内蒙古地区汉族散发性乳腺癌与BRCA1基因突变的相关性研究

目的 本实验旨在研究内蒙古地区汉族散发性乳腺癌患者BRCA 1基因第11外显子有无突变.方法 选择内蒙古地区69例汉族散发性乳腺癌患者作为研究对象,提取DNA,采用聚HTK合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）和基因测序技术方法检测BRCA 1基因第11外显子.统计分析BRCA 1基因突变情况.结果 69例散发性乳腺癌中BRCA 1基因第11外显子上共发现2例突变（2073delA移码突变和W372X无义突变）.结论 内蒙古地区汉族散发性乳腺癌中BRCA1基因第11外显子发现2例突变,均已收录于NCBI数据库中;尚未发现国内文献报道的在中国汉族群中可能具有部分始祖效应的突变位点.     

上海地区早发性乳腺癌患者BRCA1和BRCA2基因突变分析

目的研究中国上海地区早发性乳腺癌中BRCA1／BRCA2基因的突变位点及携带情况。方法对象为来自上海地区的50例早发性乳腺癌（发病年龄440岁）,其中13例（26％）有一级亲属患病家族史。由静脉血提取基因组DNA,对BRCA1／2基因的全部编码序列进行扩增。突变分析由变性高效液相色谱分析（DHPLC）进行预筛,之后进行DNA测序证实。结果在BRCA1基因中发现有6个致病突变位点,其中4个为新发现的位点,包括两个移码突变（3449insA,5587-1del8）和两个拼接点突变（IVS17-1G〉T,IVS21＋1G〉C）。BRCA2基因的两个致病突变位点都很接近位于Il号外显子上;其中的1个致病突变位点为移码突变（5950delCT）,另一个错义突变（5911G〉C）可能为新的致病突变位点。另外,共发现有12个新的SNP位点,都未引起氨基酸编码改变;其中,8个在BRCA1基因上,4个在BRCA2基因上。在早发性乳腺癌中,BRCA1基因突变频率（12％）比BRCA2基因（4％）高;BRCA1基因突变频率在有无家族史的患者中分别为30．8％和5．4％。结论新发现的4个BRCA1基因的致病突变位点和一个BRCA2基因的错义突变位点可能是中国人群早发性乳腺癌的特有突变位点;在中国人群中,BRCA1基因突变起着比BRCA2基因更大的作用;本研究为未来的临床基因检测提供了可能的筛查模式。     

新疆多民族地区三阴性乳腺癌BRCA1基因突变分析

目的：研究新疆多民族地区三阴性乳腺癌( TNBC ) BRCA1基因的突变情况及突变者与未突变者临床、病理组织特征的差异。方法以新疆多民族地区130例TNBC患者为研究对象,从静脉血提取基因组DNA,采用PCR联合直接测序法检测BRCA1基因突变情况。结果130例TNBC患者BRCA1突变率为17．7%(23/130),其中汉族与少数民族 TNBC 患者 BRCA1突变率分别为20．5%(17/83)、12．8%(6/47),差异无统计学意义(χ2=1．856,P=0．869)。130例TNBC患者中发现23例BRCA1突变的19个位点,其中8个为新发现的位点;4个BRCA1基因突变“热点”;此外还发现了9例(6．9%,9/130)致病性突变,5例无义突变,4例移码突变。早发性 TNBC 组 BRCA1突变率28．3%(13/46)高于晚发性TNBC组11．9%(10/84),差异有统计学意义(χ2=5．460,P<0．05)。 BRCA1基因突变组与BRCA1基因未突变组相比,发病年龄早,腋窝淋巴结转移率高, TNM分期晚,差异均有统计学意义( P<0．05)。结论新疆多民族地区TNBC患者BRCA1基因突变率高;突变者与未突变者相比,存在临床病理组织差异。     

