超排卵对小鼠着床期白血病抑制因子的影响及中药的调节作用

目的 检测超排卵小鼠着床期子宫内膜白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达水平,探讨补肾安胎方对超排卵小鼠着床期子宫内膜容受性的影响.方法 将120只小鼠随机分为正常组、模型组、中药组.模型组和中药组注射PMSG和HCG造成小鼠超排模型后合笼,正常组注射等体积生理盐水后合笼.中药组给予补肾安胎方,正常组和模型组灌服等量蒸馏水.于妊娠第4天(Pregnancy day 4,Pd4)、第五天(Pd5)留取妊娠子宫;采用免疫组化技术检测LIF蛋白表达,采用RT-PCR技术检测LIF mRNA表达.结果 免疫组化SP法检测结果显示3组小鼠LIF蛋白表达空间分布无明显差异.RT-PCR技术检测结果显示正常组Pd4 LIF表达呈强阳性,Pd5表达下降,与模型组同期比较差异有统计学意义(P＜0.05),中药治疗后与模型组同期比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾安胎方能协调由于控制性超排卵所致的子宫内膜LIF表达水平,从而提高小鼠着床期子宫内膜容受性.     

不同时间注射PMSG和HCG对小鼠超排卵效果的影响

目的探讨不同时间注射孕马血清激素（PMSG）和人绒毛膜促性腺激素（HCG）对小鼠超排卵效果的影响。方法选用40只6周龄F1昆明小鼠,随机分成4组,分别在同一天的11：00,13：00,15：00,17：00注射PMSG5IU,48h后注射HCG5IU,然后与公鼠合笼;次日晨检查阴栓,阳性者于当日10：00处死取卵,计数受精卵的数量。结果11：00,13：00,15：00和17：00组平均每只获取可用受精卵9．8枚、24．8枚、11．5枚、4．7枚。结论在13：00注射PMSG,48h后注射HCG对小鼠超排效果最好。     

补肾安胎方及其拆方对控制性超排卵小鼠胚胎着床干预的比较

目的观察补肾安胎方及其补肾、活血组分对控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)小鼠胚泡围着床期类肝素结合表皮生长因子(heparin-binding epidermal growth factorlike growthfactor,HB-EGF)及其受体的影响,探讨补肾安胎方及其拆方对着床环节的作用机制。方法将雌性小鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)、补肾安胎组(BH)、补肾组(BS)和活血组(HX)。观察妊娠第1天阴栓率、妊娠第6天妊娠率和孕鼠着床位点数;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定妊娠第5天、第6天子宫内膜HB-EGF mRNA的表达,采用免疫组织化学法测定同期子宫内膜表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白的表达。结果模型组阴栓率、妊娠率较正常组显著降低(P0.01),着床位点数显著升高(P0.01);中药各组治疗后,阴栓率、妊娠率均较模型组显著升高(P0.05,P0.01),但着床位点数均显著降低(P0.05,P0.01),以补肾安胎组作用最为明显;活血组阴栓率高于补肾组(P0.05),着床位点数较补肾组降低(P0.01),妊娠率两组比较,差异无统计学意义。正常组HB-EGF mRNA表达最高,模型组显著低于正常组(P0.01),各中药组均显著高于模型组(P0.01);各中药组HB-EGF mRNA表达比较,补肾安胎组明显高于活血组和补肾组(P0.05),活血组高于补肾组(P0.05);妊娠第6天,HB-EGF mRNA表达量较妊娠第5天降低。EGFR蛋白在围着床期子宫内膜腺体和基质细胞胞质中表达,各组小鼠EGFR蛋白表达空间分布差异无统计学意义。正常组EGFR蛋白表达丰富;模型组表达较正常组显著减少(P0.01),部分缺失;中药各组EGFR表达量均高于模型组(P0.01);其中补肾活血组高于活血组和补肾组(P0.05,P0.01),活血组高于补肾组(P0.05,P0.01)。结论补肾安胎方及补肾、活血组分均能够改善控制性超排卵小鼠的着床率和妊娠率,促进胚泡生长和HB-EGF及其受体的表达,其中以补肾安胎全方作用最佳,补肾、活血组分在改善胚泡着床过程中具有协同作用。     

