miR-146a-5p通过调控Notch2表达对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌损伤的影响

目的:探究miR-146a-5p调控Notch2表达对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、MI/R组、MI/R+mimic mock组、MI/R+mimic组,构建MI/R大鼠模型并使用相应的慢病毒处理,检测各组大鼠心脏LVEDD、LVESD和心肌梗死面积,RT-PCR检测miR-146a-5p基因表达水平,ELISA检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,TUNEL检测细胞凋亡,免疫组化检测Ki67阳性细胞率,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Notch2、Hes1蛋白水平。将细胞分为Control组、OGD/R组、OGD/R+mimic mock组、OGD/R+mimic组、OGD/R+pc-Notch2组、OGD/R+mimic+pc-Notch2组,缺糖缺氧复糖复氧诱导心肌细胞损伤并...     

沉默miR-26a减轻缺血/再灌注大鼠心肌损伤

目的 探讨微核糖核酸(miR-26a)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的影响.方法 将大鼠随机分为对照组(n=20)、I/R组(n=20)和siRNA组(n=20).建立大鼠I/R模型前7 d,尾静脉注射miR-26a siRNA沉默内源性miR-26a.超声心动图检测心脏射血分数(EF％)和缩短分数(FS％);2...     

纳布啡通过激活MAPK/ERK信号通路减轻心肌缺血再灌注大鼠心脏损伤

目的：探究纳布啡（NAL）对心肌缺血再灌注（MIR）大鼠心脏损伤的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的关系。方法：经在体冠脉阻断法构建MIR大鼠模型,随机分为MIR组、NAL组和NAL+PD98059[MAPK激酶1/2(MEK1/2)抑制剂]组,另设假手术（sham）组,每组10只。系活结30min后,各组大鼠给予相应的生理盐水、2.5 mg/kg NAL和10 mg/kg PD98059腹腔注射。2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）、HE及TUNEL染色分别检测心肌梗死面积、病理变化及细胞凋亡情况;试剂盒检测血清肌酸激酶（CK）、心肌钙蛋白T(cTnT)和乳酸脱氢酶（LDH）水平,以及心肌丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、活性氧（ROS）和总抗氧化能力（T-AOC）水平;Western blot检测心肌凋亡相关蛋白及MAPK/ERK信号通路相关蛋白水平。结果：相比于sham组,MIR组心肌纤维断裂,心肌细胞变形,可见炎症细胞浸润,心肌梗死面积增大,细胞凋亡率,心肌cleaved caspase-3蛋白水平,血清CK、cTnT和...     

小檗碱减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨小檗碱(BBR)减轻大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的作用及其与JAK2/STAT3信号通路的关系。方法雄性SD大鼠(250只)随机分为7组(n=36):假手术组(sham)、sham+BBR组、sham+AG490(AG,JAK2/STAT3通路抑制剂)组、MI/R+溶剂组(MI/R+V)、MI/R+BBR组、MI/R+BBR+AG组、MI/R+AG组。常规结扎大鼠冠状动脉左前降支行心肌缺血再灌注手术,缺血30 min后再灌注4 h,用Western blot法检测心肌JAK2、STAT3磷酸化水平及心肌凋亡相关蛋白表达,再灌注6 h后检测心肌细胞凋亡率、梗死面积及氧化应激相关指标,再灌注72 h后检测心功能。结果 BBR可显著改善心肌缺血再灌注术后心功能并减轻心肌凋亡及梗死,这种保护作用可被AG阻断(均P0.05)。BBR治疗还可显著提高心肌JAK2及STAT3磷酸化水平,抑制凋亡相关信号分子表达,这种作用也被AG阻断(P0.05)。结论 BBR可显著减轻大鼠MI/R损伤后心肌梗死及凋亡水平,改善心功能,JAK2/STAT3可能介导此作用。     

柚皮素对心肌缺血/再灌注损伤大鼠PI3K/AKT信号通路和内质网应激及其相关凋亡通路的影响

目的:观察柚皮素对缺血/再灌注(I/R)大鼠心脏损伤的影响,并探讨柚皮素的作用是否涉及PI3K/AKT信号通路和内质网应激及其相关凋亡通路.方法:48只SD大鼠按随机数字表法分成假手术组(sham组)、模型组(I/R组)、柚皮素处理组(NAR组)和柚皮素处理+LY294002组(NL组).结扎大鼠冠状动脉左前降支30 ...     

黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:研究黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:采用线栓法构建大鼠脑缺血再灌注损伤模型,取30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄角颗粒组,并按分组给予相应处理。采用Zea Longa评分法对各组大鼠进行神经功能评分,TTC染色检测各组大鼠脑梗死体积百分比,HE染色观察各组大鼠脑组织病理形态,TUNEL染色法检测各组大鼠脑细胞凋亡率,Western blot检测各组大鼠脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠的神经功能缺损程度和神经细胞损伤程度明显加重(P0.05);脑梗死体积百分比和脑细胞凋亡率显著上升(P0.05);脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平显著上调(P0.05)。与模型组相比,黄角颗粒组大鼠的神经功能缺损程度和神经细胞损伤程度明显减轻(P0.05);脑梗死体积百分比和脑细胞凋亡率显著下降(P0.05);脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平显著下调(P0.05)。结论:黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路的激活相关。     

人参炔醇通过Nrf2/ARE通路调控小鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 阐明人参炔醇(Panaxynol,PNN)对小鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其可能机制.方法 30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组(Sham)、MIRI组和MIRI+PNN组,采用结扎冠状动脉方法建立小鼠MIRI模型,术后给予PNN干预,每日一次,连续1周.实验第7天,收集小鼠心肌组织,称取小鼠心脏重量;HE染色观察组织病理学改变;Western blot检测氧化应激和细胞凋亡相关蛋白表达.结果 MIRI组小鼠小鼠心脏重量和心脏重量指数明显升高,心肌间质出现明显的炎症细胞浸润,促氧化应激蛋白MDA5和IRE-α表达升高,而SOD-1蛋白表达降低,同时促细胞凋亡蛋白Bax和Caspase3表达升高,而Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05).PNN处理能显著降低MIRI诱导的小鼠心脏重量和心脏重量指数,减少心肌间质炎症细胞浸润,降低MDA5、IRE-α、Bax和Caspase3蛋白表达,提高SOD1和Bcl-2蛋白表达.此外,PNN处理还能显著增加Nrf2蛋白表达,降低ARE蛋白表达(P＜0.05).结论 NN处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/ARE信号通路相关.     

EdCC通过MEK-ERK信号通路减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤

 目的: 研究子宫内膜干细胞(endometrial stem cells,EnSCs)来源细胞因子“鸡尾酒”(EnSC-derived cytokine cocktail,EdCC)对心肌缺血再灌注损伤的影响及MEK-ERK信号通路的作用。方法: 建立小鼠心肌缺血再灌注损伤模型,用TTC/Evans blue染色评估心梗面积,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测ERK1/2磷酸化水平和cleaved caspase-3表达。结果: EnSCs具有间充质干细胞特性,表达CD90,不表达CD34和CD45。EdCC的表皮生长因子(EGF)含量为(6 811±312)ng/g蛋白。经尾静脉注射EdCC可显著升高心肌ERK1/2磷酸化水平,明显降低梗死面积,减少梗死周边区凋亡细胞数目,抑制capase-3活化。MEK1特异性阻断剂PD98059(5 mg/kg)抑制EdCC介导的ERK1/2磷酸化,并抵消上述心肌保护效应。EGF受体特异性阻断剂AG-1487(6 mg/kg)只能部分抵消EdCC的心肌保护作用,而单纯注射EGF不能缩小梗死面积。结论: EdCC通过激活MEK1-ERK1/2信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤,EGF受体是该通路重要组成部分。该结果对目前成体干细胞移植治疗模式——从细胞转移到细胞因子,具有重要的理论意义。     

Endothelial cysteinyl leukotriene 2 receptor expression mediates myocardial ischemia-reperfusion injury

Cysteinyl leukotrienes (CysLTs) have been implicated as inflammatory mediators of cardiovascular disease. Three distinct CysLT receptor subtypes transduce the actions of CysLTs but the role of the endothelial CysLT2 receptor (CysLT2R) in cardiac function is unknown. Here, we investigated the role of CysLT2R in myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury using transgenic (tg) mice overexpressing human CysLT2R in vascular endothelium and nontransgenic (ntg) littermates. Infarction size in tg mice increased 114% compared with ntg mice 48 hours after I/R; this increase was blocked by the CysLT receptor antagonist BAY-u9773. Injection of 125 I-albumin into the systemic circulation revealed significantly enhanced extravasation of the label in tg mice, indicating increased leakage of the coronary endothelium, combined with increased incidence of hemorrhage and cardiomyocyte apoptosis. Expression of proinflammatory genes such as Egr-1, VCAM-1, and ICAM was significantly increased in tg mice relative to ntg controls. Echocardiographic assessment 2 weeks after I/R revealed decreased anterior wall thickness in tg mice. Furthermore, the postreperfusion time constant tau of isovolumic relaxation was significantly increased in tg animals, indicating diastolic dysfunction. These results reveal that endothelium-targeted overexpression of CysLT2R aggravates myocardial I/R injury by increasing endothelial permeability and exacerbating inflammatory gene expression, leading to accelerated left ventricular remodeling, induction of peri-infarct zone cellular apoptosis, and impaired cardiac performance.     

