长链非编码RNA FENDRR对前列腺癌DU-145细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA FENDRR对前列腺癌DU-145细胞生物学行为的影响。方法 realtime PCR方法检测前列腺癌细胞株DU-145和正常前列腺上皮细胞RWPE-1中FENDRR的表达水平。构建FENDRR基因表达载体pcDNA-FENDRR并转染DU-145细胞,real-time PCR方法验证转染效率。FENDRR基因过表达后,平板克隆实验实验检测DU-145细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测DU-145细胞的凋亡率;划痕实验与Transwell实验检测DU-145细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 FENDRR在前列腺癌细胞株DU-145中的表达明显低于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P0.01)。pcDNA-FENDRR转染显著上调DU-145细胞中FENDRR mRNA的表达。FENDRR基因过表达后,DU-145细胞的增殖、迁移与侵袭能力明显降低,细胞凋亡率明显升高(P0.01)。结论过表达lncRNA FENDRR能够抑制前列腺癌DU-145细胞增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡,在前列腺癌中发挥肿瘤抑制基因的作用。     

雷公藤红素诱导多发性骨髓瘤H929细胞凋亡

目的:研究雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的诱导作用及分子机制。方法:体外培养H929细胞,加入不同浓度(0.5、1、5和10 mg/L)的雷公藤红素处理细胞,CCK8法分析药物对细胞活力的抑制率;annexin V-PE/7-AAD双染法检测雷公藤红素对H929细胞凋亡的影响;流式细胞术分析雷公藤红素处理的H929细胞中线粒体膜电位水平;彗星电泳实验分析雷公藤红素对细胞DNA损伤的诱导作用;Western blot分析不同浓度的雷公藤红素对H929细胞中凋亡相关分子P53、XIAP、cleaved PARP-1和cleaved caspase-3的蛋白水平以及线粒体细胞色素C释放的影响。结果:不同浓度雷公藤红素处理H929细胞后明显抑制细胞的活力,并呈浓度依赖和时间依赖性。雷公藤红素呈浓度依赖地诱导H929细胞凋亡,并且降低线粒体膜电位水平(P<0.05)。彗星电泳实验结果显示雷公藤红素可以诱导H929细胞的DNA损伤。Western blot实验结果显示雷公藤红素处理的H929细胞中,促凋亡蛋白P53、cleaved PARP-1和cleaved caspase-3...     

雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡

目的:探讨雷公藤红素对人骨肉瘤细胞Saos-2的杀伤作用及相关机制。方法:将人骨肉瘤细胞Saos-2用各种不同的浓度的雷公藤红素治疗后,采用MTT法检测雷公藤红素对Saos-2细胞活力的抑制作用;采用流式细胞术检测用雷公藤红素处理后Saos-2细胞的凋亡及活性氧簇(ROS)的产生;Western blot检测雷公藤红素处理后Saos-2细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平。结果:雷公藤红素有显著的体外抗骨肉瘤作用,能显著抑制Saos-2细胞的活力。雷公藤红素可显著诱导Saos-2细胞发生凋亡,产生ROS。雷公藤红素处理后Saos-2细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平均显著上升。结论:雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导人骨肉瘤Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡。     

雷公藤红素通过调控GINS2表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞活力和凋亡的影响

目的:探讨雷公藤红素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)活力和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用低、中、高剂量的雷公藤红素处理KFB。采用CCK-8实验和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。RT-qPCR和Western blot检测GINS复合物亚基2(GINS2)的表达。将KFB分为si-NC组、si-GINS2组、Exp+pcDNA组和Exp+pcDNA-GINS2组,按照上述方法检测细胞活力和凋亡的变化。结果:雷公藤红素处理后KFB活力降低,细胞凋亡率升高,GINS2表达降低,并呈显著的剂量依赖关系(P<0.05)。敲减GINS2表达后,KFB活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);过表达GINS2可部分逆转雷公藤红素对KFB活力和凋亡的影响(P<0.05)。结论:雷公藤红素通过下调GINS2可抑制KFB活力,促进细胞凋亡。     

雷公藤红素抑制A549人肺癌细胞的增殖并增加其凋亡

目的探讨雷公藤红素对人A549肺癌细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法采用(0、1、2、3、4、5、6)μmol/L雷公藤红素分别处理培养的A549细胞0、24、48、72 h,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率确定最佳处理浓度和处理时间。后续实验采用(0、1、3)μmol/L雷公藤红素分别处理培养的A549细胞48 h,实时定量PCR检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-8、caspase-9的mRNA水平;Western blot法检测BAX、Bcl2、裂解型caspase-3 (c-caspase-3)、c-caspase-8、c-caspase-9的蛋白水平。结果雷公藤红素可浓度和时间依赖性地抑制A549细胞生长,(1、3)μmol/L雷公藤红素处理的A549细胞Bcl2的mRNA和蛋白水平降低,BAX、caspase-3、caspase-8、caspase-9的mRNA水平和BAX、c-caspase-3、c-caspase-8、c-caspase-9的蛋白水平增加。结论雷公藤红素可通过线粒体途径增加A549细胞凋亡并抑制其增殖。     

雷公藤红素对人肥大细胞系粘附能力和粘附分子表达的影响

雷公藤红素是雷公藤单体之一.本文研究雷公藤红素对人肥大细胞系HMC-1细胞粘附及粘附分子表达的影响.结果发现:HMC-1细胞能自发地表达β1、β3型整合素和CD44,不表达β2型整合素,具有迅速粘附于鼠尾胶的能力,在粘附过程中细胞由圆形、椭圆形变成梭形、多极形.雷公藤红素与HMC-1细胞在粘附前或粘附后共育均能以剂量和时间依赖方式抑制粘附和粘附过程中细胞形态的变化,并可下调粘附分子的表达.提示:雷公藤红素能抑制HMC-1细胞的粘附,这一作用与其抑制粘附分子表达和细胞形态的改变有关.     