新疆地区不同民族早发性和三阴性乳腺癌易患基因1突变研究

目的 研究新疆地区汉族和维吾尔族早发性、三阴性乳腺癌易患基因1（BRCA1）基因的突变情况及临床病理特征。方法 选取2012年7月-2014年8月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的早发性（发病年龄≤35岁）、三阴性乳腺癌患者60例,其中汉族30例,维吾尔族30例,运用聚合酶链反应（PCR）和DNA测序检测BRCA1基因突变,并结合临床病理因素进行分析。结果 60例早发性、三阴性乳腺癌患者BRCA1突变率为18.3%（11/60）,其中维吾尔族患者BRCA1突变率为30.0%（9/30）,汉族患者BRCA1突变率为6.7%（2/30）,两者突变率比较,差异有统计学意义（χ2=5.454,P=0.019）。60例患者BRCA1突变的位点共11个,其中8个可引起氨基酸错义突变,2个移码突变,1个拼接点突变。BRCA1基因突变者与无突变者民族、淋巴结转移个数、Ki-67表达情况比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 新疆地区维吾尔族和汉族早发性、三阴性乳腺癌BRCA1基因突变存在差异,BRCA1突变者临床表现淋巴结转移多、Ki-67蛋白高表达,提示早发性、三阴性乳腺癌可能发病早,恶性程度高。     

汉族散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变的研究

目的研究宁夏地区汉族乳腺癌患者BRCA1基因突变情况及突变位置。方法抽取已经确诊55例乳腺癌患者的外周血标本,对照组为30例健康女性查体的外周血标本,应用PCR法（聚合酶链反应）和DNA序列直接测定的方法检测BRCA1基因突变。结果（1）55例乳腺癌BRCA1的突变率9．09％（5／55）,其中17例早发性乳腺癌（≤35岁）BRCA1突变率23．53％（4／17）,高于晚发性乳腺癌基因突变率的2．63％（1／38）,差异有统计学意义（χ2=3．94,P〈0．05）;（2）5例BRCA1基因突变的乳腺癌中有3例ER、PR、人表皮生长因子受体2（HER-2）均为阴性,即三阴乳腺癌,其比例为60％（3／5）,而非BRCA1突变的乳腺癌中三阴比例为10．00％（5／50）,差异有统计学意义（χ2=5．56,P〈0．05）;BRCA1基因突变相关性乳腺癌淋巴结转移率为100％（5／5）,高于非BRCA1基因突变相关性乳腺癌62％（31／50）,差异有统计学意义（χ2=5．56,P〈0．05）。结论BRCAI突变可能与宁夏地区汉族散发性乳腺癌尤其是早发性乳腺癌的发生密切相关,并与三阴乳腺癌有密切关系,且提示预后可能较差。     

家族性乳腺癌患者115例的BRCA1和BRCA2基因突变检测

目的 研究中国家族性乳腺癌患者中BRCA1/2基因突变的发生率和特性.方法 研究对象为来自全国4个乳腺癌医疗中心的115例家族性乳腺癌患者(包括前期研究的35例),应用DHPLC和DNA序列测定技术对这些患者进行BRCA1/2基因全编码区的突变检测.结果 在115例患者中,共发现11例BRCA1基因突变和3例BRCA2基因突变,总的突变发生率为12.2%.根据家系中乳腺癌患者个数分层后,突变携带率差异无统计学意义.但是携带BRCA1/2基因突变的家系中先证者和所有乳腺癌患者的平均发病年龄显著早于突变阴性的家系(P＜0.01),同时家系中年轻的乳腺癌患者越多,突变携带率就越高.结论 在中国家族性乳腺癌患者中,患者的发病年龄能有效地预测BRCA1/2基因突变的携带率,但是家系中乳腺癌患者个数的预测功能却较差.     

