急性肾小管坏死时肾小管上皮细胞损伤与修复的机理

急性肾小管坏死（ＡＴＮ）在临床上十分常见，其发病率多年来居高不下，病死率仍高达５０％以上。以往研究表明，ＡＴＮ时肾脏具有强大的代偿及损伤修复能力，在一定程度的损伤后，其形态及功能可完全恢复正常。因此，近年来，肾小管上皮细胞损伤与修复的细胞与分子生物学机理成为有关ＡＴＮ研究的特点，人们期望能通过对肾小管上皮细胞生物学行为的深入认识，为寻找对ＡＴＮ行之有效的治疗方法提供新的思路。一、ＡＴＮ时肾小管上皮细胞损伤机理临床上ＡＴＮ最常见的病因为急性缺血或中毒性肾损伤，主要累及近端肾小管上皮细胞。损伤后的细…     

不同时期失面神经支配肌细胞直径与酶含量变化的研究

目的:观察不同时期大鼠眼轮匝肌失神经支配后肌细胞直径与酶含量的变化,为临床面神经损伤最佳手术修复时机提供理论依据.方法:建立面神经损伤大鼠模型,应用计算机图像分析仪及比色分析技术,分别观察面神经离断术后第1、3天,第1、2、4、6、8周眼轮匝肌肌细胞直径和Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量的变化.结果:面神经离断术后眼轮匝肌肌细胞直径从正常值降到只占正常值的20%;Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶的灰度值亦分别从术后1天的(1.24±0.17)、(8.55±0.36)增加到术后8周的(1.42±0.10)、(9.74±0.33),差异均有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠面神经离断术后眼轮匝肌肌细胞直径、Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量下降,并且随失神经支配时间延长呈进行性下降,提示面神经损伤修复手术应早期进行,有利于面神经功能恢复.     

肾损伤分子-1：早期肾小管损伤与修复的生物学标记

急、慢性肾脏病是临床常见病,其长期预后多数取决于肾小管间质损伤的严重程度[1,2]。急性肾小管损伤可以引起急性肾衰竭及一系列临床综合征,导致死亡率和住院率升高,并给患者家庭及社会带来沉重的经济负担。     

骨髓干细胞参与小鼠急性肾小管坏死修复的实验研究

【摘要】 目的 观察在生理和病理情况下,骨髓来源的干细胞(BMSC)能否分化成肾小管上皮细胞。 方法 绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓细胞。同种无荧光标记的C57BL/6小鼠100只分为正常对照组、全身照射组、缺血再灌注组、骨髓移植组、骨髓移植+缺血再灌注组。受体鼠的骨髓重建经血液常规检查和流式细胞仪检测确认,并采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察绿色荧光标记的BMSC在受体鼠肾脏的分布及数量。 结果 全身致死剂量γ射线照射未造成小鼠肾脏组织结构和生理功能的明显改变。骨髓移植后第56、84天的受体鼠肾小管中有少量GFP阳性细胞的存在[(78.75±5.99)%、(79.58±4.60)%],激光共聚焦显微镜进一步证实这些细胞位于肾小管,并表达肾小管上皮细胞特异性的功能蛋白megalin。 结论 在生理和病理情况下,骨髓干细胞均可以向肾小管上皮细胞转分化,参与肾小管上皮细胞的更新,并且在急性肾小管坏死的病理条件下,骨髓干细胞的肾向转化率与肾脏受损程度有关。     

