基于PPARγ/c-Ski信号通路探究黄芩苷对乙型病毒性肝炎大鼠肝功能损伤的机制

目的 基于PPAR-γ/cSki信号通路探究黄芩苷对乙型病毒性肝炎大鼠肝功能损伤的影响。方法 将大鼠随机分为sham组、HBV组、HQL组、HQM组、HQH组、PT组,每组10只。使用全自动生化检测仪检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）含量,肝脂质代谢指标总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）含量及肝纤维化指标透明质酸（HA）和层黏连蛋白（LN）含量;ELISA检测血清中一氧化碳合酶iNOS、IL-6、IL-10、IL-4水平;苏木精-伊红（HE）染色检测肝组织病理学变化;染色质免疫共沉淀法分析肝组织中病毒载量;蛋白质印迹检测肝组织中PPAR-γ和c-Ski蛋白表达。结果 和sham组相比,HBV组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、LDL、HA、LN、iNOS和IL-6含量均明显升高,HDL、IL-10和IL-4含量明显减少（P<0.05）;和HBV组相比,HQL组、HQM组、HQH组和PT组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、LDL、HA、LN、iNOS和IL-6含量明显降低,HDL、IL-10...     

IFN-γ通过激活JAK/STAT信号通路上调手足口病患儿OAS1表达

目的:探讨干扰素γ(IFN-γ)是否可以通过激活Janus激酶(JAK)/信号转导和转录激活因子(STAT)信号通路上调手足口病(HFMD)患者2',5'-寡聚腺苷酸合成酶1(OAS1)的表达,从而发挥抗病毒感染的作用.方法:收集140例儿童手足口病和60例健康对照儿童外周血标本,RT-qPCR和Western blo...     

黄芪甲苷对乙型病毒性肝炎大鼠模型免疫炎症反应的影响及机制

目的 探讨黄芪甲苷对乙型病毒性肝炎大鼠免疫炎症反应的抑制作用及其作用机制。方法 将SPF级SD大鼠30只随机分为空白对照组、模型组、黄芪甲苷（40 mg/kg）组,每组10只。采用尾静脉注射乙型肝炎病毒的方法制备乙型病毒性肝炎大鼠模型。ELISA试剂盒检测大鼠血清中HBsAg、HBeAg水平;全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）水平;流式细胞仪检测外周血液中Th17、Treg细胞比例;ELISA检测大鼠血清中IL-1β、IL-6及TNF-α水平;HE染色观察肝组织病理形态。Western blot检测AMPK、NF-κB及IκB蛋白表达。结果 黄芪甲苷能够显著降低大鼠血清HBsAg、HBeAg、ALT及AST水平;明显降低Th17比例,明显升高Treg比例及Treg/Th17;明显降低IL-1β、IL-6及TNF-α水平;明显减轻肝组织损伤;明显增加AMPK与IκB蛋白表达,并明显降低NF-κB蛋白表达。结论 黄芪甲苷可改善乙型病毒性肝炎大鼠免疫...     

茯苓多糖改善HDL功能并通过PPARγ/LXRα/ABCA1抗AS机制研究

目的:探讨茯苓多糖改善HDL功能以及通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路防治AS的作用及机制研究.方法:将32只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、茯苓多糖组、辛伐他汀组,10只C57BL/6J作为正常组.模型组及药物干预组给予高脂饲料喂养,正常组给予普通饲料喂养.8周后,药物干预组每日灌胃相应药物,茯苓多糖组以...     

c-Ski调控p38信号通路在TGF-β1介导人冠状动脉内皮细胞内皮间充质转化中的作用研究

目的 探索c-Ski蛋白在人冠状动脉内皮细胞内皮间充质转化过程中的表达特征及其调控p38信号通路的机制,为心肌纤维化提供新的预防和治疗的靶点.方法 以人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs)为研究对象,采用转化生长因子β1(transformin...     

