血管内皮生长因子B在牦牛间脑和脑干相关组织的表达与定位

目的 了解牦牛间脑和脑干不同区域血管内皮生长因子B(VEGF-B)的表达及分布特征，探讨其与低氧适应性之间的关系。方法 选取5头健康牦牛，按照脑大体解剖结构进行分区并采集间脑和脑干相关组织，具体包括垂体、丘脑、下丘脑、延髓和脑桥5个部位。利用Real-time PCR、Western blotting及免疫组织化学技术对VEGF-B在牦牛间脑和脑干相关区域的表达与定位进行研究。结果 牦牛间脑和脑干相关组织中VEGF-B mRNA表达水平最高的部位为垂体，显著高于其他部位(P<0.05),其余表达水平依次为下丘脑、丘脑和延髓，脑桥表达量最低；牦牛间脑和脑干相关组织VEGF-B蛋白表达水平除丘脑高于下丘脑外，其余部位表达水平与mRNA表达趋势一致。免疫组织化学结果显示，与阴性对照组相比，VEGF-B蛋白阳性物质主要分布于上述各类细胞的胞质。其中，垂体中VEGF-B阳性着色主要表达于嗜酸性细胞中；丘脑和下丘脑中VEGF-B阳性着色主要集中于多形细胞；延髓和脑桥中VEGF-B阳性反应主要集中在神经元胞体中。结论 VEGF-B蛋白在牦牛间脑和脑干中均有表达，可能与其所担负的抗细胞凋亡、“生...     

卵泡刺激素与卵泡刺激素及黄体生成素共同干预对玻璃化冻存小鼠卵巢组织血管内皮生长因子表达的影响

目的 通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织卵泡刺激素（FSH）及FSH和黄体生成素（LH）共同干预,观察冻融卵巢组织的形态学改变以及两种激素干预对冻存卵巢组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,寻找最佳的提高冻融卵巢组织卵泡存活及VEGF表达的激素干预方式。 方法 4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组（CG）,玻璃化冻存对照组（VCG）,300IU/L FSH全程干预玻璃化冻存组（OG-FSH）,以及150IU/L FSH+150IU/L LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH),每组30个卵巢样本。通过常规组织学、Western blotting技术,观察并分析各组卵巢组织形态结构改变及VEGF蛋白表达量;通过荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测VEGF mRNA表达情况。 结果 OG-FSH+LH 组正常卵泡百分比最高,且显著高于OG-FSH组（P<0.05）;VEGF蛋白表达量在OG-FSH+LH组显著高于OG-FSH组（P<0.05）;荧光定量PCR检测结果表现为VEGF mRNA表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组,最低是VCG组（P<0.05）。 结论 玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式较单独FSH干预具有更高正常卵泡百分比和更佳的VEGF蛋白表达。     

血浆血管内皮生长因子及血管紧张素Ⅱ与糖尿病肾病的关系

目的:检测糖尿病患者血浆血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)和血管内皮生长因子(VEGF)浓度变化,并探讨二者之间关系及其在糖尿病肾病发生、发展过程中的作用。方法:98例Ⅱ型糖尿病患者分为两组,43例为糖尿病肾病组(DN),55例为糖尿病非肾病组(NDN)。分别测定各组患者血浆中血管紧张素Ⅱ、血管内皮生长因子、糖化血红蛋白(GHbAlc)及尿微白蛋白(UmALB)的含量。结果:DN组和NDN组患者ATⅡ、VEGF、GHbAlc及UmALB水平均明显高于正常对照组(P＜0.01);DN组ATⅡ、VEGF及UmALB明显高于NDN组(P＜0.01),但是GHbAlc水平在两组之间无显著差异(P＞0.05);各组糖尿病患者血浆ATⅡ和VEGF水平呈显著正相关(r=0.465,P＜0.05),血浆VEGF水平与尿微白蛋白呈高度正相关(r=0.540,P＜0.01)。结论:糖尿病患者血浆ATⅡ和VEGF明显升高,二者之间存在相互作用关系,可能共同参与糖尿病肾病的发生和发展过程。     

