miR-129-5p靶向KLK7对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制

目的 探讨高表达miR-129-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR方法检测卵巢癌SKOV3细胞与人正常卵巢上皮细胞株中miR-129-5p的表达。在卵巢癌SKOV3细胞中瞬时转染miR-129-5p模拟物及无意义序列,采用CCK8法及Transwell实验检测各组细胞的增殖能力和侵袭能力;实时荧光定量PCR检测miR-129-5p和KLK7的相对表达水平;Western blot检测各组细胞中KLK7蛋白表达;Targetscan 7.2和双荧光素酶实验分析miR-129-5p与KLK7的靶向关系。结果 miR-129-5p在卵巢癌SKOV3细胞中的表达低于人正常卵巢上皮细胞(P<0.05),过表达miR-129-5p降低SKOV3细胞中KLK7 mRNA和蛋白的表达,Targetscan 7.2网站分析及双荧光素酶实验证实KLK7为miR-129-5p的靶基因,过表达miR-129-5p抑制SKOV3细胞增殖和侵袭能力(P<0.05)。结论 过表达miR-129-5p可通过靶向调控KLK7抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭。     

miR-483-3p靶向SMAD4对肾上腺皮质癌NCI-H295R细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-483-3p对肾上腺皮质癌NCI-H295R细胞增殖和侵袭的影响及机制.方法 miR-483-3p模拟物和抑制物分别转染肾上腺皮质癌NCI-H295R细胞,设置空白组(未进行转染)、miR-483-3p阴性对照组(转染无义序列)、miR-483-3p模拟物转染组(转染miR-483-3p模拟物)、mi...     

miR-194-5p通过FOXP2影响骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的研究

目的 探讨高表达miR-194-5p对骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 实时荧光定量PCR方法检测骨肉瘤SAOS-2细胞与人成骨hFOB1.19细胞中miR-194-5p的表达水平,应用瞬时转染将miR-194-5p模拟物转染至骨肉瘤SAOS-2细胞,实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-194-5p、FOXP2 mRNA的相对表达水平,Western blot检测各组细胞中FOXP2蛋白表达,Targetscan7.2和双荧光素酶实验分析FOXP2与miR-194-5p的靶向关系,采用CCK8法检测各组细胞的增殖能力,transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 miR-194-5p在骨肉瘤SAOS-2细胞中的表达低于人成骨hFOB1.19细胞（P<0.05）;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞中FOXP2mRNA和蛋白表达下降;Targetscan7.2网站分析及双荧光素酶实验证实FOXP2为miR-194-5p的靶基因;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞增殖、侵袭能力下降。结论 过表达miR-194-5p可以抑制骨肉瘤SAOS-2细胞...     

miR-342-3p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及可能机制

目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、HNE-1、5-8F、HONE-1中miR-342-3p的表达水平。采用脂质体介导法向CNE-2细胞转染miR-342-3p模拟物记为miR-342-3p mimic组,转染模拟物对照的CNE-2细胞记为NC组,不行转染的CNE-2细胞记为Control组。以qRT-PCR检测转染效果,四甲基偶氮唑盐(MTT)法和克隆形成实验检测转染对细胞增殖的影响,Annexin-Ⅴ-FITC/PI双染色法检测转染对细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞中caspase-3、Ki-67及NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与鼻咽上皮细胞NP69相比,miR-342-3p在鼻咽癌细胞中的表达水平显著降低。与Control组和NC组相比,miR-342-3p mimic组细胞miR-342-3p的表达水平显著升高,细胞OD值明显降低,克隆形成率显著下降,凋亡显著升高(P0.05),细胞中caspase-3激活水平升高,Ki-67、p-IKKα、p-IKKβ蛋白水平降低(P0.05)。结论 miR-342-3p在鼻咽癌细胞中呈低表达,上调鼻咽癌CNE-2细胞中miR-342-3p的表达能够抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用与抑制NF-κB信号通路的激活相关。     