姜黄素对2 型糖尿病肾病大鼠保护作用及机制研究

目的:探讨姜黄素对2 型糖尿病肾病(DN)大鼠保护作用及可能的作用机制。方法:30 只Wistar 大鼠随机分为对照组、DN 组和姜黄素组,每组10 只。DN 组和姜黄素组采用高脂饲料喂养后注射链脲佐菌素建立DN 模型,造模成功后姜黄素组以200 mg/ kg 姜黄素灌胃,每天1 次,对照组和DN 组给予等量羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药12 周。末次给药后收集24 h 尿量,称重,腹腔麻醉后心脏取血,检测血糖(Blood glucose,BG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacylglyceride,TG)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿微量白蛋白(Vrine microalbumin,mAlb),计算尿蛋白排泄率(Urinary protein excretion rate,UAER);处死大鼠,摘取双肾除去包膜后称重(KM),计算肾重指数(KI);多聚甲酚固定肾皮质用于苏木素-伊红(HE)染色,肾皮质制成匀浆检测MDA 和SOD 活性,Western blot 检测肾组织中核因子相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO鄄1)蛋白表达。结果:DN 组和姜黄素组BG、TC、TG、KI、BUN、Scr、UAER、MDA显著高于对照组,BM、KM、SOD 显著低于对照组,且姜黄素组上述指标升高或降低幅度小于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05);HE 染色结果显示,与DN 组比较,姜黄素组肾小管变性明显减轻,炎性细胞浸润明显减少;Western blot 结果显示对照组Nrf2 和HO-1 蛋白表达显著低于DN 组和姜黄素组,而姜黄素组显著高于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可能通过激活Nrf2/ ARE 信号通路,降低糖尿病肾病大鼠氧化应激、发挥肾脏保护作用。     

厄贝沙坦联合卡维地洛介导β-catenin/PPARγ通路改善心肌梗死后心衰大鼠血管新生

目的 探究厄贝沙坦联合卡维地洛对心肌梗死后心衰大鼠心肌血管新生的作用及可能机制。方法30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（Model组）和厄贝沙坦联合卡维地洛组（irbesartan+carvedilol组）,每组10只。全自动生化分析仪检测大鼠血清心肌酶;HE染色观察大鼠心肌病理学改变;TUNEL检测大鼠心肌细胞凋亡;免疫荧光检测大鼠心肌CD34表达,分析微血管密度;Western blot检测心肌组织VEGF、bFGF、β-catenin和PPARγ蛋白表达水平。结果 厄贝沙坦联合卡维地洛降低大鼠血清心肌酶水平、改善心肌病理损伤、降低心肌组织细胞凋亡水平、增加心肌微血管密度及VEGF和bFGF蛋白表达水平、降低心肌组织β-catenin与PPARγ蛋白表达水平。结论 厄贝沙坦联合卡维地洛改善心衰大鼠心肌梗死所致心肌损伤,其机制可能与调节β-catenin/PPARγ信号通路有关。     

姜黄素通过激活AMPK信号通路介导的自噬抑制大鼠蛛网膜下腔出血后神经元凋亡

目的:探讨姜黄素(Cur)对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的影响及其作用机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组(Sham)、模型组(SAH)、Cur低剂量干预组(50 mg/kg,Cur-L)、Cur高剂量干预组(200 mg/kg,Cur-H)和高剂量Cur联合AMPK抑制剂Dorsomor...     

Hippo-YAP信号通路在IFN-γ促神经干细胞增殖中的作用及其机制

目的研究γ-干扰素(IFN-γ)对神经干细胞增殖及自我更新能力的影响;Hippo-YAP信号通路在IFN-γ促神经干细胞增殖以及自我更新能力的作用机制。方法从14~16 d胎鼠海马部提取分离神经干细胞进行体外培养,细胞免疫荧光Nestin染色确定神经干细胞分离成功。分为IFN-γ处理组和PBS对照组,计算神经球体数量及面积。CCK-8法测定神经干细胞增殖能力。实时荧光定量测定Hippo-YAP信号通路主要组分YAP的mRNA水平。蛋白免疫印迹法测定Hippo信号通路主要组分YAP蛋白、Cyclin D1蛋白水平。结果形态学研究显示IFN-γ处理组的神经干球数量及面积与PBS对照组相比增加,差异均有统计学意义(P<0.01);CCK-8试剂盒检测细胞活力显示IFN-γ处理好细胞活力比PBS组提高,差异有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量结果显示IFN-γ处理YAP的mRNA数量增加,差异有统计学意义(P<0.01);蛋白免疫印迹结果显示IFN-γ处理组的YAP蛋白、Cyclin D1蛋白增加,与PBS对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Hippo-YAP通路在IFN-γ促进神经干细胞的增殖及自我更新能力中发挥重要作用,主要机制是YAP蛋白激活Cyclin D1蛋白,促进神经干细胞的增殖及提高自我更新能力。     

Wnt和Notch信号通路在大鼠创面愈合模型中的表达作用

目的观察Wnt和Notch信号通路在大鼠创面愈合模型中的表达及作用。方法取25只SD大鼠幼鼠,早期用溴脱氧尿苷（BrdU）标记表皮干细胞,注射BrdU 60 d后建立全层皮肤缺损创面模型。于大鼠致伤后0 d、7 d、14 d、21 d、30 d五个时间点分别各断颈处死5只取标本,利用免疫印迹、免疫组化和免疫荧光双标法观察创面愈合过程中Wnt1、β-catenin、c-Myc、Jagged1、Notch1、Hes1和Brdu的表达情况。结果免疫印迹结果显示Wnt和Notch信号通路成员在伤后表达上调,于伤后7 d达高峰,持续表达至伤后30 d。免疫组化结果显示,β-catenin开始在细胞膜低表达,伤后逐渐转变为表皮全层表达,且部分呈现异常核表达;伤后,Notch1在表皮全层表达逐渐上调,且在基底层表达上调显著。免疫荧光提示,BrdU/c-Myc和BrdU/Hes1双染阳性细胞率在伤后上升,于伤后7 d达高峰,持续表达至伤后30 d。结论 Wnt和Notch双信号通路可能通过调控表皮干细胞的增殖分化参与大鼠创面愈合过程。     