胚胎后肾间充质细胞移植对急性肾小管坏死肾功能的修复作用

目的：将体外培养的胚胎后肾间充质细胞,通过尾静脉注射移植给急性肾小管坏死的模型大鼠,观察是否改善对肾功能起修复作用。方法：（1）体外培养、扩增及生物学鉴定大鼠胚胎后肾间充质细胞株（RIMM-18）;（2）通过皮下注射总量为900mg/kg庆大霉素,建立急性肾小管坏死的大鼠模型;（3）除空白组外,将造模大鼠随机分为3组：①移植组：造模后通过尾静脉注射移植培养的RIMM-18细胞1～6×107/ml;②培基组：造模后通过尾静脉注射等量的无血清培养基;③急性肾小管坏死组（ATN组）：皮下注射总量为900mg/kg的庆大霉素×3d。（4）留取标本：分别于成模后1d、4d、1周、2周及4周杀鼠,留取尿和血标本;（5）生化指标检测：BUN、Scr、尿蛋白、尿肌酐、β2-MG、NAG和RBP等。结果：（1）RIMM-18细胞体外生长良好,保持间充质细胞特性。（2）皮下注射总量900mg/kg的庆大霉素3d成模。（3）移植组大鼠毛发有光泽、脱毛少,体重及尿量的恢复较快,死亡率下降。（4）各组大鼠生化指标比较：移植组尿蛋白于4d时达峰值,2周时下降接近正常;而培基组和ATN组于1周达峰值,持续至4周降至正常。移植组、培基组和ATN组于1周、2周时其值分别为（1.37±0.10）mg/L、（1.97±0.21）mg/L、（2.05±0.19）mg/L,（0.56±0.07）mg/L、（1.59±0.07）mg/L、（1.66±0.11）mg/L,移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。BUN、Scr、NAG、RBP及β2-MG变化规律类似。（5）肾脏病理：移植组4d时肾小管病变最显著,培基组和ATN组则于1周时肾小管病变最明显,恢复较移植组慢。肾小管Paller氏评分显示于1周、2周、4周时移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：胚胎后肾间充质细胞通过尾静脉移植能改善ATN的肾功能。     

肾小管上皮细胞损伤的修复与再生

肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cell，RTEC）是兼有免疫调节作用且生物学功能十分活跃的细胞，是肾小管间质的主要细胞。当它受到缺氧、中毒、细胞或炎性反应因子、血浆蛋白或葡萄糖等损伤因素作用后，RTEC活化、增生，小管扩张，管型形成，最终导致小管萎缩、凋亡和（或）纤维化。RTEC损伤不仅是引起急性肾衰竭的直接原因，     

RASAL3通过上调FXYD6表达促进肝内胆管细胞癌细胞增殖的作用机制研究

目的探讨Ras蛋白激活类似物3(RASAL3)在肝内胆管癌(iCCA)中的表达并深入研究其促进iCCA进展的作用机制。方法收集185例iCCA患者肿瘤与癌旁组织标本, 应用免疫组化、RT-qPCR和Western blot法检测RASAL3的表达, 并同时检测人胆管癌细胞株和人胆管上皮细胞中RASAL3和FXYD6的mRNA和蛋白表达情况, CCK-8法检测细胞增殖及Na+-K+-ATP酶活性。结果 RASAL3在胆管癌组织和细胞株中高表达;生存分析结果显示RASAL3高表达与胆管癌的不良预后相关(P<0.05)。敲降RASAL3抑制胆管癌细胞的增殖;沉默RASAL3降低FXYD6表达水平, 抑制Na+-K+-ATP酶活性。结论 iCCA中RASAL3表达水平显著上调, RASAL3可通过激活FXYD6, 上调Na+-K+-ATP酶活性促进iCCA的发展。     

丹参酮ⅡA对兔纤维环细胞能量代谢的保护作用

[目的]考察丹参酮ⅡA(TSⅡA)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔纤维环细胞能量代谢障碍的保护作用.[方法]藻酸盐串珠立体培养兔纤维环细胞,将细胞分为7组,在培养过程中加入不同浓度的药物:A组为空白对照不加入药物,B组加入4 μg/ml TSⅡA,C组加入10ng/ml IL-1β,D～G组在给予10 ng/mlIL-1β同时分别加入0.5、1、2和4 μg/ml TSⅡA.于培养3 d后行Na+-K+-ATP酶活性检测、,琥珀酸脱氢酶活性检测、MTT法细胞增殖情况检测以及细胞凋亡的流式细胞仪检测.[结果]G组Na+-K+-ATP酶活性(3.23±0.28U/mgprot)较C组(1.118±0.15U/mgprot)明显增高(P<0.01),与A组接近(3.57±0.15 U/mgprot)(P>0.05).G组琥珀酸脱氢酶活性(12.48±0.97U/mgprot)较c组(3.03±0.60 U/mgprot)明显增高(P<0.01),与A组接近(14.24±1.56 U/mgprot)(P>0.05).G组MTT试验吸光度(0.77±0.06)较C组(0.31±0.07)明显增高(P＜0.01),随着TSⅡA浓度的升高,D～G组吸光度随着TsIIA上升而上升.G组细胞死亡细胞比例和凋亡细胞比例分别为21.08±1.46%和8.99±0.33%,均显著低c组(43.11±2.7,P<0.01和11.71±0.32,P<0.01).[结论]TSIIA能够减轻IL-1β对纤维环细胞能量代谢的抑制作用,从而改善纤维环细胞的增殖、死亡及凋亡.     