LncRNA TUG1靶向miR-141-3p影响甲状腺癌细胞的增殖和侵袭

目的 检测LncRNA TUG1在甲状腺癌细胞中的表达,初步探讨LncRNA TUG1对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 采用qRT-PCR法检测甲状腺癌B-CPAP、TPC-1细胞株中LncRNA TUG1和miR-141-3p的表达水平,应用生物信息学预测lncRNA TUG1和miR-141-3p的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验进行验证。将lncRNA TUG1干扰序列转染TPC-1细胞,应用qRT-PCR法检测lncRNA TUG1和miR-141-3p的表达,MTT法检测各组TPC-1细胞增殖能力,Transwell实验检测各组TPC-1细胞的侵袭能力。结果 与正常甲状腺上皮细胞相比,BCPAP、TPC-1中LncRNA TUG1表达水平明显升高（P<0.05）,miR-141-3p表达水平明显下降（P<0.05）,生物信息学分析及双荧光素酶实验结果显示,lncRNA TUG1可以靶向调控miR-141-3p。转染TUG1干扰序列能够降低TPC-1细胞lncRNA TUG1的表达,上调miR-141-3p的表达（P<0.05）;沉默lncRNA T...     

miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及其机制

目的:探索miR-219-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并探讨其机制.方法:采用RT-PCR检测miR-219-5p在NSCLC细胞系H1299,A549,H1975及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中的表达.将NSCLC细胞系H1299分成对照组和miR-219-5p组,用Lipofectamine 2000分别转染miR-219-5p scramble和miR-219-5p mimics,采用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测比较两组细胞增殖、凋亡及侵袭能力,Western印迹测定表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及裂解型多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)在两组细胞中的表达.结果:miR-219-5p在H1299,A549和H1975细胞系中的表达量均低于BEAS-2B,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示在48,72,96及120 h,miR-219-5p组OD490 nm值显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组细胞凋亡率显著高于对照组(13.33%±1.20%vs 3.43%±0.12%),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组侵袭细胞数显著少于对照组(67.5±9.9 vs 189.5±16.7),差异有统计学意义(P<0.05);miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量为0.35±0.07,miR-219-5p组EGFR蛋白相对表达量显著低于对照组(1.0),差异有统计学意义(P<0.01);miR-219-5p组裂解型PARP蛋白相对表达量显著高于对照组(2.74±0.17 vs 1.0),差异有统计学意义(P<0.01).结论:miR-219-5p可抑制NSCLC的细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,其机制可能与下调EGFR及上调PARP的表达有关.     

miR-210-3p通过靶向调控SMAD4基因对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨miR-210-3p对宫颈癌细胞增殖、侵袭的影响及作用机制.方法 通过OncomiR和GEPIA网站分析TCGA数据库宫颈癌病例中miR-210-3p和SMAD4的表达.采用miR-210-3p抑制物转染宫颈癌Hela细胞,实验设置空白组、miR-210-3p阴性对照组和miR-210-3p抑制物组,采用CC...     

miR-144-3p对大鼠脊髓损伤后巨噬细胞炎症反应和功能恢复的影响

目的 探究miR-144-3p对脊髓损伤大鼠的巨噬细胞炎症反应和运动功能恢复的影响。方法 分析脊髓损伤大鼠miRNA表达数据集GSE19890中miR-144的表达情况;在ENCORI网站中预测miR-144-3p的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-144-3p与靶基因的结合情况;构建脊髓损伤大鼠模型,采用RT-qPCR和Western blot实验验证损伤区域miR-144-3p和Notch1的变化情况;用miR-144-3p mimics或miR-144-3p NC转染LPS诱导的巨噬细胞或经鞘内注射脊髓损伤的大鼠,探究miR-144-3p对体内外巨噬细胞炎症反应和大鼠运动功能恢复的影响。结果 数据集GSE19890中miR-144在大鼠脊髓损伤7 d时明显下调。Notch1作为miR-144-3p的靶基因被其负调控。miR-144-3p在脊髓损伤大鼠模型损伤7 d时明显下调,而Notch1的表达则明显上调。miR-144-3p能够明显抑制LPS体外诱导的M1型巨噬细胞炎症反应和脊髓损伤导致的体内巨噬细胞炎症反应,并且促进脊髓损伤大鼠的运动功能恢复。结论 miR-144-3p靶向调控Notch1的表达,并且通过抑制巨噬细胞炎症反应来促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。     