2型糖尿病肾病患者血管内皮生长因子检测的临床意义

目的 :探讨了 2型糖尿病肾病患者血管内皮生长因子的水平。方法 :应用酶联双抗体夹心法测定了 31例无糖尿病肾病和 5 5例糖尿病肾病患者血管内皮生长因子含量 ,并与 35名正常健康人作对照。结果 :2型糖尿病无肾病组和有肾病组血管内皮生长因子水平均高于正常人组 ,尤以糖尿病肾病为甚 (p <0 0 1 ) ,糖尿病肾病组与无糖尿病肾病组比较 ,差异也有显著性 (p <0 0 1 )。 结论 :2型糖尿病肾病的发生与发展与血管内皮生长因子水平密切相关。     

色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子在糖尿病大鼠肾脏的不平衡表达

目的检测色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）在糖尿病大鼠肾脏的表达，探讨其在糖尿病肾病（DN）发生发展中的作用。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组（NC）、糖尿病模型组（DM）。4、8周末，检测血糖、糖化血红蛋白、肾重指数、尿白蛋白排泄率，免疫组织化学法检测肾脏PEDF、VEGF的表达。结果4、8周末，DM组大鼠肾脏PEDF的表达较NC组明显减少（P〈0．01）；VEGF的表达较NC组明显增多（P〈0．01）；肾脏PEDF的表达与VEGF明显负相关（r=-0．823，P〈0．01）。结论PEDF和VEGF在肾脏的不平衡表达可能参与了DN的发病。     

PPAR-γ激动剂对2型糖尿病大鼠肾脏血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨PPAR-γ激动剂罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏VEGF表达的影响。方法采用长期高脂饮食加小剂量链脲菌素（STZ）一次性腹腔注射，建立2型糖尿病大鼠模型，光镜及电镜行肾脏形态学检查；RT—PCR测定VEGF mRNA表达，VEGF免疫组化染色观察VEGF蛋白水平变化。结果2型糖尿病大鼠肾脏VEGFmRNA及其蛋白质表达明显高于正常对照组（均P〈0．01），同时大鼠肾脏出现糖尿病肾病的病理变化；PPAR-γ激动剂罗格列酮干预后，肾组织VEGF mRNA及其蛋白质表达较2型糖尿病组降低（均P〈0．01）,同时肾脏病理变化也得到明显改善。结论PPAR-γ激动剂罗格列酮可能通过抑制肾脏VEGF表达，延缓糖尿病肾病的发生。     

血管内皮生长因子在梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化中的变化

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factorVEGF)是一种多功能细胞因子。目前认为VEGF与糖尿病肾病蛋白尿的形成有关,在5/6肾切除大鼠外源性VEGF具有保护肾功能的作用。本实验利用大鼠单侧输尿管结扎(UUO)模型观察VEGF在肾间质纤维化中的变化。1材料与方法1.1实验动     

低分子肝素对肾病综合征大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨低分子肝素（LMWH）对肾病综合征(NS)大鼠血管内皮生长因子（VEGF）的影响及其对肾脏保护作用的可能机制。方法: 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、肾病综合征模型组、肾病综合征模型LMWH治疗组，分别于第2、3、4周末留取24 h尿液，测定尿蛋白，并离心沉淀备测VEGF；同时腹主动脉取血测定血清白蛋白，并离心沉淀备测VEGF。结果:NS大鼠尿液、血清中VEGF水平明显升高，尿液VEGF与24 h尿蛋白水平呈显著正相关。用LMWH治疗后血清、尿液VEGF水平减低，24 h尿蛋白减少，血清白蛋白升高。结论:LMWH可降低NS大鼠血清和尿液VEGF浓度，可能是其保护肾脏的机制之一。     

菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响

目的 探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 48只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、PRD组和导升明组,每组12只.糖尿病模型组、PRD组和导升明组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.模型成功建立...     

