Toll样受体4在宫颈细胞系和宫颈上皮病变中的表达及与HPV16感染的关系

目的：检测Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）在宫颈细胞系和宫颈病变组织中的表达,探讨TLR4在宫颈病变进展中的作用及与人乳头状瘤病毒（human papillomavirus 16,HPV16）感染的关系。方法：用RT-PCR检测H8, SiHa,Caski细胞中HPV16 E6基因的mRNA含量;Western免疫印迹测定3种细胞系中TLR4蛋白含量;免疫组织化学检测127例慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（cervical intra-epithelial neoplasia,CIN）以及宫颈鳞癌病变组织石蜡切片中TLR4蛋白的表达。抽提石蜡组织总DNA,用PCR方法检测组织中HPV16的感染情况。结果：Caski和SiHa细胞中HPV16 E6基因mRNA含量和TLR4蛋白表达明显高于H8正常对照（P〈0.05）,且Caski细胞中HPV16 E6基因mRNA含量和TLR4蛋白表达也显著高于SiHa细胞（P〈0.05）;TLR4在慢性子宫颈炎,CIN和宫颈鳞癌组织的表达分别为32.0%,59.4%和77.8%,随着宫颈上皮病变加重TLR4表达增强（P〈0.01）,并且与宫颈癌分化程度有关（P〈0.01）;HPV16在宫颈病变组织中的表达随着病理分级逐渐增高,在慢性子宫颈炎、CIN和宫颈鳞癌组织中分别为8.0%,48.4%和81.0%（P〈0.01）;在CIN和宫颈癌组织中TLR4与HPV16相关（r=0.303,P〈0.05;r=0.633,P〈0.05）。结论：HPV16感染可以上调TLR4在宫颈上皮病变中的表达,TLR4与HPV16共同作用对宫颈上皮从炎症发展到CIN至宫颈癌过程中发挥重要作用。     

宫颈癌及癌前病变患者高危型HPV16感染与HLA-Ⅰ表达的关系

目的探讨宫颈癌及癌前病变患者高危型人乳头状瘤病毒16(HPV16)感染与人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)表达的关系。方法选取2014年4月~2016年4月我院行手术切除术或妇科检查的123例宫颈病变患者为研究对象,利用聚合酶链式反应(PCR)检测患者HPV阳性检出率,采用免疫组织化学S-P方法检测组织中HLA-Ⅰ蛋白表达水平,分析HLA-Ⅰ与宫颈癌及癌前病变患者高危型HPV16感染之间的关系。结果宫颈炎组织中HPV16阳性检出率为8.33%,明显低于宫颈内上皮瘤变(CIN)组织中HPV16阳性检出率(31.25%),差异有统计学意义(P0.05),CIN组织中HPV16阳性检出率为31.25%,明显低于宫颈鳞癌(CSCC)组织中阳性检出率(79.10%)(P0.05);宫颈炎组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率为95.83%,明显高于CIN组织阳性表达率(40.63%)(P0.05),CIN组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率为40.63%,明显高于CSCC组织中阳性表达率(19.40%)(P0.05);宫颈癌组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率与宫颈癌组织分化、临床分期以及淋巴结转移密切相关(P0.05);相关性分析结果显示,HPV16感染与HLA-Ⅰ蛋白表达呈显著负相关(r=-0.748,P0.05)。结论 HLA-Ⅰ表达及高危型HPV16感染与宫颈病变进展为宫颈癌密切相关,且HLA-Ⅰ蛋白表达与HPV16感染呈明显负相关。     

Toll样受体4在早产中的表达及意义

早产占分娩总数的5％～15％。尽管围生期保健在不断发展,但早产仍是导致围生儿发病及死亡的主要原因。目前对早产的病因尚未明确。近年来随着生殖免疫学的发展,Toll样受体尤其是Toll样受体4在早产中的研究越来越受到重视。本文将对此进行综述。     

模式识别受体与HPV感染及宫颈癌的相关研究进展

高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续性感染是宫颈癌的主要危险因素,天然免疫系统通过模式识别受体(PRR)诱导促炎症细胞因子及Ⅰ型干扰素释放,在抵御外源微生物过程中发挥重要作用.天然免疫系统障碍使HPV不能被有效清除,HPV持续性感染,最终导致宫颈癌的发生.PRR在HPV感染过程中发挥重要作用,并且其异常表达参与宫颈癌的发...     