长链非编码RNA MALAT1靶向miR-129对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA MALAT1对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的影响,初步分析其机制.方法 将lncRNA MALAT1抑制物转染前列腺癌PC3细胞,分为untreated组(对照组)、si-NC组(阴性对照组)及si-MALAT1组(沉默MALAT1),实时定量PCR检测各组PC3细胞lncRNA MALAT1和miR-129的表达,双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA MALAT1和miR-129的靶向关系,CCK-8方法检测各组PC3细胞增殖能力,Transwell实验检测各组PC3细胞侵袭能力.结果 转染MALAT1抑制物能够降低PC3细胞lncRNA MALAT1的表达,上调miR-129的表达(P＜0.05);双荧光素酶实验表明lncRNA MALAT1可以靶向调控miR-129.lncRNA MALAT1表达抑制后,PC3细胞的增殖与侵袭能力下降(P＜0.05).结论 沉默lncRNA MALAT1可以抑制前列腺癌细胞PC3的增殖和侵袭,其机制可能与调控miR-129表达有关.     

RILP inhibits proliferation,migration, and invasion of PC3 prostate cancer cells

RILP (Rab-interacting lysosomal protein) is a key regulator of lysosomal transport and a potential tumor suppressor. However, the role of RILP in prostate cancer and the underlying mechanism of RILP in regulating the proliferation, migration, and invasion of prostate cancer cells remain to be studied. In this study, we confirmed RalGDS (Ral guanine nucleotide dissociation stimulator) as the interaction partner of RILP in PC3 prostate cancer cells. Immunofluorescence microscopy showed that RILP recruits RalGDS to the lysosomal compartment. We found that RILP inhibits the activation of RalA and downstream effector RalBP1, and negatively regulates the downstream molecular phosphorylation of Ras. We showed that RILP inhibits the proliferation, migration, and invasion of PC3 prostate cancer cells, which may give rise to novel ideas for cancer treatment.     

过表达miR-320a对宫颈癌Hela细胞增殖和侵袭能力的影响及其可能机制

目的 探讨过表达miR-320a对宫颈癌Hela细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 将宫颈癌Hela细胞用培养基培养后,将miR-320a模拟物瞬时转染Hela细胞使miR-320a过表达,并通过实时定量PCR进行验证,采用CCK-8方法、Transwell实验检测各组Hela细胞的增殖和侵袭能力,Western blot检测各组Hela细胞E2F1蛋白表达,应用Targetscan7.2网站预测E2F1与miR-320a的靶向关系,应用双荧光素酶报告基因实验进行验证.结果 在转染miR-320a模拟物后,Hela细胞中miR-320a表达上升,细胞增殖能力和侵袭能力下降,E2F1蛋白表达下降,生物信息学分析及双荧光素酶实验证实E2F1为miR-320a的靶基因.结论 过表达miR-320a可以抑制Hela细胞增殖与侵袭,其机制可能与调控E2F1的表达相关.     

过表达miR-139-5p对胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨过表达miR-139-5p对胶质瘤U87MG细胞增殖和侵袭的影响,并初步分析其可能机制.方法 在胶质瘤U87MG细胞中瞬时转染miR-139-5p并用real-time PCR方法验证其转染效率,CCK-8法检测转染后各组U87MG细胞的增殖能力,Transwell实验检测转染后各组U87MG细胞的侵袭能力,...     

高表达miR-20b对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和侵袭的影响及可能机制

目的 探究高表达miR-20b对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和侵袭的影响及其可能机制.方法 将TPC-1细胞分为空白对照组、miR-NC组(转染阴性对照miR-NC)和miR-20b模拟物组(转染miR-20b mimics),实时定量PCR和Western blot检测各组细胞miR-20b和CCND1的表达,双荧光素...     

miR-454-3p靶向BPTF表达调控肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-454-3p对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法采用RT-PCR技术检测miR-454-3p在肺癌组织以及肺癌细胞株中的表达,以表达量最低的肺癌细胞A549为后续分析对象,将miR-454-3p mimic转入A549细胞,RT-PCR验证miR-454-3p的过表达效率;采用CCK-8、迁移、侵袭等实验,观察转染组与对照组肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭情况;生物信息学预测BPTF是miR-454-3p的靶标,构建BPTF 3′UTR荧光素酶载体,通过双荧光素酶报告基因验证miR-454-3p和BPTF的靶向关系;应用Western blot法检测BPTF的表达及迁移、侵袭相关蛋白的变化。结果RT-PCR实验表明miR-454-3p在肺癌组织和细胞中表达下调,且在A549细胞中表达最低(P<0.05)。与对照组相比,过表达miR-454-3p的肺癌细胞A549增殖能力明显降低,迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。生物信息学软件分析BPTF为miR-454-3p的潜在靶基因,过表达miR-454-3p后BPTF的表达水平明显受到抑制。同时,迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达明显下调,E-cadhern表达明显上调,而E-cadherin的负性调控N-cadherin表达下降。结论miR-454-3p可能通过靶向下调BPTF的表达,抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,为肺癌的靶向治疗提供潜在靶标。     