低能量氦氖激光照射增加大鼠心肌血管内皮生长因子的表达

目的　探求低能量氦氖激光照射大鼠心前区 ,对心肌血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。　方法　采用RT PCR和免疫组织化学染色图像分析的方法 ,实验动物分对照组和激光照射组 ,每组 8只 ,照射组的照射剂量为 6 0 5J cm2 。　结果　VEGF免疫组织化学染色示照射组心肌微血管内皮细胞的着色较重 ,其平均光密度值为 0 2 4 6± 0 0 15 ,明显高于对照组的 0 2 18± 0 0 12 (t=9 0 5 ,P <0 0 5 ) ;心肌组织VEGF16 5的RT PCR产物表达显示 ,激光照射组的VEGF16 5mRNA表达为对照组的 2 79倍。　结论　以剂量为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,心肌微血管及心肌组织VEGF的表达明显增强。     

血管内皮生长因子、细胞间黏附分子1在糖尿病大鼠肾小球的表达

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和细胞间黏附分子1(1CAM-1)在糖尿病肾病(DN)发生机理中的作用。方法 采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠模型，观察大鼠肾小球肥大、肾功能和24h尿蛋白改变以及用免疫组织化学和计算机图像分析技术定位、半定量检测VEGF和ICAM—1在DM大鼠肾小球的表达。结果 VEGF和ICAM—1在糖尿病大鼠肾小球中均有不同程度表达，VEGF主要分布于肾小球脏层上皮细胞的脑浆之中，ICAM—1主要分布于肾小球内皮细胞和系膜细胞的脑浆中。VEGF、ICAM-1水平与蛋白尿和肾小球肥大呈正相关关系。结论 DM大鼠肾小球VEGF和ICAM-1的升高可能参与了DN的疾病发展过程，估计是糖尿病肾病发生机理之一。     

微小RNA-126靶向调控血管内皮生长因子对新生大鼠缺氧-缺血性脑病神经元损伤的影响

目的 探讨微小RNA-126（miR-126）靶向调控血管内皮生长因子（VEGF）对新生大鼠缺氧-缺血性脑病（HIE）神经元损伤的影响。 方法 选择清洁级新生7日龄SD雄性大鼠随机分为4组,假手术组（A组）、HIE组（B组）、HIE+阴性对照组（C组）和HIE+miR-126过表达组（D组）,每组18只。建立HIE模型后进行大鼠神经功能缺损评分及脑组织含水量测定;采用HE染色光学显微镜下观察各组大鼠脑海马组织CA1区病理形态学改变;采用Real-time PCR检测大鼠脑组织miR-126和VEGF的表达水平;采用免疫组织化学法检测各组大鼠脑海马组织CA1区VEGF蛋白表达情况;采用双荧光素酶靶标实验验证miR-126与VEGF基因的靶向关系;采用流式细胞术检测脑海马组织神经元凋亡水平;采用Western blotting检测各组大鼠脑组织剪切Caspase-3（cleaved-Caspase-3）蛋白表达水平。 结果 A组大鼠无神经功能损伤,神经行为学评分为0分,脑组织无损伤;B组和C组大鼠神经行为学评分分别为（2.50±0.55）分和（2.33±0.82）分,脑组织损伤明显;D组大鼠神经行为学评分为（1.50±0.55）分,脑组织损伤有改善;与A组相比,B组、C组和D组大鼠神经行为学评分（P<0.05）及脑组织含水量（P<0.05）升高;与B组相比,D组大鼠神经行为学评分（P<0.05）及脑组织含水量（P<0.05）降低。与A组相比,B组和C组大鼠脑组织miR-126的表达水平均显著降低,VEGF mRNA和蛋白表达水平、脑海马组织神经元凋亡率及脑组织cleaved-Caspase-3的表达水平均显著升高（P<0.05）;与B组相比,D组大鼠miR-126的表达水平均显著升高,VEGF mRNA和蛋白表达水平、脑海马组织神经元凋亡率及脑组织cleaved-Caspase-3的表达水平均显著降低（P<0.05）。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-126和VEGF能够靶向结合。 结论 过表达miR-126后可降低脑海马组织神经元凋亡水平,改善HIE的发展,其作用机制可能与miR-126靶向抑制VEGF基因表达有关。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞自噬的影响及相关机制