结核病患者中性粒细胞表面Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。     

Toll样受体2/4在人牙龈上皮细胞的表达研究

目的:探讨Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)在人牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGECs)的表达情况,以及上述受体在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激下表达水平的改变?方法:采用逆转录PCR技术检测TLR2?TLR4 在HGECs的基因表达,采用real-time PCR技术和流式细胞技术检测1 μg/ml牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)?LPS或1 μg/ml大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) LPS刺激后,该细胞TLR2?TLR4表达水平的改变?结果:来自不同个体的HGECs均表达TLR2,TLR4 mRNA?1 μg/ml P.gingivalis LPS刺激后,TLR2基因和蛋白表达水平均明显增高(P < 0.05);1 μg/ml E.coli LPS刺激后,TLR4基因和蛋白表达水平明显增高(P < 0.05)?结论:TLR2?TLR4在HGECs存在稳定表达,并能被LPS的刺激活化,提示上述两种受体可能参与了牙周组织的炎症和免疫反应?     

Toll样受体3和Toll样受体4在原发性IgA肾病患儿肾组织中的表达及意义

目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)3和TLR4在原发性IgA肾病患儿肾组织中的表达及意义.方法 选择2014年7月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的64例原发性IgA肾病患儿为研究对象,所有患儿于超声引导下定位穿刺获取肾组织标本行病理学检查,根据牛津分类法将患儿分为M0组...     

宫颈癌及其癌前病变中HPV16/18感染与P16INK4A蛋白表达的关系

宫颈癌与高危型人乳头状瘤病毒（HPV）的持续感染密切相关,P16^INK4A基因产物在HPV感染引起的宫颈癌多步骤、多阶段病变中起重要作用,我们检测了2005年6月至2008年3月送检的284例宫颈组织标本中HPV26／18感染和P16^INK4A蛋白表达的情况,分析两者的关系,报告如下。     

p16^INK4A 在ASCUS中的表达及其与HPV感染的关系

目的：探讨对筛p16^INK4A查ASCUS中潜在宫颈病变的价值及其与HPV感染的关系。方法：对148例宫颈细胞学检查结果为ASCUS的病人进行p16^INK4A免疫细胞化学检测,同时采用荧光定量PCR方法,检测剩余标本中HPV16,18型DNA的表达,其结果与p16^INK4A表达结果比较,分析其相关性。结果：148例ASCUS中,p16^INK4A在经病理学确诊的慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变的CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和浸润癌的阳性表达率分别为0.9%、77.3%、91.7%、100%、100%;HPV16,18型的阳性表达率分别为0.9%、68.18%、83.33%、100%、100%;p16^INK4A以及HPV16,18型的表达在宫颈炎与CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级之间,宫颈炎与宫颈鳞癌之间,阳性率均有显著性差异,而二者之间的表达具有较高的一致性。结论：p16^INK4A在宫颈CIN及以上病变中高表达,且与HPV-DNA的表达具有较高的一致性,可对ASCUS进行有效地分流监测。     

p16INK4A在ASCUS中的表达及其与HPV感染的关系

目的:探讨对筛p16INK4A查ASCUS中潜在宫颈病变的价值及其与HPV感染的关系.方法:对148例宫颈细胞学检查结果为ASCUS的病人进行p16INK4A免疫细胞化学检测,同时采用荧光定量PCR方法,检测剩余标本中HPV16,18型DNA的表达,其结果与p16INK4A表达结果比较,分析其相关性.结果:148例AS...     

宫颈腺癌中HPV16/18与P16的表达及其相关性

目的探讨各类型宫颈腺癌与HPV16/18感染的关系,分析HPV16/18的感染率与P16表达之间的相关性。方法应用原位杂交及免疫组织化学EnvisionTM二步法检测31例宫颈管型腺癌,12例宫颈子宫内膜样腺癌,9例宫颈微偏腺癌中HPV16/18及P16的表达情况,另选36例宫颈鳞癌作对照。结果①微偏腺癌中HPV16/18的检出率低于其他各组,差异均具有统计学意义(P<0.05);宫颈管型腺癌、子宫内膜样腺癌中HPV16/18的检出率与鳞癌相比差异无统计学意义(P>0.05)。②微偏腺癌中P16蛋白的阳性表达率低于其他各组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。③所有HPV阳性患者P16的表达明显高于所有HPV阴性患者,P16的阳性表达率与HPV16/18感染呈正相关(P<0.05)。结论①宫颈管型腺癌及宫颈子宫内膜样腺癌与HPV16/18感染相关,而宫颈微偏腺癌可能与HPV16/18的感染无关。②P16蛋白的过表达可能参与了部分普通型宫颈腺癌的发生、发展,但在微偏腺癌中可能不起重要作用。③P16蛋白的高表达与HPV感染密切相关。     