长链非编码RNA PCA3对前列腺癌细胞LNCaP增殖和侵袭的影响及其机制的研究

目的 探讨长链非编码RNA PCA3对前列腺癌细胞LNCaP增殖和侵袭的影响并初步分析其机制。方法 将lncRNA PCA3抑制物转染前列腺癌细胞LNCaP,沉默细胞中lncRNA PCA3的表达,分为untreated组（对照组）、si-PCA3组（沉默PCA3）、miR-218 mimics组（转染miR-218模拟物）、si-PCA3+miR-218 inhibitor组（同时沉默PCA3和miR-218）,实时定量PCR检测各组LNCaP细胞lncRNA PCA3、miR-218和Runx2表达,双荧光素酶报告基因实验分别分析lncRNA PCA3和miR-218,miR-218和Runx2的靶向关系,采用CCK-8法检测各组LNCaP细胞增殖能力,Transwell实验检测各组LNCaP细胞侵袭能力,Western blot检测各组LNCaP细胞Runx2蛋白表达。结果 转染PCA3抑制物能够显著降低LNCaP细胞lncRNA PCA3和Runx2的表达,上调miR-218的表达（P<0.05）;转染miR-218模拟物,可以降低Runx2的表达（P<0.05）;同时抑制PCA3和miR-218表达后,Runx2表达无明显变化（P>0.05）,双荧光素酶实验表明lncRNA PCA3可以靶向调控miR-218,miR-218可以靶向调控Runx2。lncRNA PCA3表达抑制后,LNCaP细胞的增殖与侵袭能力显著降低（P<0.05）。结论 抑制lncRNA PCA3可以抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖和侵袭,其机制可能与调控miR-218/Runx2轴表达有关。     

麦冬皂苷B对前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨麦冬皂苷B对前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响及可能机制.方法 体外培养PC-3细胞,分别以5、10、20μmol/L麦冬皂苷B处理后,MTT实验检测PC-3细胞增殖能力;Transwell实验检测PC-3细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测PC-3细胞的细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot检测细胞周期蛋白Dl(cyclin D1)和基质金属蛋白酶-2/9(matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)的表达.结果 不同浓度麦冬皂苷B处理后,PC-3细胞的细胞增殖能力、迁移和侵袭能力降低(P＜0.01);G0/G1期细胞比例与细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);PC-3细胞cyclinD1、MMP-2与MMP-9的表达水平均明显降低(P＜0.01).结论 麦冬皂苷B抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭及迁移,促进凋亡.     

miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其对ACC-M细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其对腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖以及侵袭能力的影响。方法通过实时PCR检测5例涎腺腺样囊性涎组织及癌旁正常组织miR-24-3p的表达水平;将miR-24-3p模拟物瞬时转入高转移腺样囊性癌细胞系(ACC-M)使miR-24-3p过表达,并通过实时PCR方法验证;流式细胞仪分析转染后ACC-M细胞周期的改变,甲基噻唑基四唑比色法检测转染后ACC-M细胞的增殖,Transwell实验检测转染后ACC-M细胞的侵袭能力,蛋白质免疫印迹法检测转染后ACC-M细胞血小板源性生长因子受体B(PDGFRB)的表达变化。结果 miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织。转染miR-24-3p mimics能够显著上调ACC-M细胞miR-24-3p的表达水平,ACC-M细胞的S期比例明显下降,而G_0/G_1期的细胞明显增多,增殖受到明显抑制,侵袭能力下降,显著降低ACC-M细胞PDGFRB的蛋白表达。结论 miR-24-3p在涎腺腺样囊性癌中低表达,过表达miR-24-3p能够抑制涎腺腺样囊性癌细胞的增殖与侵袭能力。