骨髓间充质干细胞对急性肾小管坏死修复作用的研究进展

一、骨髓间充质干细胞的生物学特性 骨髓内干细胞可分为造血干细胞和间充质干细胞。间充质干细胞（mesen—chymal stem cells,MSC）在维持造血干细胞的存活、增殖、分化具有重要的作用,它占骨髓有核细胞的0．001％～0．01％。MSC在体外培养时贴壁生长,其形态与成纤维细胞相似,呈克隆性增生。20％的MSC为G0期细胞,具有强大的增殖能力。目前发现,MSC为CD34＋细胞,它可表达SH2、SH3、     

急性肾功能衰竭肾小管细胞和分子的发病机制研究现状

急性肾衰（ＡＲＦ）的发病机制十分复杂，是一直未解决的课题。本文重点综述急性肾衰肾小管发病机制的研究进展。如钙超载、磷脂酶Ａ２激活，氧自由基产生、肾小管上皮细胞脱落与粘连，生长因子与肾小管上皮细胞修复。ＡＲＦ的分子治疗在不远的将来可能成为现实     

中国实验用小型猪肾小管的发育及各节段标志物的表达

目的:明确解剖和生理上与人非常接近的中国实验用小型猪肾脏发育过程中肾小管的形态学变化和肾小管各节段的特异性标志物。方法:采用高碘酸-希夫(PAS)染色和免疫荧光染色技术,系统观察中国实验用小型猪妊娠28～112d(E28d～E112d)和出生后1d、7d、14d、21d(P1d～21d),共17个不同时间点猪肾小管的发育及肾小管特异性标志物雪莲花凝集素(LTL)、水通道蛋白1(AQP1)、钙结合蛋白(calbindin)-D28k在肾小管不同节段的表达。结果:(1)中国实验用小型猪E28d可见后肾间充质和输尿管芽,即后肾已经开始发育;但这时还没有肾小管。E35d可见不同节段的肾小管,即肾小管已开始发育。从E35d～P14d(E112d仔猪出生),肾皮质均有生肾区存在,即不断有新的肾单位发生;P21d生肾区消失,即不再有新的肾单位产生。(2)①LTL在E28d表达在输尿管芽,E35d开始在近端小管表达,以刷状缘表达最为明显;表达由弱到强,由点状到线状。②AQP1在E28d未见表达,E35d开始表达;AQP1表达在近端小管和髓袢的降支细段,主要表达在细胞膜,尤其在管腔侧的表达更为明显。③Calbindin-D28k在E28d表达在输尿管芽,E35d开始表达在远端小管和集合管;Calbindin-D28k主要表达在细胞质,随着肾小管发育,表达逐渐增强。(3)发现集合管来源于输尿管芽,发源于输尿管芽的集合管从被膜下的生肾区一直延伸到肾髓质。结论:中国实验用小型猪妊娠35d可以见到不同节段肾小管。LTL、AQP1、Calbindin-D28k可以分别作为猪近端小管、髓袢、远端小管和集合管的标志物。     

丹参对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损害的保护作用研究

目的:探讨丹参对马兜铃酸(aristolochic acid,AA)所致肾小管上皮细胞损害的保护作用.方法:以95%DMEM培养液加5%小牛血清培养肾小管上皮细胞株(NRK-52E),加入不同浓度的丹参和马兜铃酸,采用MTT法来观察肾小管上皮细胞存活以及生长的状况;用碘化丙啶(PI)染色方法确认细胞凋亡的发生.结果:马兜铃酸浓度超过10 mg/ml时肾小管上皮细胞的活力显著抑制(P＜0.05).以丹参3.0、15、30、60 mg/ml处理后的肾小管上皮细胞再加入AA(10 mg/ml浓度),则肾小管上皮细胞的活力明显增加,且随着丹参浓度的增加其作用愈趋明显(P＜0.01),丹参明显抑制AA所造成肾小管上皮细胞的凋亡(P＜0.01).结论:丹参(3.0、15、30、60 mg/ml)通过减少马兜铃酸致肾小管上皮细胞的凋亡,可明显保护肾小管上皮细胞,且其作用随着丹参浓度的增加而加强.     