黄芩苷在乙型病毒性肝炎大鼠模型中调节肝功能损伤的机制研究

目的探究黄芩苷(Baicalin)抑制NF-κB p65的活化对乙型病毒性肝炎大鼠模型肝功能损伤的调节作用。方法选取90只SD大鼠,并分为健康对照组,乙肝病毒模型组、阳性对照(拉米夫定)组、黄芩苷25umol/L组、黄芩苷50umol/L组、黄芩苷100umol/L组各15只;阳性对照使用拉米夫定10 mg/kg处理,加药组分别采用对应剂量的黄芩苷处理,乙肝病毒模型组采用等剂量的生理盐水处理。检测各组大鼠ALT、AST、TC、TG、HDL及LDL含量;HE染色观察各组大鼠肝组织结构排列及损失情况;检测各组大鼠Caspase-3、Survivin的表达情况;油红O染色检测脂肪堆积情况;检测各组大鼠外周血中iNOS、IL-6、IL-10、IL-4的水平;使用免疫组化和Western blot检测NF-κB p65的核定位和核表达情况;分别加入大黄素和细菌内毒素脂多糖(LPS)处理大鼠,分别检测上述指标。结果相比健康对照组,乙肝病毒模型组、黄芩苷25umol/L组、黄芩苷50umol/L组AST、ALT、Caspase-3基因及蛋白表达、TC、TG、HDL、iNOS、IL-6水平显著升高,S...     

苦参碱通过抑制Lyn/Syk信号通路治疗大鼠过敏性哮喘

目的 探讨苦参碱（Mat）调节Lyn/Syk信号通路对过敏性哮喘大鼠免疫功能的影响。方法 随机取12只SD大鼠作为对照组（NC组）,其余大鼠参考先前文献通过卵清蛋白（OVA）造模。将造模成功的过敏性哮喘大鼠随机平分为Model组、Mat组（100 mg/kg Mat）、MLR-1023组（30 mg/kg Lyn/Syk信号通路激活剂MLR-1023）、Mat+MLR-1023组（100 mg/kg Mat+30 mg/kg MLR-1023）,每组12只。NC组、Model组给予等量的生理盐水,每天1次,持续4周。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）并进行嗜酸粒细胞计数;ELISA试剂盒检测血清和BALF液中细胞因子水平;HE染色检测肺组织病理变化;测定肺组织中组胺水平;Western blot检测Lyn/Syk通路相关蛋白水平。结果 NC组大鼠肺组织染色清晰,结构正常。Model组出现大量炎性细胞浸润现象,支气管周围嗜酸粒细胞增多,上皮细胞增大、脱落。Model组较NC组血清中TNF-α、IL-4、IL-5、IL-1β和LTD-4水平,BALF中IgE、OVA sIgE、嗜酸粒细胞数量...     

p-ERK1/2-AP-1通路在姜黄素抗大鼠糖尿病神经病理性痛中的作用

目的: 观察p-ERK1/2-AP-1通路在姜黄素(Cur)抗大鼠糖尿病神经病理性痛(DNP)中的作用。方法: 雄性SD大鼠96只,随机分为4组(n=24):正常对照组、DNP组、DNP+溶剂组(DNP+Sol组)和DNP+Cur 100 mg/kg组(DNP+Cur组)。除正常对照组外,其余各组采用腹腔注射链唑霉素75 mg/kg的方法制备DNP模型,造模成功后每天1次腹腔注射相应的溶剂或Cur,持续2周。于造模前2 d、造模后14 d、腹腔给药后3、7、14 d时测定机械缩足痛阈(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)和非空腹尾静脉血糖值,取脊髓腰膨大及L₄/L₅背根神经节(DRG),采用免疫组化及Western blotting法测定脊髓背角和DRG p-ERK1/2的表达,电泳迁移率变动分析AP-1的表达。结果: 与正常对照组相比,DNP组各时点MWT降低、TWL缩短;血糖值升高;脊髓背角及DRG p-ERK1/2均出现表达上调(P<0.05);脊髓背角AP-1表达上调(P<0.05)。与DNP组相比,DNP+Cur组在给药后7 d MWT回升、TWL延长;在给药后14 d脊髓背角及DRG p-ERK1/2、脊髓背角AP-1表达下调(P<0.05),但并不影响血糖水平。结论: Cur可减轻大鼠糖尿病神经病理性痛,其机制可能与抑制脊髓背角和DRG神经元p-ERK1/2-AP-1通路激活有关。     