目的 探讨雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠的肾脏细胞自噬的影响，并分析其相关分子机制。方法 采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法构建糖尿病肾病大鼠模型。将30只SD大鼠依据随机数表法分为5组，对照组、模型组、0.1 mg/kg药物组、0.5 mg/kg药物组和1.0 mg/kg药物组，每组各6只。糖尿病肾病模型建立成功后，0.1 mg/kg药物组、0.5 mg/kg药物组和1.0 mg/kg药物组分别灌胃0.1、0.5和1.0 mg/kg雷公藤多苷，对照组和模型组给予等量的生理盐水。比较各组间肾功能、氧化应激指标的水平。采用Western blotting法检测各组间磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3β-Ⅰ（LC3-Ⅰ）、微管相关蛋白1轻链3β-Ⅱ（LC3-Ⅱ）及Beclin1蛋白表达水平。使用Real-time PCR技术检测各组间LC3及Beclin1 mRNA表达水平。结果 与对照组比较，模型组尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、尿蛋白（Pro）及丙二醛（MDA）水平均升高，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及过氧化氢酶(CAT)水平均明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，药物组BUN、Scr、Pro及MDA水平均明显降低，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及CAT水平均明显升高（P<0.05），呈剂量依赖性。与对照组比较，模型组的肾组织p-mTOR蛋白表达水平升高，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin1蛋白表达水平降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，各剂量药物组p-mTOR蛋白表达水平降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平显著升高（P<0.05），呈剂量依赖性，0.5 mg/kg及1.0 mg/kg药物组Beclin1蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）。与对照组比较，模型组的肾组织，LC3-Ⅱ及Beclin1 mRNA表达水平降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，各剂量药物组LC3及Beclin1 mRNA表达水平显著升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 雷公藤多苷对糖尿病性肾病大鼠肾功能具有一定的保护作用，其机制可能与抑制氧化应激和激活自噬功能有关。     

血管内皮生长因子和血小板反应蛋白-1在大鼠胸主动脉瘤中的表达 

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）及血小板反应蛋白-1（TSP-1）在实验性大鼠胸主动脉瘤中的表达及其意义。方法 30只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和手术组,每组15只。采用氯化钙（CaClSUB>2/SUB>）诱导法制备胸主动脉瘤模型,于术后4周取外敷CaCl2段胸主动脉。HE染色及地衣红染色观察胸主动脉组织学改变;免疫组织化学和免疫印迹法检测动脉瘤壁VEGF和TSP-1的表达。结果 免     

RTN1A通过ERK信号诱导肾小管上皮细胞分泌VEGF和IL-8并促进糖尿病肾病肾纤维化

目的:探讨网状蛋白1A(RTN1A)对肾小管上皮细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素8(IL-8)及糖尿病肾病(DN)肾纤维化的影响及潜在机制。方法:构建DN小鼠模型,并检测其血糖、肾脏指数、尿微量白蛋白和肌酐清除率进行验证; Western blot检测RTN1A、p-ERK、ERK、细胞因子VEGF和IL-8以及肾脏纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN)的表达;高糖处理人肾小管上皮细胞株HK-2模拟体内DN细胞,Western blot和ELISA检测ERK信号蛋白、纤维化标志物及细胞因子分泌变化;高糖联合沉默RTN1A或ERK抑制剂PD98059处理24 h,检测细胞因子的分泌和纤维化蛋白的变化。结果:DN小鼠模型中血糖、肾脏指数、尿微量白蛋白和肌酐清除率均明显高于对照组,说明DN模型构建成功; DN模型小鼠中RTN1A及其下游蛋白p-ERK的水平显著增加,并且细胞因子VEGF和IL-8及纤维化标志物α-SMA和FN也显著增加;高糖处理HK-2细胞后,细胞中RTN1A及其下游蛋白p-ERK水平升高,细胞因子VEGF和IL-8及纤维化标志物α-SMA和FN也显著升高;而ERK抑制剂PD98059处理与沉默RTN1A结果一致,p-ERK、VEGF、IL-8、α-SMA和FN均明显降低。结论:RTN1A可能与DN发生发展有关。沉默RTN1A可能通过ERK信号抑制DN肾炎症反应及纤维化。RTN1A可能是一个有效的治疗靶点。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(Vascular endothelial growth factor receptor1,VEGFR1)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症中的作用机制.方法:采用免疫组织化学及Western blot方法检测34例异位症患者在位内膜、异位内膜(内异症组)及34例正常内膜(对照组)组织中VEGF及其受体VEGFR1蛋白的定位及表达.结果:异症组在位及异位子宫内膜组织腺上皮细胞及间质细胞中均有VEGF及VEGFR1蛋白表达,且均高于同期对照组内膜,差异有统计学意义;对照组分泌期内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达高于增生期,呈现周期性变化,而内异症组在位及异位内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达失去周期性变化,分泌期与增生期均高表达,差异无统计学意义.Western blot检测结果与免疫组化结果一致.结论:内异症患者在位及异位内膜组织中VEGF、VEGFR1蛋白高表达可能与内异症的发生发展有关.     