新疆地区维吾尔族、汉族早发性乳腺癌BRCA1基因突变分析

目的研究新疆地区维、汉两族早发性乳腺癌BRCA1基因突变情况及临床病理特征。方法选取病理确诊的65例（维族35例,汉族30例）早发性乳腺癌标本,运用酶链聚合反应（polymerase chain reaction,PCR）和DNA测序方法检测BRCA1基因突变情况,并结合临床病理因素进行相关分析。结果 65例早发性乳腺癌（发病年龄≤35岁）BRCA1的突变率为21.5%（14/65）,35例维吾尔族早发性乳腺癌BRCA1突变率为34.3%（12/35）,30例汉族早发性乳腺癌BRCA1突变率为6.7%（2/30）。65例早发性乳腺癌BRCA1突变的位点为第2、第10、第18号外显子,共发现14个突变位点,位于Exon10共11个,其中10个可引起氨基酸错义突变,3个无义突变;位于Intron18上的1个拼接点突变。65例早发性乳腺癌中BRCA1基因突变者和未突变者在淋巴结转移状况、P53和Ki-67表达情况、组织学分级方面差异有统计学意义（P〈0.05）。结论疆维地区维族、汉族早发性乳腺癌BRCA1基因突变率差异具有统计学意义（P〈0.05）,突变位点可能是新疆维族早发性乳腺癌的遗传易感性位点,与早发性乳腺癌发病存在关联。BRCA1突变者主要临床表现为淋巴结转移多,P53突变率高、Ki-67蛋白高表达等,提示早发性乳腺癌可能发病早、恶性程度高。     

中国家族性乳腺癌人群中发现重复出现的BRCA1 1100delAT突变

目的观察以前在上海地区家族性乳腺癌人群中发现的BRCA1基因突变是否在扩大的样本中有重复出现。方法对来自国内4个乳腺癌临床研究中心的60个独立的汉族家族性乳腺癌家系进行检测,家系中至少有2个一级亲属或3个二级亲属患原发性乳腺癌。从外周血白细胞中提取基因组DNA,对以前报道过的BRCA1基因致病性突变（1100delAT、WS17-1G〉T、IVS21＋1G〉C和5640delA）应用聚合酶链式反应（PCR）-变性高效液相色谱（DHPLC）分析-DNA直接测序的方法进行特异性分析。选取4个与BRCA1基因连锁的标记（D17S855、D17S1322、D17S1326和D17S1327）进行等位基因型分析。结果在来自中国北方的2个家系中发现有重复出现的BRCA11100delAT突变,并在其中一例的患病亲属中发现携带相同的突变。在检测的片段中还发现了1个新的致病性突变．BRCA15589del8。用与BRCA1基因连锁的标记进行等位基因型分析显示,两个来自中国北方的BRCA1 1100delAT突变携带病例有相同的等位基因型,而与前期研究中发现的上海地区此突变携带者的等位基因型有所差异。BRCA11100delAT突变在所有检测家系中出现的频率为3．16％（3／95）。结论首次在中国大陆家族性乳腺癌人群中发现BRCA1基因有重复出现的突变。BRCA11100delAT突变可能是中国家族性乳腺癌人群中BRCA1基因的突变热点;在中国北方人群中,此突变可能有“始祖效应”,需要在大规模人群中进一步研究证实。     

广西地区散发性乳腺癌BRCA1突变及其相关临床、组织病理特征的研究

目的：探讨广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因的突变情况,及其与乳腺癌的临床、组织病理特征。方法：采用PCR联 合基因直接测序法检测广西地区235例乳腺癌患者（包括155例汉族及80例壮族乳腺癌患者）BRCA1基因的突变情况,同时 采用免疫组化方法检测乳腺癌组织中ER、PR及CerbB-2的表达情况。结果：①235例乳腺癌患者BRCA1突变率为8.5% （20/235）;其中汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率分别为7. 1 % （11/155）、11. 3% （9/80）,两者比较差异无统计学意义（χ^2=1. 169,P =0. 280）。②20例BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为65. 0%,三阴性乳腺癌（TNBC）检出率为35.0%; 而无BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为30. 0%,TNBC检出率为14. 8%,两组比较Cerbfr2阴性表达率及TNBC检 出率差异有统计学意义（χ^2 = 10.031, P =0.002;χ^2=4.018, P =0.045）。结论：广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因突变率 相对较低,汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率无明显差异;BRCA1突变乳腺癌CerbB-2阴性表达率高,与三阴性乳腺癌关 系密切,提示预后可能较差。     

