两种新型冠状病毒免疫学检测方法的应用评价

目的：为有效检测新型冠状病毒特异性抗体（新冠抗体），利用化学发光法和胶体金法分别检测已完成中和试验的92份血清，对两种方法的敏感度和特异度等进行初步比较和评价，为大规模人群免疫后血清SARS-CoV-2抗体水平监测提供参考。方法：采用病毒中和试验、胶体金试剂盒和全自动化学发光分析仪分别对样本开展SARS-CoV-2特异性抗体检测，计算诊断特异度、敏感度、阴阳性预测值和符合率。结果：化学发光法的灵敏度为100.00%，高于胶体金法的71.64%；胶体金法的特异度为92.00%，高于化学发光法的64.00%；胶体金法阴阳性预测值分别为54.76%和96.00%，而化学发光法的阴阳性预测值分别为100.00%和88.16%；胶体金法和化学发光法的Kappa值分别为0.525和0.721。结论：以微量病毒中和抗体试验为金标准，化学发光法的灵敏度和Kappa值较高，适用于SARS-CoV-2病例辅助性快速检测；胶体金法测定SARS-CoV-2特异度总抗体的灵敏度一般，特异度较高，其使用简便快速、成本低廉，在条件限制、需要及时监测等情况下，适用于快速大规模筛查以及阳性样本初步检测。随着新冠疫苗在人...     

抗双链DNA抗体四种检测方法的比较及临床应用

目的比较短膜虫间接免疫荧光法（CLIFT）、酶免疫印迹法（LIA）、胶体金快速斑点法（DIGFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗双链DNA（ds-DNA）抗体的敏感度和特异度,探讨4种方法在检测抗双链DNA抗体的临床应用价值,寻找对临床最有价值的检测方法。方法用4种方法检测59例系统性红斑狼疮（SLE）患者,50例健康体检者血清中抗ds-DNA抗体,比较各种检测方法的敏感度、特异度和符合率。结果 CLIFT法、胶体金快速斑点法在SLE中的检出率分别为52.5%、44.1%、66.1%、57.6%,均明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;CLIFT法与其他三种方法之间没有显著的统计学差异（P〉0.05）,仅是方法学上的差异。结论 4种方法检测抗ds-DNA抗体均具有很高特异度,但敏感度略有差异,胶体金快速斑点法敏感度最高,检测方法操作方便适用于临床快速筛查,免疫荧光法的特异度高,可以用于临床确认试验方法。     

五厂家EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的比较

目的 通过比较EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性,为试剂盒在临床上的使用选择和性能改进提供依据.方法 使用五厂家的EB病毒衣壳抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒（VCA IgA和VCA IgG试剂盒）、核抗原I IgA和IgG抗体检测试剂盒（EBNA1 IgA和EBNA1IgG试剂盒）、早期抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒（EA IgA和EA IgG试剂盒）以及Zta IgA抗体检测试剂盒,分别检测33例鼻咽癌患者（NPC）、30例健康体检者（HD）和41例非鼻咽癌的其他肿瘤患者（NNPC）血清或血浆样本.结果 A厂家的VCA IgA试剂盒灵敏度高于其他厂家同品种试剂盒,但对于NNPC特异度最低（36.6％）;而D厂家VCA IgA试剂盒的特异度最高（97.6％）,且对HD的特异度均大于90％.B和D厂家的EBNA1 IgA试剂盒间阳性、阴性符合率分别为92.1％和100.0％.A和E厂家的EA IgA试剂盒的灵敏度均较低而特异度高,试剂盒间阳性符合率低（39.4％）,阴性符合率高（98.6％）;而VCA IgG试剂盒的灵敏度高但特异度低.A和C厂家的EBNA1IgG试剂盒的灵敏度高（100.0％,97.0％）但特异度低（3.3％,13.3％）.C厂家EA IgG试剂盒检测所有样本结果均为阴性.结论 五个不同厂家VCA LgA、EA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性存在差异,特别是A厂家和其他国内厂家同品种试剂间差异明显,需根据临床目的进行选择.三家国产VCA IgA试剂盒的灵敏度需进一步提高.相反,EBNA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和结果一致性较好.单独使用VCA IgG和EBNA1 IgG试剂盒血清学诊断鼻咽癌的特异度差,其判读界值可能需根据检测且的进行调整.     

点免疫金渗滤法筛选胶体金标记抗人IgG 的研究

目的:应用点免疫金渗滤法筛选适宜胶体金标记的抗人IgG(以下简称二抗),并运用多个评价指标进行比较和分析。方法:选择三个不同公司的二抗用胶体金标记,根据棋盘滴定法确定最佳标记条件;运用点免疫金渗滤法对三种二抗的胶体金标记后检测效能进行比较,采用包虫病人和健康对照血清,用包虫病特异性抗原检测包虫病患者血清中的特异性抗体,评价最优的二抗,并与酶联免疫吸附测定法进行比较。结果:A、B、C 三种二抗标记的最佳标记条件为:pH 均为8.5,加入量分别为38.4、24、19.2 g/ ml,综合评价二抗B 检测效能最优。将其与酶联免疫吸附测定法检测效能进行比较,两种方法检测结果的Kappa=0.895(P<0.05),吻合度较强。结论:应用点免疫金渗滤法,以及本文提出的评价指标,能够筛选出最佳二抗,对检测试剂盒中二抗的选择具有重要的参考价值。     

胶体金法和TPPA法检测血清梅毒抗体的比较与分析

目的 通过梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）和胶体金（Colloidal Gold,TPAb）检测血清梅毒抗体的比较,探讨胶体金法和TPPA法检测血清梅毒螺旋体抗体结果之间的关系.方法 通过对本院首次用TPPA法检测阳性后的血清标本,再用TPAb法复查,共616例,以及急诊术前和腔镜检查前用TPAb法筛查出阳性的血清标本,再用TPPA法复查,共88例,并对7份两种方法共同阳性梅毒抗体血清用阴性血清进行倍比稀释,对稀释后的同一份血清分别用TPPA法和TPAb法进行定性检测,以比较两种方法灵敏度.结果 TPPA法检出616例阳性,用TPAb法复查612例阳,符合度99.35％;TPAb法共检测出88例阳性,用TPPA法复查77例阳性,符合度87.5％.结论 稀释实验表明TPAb法灵敏度比TPPA法更高,能检测出更低的下限.     