超排卵治疗对机体免疫和生殖内分泌的影响

目的 探讨促性腺激素对生殖内分泌-免疫系统的影响。方法 测定52例不孕症患者超排卵治疗前后卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、抗卵巢抗体（AOA）、抗磷脂抗体（APA）、抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（ds-DNA）的变化。结果 治疗后FSH,LH,E2较治疗前无显著性变化（P>0.05）,治疗后8例患者出现AOA,2例出现ds-DNA。结论 超排卵不影响血清FSH,LH,E2水平,可能对机体的免疫功能有所影响,但无明显临床表现。     

中医药改善超排卵周期卵泡发育的研究思路

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET)及其衍生技术是人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的主体,是临床治疗不孕不育症的有效手段.决定IVF-ET成功率的主要因素是胚胎质量和子宫内膜容受性.胚胎质量取决于优质的卵子和精子,而IVF-ET中卵子的获得常需使用控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)方案.COH是指以药物的手段在可控制的范围内诱发多卵泡的发育和成熟,以便获得更多可供移植的胚胎从而提高受孕率.     

调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵作用的影响

目的:观察调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵的促进作用。方法:采用9 d龄雌性大鼠注射丙酸睾丸酮建立雄激素致不孕大鼠模型,随机分为模型组及中药组,并另设正常对照组;自81 d龄起,中药组灌胃调经助孕方,模型组与正常组灌胃等量蒸馏水,连续30 d。采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌激素(E2)、脱氢表雄酮(DHA)。结果:模型组大鼠表现为动情间期延长,且丧失正常性周期;中药组动情周期出现周期性变化,排卵恢复率为66.7%,两组差异有统计学意义(P0.05)。模型组大鼠FSH、LH和E2含量明显低于正常组(P0.05),DHA、T含量明显高于正常组(P0.05);与模型组比较,中药组大鼠FSH、LH和E2含量明显升高(P0.05),DHA、T含量明显降低(P0.05)。结论:调经助孕方能够明显提高雄激素致不孕大鼠的排卵率,改善大鼠生殖内分泌轴功能。     

超排卵全程应用225U促黄体生成素对取卵及胚胎移植日血清血管内皮生长因子水平的影响

【目的】探讨促黄体生成素在控制性超排卵中降低血清血管内皮生长因子水平的有效性。【方法】20例在超排卵全程添加225 U促黄体生成素(实验组)同50例未添加患者(对照组)比较超排卵启动日血清血管内皮生长因子水平,人绒毛膜激素注射日、取卵日及胚胎移植日血清血管内皮生长因子较启动日的升高水平。【结果】试验组及对照组启动日血清血管内皮生长因子水平及人绒毛膜激素注射日血清血管内皮生长因子较启动日的升高水平差异不具有统计学意义;试验组取卵日(P=0.017)及胚胎移植日血清血管内皮生长因子较启动日的升高水平(P=0.009)同对照组相比,差异具有统计学意义。【结论】225 U促黄体生成素在超排卵全程应用可有效降低取卵及胚胎移植日血清血管内皮生长因子水平。     

电针对排卵障碍不孕大鼠卵巢MMP-9表达影响的实验研究

目的:评估电针对排卵障碍不孕大鼠模型的促排卵作用.方法:选用SD雌性大鼠幼鼠于出生第9日龄注射丙酸睾丸酮制作大鼠模型,采用原位杂交等方法对电针治疗后的大鼠卵巢局部基质金属蛋白酶mRNA MMP-9 mRNA的表达进行观察.结果:电针能明显增加大鼠卵巢、子宫重量有利于卵泡的发育和排卵,电针能明显增加卵巢各级卵泡总数,明显...     