肾小管上皮间充质转化细胞模型中WT1和Pax2重新表达的研究

目的:探讨肾小管上皮间充质转化(EMT)细胞模型中胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达及其规律,并研究上调表达外源性WT1对肾小管上皮细胞株(NRK52E)的影响。方法:采用10 ng/ml IL-1α刺激体外培养的NRK52E细胞,建立EMT细胞模型。采用脂质体转染技术,将pRc/CMV-D-WT1质粒瞬时转染NEK52E细胞。分别提取EMT细胞模型和质粒转染组不同时间点细胞的RNA和蛋白质,采用RT-PCR和Western blot检测NEK52E细胞WT1、Pax2、上皮细胞标志E-cadherin和间充质标志α-SMA的表达,研究基因表达的时效性变化规律,并观察细胞的形态。结果:成功建立EMT细胞模型,该模型中E-cadherin的表达显著减少,α-SMA的表达显著增多,细胞发生明显的成纤维化样改变。在EMT细胞模型中,出生后关闭的WT1和Pax2获得重新表达,且Pax2的表达早于α-SMA和WT1。在NEK52E细胞中上调表达WT1,细胞表达α-SMA,不表达Pax2,同时E-cadherin的表达显著减少,细胞出现成纤维化样改变。结论:Pax2和WT1基因是EMT中的关键基因,在EMT发生时呈序列启动,Pax2在EMT中处于WT1上游。胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达可能是EMT的重要机制。     

FSGS患者尿蛋白对肾小管上皮细胞活力及转分化的影响

目的：探讨局灶性-节段性肾小球硬化症（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）患者尿蛋白对肾小管上皮细胞（TECs）活力及转分化的影响。方法：用硫酸铵沉淀法提取FSGS患者尿液中的总蛋白成分,应用不同浓度尿蛋白处理体外培养人近端肾小管上皮细胞,然后应用全自动生化分析仪检测不同浓度尿蛋白刺激后HK-2细胞LDH值并计算其释放率、免疫细胞化学（ICC）法检测不同浓度尿蛋白刺激后HK-2细胞E-钙黏蛋白（e—cadherin）的表达水平和Western blotting法检测HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白（Q—SMA）蛋白表达水平。结果：所提取的尿蛋白主要成分为白蛋白、转铁蛋白和IgG等,分别占59．3％、15．3％和13．8％;肾小管上皮细胞LDH释放率和α—SMA蛋白的表达水平随尿蛋白浓度的升高而升高;E—cadherin的表达水平随着尿蛋白浓度的升高而下降。结论：FSGS尿蛋白可通过诱导肾小管上皮细胞损伤和转分化而促进肾小管-间质纤维化。     

慢性肾衰竭大鼠血清对P-gp和MRP2在肾小管上皮细胞中表达的影响

目的：通过慢性肾衰竭大鼠血清对肾小管上皮细胞多药耐药蛋白表达影响的研究,探讨慢性肾衰竭肾小管上皮细胞功能改变的部分分子机制。方法：体外培养小鼠原代肾小管上皮细胞,分别用含1.0%,2.5%,5.0%的5/6肾切除的慢性肾衰竭大鼠血清和正常对照大鼠血清的培养液培养,72h后收集细胞,提取膜蛋白。用Western-blotting检测多药耐药蛋白（P-glycoprotein,P-gp）、多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance-associated protein 2,MRP2）和内参5′-nucleotidase的蛋白表达。用Bio-Rad Quantity One凝胶分析系统对条带进行半定量分析。结果：（1）血清浓度相同的情况下,慢性肾衰竭大鼠血清刺激可较对照血清增强肾小管上皮细胞P-gp的表达,在血清为1.0%时,有统计学意义;而各个浓度的肾衰竭血清刺激细胞MRP2的表达均较正常对照血清显著增高,具有统计学意义。（2）无论对照血清还是慢性肾衰竭血清,随着血清浓度的降低,两种耐药蛋白的表达均逐渐增高。P-gp表达在1.0%血清干预的细胞和5.0%、2.5%血清之间,有统计学意义;而MRP2的表达在各个浓度之间均有统计学意义。结论：血清成分或浓度可改变肾小管上皮细胞P-gp和MRP2的表达,其机制和作用有待进一步研究。     