厄洛替尼减轻STZ诱导的糖尿病肾病模型大鼠的肾损伤

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂厄洛替尼(erlotinib)对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及机制。方法:采用大剂量(55 mg/kg)链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导大鼠糖尿病肾病模型,以1周后血糖值16.7 mmol/L的大鼠为造模成功的标准。将糖尿病大鼠随机分为2组[STZ组和STZ+erlotinib(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))组],并以正常大鼠为对照组(control组)。Erlotinib处理4周后,检测大鼠空腹血糖、血清肌酐和24 h尿蛋白含量的变化;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变;Western blot检测各组肾脏组织中EGFR、p-EGFR、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad2/3、p-Smad2/3、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)和纤连蛋白(fibronectin)的蛋白水平;活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测各组肾脏组织中ROS和MDA水平。结果:与control组相比,STZ组血糖、24 h尿蛋白和血清肌酐水平均显著升高(P0.01),肾组织形态学出现异常变化;与STZ组相比,STZ+erlotinib组的血糖、24 h尿蛋白水平和血清肌酐水平显著降低(P0.05),肾小球结构恢复正常,肾小球系膜细胞增生程度明显减弱。厄洛替尼明显抑制了STZ大鼠肾组织中p-EGFR、TGFβ1、p-Smad2/3、ColⅣ和fibronectin蛋白水平,也明显抑制了STZ大鼠肾组织中ROS和MDA水平。结论:厄洛替尼可能通过抑制EGFR/TGFβ1-Smad2/3信号通路的激活来抑制糖尿病肾病肾组织的纤维化和氧化应激反应,从而减轻肾损伤。     

Effects of vascular endothelial growth factor released from cultured dermal substitute on proliferation of vascular endothelial cells in vitro

Allogeneic cultured dermal substitute (CDS) was prepared by culturing fibroblasts on a two-layered spongy matrix of hyaluronic acid and atelocollagen. CDS can be cryopreserved and transported to other hospitals in a frozen state. The present study was designed to analyze the amounts of vascular endothelial growth factor (VEGF) released from fibroblasts in fresh and cryopreserved CDS and to investigate the effects of this VEGF on proliferation of vascular endothelial cells in vitro. The culture medium used in preparing CDS (fresh CDS culture medium sample) was collected and stored at –30°C for the quantitative analysis of VEGF. After thawing cryopreserved CDS, it was recultured in a culture medium for 1 week. The culture medium used was collected and stored at –30°C for quantitative analysis of VEGF. The amounts of VEGF released from the fresh and cryopreserved CDS into the culture medium were about 610pg/ml and 640pg/ml, respectively. This finding suggests that the cryopreserved CDS retains its ability to release VEGF. Immunohistological analysis indicated that some of the VEGF adhered to the matrix. Human vascular endothelial cells were cultured in medium mixed with the fresh or cryopreserved CDS culture medium sample. Proliferation of vascular endothelial cells was enhanced by increasing the concentration of both CDS culture medium samples. When antihuman VEGF antibody was added to the culture medium, the proliferative activity of vascular endothelial cells was reduced. These findings confirm that VEGF released from CDS promotes proliferation of vascular endothelial cells.