p16基因CpG位点甲基化在维吾尔族宫颈鳞癌及HPV16感染中的意义

目的:探讨p16 基因启动子区CpG 位点甲基化及HPV16 感染与新疆维吾尔族宫颈鳞癌的关系及其意义。方法:采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱方法(MALDI-TOF MS) 对20 例维吾尔族宫颈鳞癌及20 例对照组维吾尔族宫颈组织中的p16 基因启动子CpG 位点甲基化进行定量检测;采用聚合酶链反应(PCR) 的方法检测两组HPV16 的感染状况。结果:宫颈鳞癌及对照组中p16 基因启动子区16 个CpG 位点中CpG1-2, CpG6 为甲基化差异位点, 宫颈鳞癌组中CpG1-2, CpG6 位点甲基化水平明显高于对照组;宫颈鳞癌组的HPV16 感染率明显高于对照组, 差异有统计学意义(P<0.05);所检测的维吾尔族宫颈鳞癌组织中p16 基因启动子区CpG 位点甲基化与HPV16 感染无明显相关。结论:p16 基因启动子区CpG1-2, CpG6 位点高甲基化及HPV16 感染均与维吾尔族宫颈鳞癌的发生有关系, 但为两个独立事件。     

HPV16与新疆维吾尔族宫颈癌的相关性研究

目的 :探讨新疆维吾尔族宫颈癌患者中HPV16型的检出率。方法 :采用半巢式PCR技术检测 73例新疆维吾尔族宫颈癌活检组织、2 6例正常宫颈石蜡包埋组织中HPV16型 ,分析其与新疆维吾尔族宫颈癌发生的相关性。结果 :在宫颈癌组织中 ,HPV16检出率为 6 1.6 % (4 5 / 73) ,与对照组相比 (0 % ) ,存在显著性差异 (χ2 =2 9.38,P <0 .0 5 )。结论 :HPV16型感染与新疆维吾尔族宫颈癌的发生密切相关。     

HPV16／18型病毒感染与宫颈癌的关系研究

目的探讨高危型人乳头瘤病毒（human papilloma—virus,HPV）16／18型感染与宫颈癌的关系。方法应用实时荧光定量PCR（FQ—PCR）检测176例宫颈癌患者及218例宫颈炎症患者的宫颈分泌物,计算两组HPV16／18型阳性率及各组中HPV—DNA病毒载量拷贝对数值。结果宫颈癌患者组HPVl6／18型阳性率78．41％（138／176）,宫颈炎患者组HPVl6／18型阳性率29．82％（65／218）,两组阳性率经）（2检验,有显著性差异（Х^2=92．06,P〈0．01）;病毒载量前者也显著高于后者（t=2．42,P〈0．01）。结论HPVl6／18型病毒感染与宫颈癌关系密切,实时荧光定量PCR检测可以早期发现、旱期治疗。是预防宫颈癌的有效手段。     

凋亡抑制基因Survivin在宫颈癌中的表达及与HPV16／18的相关性研究

目的研究凋亡抑制基因Survivin在宫颈癌中的表达及与HPV16／18的关系,以探讨宫颈癌的发生机制,指导诊断和预后判断。方法采用原位杂交法检测20例正常宫颈组织、74例宫颈上皮内瘤变（CIN）和81例宫颈癌中SurvivinmRNA及HPV16／18DNA的表达。结果Survivin mRNA的阳性率在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌中逐渐升高,且随着临床分期的升高、组织分化的恶化而更为升高,其阳性率与淋巴结转移相关,与病理类型及肿块类型无关。HPV16／18在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌中的阳性率也逐渐升高,差异有统计学意义。SurvivinmRNA表达与HPV16／18感染呈正相关。结论SurvivinmRNA在宫颈癌中有异常表达。Survivin的异常表达和HPV16／18感染有关,它可能在HPV的协同作用下参与宫颈癌的发生和发展,两者联合检测可望为宫颈癌早期诊断和预后判断提供切实可行的指标。     