促红细胞生成素减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨促红细胞生成素在心肌缺血再灌注损伤中对细胞外基质代谢的调节作用及其机制。方法构建Langendroff大鼠离体心脏缺血再灌注模型,结合Western blot观测在促红细胞生成素及相应信号传导通路阻滞剂干预下,左室舒张末压(LVEDP)、梗死面积、MMPs及胶原Ⅰ/Ⅲ表达的变化。结果促红细胞生成素可改善LVEDP[(19.8±0.2)mmHgvs(35.9±0.2)mmHg,IR组vsEPO+IR组,P<0.05],减少梗死面积(35.26%±7.1%vs62.70%±7.2%,EPO+IR组vsIR组,P<0.05)。在缺血再灌注损伤的过程中MMP2及MMP9表达均显著升高,而TIMP-4则显著减低。外源性EPO可逆转MMPs的激活。此外EPO则可促进胶原Ⅲ、Ⅰ的表达,并且这一保护作用可被MEK-Erk信号通路阻滞剂所阻断。结论EPO通过MEK-Erk信号传导通路促进胶原Ⅰ/Ⅲ的合成,抑制MMPs的激活,抑制细胞外基质降解,在一定程度上减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

PI3K/AKT信号通路在全肝缺血再灌注大鼠肺损伤中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/AKT通路在大鼠全肝缺血再灌注肺损伤中作用。方法 本实验分两部分。(1)36只大鼠分别于肝缺血前与再灌注后不同时点处死取肺。（2）12只大鼠分成Wortmannin组与模型对照组。分别应用Western blot、原位末端转移酶(TUNEL)法与免疫组化法检测肺AKT、磷酸化AKT（p-AKT）表达、细胞凋亡与增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果（1）与缺血前相比,缺血再灌注后肺细胞凋亡指数显著增高; p-AKT/AKT与PCNA阳性指数呈双相变化;肺病理改变严重。（2）p-AKT/AKT与PCNA阳性指数成正相关;与凋亡指数呈负相关。（3)与模型对照组相比,Wortmannin组p-AKT/AKT与PCNA阳性指数显著降低,细胞凋亡指数显著增高,病理改变加重。结论 PI3K/AKT通路可能通过抑制凋亡、促进增殖对全肝缺血再灌注肺损伤发挥保护作用。     

Trx2/ASK1信号通路介导天疱疮诱导的线粒体损伤及机制

目的 研究Trx2/ASK1信号通路在天疱疮诱导线粒体损伤的调控机制.方法 在重庆医科大学附属第一医院收集天疱疮(PV)和健康血清样本,PV及健康患者血清培养的HACAT细胞,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2蛋白表达;流式细胞术检测天疱疮患者血清培养对细胞凋亡率的影响;ELISA实验检测天疱疮...     

尼可地尔激活RISK通路减轻高胆固醇大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的探讨尼可地尔对高胆固醇大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其可能机制。方法应用高胆固醇饮食喂养健康雄性Wistar大鼠8周建立高胆固醇大鼠模型,应用Langendorff灌流装置采用全心缺血30min和再灌注120min建立离体心脏缺血/再灌注(I/R)模型。在缺血前或再灌注即刻灌注含有尼可地尔的KH液10min以制备尼可地尔药物预处理(NIC-pre)与后处理(NIC-post)模型。通过TTC染色测量心肌梗死面积、TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测RISK通路p-Akt和p-Erk1/2蛋白表达水平。结果与I/R对照组相比,NIC-30pre组与NIC-30post组均可降低心肌梗死面积和心肌细胞凋亡率,并显著上调p-Akt和pErk1/2的表达水平。结论尼可地尔减轻高胆固醇大鼠心肌缺血/再灌注损伤,与其激活RISK通路相关。     

Glutamine ameliorates intestinal ischemia-reperfusion Injury in rats by activating the Nrf2/Are signaling pathway

Ischemia-reperfusion (I/R)-mediated intestinal mucosal injury is usually induced by oxygen-derived toxic free radicals from the xanthine oxidase system after reperfusion, but the detailed molecular mechanisms underlying glutamine protection is still unclear. This study aims to elucidate whether glutamine prevents damage to the intestinal mucosa after I/R in rats and to investigate signaling by the Nrf2/ARE pathway induced by GLN in a rat model. Our results revealed that Glutamine pretreatment reduced jejunum injury and microvascular hyper-permeability induced by I/R. MDA level significantly increased while the SOD and GSH-Px levels decreased in the I/R group compared to the sham group and the GLN-I/R group. Both the mRNA and protein levels of the Nrf2 and HO-1 were significantly elevated by GLN pretreatment when compared to the I/R group. GLN treatment also elevated Bcl-2 levels, and accordingly suppressed apoptotic damage in the jejunum cells shown by decreased cleaved caspase-3 level. Mechanistic investigation revealed that GLN treatment augmented binding of Nrf2 onto Bcl2 gene promoter. These results indicate that glutamine has protective effects on I/R in vivo by activating the Nrf2/ARE signaling pathway to inhibit ROS production and reduce intestinal apoptosis.     

长托宁抑制JAK2/STAT3信号通路缓解脑缺血再灌注大鼠脑内炎症反应

目的 探讨长托宁对脑缺血性再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对JAK2/STAT3信号通路的影响.方法 采用线栓法制备脑缺血性再灌注(I/R)大鼠模型,随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注模型组(I/R)、长托宁治疗组(PH);对各组大鼠的神经功能障碍进行评分;检测各组大鼠脑梗死体积以及脑含水量;Nissl染色各组大鼠...