的相关系数R2=0.9749。应用所建立的QSTR模型验证了苯酚类化合物的LD50值。经过17个预测样本对该模型进行验证,结果表明该模型具有很好的预测能力。同时分析了苯酚类化合物的毒性机理。     

氯化镉、硫酸锌和亚硒酸钠细胞毒性检测方法的比较

近年出于动物保护和动物福利的要求,许多国家和国际组织都立法限制或禁止动物试验,使体外试验作为一种替代方法得到了迅速发展.体外细胞毒性试验作为体外试验的一类重要试验在新药的研究、开发以及化学物质毒性评价方面发挥重要作用.从1999年开始,美国和欧盟就开始进行用体外细胞毒性试验代替动物经口急性毒性试验的研究,虽然发现体内的经口急性试验与体外细胞毒性试验有很大的相关性,但不能完全替代体外试验.而对他们的试验进行研究发现,他们对所有种类的化学物质都采用同一的方法进行评价.这样虽然有助于方法的标准化,由于化学物质的作用机制的不同,有必要探索不同种类物质的不同细胞毒性方法的适用性[1-2].噻唑蓝法(MTT)和中性红法是2种应用较多且较成熟的检测方法,均具备简便、快捷和试验条件可控等优点,是毒理学检测细胞毒性首选或必选的方法.但是,受试验体系的影响,每种方法的不足可能对实验结果产生一定的影响.因此,对不同的试验体系加以验证,可以更好地推断其适用性.     

氟胺酮和氯胺酮的毒性比较研究

目的:分析氟胺酮和氯胺酮的急性毒性及神经毒性作用.方法:急性毒性实验采用"上下法"给药,观察小鼠给予氟胺酮或氯胺酮2 d内的反应,并计算半数致死量(median lethal dose,LD50).神经毒性实验则采用MTT法观察氟胺酮或氯胺酮对神经细胞的毒性作用,并计算半数抑制浓度(half maximal inhib...