胶体金免疫层析法检测血清癌胚抗原

建立一种快速、简易的检测血清中癌胚抗原(CEA)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗CEA单克隆抗体4A3。将单克隆抗体3B5划线包被于硝酸纤维素膜上，制成免疫层析检测试纸条。血清中CEA与试纸条上胶体金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的包被抗体结合形成肉眼可见的红色线条。用GICA与ELISA试剂盒对比检测了637份血清标本，其灵敏度为96．69％，特异性为99．38％，两法符合率为98．74％。GICA检测血清中的CEA特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

快速乙肝表面抗原胶体金免疫层析测定法的建立及应用

建立乙肝表现抗原胶体金免疫层析测定法，用于乙肝病毒感染检测。采用亲和力强、特异笥高的自制抗－ＨＢｓ单克隆抗体及胶体金标记和硝酸纤维膜包被技术，制备乙肝表面抗原胶体金免疫层析快速测定试条，并进行了初步临床应用。该法的灵敏度为５ｎｇ／ｍＬ，与目前广泛使用的ＥＬＩＳＡ法对照检测５１３份血清标本，符合率为９９．２％。该法快速、准确、特异、灵敏、简便，基本符合临床应用要求，可用于乙肝表面抗原的检测。     

胶体金与胶乳增强免疫比浊法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ的比较

目的 用北京九强公司的胶体金法与胶乳增强免疫比浊法定量测定我院60例血清肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)水平.方法 结合临床最后诊断,评价两种测定方法的分析性能.比较胶体金法与胶乳增强免疫比浊法测定cTn Ⅰ总符合率、灵敏度、特异性、误诊率和漏诊率.结果 胶体金法与胶乳增强免疫比浊法与临床诊断总符合率好,灵敏度高,特异性强,误诊率和漏诊率低.两种检测方法测定结果之间差异无统计学意义,P＞0.05.结论 胶乳增强免疫比浊法定量测定cTn Ⅰ方法简便、快速,具有较高的灵敏度和精密度,可用全自动分析仪进行测试,适用于大批量及临床常规使用.胶体金法方便快速,适合临床科室床旁检测.     

嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强蛋白的表达和纯化及其在血清学诊断中的应用

目的 表达和纯化出嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强(MIP)蛋白,研究其在军团菌肺炎血清学诊断中应用价值.方法 将已构建成功的重组质粒pET-mip转化E.coli BL21感受态细胞,诱导MIP蛋白表达,运用SDS-PAGE分析和亲和层析法纯化.用DRG军团菌IgG/IgM/IgA的ELISA检测试剂盒筛出40份阳性血清和30份阴性血清,用纯化的MIP蛋白建立间接ELISA,同时与R＆D的ELISA IgG、IgM、IgA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后对这两种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及不同检测结果的一致性,来评价该方法的应用价值.结果 诱导相对分子质量(Mr)大约40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表达并纯化.纯化蛋白建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与国外ELISA试剂盒(R＆D)进行比较,IgG抗体的灵敏度88.5％,特异度95.5％,一致性Kappa值0.846(P ＜0.05),ROC曲线下面积0.927.IgM抗体的灵敏度89.3％,特异度97.6％,一致性Kappa值0.88(P ＜0.05),ROC曲线下面积0.947.IgA抗体的灵敏度90％,特异度95.2％,一致性Kappa值0.856(P＜0.05),ROC曲线下面积0.931.结论 成功诱导了嗜肺军团菌MIP蛋白稳定表达并纯化,运用MIP作为包被抗原的军团菌肺炎的血清学诊断方法具有较高的诊断价值.     

ECL法检测前列腺特异抗原的临床价值

目的 :探讨前列腺特异性抗原 (PSA)浓度测定在前列腺疾病诊断中的应用价值。方法 :采用电化学发光免疫分析 (ECL)法检测 81例健康对照者、5 8例前列腺炎患者、1 2 1例良性前列腺增生 (BPH)患者和 6 9例前列腺癌 (PCa)患者血清中的PSA浓度 ,对检测结果进行统计分析。组间两两比较用t检验 ;良、恶性鉴别诊断界值的确定用ROC曲线。结果 :(1 )前列腺癌组患者血清PSA浓度明显高于其它各组 (p皆 <0 0 0 1 ) ;前列腺增生组部分病人血清PSA浓度升高 (与健康对照组和炎症组比较 p <0 0 0 1 ) ,但局限在一定范围 ,一般不超过 1 0ng/ml;前列腺炎组和健康对照组均在正常范围 (<4ng/ml)。 (2 )ROC曲线下面积为 0 98,当鉴别界值为4ng/ml时 ,灵敏度为 1 0 0 % ,特异度为 77 3% ;界值为 1 8ng/ml时 ,特异度 1 0 0 % ,灵敏度 6 8 1 % ;界值为 7 6ng/ml时 ,灵敏度为 95 7% ,特异度为 90 %。结论 :PSA是筛查前列腺癌的灵敏的肿瘤标志物 ,对良、恶性前列腺疾病有一定的鉴别诊断意义。