乳腺癌BRCA1基因突变的研究

目的　乳腺癌易感基因 (BRCA1基因 )是一种抑癌基因。本研究检测BRCA1基因在乳腺癌中的突变情况 ,探讨BRCA1基因突变与乳腺癌的关系。方法　选取 89例乳腺癌患者标本作实验组 ,另取非癌乳腺组织标本 30例作对照组。每一例标本分别捣碎 ,分别用酚 -氯仿抽提法提取DNA ,每例DNA用PCR扩增BRCA1基因的 2、5、1 7、2 0等 4个外显子。分别将每例病人每个外显子的PCR扩增产物进行SSCP分析 ,对出现异常区带的PCR扩增产物进行DNA测序 ,与基因库序列比对分析其突变情况。结果　 30例非癌乳腺组织未检测出BRCA1基因突变 ,89例乳腺癌共检测出 4例突变 ,其中 2例为 5外显子的错义突变 (2 73C >G ,2 87A >T) ,2例为 1 7外显子的错义突变 (5 1 1 5T >C ,5 1 1 6A >G)。乳腺癌BRCA1的基因突变率为 4 5 %(4 / 89)。结论　BRCA1突变与乳腺癌有关系 ,检测BRCA1基因突变对于乳腺癌患病风险评估及早期诊断具有重要意义     

BRCA1和BRCA2在胶东半岛地区女性散发性乳腺癌中的表达研究

目的 探讨BRCA1和BRCA2在胶东半岛地区女性散发性乳腺癌组织中的表达特点及其临床意义.方法 应用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测100例胶东半岛地区女性散发性乳腺癌及30例乳腺良性病变组织中BRCA1和BRCA2的表达.结果 ①BRCA1和BRCA2的阳性表达率在乳腺癌组织中分别为49%（49/100）和50%（50/100）;在乳腺良性病变中分别为80%（24/30）、83 33%（25/30）.二者差异有统计学意义（P＜0.05）.②乳腺癌组织中BRCA1和BRCA2的表达与患者年龄、淋巴结转移状况、肿瘤的大小及绝经与否差异均无统计学意义（P＞0.05）.③BRCA1 和BRCA2 在乳腺癌中的表达无相关性.结论 BRCA1和BRCA2在胶东半岛地区散发性乳腺癌组织中的表达明显低于乳腺良性病变,可作为胶东半岛地区散发性乳腺癌监测指标,但在散发性乳腺癌发生发展中的作用是独立的,不具有相关性.     

乳腺癌组织中BRCA1的蛋白表达对乳腺癌新辅助化疗疗效的影响

目的 新辅助化疗是重要的乳腺癌综合治疗手段之一.BRCA1的过表达可以使损伤的DNA 迅速修复,从而导致瘤细胞对化疗药物的耐药.文中探讨BRCA1蛋白的表达对乳腺癌新辅助化疗敏感性的影响.方法 Envision法检测接受了新辅助化疗(TEC或CEF方案)的40例患者的BRCA1的蛋白表达,对比新辅助化疗前后B超检查结果以及术前术后病理诊断结果来综合评价化疗的有效性,分析这新辅助化疗有效组与无效组中BRCA1蛋白表达差异是否存在统计学意义.结果 在20例新辅助化疗无效组中,16例的BRCA1蛋白呈高表达,20例新辅助化疗有效组中9例呈高表达.BRCA1蛋白在新辅助化疗无效组中的高表达率明显高于有效组,两者比较具有显著性差异(P＜0.05).结论 BRCA1的蛋白表达程度可以作为乳腺癌新辅助化疗敏感性的预测指标之一.     