宫颈鳞状上皮病变中HPV感染与P16、Ki-67蛋白表达

目的：探讨HPV在宫颈鳞状上皮病变中的感染情况及其与P16、Ki-67蛋白表达的关系。方法：采用原位杂交及免疫组化方法,检测HPV、P16和Ki-67蛋白在200例不同程度宫颈鳞状上皮病变中的表达情况。结果：HPV在宫颈鳞状上皮病变中总检出率为64%（128/200）,HPV 6/11在尖锐湿疣组中检出率最高,HPV 16/18在宫颈鳞状细胞癌、CIN组中尤其在CINⅡ～Ⅲ组中阳性率显著性增高。随着宫颈病变程度的加重,P16和Ki-67蛋白的阳性表达也呈递增趋势。结论：高危型HPV16/18感染与宫颈鳞状上皮内瘤变密切相关;抑癌基因P16蛋白的表达上调参与蛋白对宫颈鳞状细胞癌的发生发展过程;P16蛋白还可作为鉴别宫颈肿瘤性及非肿瘤性增生的标记物;联合检测P16和Ki-67蛋白对宫颈CIN的诊断及分级具有辅助诊断价值。     

HPV16相关宫颈癌组织中MUC16和E6表达的关系

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)16相关宫颈癌组织中粘蛋白抗原16(MUC16)与E6表达的关系。方法:以HPV16 E6阳性和阴性的宫颈癌细胞系和宫颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织(184例)为研究对象,采用Western blot和免疫组化方法检测HPV16 E6和MUC16的表达。结果:Western blot结果显示:C-33A细胞中HPV16 E6无表达,Ca Ski细胞和Si Ha细胞中可见HPV16 E6表达;C-33A细胞中MUC16的表达低于Ca Ski细胞和Si Ha细胞(P<0.05),Ca Ski细胞和Si Ha细胞中MUC16的表达差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示:HPV16E6阳性的宫颈鳞癌组织中MUC16的表达高于HPV16 E6阴性的宫颈鳞癌组织(χ2=43.670,P<0.001)。结论:宫颈癌细胞系和鳞癌组织中MUC16与E6表达可能有关。     

宫颈鳞癌组织中c-fos 蛋白表达 与HPV 感染的相关性

目的 探讨宫颈鳞癌及宫颈病变组织中原癌基因c-fos 蛋白和人乳头状瘤病毒（HPV）表达及其 与宫颈鳞癌发生、发展的关系。方法 选取承德医学院附属医院妇科门诊及病房经病理确诊为宫颈鳞癌和宫 颈病变组织患者共148 例。依据病理学诊断结果分为慢性宫颈炎症组（31 例）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL） 组（35 例）、高级别鳞状上皮内病变（HSIL）组（33 例）及宫颈鳞状细胞癌组（49 例）。分别采用PCR- 反 向点杂交技术及免疫组织化学PV 二步法检测各组织中HPV-DNA 和c-fos 蛋白表达。结果 宫颈鳞癌组织 中HPV 感染和c-fos 蛋白表达高于慢性宫颈炎症组、LSIL 组及HSIL 组（P <0.05）;宫颈鳞癌组c-fos 蛋白 表达与肿瘤的分化程度、TNM 分期、有无淋巴结转移密切相关（P <0.05）;HPV 阳性宫颈鳞癌患者c-fos 蛋 白表达率高于HPV 阴性患者（P <0.05）。结论 c-fos 蛋白在宫颈鳞癌及宫颈病变组织均有一定程度表达,随 宫颈病变程度的加重c-fos 蛋白表达逐渐升高,宫颈鳞癌组织中c-fos 表达与HPV 感染密切相关。     

子宫颈癌组织中高危型人乳头状瘤病毒感染和P16INK4A蛋白表达的检测

目的:检测宫颈上皮癌变过程中高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染和P16INK4A蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学方法检测30例正常宫颈组织、23例宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)、26例CINⅡ、31例CINⅢ和22例浸润癌组织中P16INK4A蛋白的表达;用第二代杂交捕获法(HC-2)检测13种HR-HPV DNA.结果:正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、浸润癌组织中,P16INK4A蛋白阳性表达率分别为6.67%、39.10%、88.50%、87.10%、90.90%,HR-HPV阳性率分别为30.00%、82.60%、80.80%、90.30%、95.50%,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ和浸润癌组织与正常宫颈组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01).等级相关分析结果显示,宫颈组织中HR-HPV阳性率与P16INK4A蛋白阳性表达率呈正相关(rs=0.564, P＜0.01).结论:HR-HPV致宫颈上皮恶性转化可能与P16INK4A蛋白过表达有关, P16INK4A和HR-HPV联合检测可提高对子宫颈癌及CIN的阳性预测值.