金丝桃苷增强人γδT细胞增殖及杀伤功能研究

目的:研究金丝桃苷对人γδT细胞增殖及功能的影响。方法:以异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的金丝桃苷处理,CCK-8法检测细胞增殖。LDH法检测金丝桃苷对前列腺癌细胞DU-145的杀伤活性。流式细胞仪检测处理前后γδT细胞上穿孔素、颗粒酶、CD107a、IFN-γ的表达情况。结果:异戊烯焦磷法能在体外成功培养出高纯度的γδT细胞。金丝桃苷在μg/ml范围内可显著促进γδT细胞增殖。金丝桃苷作用于γδT细胞后杀伤DU-145的能力明显增强,且在3.13~12.5μg/ml浓度时γδT细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达显著升高,与对照组相比有统计学差异。金丝桃苷对γδT细胞上CD107a的表达无明显影响。结论:金丝桃苷通过增强γδT细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达来增强其杀伤DU-145的作用。     

雷公藤红素诱导CEM-6T细胞凋亡的机制研究

在已经证明雷公藤红素能诱导人T淋巴细胞株CEM 6T细胞凋亡的基础上 ,进一步探讨此凋亡过程的机制。本项目研究雷公藤红素诱导CEM 6T细胞凋亡过程中Fas/FasL、ICEmRNA的变化以及ICE抑制剂、磷酸酶抑制剂对凋亡的影响。结果发现 ( 1)CEM 6T细胞表达Fas,不表达FasL ,雷公藤红素处理不能改变这一情况 ;( 2 )雷公藤红素不能改变ICEmRNA的表达水平 ,但ICE抑制剂Ac YVAD CHO能使雷公藤红素诱导CEM 6T的凋亡率下降 ;( 3) 1 5 μmol/L磷酸酶抑制剂okadaicacid能使凋亡率下降。提示雷公藤红素诱导CEM 6T细胞凋亡不依赖Fas/FasL ,而与细胞内原已存在的ICE有关 ,蛋白去磷酸化参与了此凋亡过程     

微小RNA-448抑制剂对人前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的观察特异性微小RNA-448抑制剂对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 qRT-PCR检测正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和癌细胞株(DU-145、PC-3、C4-2B和LNCa P)中miR-448的表达,选取表达量的最高的癌细胞株进行后续实验。利用脂质体转染试剂将miR-448抑制剂或miR-NC转入前列腺癌细胞中,qRT-PCR检测miR-448及人趋化素样因子超家族成员3(CMTM3)mRNA的表达水平,Western blot检测细胞相关蛋白表达。MTT法检测细胞的增殖活性,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 RWPE-1细胞中miR-448的表达显著低于癌细胞(P0.01),DU-145细胞中的表达最高(P0.01)。miR-448抑制剂转染48 h后,DU-145细胞miR-448表达下调(P0.01),CMTM3 mRNA表达上调(P0.01),CMTM3、E-cadherin和β-catenin蛋白表达上调,N-cadherin和Snail蛋白表达下调;细胞增殖活性降低(P0.05);细胞迁移能力降低(P0.01)。结论 miR-448在前列腺癌细胞中明显高表达,miR-448抑制剂可下调DU-145细胞中miR-448表达,上调CMTM3蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移,在前列腺癌的分子治疗中具有潜在功能。     

miR-99a-5p通过靶向mTOR抑制前列腺癌细胞增殖及肿瘤生长

目的 探讨miR-99a-5p靶向mTOR对前列腺癌细胞增殖及肿瘤生长的影响。方法 CCK-8法检测miR-99a-5p对DU-145细胞增殖的影响;miR-99a-5p mimics转染前列腺癌DU-145细胞,通过实时定量PCR检测miR-99a-5p和mTOR mRNA表达,Western blot检测miR-99a-5p过表达后DU-145细胞mTOR蛋白的表达;通过生物信息学网站预测mTOR是否为miR-99a-5p潜在的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验进行验证,CCK-8和肿瘤异种移植裸鼠模型验证miR-99a-5p通过靶向mTOR对前列腺癌细胞增殖及肿瘤生长的影响。结果 转染miR-99a-5p mimics抑制DU-145细胞体外增殖活性,降低mTOR mRNA和蛋白的表达,miR-99a-5p结合mTOR mRNA 3’UTR区域,且miR-99a-5p通过靶向mTOR抑制前列腺癌细胞增殖及肿瘤生长。结论 miR-99a-5p通过靶向调控mTOR抑制前列腺癌细胞的增殖及肿瘤生长。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.