瘦素在超排卵周期的变化及对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的 :探讨超排卵对瘦素水平的影响以及瘦素水平对体外受精 -胚胎移植 (IVF- ET)结局的影响。方法 :应用酶联免疫吸附法和放射免疫法分别测定 39例 IVF- ET患者在注 FSH、HCG前和取卵前的血清瘦素及排卵前卵泡的卵泡液瘦素、E2 水平。结果 :血清瘦素水平在注 HCG前 (2 6 .1± 2 .3)μg/ L明显高于注 FSH前 (9.3± 1.0 )μg/ L和取卵前 (15 .8± 2 .3) μg/ L,P均 <0 .0 0 1;卵泡液 (18.5± 2 .2 ) μg/ L和同期血清 (15 .8± 2 .3) μg/ L的瘦素水平比较 ,经 t检验无显著性差异 ;妊娠组的卵泡液和同期血清瘦素水平 (11.7± 1.8) μg/ L和 (8.7± 1.5 ) μg/ L明显低于非妊娠组的卵泡液和同期血清瘦素水平 (2 0 .8± 2 .7) μg/ L和 (18.3± 2 .9) μg/ L,P<0 .0 5。结论 :超排卵后瘦素浓度过高可能不利于卵泡的生长和发育。     

补肾养血中药对无排卵性不孕的治疗作用及机理探讨

【目的】观察补肾养血中药对无排卵性不孕的治疗作用并探讨其机理。【方法】对 2 76例经血液性腺激素检测证实为垂体功能低下的无排卵性不孕患者分成 3组进行促排卵治疗。中药组以真武汤合生脉散加减 ,在月经周期第 3天开始服用中药 ,每天 1剂 ,直至排卵后停服 ;克罗米酚 (CC) +绒毛膜激素 (HCG)组在月经周期第 5天开始口服CC 5 0mg/d ,并在卵泡成熟日加用HCG 10 0 0 0U肌肉注射 ;人绝经后促性腺激素 (HMG) +HCG组则在月经周期第 8天开始肌注HMG 2 5U/d ,并在卵泡成熟日加用HCG10 0 0 0U肌肉注射。嘱患者连续 3晚同房。从月经周期第 10天开始 ,用B型超声波影象监测排卵情况 ,隔天 1次 ,至卵泡成熟 (1 8cm× 1 8cm) ,并以早孕试纸检测是否排卵妊娠。【结果】中药组共观察了 16 7个促排卵周期 ,其中排卵周期 93个 ,不排卵周期 74个 ,排卵率为 5 5 6 8% ;CC +HCG组观察了促排卵周期 2 30个 ,其中排卵周期 182个 ,不排卵周期 4 8个 ,排卵率为 79 13% ;HMG +HCG组观察了促排卵周期 134个 ,其中排卵周期 88个 ,不排卵周期 4 6个 ,排卵率为 6 5 6 7%。经多个样本率的 χ2 检验 ,显示中药组排卵率均低于CC +HCG组和HMG +HCG组 (χ2 =9 345 ,P <0 0 1)。但中药组的妊娠周期有 5 4个 ,未妊娠周期 113个 ,妊娠率     

多囊卵巢综合征患者在控制性超排卵中的内分泌变化

目的:探讨抑制素B(Inhibin B)和胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)与多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定20例PCOS妇女和10例输卵管性因素不孕妇女控制性超排卵(COH)用药前基础血清,用药过程中(注射HCG前)血清和取卵日卵泡液(FF)中的Inhibin B和IGF-Ⅱ水平,同时采用放射免疫分析法(RIA)测定其中其他性激素水平。结果:用药后PCOS组血清Inhibin B值和IGF-Ⅱ值高于对照组(P>0.05);PCOS组卵泡液中Inhibin B和IGF-Ⅱ显著高于对照组(P<0.01);PCOS组卵泡液中IGF-Ⅱ与Inhibin B呈显著正相关(r=0.56,P<0.01)。结论:Inhibin B与IGF-Ⅱ作为重要的卵巢内局部自-旁分泌调节因子,可能参与了PCOS的发病过程。     

超促排卵技术应用中的伦理问题

通过对超促排卵这一技术实施过程中的机理、时间、风险、费用、疗效评价等问题进行伦理学分析,提出了如何运用伦理学原则解决这些问题的措施：尊重患者的知情权;加强技术研究,寻求最优化的治疗方案;制订更细致的具有可操作性的生殖伦理细则;在医学实践中增强伦理意识。     