Breast metastases from a Renal Cell Carcinoma. A case report and review of the literature

INTRODUCTION

Metastases to the breast from extra-mammary tumors are uncommon and few sporadic cases are reported in the international literature. An accurate differential diagnosis of secondary cancer is mandatory because both prognosis and treatment differ with respect to primary breast tumors.

PRESENTATION OF CASE

We present the case of a 70-year-old woman with an isolated metastasis to the breast occuring 9 years after undergoing a nephrectomy for Renal Cell Carcinoma (RCC).Clinical examination revealed a palpable and mobile mass in the right breast with an enlarged ipsilateral axillary lymph node. Mammographic findings showed a dense, well circumscribed solid mass and the breast ultrasonography findings were those of a hypoechoic homogeneous solid nodule with no posterior attenuation but with prominent peripheral vascularity. A tru-cut biopsy was conclusive for a metastatic deposit by RCC. A whole-body CT scan showed no evidence of further recurrences. The patient underwent metastasectomy and exeresis of the papable lymphnode.

DISCUSSION

In patients with former surgery for RCC, a diagnosis based on a preoperative biopsy allows to indicate the proper surgical treatment: in facts, as compared to primary breast tumors treatment, the rationale to pursue wide surgical margins is pointless in cases of metastases and, similarly, the biopsy of the sentinel lymphnode is void of sense due to the lack of its physiopathological prerequisite.

CONCLUSION

We suggest to consider a micro-histological biopsy of any new breast lesion appearing in a patient with a history of treatment for RCC. Prompt diagnosis is necessary to choose the right treatment.     

IgA肾病肾活检病理与中医辨证关系的研究

目的:探讨IgA肾病肾活检病理与中医辨证的关系.方法:选取资料完整,临床诊断为原发性肾小球疾病,病理诊断为IgA肾病患者病例,参照1996年中国中医药学会内科学会肾病专业委员会通过的慢性肾炎(前期)中医辨证标准对患者中医症状进行半定量记分;参照 Memphis分级记分方法对肾活检病理资料进行记分;并按"新三因论"假说分别把中医症状分数和肾活检病理分数各分为三类,进行方差分析.结果:中医外感症状值、内郁症状值与病理炎症介质浸润值有正相关性(P<0.01);中医内郁症状值与病理组织增生值有正相关性(P<0.01);中医正虚症状值与病理组织硬化值有正相关性(P<0.01).结论:(1)肾组织内炎症介质浸润的病理改变表现在中医症状上以外邪症状、内郁症状为主;(2)肾组织内组织增生的病理改变表现在中医症状上以内郁症状为主;(3)肾组织内组织硬化的病理改变表现在中医症状上以正虚症状为主.     

烤瓷贴面与全瓷冠在前牙美容修复中的应用比较

目的 探究前牙美容修复中分别采用烤瓷贴面和全瓷冠的效果。方法 选取2019年1月-2021年1月 在我院进行前牙美容修复的50例患者作为研究对象，使用随机数字表法将其分为对照组和观察组，每组 25例。对照组采用全瓷冠修复修复，观察组采用烤瓷贴面修复，比较两组修复优良率、美观度、 舒适度以及不同随访时间段的疼痛程度。结果 观察组修复优良率高于对照组，差异有统计学 意义（P＜0.05）；观察组修复后红色美学评分和白色美学评分均高于对照组，差异有统计学意义 （P＜0.05）；观察组修复后舒适度评分高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组修复 3、6和12个月后的视觉疼痛模拟评分低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 在前牙美容修复 过程中，与全瓷冠修复相比，烤瓷贴面修复可以有效提高整体的修复优良率，提升患者前牙的美观度和舒 适度，减轻其疼痛程度，值得临床应用。