胚胎期脂多糖暴露可通过钟样受体4引起出生后多巴胺能神经元减少

目的 观察钟样受体4(TLR-4)在胚胎期脂多糖 (LPS) 暴露引起的出生后个体脑内多巴胺 (DA) 能神经元减少中的作用.方法 TLR-4 突变型C57BL/10ScNCr小鼠和野生型C57BL/10ScSn小鼠各15只,在妊娠期第10.5天给小鼠腹腔注射LPS或肽聚糖(PDG),出生后4月龄时收集大脑组织标本(n=5),通过免疫组织化学染色和体视学技术定量DA能神经元和小胶质细胞数量,高效液相色谱法测定DA及其代谢物水平,免疫荧光法结合流式细胞术测定TNF-α和IL-1β蛋白水平.结果 出生前接触过LPS的4月龄C57BL/10ScSn小鼠,与注射生理盐水的对照小鼠比较,黑质DA能神经元减少(25.3±2.1)%,纹状体DA含量降低(33.5±5.0)%,黑质小胶质细胞数量增加(294±24)%,黑质和纹状体TNF-α和IL-1β蛋白水平也明显增高;但是出生前接触过LPS的TLR-4突变型C57BL/10ScNCr小鼠脑内无相应变化.出生前接触过TLR-2配体PDG的4月龄C57BL/10ScNCr 和C57BL/10ScSn小鼠均出现脑内DA能神经元减少和免疫炎症改变.结论 胚胎期接触LPS可通过TLR-4引起出生后个体脑内DA能神经元减少.     

氨基糖甙类药物毒性对耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体的影响

目的 探讨氨基糖甙类耳毒性药物暴露下小鼠内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体表达水平的变化,以及这种变化和小鼠听功能改变之间的关系。方法 选择5周大小的C57BL/6J小鼠,每天腹腔注射庆大霉素1次,药物浓度为100mg/kg,连续给药14d,分别在第7天、第14天时检测受试小鼠的ABR(Click&Tone burst),并以未进行腹腔注射给药的小鼠(0d)作为对照组。使用抗GluR2/3抗体对小鼠基底膜铺片标本进行染色标记,以观察耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体(GluR2/3)的表达情况。结果 注射庆大霉素小鼠在第7天、10天、14天时听力损失明显,听力阈值显著高于对照组(p<0.05)。应用庆大霉素后第7天和14天,耳蜗内毛细胞传入神经突触后谷氨酸受体(GluR2/3)的表达水平和对照组相比显著增高,听力损失最为严重,提示GluR2/3在突触后的过高表达和耳聋程度存在相关性。结论 氨基糖甙类耳毒性药物持续暴露可以造成耳蜗内毛细胞传入神经突触间隙内谷氨酸递质过表达,与耳聋程度呈正相关。     

孕鼠手机辐射暴露对子鼠前额叶皮质中5-HT_(2C)受体的影响

目的:探讨孕鼠手机辐射暴露对子鼠前额叶皮质中5-HT_(2C)受体表达水平的影响。方法:27只SPF级SD孕鼠平均随机分为3组:A组(不辐射)、B组(辐射6 h/d,21 d)和C组(辐射24 h/d,21 d),每组9只孕鼠;待子鼠出生后每组随机留养72只,在出生后第1 d、7 d、30 d和60 d取子鼠前额叶皮质。运用免疫组织化学方法标识5-HT_(2C)受体表达,并通过图像分析软件对阳性表达进行IOD值分析;运用实时荧光定量PCR法检测5-HT_(2C)受体mRNA的相对表达水平。结果:5-HT_(2C)受体阳性标识主要集中在神经元胞质内,阳性表达的IOD值和实时荧光定量PCR法检测5-HT_(2C)受体表达水平的结果是一致的:与A组相比,B、C两组的表达水平均显著升高(P0.05);且C组水平高于B组(P0.05)。结论:孕鼠手机辐射暴露可导致子鼠前额叶皮质5-HT_(2C)受体表达水平升高。     

DHEA对不同周龄C57BL/6J小鼠超排卵效果的影响

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)对不同周龄C57BL/6J雌鼠超排卵效果和卵母细胞质量影响及其机制。方法 4周龄、5周龄、6周龄、7周龄的C57BL/6J雌鼠每周龄各24只,随机分为对照组、低剂量处理组(2mg/kg/d)和高剂量处理组(5mg/kg/d)。超排卵前用DHEA给予灌胃1周,进行体外受精,收集卵丘细胞和卵巢组织。提取7周龄C57BL/6J对照组以及实验组卵丘细胞mRNA进行qRT-PCR检测胚胎质量相关基因Has2、Ptgs2和Vcan的mRNA水平以及凋亡相关基因Caspase3和Bcl2l10的mRNA水平。提取7周龄C57BL/6J对照组以及实验组卵巢组织mRNA检测Gdf9、Bmp15h和Fshr的mRNA表达水平。结果经过DHEA处理的雌鼠超排卵后,4周龄、5周龄、6周龄、7周龄的C57BL/6J雌鼠体外受精(IVF)显示实验组异型卵比例下降,7周龄的C57BL/6J雌鼠受精率升高。7周龄C57BL/6J实验组卵丘细胞中与胚胎质量相关基因Has2,Ptsg2和Vcan转录水平与对照组相比上调,Caspase-3的mRNA水平下调,Bcl2l10mRNA水平上调。7周龄C57BL/6J卵巢组织中Gdf9和Bmp15mRNA水平上调。结论 DHEA处理7周龄C57BL/6J后经激素超排,通过抑制卵丘细胞凋亡,提高卵母细胞的质量,提高超排卵效果。     

雌二醇经雌激素受体调控分拣蛋白相关受体A对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响

目的 探讨雌二醇(E₂)调控分拣蛋白相关受体A(SorLA)表达对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响及机制。方法 32只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术(sham)组、卵巢切除(OVX)组、卵巢切除+E₂组(OVX+E₂)组、卵巢切除+氟维司琼(Fu)+E₂组(OVX+Fu+E₂)组，通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区SorLA表达；40只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术+空白病毒(sham+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒(OVX+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒+E₂(OVX+NC-sgRNA+E₂)组、卵巢切除+SorLA敲降病毒+E₂组(OVX+Sorl1-sgRNA+E₂)组，通过高尔基染色检测小鼠海马CA1区神经元树突棘密度；通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区突触后致...     