卵巢过度刺激综合征大鼠模型建立

为建立卵巢过度刺激综合征大鼠模型 ,将 2 2日龄大鼠 1 8只随机分成卵巢过度刺激组、超排卵组和生理盐水对照组 ,每组 6只。按照改良的 Ujioka方法 ,卵巢过度刺激组从第2 2日龄起皮下注射 PMSG1 0 IU连续 4d,第 2 6日龄注射 HCG1 0 0 IU;超排卵组从第 2 4日龄皮下注射 PMSG 1 0 IU,第 2 6日龄注射 HCG 1 0 IU,其余时间同上注射生理盐水 ;生理盐水对照组经皮下注射生理盐水 0 .1 ml连续 5d即从第 2 2～ 2 6日龄。在 HCG注射 72h后 ,尾静脉注射 1 % Evans blue( EB) 0 .1 ml以评价腹腔毛细血管通透性。EB注射 3 0 min后 ,观察卵巢重量、腹腔 EB含量及有无腹水出现。结果表明 :卵巢过度刺激组卵巢重量 ( 0 .3 53± 0 .0 2 2 8g)显著高于超排卵组和对照组卵巢重量 ( 0 .1 3 5± 0 .0 2 8g,0 .0 57± 0 .0 1 0 ;分别 P<0 .0 0 1 ) ;卵巢过度刺激组腹腔 EB含量 ( 2 .3 3± 1 .0 6μg)显著高于超排卵组和对照组卵巢重量 ( 0 .79± 0 .1 8μg,0 .68± 0 .1 9μg;分别 P<0 .0 0 1 )。卵巢过度刺激组出现腹水 ,而超排卵组和生理盐水对照组无腹水出现。这提示 :卵巢过度刺激综合征大鼠模型建立是成功的 ,该模型为系统性探讨卵巢过度刺激综合征的确切发病机理奠定了一定的基础。     

体外受精-胚胎移植过程中影响卵巢反应性的多因素分析

目的:综合分析体外受精/卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗过程中,影响卵巢对控制性超促排卵(COH)反应性的相关因素。方法:收集接受IVF/ICSI-ET治疗的741名不孕患者的资料,对所得资料进行回顾性统计学分析。结果:单因素分析显示影响是否发生卵巢反应低下的因素有患者年龄、月经周期、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)水平、bFSH/bLH值、窦卵泡数、盆腔手术史。Logistic多因素回归分析显示,年龄、bFSH、bFSH/bLH值与卵巢反应性呈负相关,窦卵泡数与卵巢反应性呈正相关。这些因素与卵巢反应不良的相关程度依次为窦卵泡数、bFSH/bLH值、患者年龄、bFSH。结论:年龄、bFSH水平、窦卵泡数、bF-SH/bLH值可用于预测卵巢的反应性,其中窦卵泡数为最敏感的指标。     

台盼兰染色小鼠胚泡着床点的观察研究

本实验探讨用硫堇和台盼兰染料对妊娠４～５ｄ小鼠进行活体染色以显示胚泡着床位点的可能性。研究结果：１台盼兰可用作胚泡着床点的染色反应,具体方法是：尾静脉注射０５％台盼兰０３ｍｌ,１０ｍｉｎ后观察,而硫堇则无效;２着床点数目在两侧子宫角内的分布有显著差别,左右子宫角内分别为６４０±１６４和４８０±２４０个;３着床点的间距为２２５±０８７ｍｍ。     

中药益气血方对超促排卵小鼠卵巢生长分化因子表达的影响

【目的】研究中药益气血方对超促排卵小鼠卵巢生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)与GDF-9B表达的影响。【方法】选用昆明种小鼠接受促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)与孕马血清(PMSG)超促排卵,中药组予以益气血方(经后增殖颗粒)(剂量为1.5 mg/kg)灌胃,对照组予以生理盐水灌胃。注射绒毛膜促性腺激素(hCG)后取卵巢组织,采用免疫组织化学方法检测GDF-9与GDF-9B的表达与半定量分析,采用实时荧光定量PCR方法检测GDF-9、GDF-9B mRNA的含量。【结果】卵母细胞与颗粒细胞中检测到GDF-9的表达,GDF-9B未表达于卵母细胞,而在颗粒细胞中高表达。半定量分析结果显示中药组卵巢组织中GDF-9与GDF-9B蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05),实时荧光定量PCR结果显示中药组GDF-9、GDF-9B mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。【结论】中药益气血方可促进超促排卵小鼠卵巢GDF-9与GDF-9B的表达,可能通过此机制促进卵母细胞发育潜能,从而促进胚胎种植。     