家族性乳腺癌BRCA1蛋白失表达研究

目的探讨在家族性乳腺癌中影响易感基因（BRCA1）蛋白表达的因素。方法运用免疫组织化学SP法检测10例乳腺导管内乳头状瘤和8例遗传性乳腺癌组织中BRCAl的表达。结果在10例乳腺导管内乳头状瘤病例ee,BRCA1蛋白阳性位于细胞核,阳性表达率为100％（10／10）;8例遗传性乳腺癌组织中BRCA1蛋白阳性表达位于细胞浆或细胞核和细胞浆,阳性率为50．0％（4／8）,两者差异有统计学意义（P〈0．01）。可能由于标本数量较少,BRCAl1在伴有腋窝淋巴结转移组的失表达率与无淋巴结转移组差别无统计学意义（P〉0．05）。结论在家族性乳腺癌中,BRCA1的失表达明显高于乳腺良性肿瘤。     

16例家族性乳腺癌BRCA2基因突变的分析

目的分析16例家族性乳腺癌患者乳腺癌易感基因-2(BRCA2)突变的特点。方法以16个乳腺癌家系中16例乳腺癌患者为研究对象,30例散发性乳腺癌患者为对照组,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的片段,直接测序的方法,检测BRCA2部分序列突变。结果 16例家族性乳腺癌患者中,发现3例致病性突变,突变率为18.75%。其中2例为新发现的突变,单个碱基替换引起的编码氨基酸改变M2610I和2405 delT(stp729)导致蛋白截短;另外1例是已报道的无义突变E2924X。散发性乳腺癌患者中未发现致病性突变,二者差异有统计学意义(P=0.037)。本研究还发现已知的内含子变异IVS21-66T/C在16例家族性乳腺癌患者中的检出率达56.25%,该位点变异在散发性乳腺癌中检出率为20%,差异有统计学意义(χ2=4.699,P<0.05)。结论 BRCA2突变与家族性乳腺癌发生密切相关,而与散发性乳腺癌的发生关系不大,在具有乳腺癌家族史的高危人群中该检测突变有一定的诊断价值。     

散发性乳腺癌BRCA1蛋白失表达的研究

目的探讨在散发性乳腺癌中影响易感基因（BRCA1）蛋白表达的因素及其与临床指征的关系。方法运用免疫组织化学SP法检测10例乳腺导管内乳头状瘤和48例乳腺癌组织中BRCA1的表达。结果在10例乳腺导管内乳头状瘤病例中,BRCA1蛋白阳性位于细胞核,阳性表达率为100％（10／10）;48例乳腺癌组织中BRCA1蛋白阳性表达位于细胞浆／细胞核和细胞浆,阳性率为56．3％（27／48）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;BRCA1的失表达率在〉40岁的发病年龄组高于≤40岁的发病年龄组（P〈0．05）。结论在散发性乳腺癌中,BRCA1的失表达高于良性肿瘤,并与高发病年龄相关,BRCA1基因表型的改变为乳腺癌的预后判断提供了新依据。     

48例散发性乳腺癌BRCA1蛋白失表达参数分析

目的探讨在散发性乳腺癌中影响易感基因（BRCA1）蛋白表达的因素及其与临床指征的关系。方法运用免疫组织化学SP法检测10例乳腺导管内乳头状瘤和48例乳腺癌组织中BRCA1的表达。结果在10例乳腺导管内乳头状瘤病例中,BRCA1蛋白阳性位于细胞核,阳性表达率为100%（10/10）;48例乳腺癌组织中BRCA1蛋白阳性表达位于细胞核或细胞核和胞浆,阳性率为56.3%（27/48）,二者差异有统计学意义（P〈0.01）;BRCA1的失表达率在〉40岁的发病年龄组高于≤40岁的发病年龄组（P〈0.05）;BRCA1在伴有腋窝淋巴结转移组的失表达率高于无淋巴结转移组（P〈0.01）;而在不同的病理学类型、组织学分级、临床分期以及肿瘤大小等方面差别无统计学意义。结论在散发性乳腺癌中,BRCA1的失表达与高发病年龄、伴有腋窝淋巴结转移等因素相关,BRCA1基因表型的改变为乳腺癌的预后判断提供了新依据。     