基于AMPK/eNOS/NF-κB信号通路观察丁苯酞对脑梗死大鼠的保护作用

目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/核转录因子κB(NF-κB(AMPK/eNOS/NF-κB信号通路)探讨丁苯酞(NBP)对脑梗死大鼠的保护机制。方法将80只12～15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组(n=20):假手术组(sham组)、模型组、丁苯酞组(NBP组)和阳性对照药物尼莫地平组(NMDP组),采用线栓法构建大鼠永久性中动脉栓塞模型,造模手术结束3h后,NBP组、NMDP组分别腹腔注射20 mg/kg NBP和NMDP,注射计量10 mL,每日定点注射1次,sham和模型组腹腔给予等量生理盐水,连续给药14 d。第14天给药后,对大鼠进行神经功能缺损程度(NDS)评分,依次采用激光散斑成像、TTC染色、尼氏染色、ELISA法,免疫荧光法检测各组大鼠大脑皮层血流变化、脑梗死体积、脑组织内神经元的损伤、脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平、NF-κB的核移位,Western blot检测p-AMPK、p-eNOS和NF-κB蛋白的表达水平。结果与sham组相比,模型组大鼠神经功能损伤评分明显升高,大脑皮层血流灌注量明显减少,脑梗死体积明显增大,神经细胞凋亡率,IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平,NF-κB入核的免疫荧光强度,p-AMPK、p-eNOS、NF-κB蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,NBP组、NMDP组神经功能损伤评分明显下降,大脑皮层血流灌注量明显增加,脑梗死体积明显减小,神经细胞凋亡率,IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平,NF-κB入核的免疫荧光强度,NF-κB蛋白表达水平均降低,p-AMPK、p-eNOS表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);NBP组和NMDP组相比,各指标相比组间差异无统计学意义(P0.05)。结论丁苯酞对脑梗死大鼠的保护作用,与AMPK/eNOS/NF-κB信号通路有关,其机制可能是AMPK/eNOS被激活,抑制NF-κB的活化,从而减轻炎症反应,发挥对脑梗死后的脑组织的保护作用。     

姜黄素通过ATK/FoxM1信号通路调控胃癌干细胞增殖及凋亡

BACKGROUND:Curcumin has crucial inhibitory effects on various cancer cells and cancer stem cells. However, its effect on gastric cancer stem cells and the underlying mechanism of this effect are unclear. OBJECTIVE:To explore the effect of curcumin on gastric cancer stem cells and the underlying mechanism. METHODS:Tumor sphere-forming assay and gastric cancer stem cell markers (EpCAM and CD44) were used to separate gastric cancer stem cells from gastric cancer SGC7901 cell lines. Effects of curcumin on the proliferation and apoptosis of gastric cancer stem cells were determined by MTT and flow cytometry analysis, respectively. Western blot analysis was used to detect the expression levels of FoxM1, p-AKT, and AKT. LY294002, an inhibitor of the PI3K/AKT pathway, was used to determine the regulatory relationship between AKT and FoxM1 signaling pathways. RESULTS AND CONCLUSION:The EpCAM+/CD44+ gastric cancer stem cells were successfully isolated from SGC7901 cells. MTT assay showed that curcumin inhibited the proliferation of gastric cancer stem cells, while flow cytometry analysis showed that curcumin induced apoptosis in gastric cancer stem cells. In addition, the expression levels of p-AKT and FoxM1 were decreased by curcumin treatment. After being treated by LY294002, the expression levels of p-AKT and FoxM1 were down-regulated markedly. In conclusion, curcumin can inhibit cell proliferation and induce apoptosis in gastric cancer stem cells via the ATK/FoxM1 signaling pathway.     

电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制研究

目的 探讨电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制.方法 70只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=30)、治疗组(n=20)与中和组(n=10),采用氯化锂联合戊四氮致构建癫痫大鼠模型,观察癫痫大鼠认知功能、癫痫发作频次、持续时间;TUNEL方法检测癫痫大鼠海马区凋亡程度...     

黄精通过TGF-β1/Smad信号通路对肝纤维化模型大鼠肝脏结构病理改善作用

目的 探讨关于黄精对大鼠肝脏纤维化的干预效果及对肝脏的保护作用.方法 研究对象来源选取Wistar大鼠,对实验动物血样及组织进行分析;样本总数45只;分为正常对照组、肝纤维化模型组以及黄精治疗干预组,每组15只.测定大鼠肝外周血TG F-β水平,使用ELISA法完成;使用免疫组化法对肝组织标本中的TGF-β1、Smad...