护理干预对卵巢过度刺激综合征康复的影响

目的通过多方位观察及护理，避免了卵巢过度刺激综合征（OHSS）危象的发生。方法对OHSS患者细致的观察，精心护理治疗和并发症的预防及处理。结果58例患者均顺利康复。结论通过有效的治疗和护理干预，提高了体外受精．胚胎移植的成功率，改善了患者的生活质量。     

Pregnancy Outcomes of In Vitro Fertilization with or without Ovarian Hyperstimulation Syndrome: A Retrospective Cohort Study in Chinese Patients

Background:

The effect of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) on pregnancy outcomes of in vitro fertilization (IVF) patients is still ambiguous. This study aimed to analyze pregnancy outcomes of IVF with or without OHSS in Chinese patients.

Methods:

A retrospective cohort study was undertaken to compare pregnancy outcomes between 190 women with OHSS and 197 women without OHSS. We examined the rates of clinical pregnancy, multiple pregnancies, miscarriage, live birth, preterm delivery, preterm birth before 34 weeks’ gestation, cesarean delivery, low birth weight (LBW), and small-for-gestational age (SGA) between the two groups. Odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (CIs) of measure of clinical pregnancy were also analyzed.

Results:

The clinical pregnancy rate of OHSS patients was significantly higher than that of non-OHSS patients (91.8% vs. 43.5%, P < 0.001). After controlling for drug protocol and causes of infertility, the adjusted ORs of moderate OHSS and severe/critical OHSS for clinical pregnancy were 4.65 (95% CI, 1.86–11.61) and 5.83 (95% CI, 3.45–9.86), respectively. There were no significant differences in rates of multiple pregnancy (4.0% vs. 3.7%) and miscarriage (16.1% vs. 17.5%) between the two groups. With regard to ongoing clinical pregnancy, we also found no significant differences in the rates of live birth (82.1% vs. 78.8%), preterm delivery (20.9% vs. 17.5%), preterm birth before 34 weeks’ gestation (8.6% vs. 7.9%), cesarean delivery (84.9% vs. 66.3%), LBW (30.2% vs. 23.5%), and SGA (21.9% vs. 17.6%) between the two groups.

Conclusion:

OHSS, which occurs in the luteal phase or early pregnancy in IVF patients and represents abnormal transient hemodynamics, does not exert any obviously adverse effect on the subsequent pregnancy.     

反复控制性卵巢刺激对卵巢功能状态的影响

 【目的】评价在辅助生育技术治疗中反复控制性卵巢刺激对卵巢功能的影响。【方法】 回顾性分析1994年3月至2005年5月就诊于本中心接受IVF治疗行控制性卵巢刺激（COH）≥4个治疗周期的127例患者的病历资料（共508个周期），比较多次COH后基础激素水平的变化，以及不同治疗周期患者的取卵数和促性腺激素（Gn）的使用剂量，统计学方法采用t检验和重复测量资料的方差分析，P<0.05被认为有统计学意义。【结果】随着COH治疗周期数的增加，患者的年龄逐渐增加，比较各周期患者月经第3天FSH、LH、PRL、E2 、T的基础值，各激素水平之间并无统计学意义 (P=0.25~0.93)。与首次接受促超排卵周期相比较，促性腺激素（Gn）的使用剂量在第3、4、5、6、7、8治疗周期显著增加(P=0.0001~0.0084)，但是各周期患者取卵数并无统计学意义(P=0.21~0.61),在对年龄分组后比较各周期Gn的使用剂量也无统计学差异(P=0.12~0.94)。本研究还对一直在本院接受COH治疗≥7个周期的12名例患者进行自身对照的比较，发现随着COH周期数的增加，患者的Gn使用剂量也增加，但控制年龄因素的作用后，Gn的使用剂量则无统计学差异（P=0.13）。【结论】反复的COH治疗不会影响卵巢的储备功能, 接受多个周期COH治疗后的患者Gn使用剂量的增加是由于年龄因素所导致的。