家族性乳腺癌患者BRCA1基因序列突变分析

目的 研究山东济宁地区家族性乳腺癌(familiar breast cancer,FBC)患者BRCA1基因的突变情况.方法 选取山东济宁地区8个乳腺癌家系中各1例乳腺癌患者,10例乳腺导管内乳头状瘤病例为对照.应用PCR技术和DNA直接测序技术检测BRCA1基因外显子11的突变.结果 实验组与对照组在外显子11的序列...     

BRCA2与P53在女性散发性乳腺癌中的表达

目的：探讨BRCA2和P53蛋白表达在散发性乳腺癌中的作用。方法：收集86例乳腺癌及癌旁组织、48例乳腺增生症手术标本,采用免疫组化S-P法检测BRCA2及P53蛋白在各例中的表达情况。结果：①BRCA2表达在乳腺癌、乳腺癌旁组织、乳腺增生症中的阳性率分别为41.8%（36/86）、75.6%（65/86）和97.9%（46/48）三组间比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;②p53在乳腺癌、乳腺癌旁组织、乳腺增生症中的阳性率分别为37.2%（32/86）、16.3%（14/86）和8.3%（4/48）,三组间比较,差异有统计学意义;③乳腺癌组织中BRCA2与p53表达之间差异,无统计学意义（r=0.612,P〉0.05）。结论：BRCA2和p53蛋白异常表达在散发性乳腺癌发生发展过程中起着一定作用。     

抑癌基因BRCA1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性测定

目的:克隆人BRCA1基因的启动子,构建荧光素酶报告基因载体,并在细胞内检其活性,为其后续基因凋控研究提供依据。方法:采用PCR技术,从人正常宫颈组织细胞中扩增出BRCA1启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,测序所扩增的DNA序列,将其转染入HCT 116细胞中并检测其活性。结果:酶切及基因测序方法证实所构建质粒含有pGL3-basic全序列及BRCA1启动子上游调控序列,扩增的BRCA1启动子序列正确;双报告基因实验检测荧光素酶活力表明,p53缺失的HCT116细胞中BRCA1启动子明显增加（P<0.05）,构建的报告基因具有启动子活性。结论:克隆BRCA1启动子及成功构建人BRCA1启动子报告基因,可实现快速、经济和准确地克隆已知基因启动子分子和构建启动子载体的目的。     

BRCA1在晚期非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨DNA损伤修复基因BRCA1在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况,对于含铂类化疗的治疗疗效影响以及预后意义。方法:应用二步免疫组织化学染色法对81例晚期非小细胞肺癌组织进行BRCA1基因定性检测,回顾调查入组患者的治疗方法、治疗反应,疗效评价、疾病进展时间及生存时间。组间差异采用卡方检验、疾病进展及生存期差异采用时序检验、Kaplan-Meier生存曲线进行统计分析。结果:81晚期非小细胞肺癌组织中BRCA1表达阳性率为51.9%,化疗有效率为43.2%;其中BRCA1阴性组化疗有效率为56.4%,BRCA1阳性组化疗有效率为31.0%,BRCA1阴性组化疗有效率高于阳性组,差异有统计学意义。BRCA1阴性组与阳性组中位疾病进展时间、中位生存期及1年生存率均无统计学差异。结论:晚期NSCLC中BRCA1的表达与临床特征无明显关联,BRCA1表达阴性有助于化疗成功,1年生存率较高,但总生存无差异。BRCA1可作为预测化疗疗效的指标之一。