美法仑治愈荷瘤小鼠的过程与TNFα的关系

目的探讨单一剂量的美法仑治愈荷瘤野生型C57BL/6小鼠的过程与肿瘤坏死因子α(TNFα)的关系。方法以3种遗传背景相同、肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)基因型不同的TNFR1 / 、TNFR1 /-和TNFR1-/-C57BL/6小鼠为实验动物,皮下接种数量相同的小鼠淋巴瘤EL4细胞。接种瘤细胞后12d,给基因型不同的各组荷瘤小鼠腹腔内单次注射7.5mg/kg的美法仑。以荷瘤野生型C57BL/6小鼠(TNFR1 / )为对照,观察美法仑对荷瘤TNFR1 /-C57BL/6小鼠和荷瘤TNFR1-/-C57BL/6小鼠的治疗效应。结果在美法仑(7.5mg/kg)治疗后的1周内,基因型不同的各组荷瘤小鼠肿瘤消退的速度基本相同。在随后的2月内,荷瘤TNFR1 / 和TNFR1 /-C57BL/6小鼠的肿瘤结节逐渐消退、肿瘤治愈;而多数荷瘤TNFR1-/-C57BL/6小鼠的肿瘤结节缩小后又再次出现并逐渐长大、肿瘤复发。结论TNFα与美法仑治愈肿瘤的过程密切相关,其中美法仑的抗肿瘤作用与荷瘤小鼠TNFR1的表达无关,但在美法仑治疗后,机体预防或避免肿瘤复发方面需要TNFR1在机体细胞的表达,而不是在肿瘤细胞的表达。     

谷氨酸受体与γ-氨基丁酸_A受体在APPswe转基因小鼠海马结构中的表达

目的探讨谷氨酸受体和γ-氨基丁酸A(GABAA)受体在阿尔茨海默病(AD)发生、发展中的作用。方法利用免疫荧光技术标记正常及APPswe转基因小鼠P0至P360各年龄段海马CA3区N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚单体1(NMDAR1)、GluR2/3和GABAARα1-6阳性细胞,并利用免疫印迹法对海马组织内NMDAR1和GABAARα1-6的活化片段进行半定量分析。结果在模型组与对照组小鼠海马CA3区,NMDAR1、GluR2/3和GABAARα1-6在出生后P7时明显增加,P30达到高峰,以后逐渐下降至成年水平;与同龄对照组相比,老龄(P360)模型鼠NMDAR1和GluR2/3阳性细胞密度明显减少(P0.05),而GABAARα1-6阳性细胞密度变化不明显(P0.05)。免疫印迹法检测结果与免疫荧光技术统计结果吻合。结论 NMDAR1和GluR2/3表达下降与AD相关的神经退行性疾病有关;而GABAARα1-6在AD发病中的作用尚不能确定。     

小鼠恶性黑色素移植瘤模型的建立及其淋巴管内皮细胞透明质酸受体1的表达

目的:建立小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型,探讨小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织内淋巴管的生成情况。方法:体外培养B16瘤细胞,接种B16瘤细胞于C57BL/6小鼠右侧背部皮内,构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型;应用H-E染色、淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(1ymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1, LYVE-1)免疫组化染色确认模型和观察肿瘤组织内淋巴管的生成情况。结果:建立了恶性黑色素移植瘤模型;LY- VE-1主要着色于正常组织和移植瘤组织中淋巴管内皮细胞的细胞膜上;恶性黑色素瘤组织中淋巴管密度明显高于正常皮肤组织。结论:构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型是获得恶性黑色素瘤组织和进一步研究的有效手段;LYVE-1是特异性较高的淋巴管内皮标记物;小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织中可能存在淋巴管的新生。     

IL-16在小鼠同种移植的皮肤组织中表达增强

目的检测小鼠同种皮肤移植后,白细胞介素16(IL-16)mRNA及蛋白在皮肤移植物中的表达并检测了血清IL-16的含量。方法建立小鼠皮肤移植模型,实验分为同基因组(C57BL/6→C57BL/6)和异基因组(BALB/c→C57BL/6),每组45只。每组受体小鼠分别于术后1、3、5、7 d,制备血清及移植皮肤。ELISA检测小鼠血清及移植皮肤组织匀浆中IL-16含量,反转录PCR检测移植组织中IL-16 mRNA的水平。结果移植术后3、5、7 d,异基因组小鼠皮肤移植物中IL-16 mRNA和蛋白含量均不同程度增加,血清IL-16水平明显升高,显著高于同基因组。结论 IL-16在小鼠移植后的皮肤组织中高表达。     

外周内源性大麻受体激动剂及其受体2亚型参与搔痒调节的研究

目的研究外周内源性大麻受体激动剂及其受体2亚型在搔痒中的作用。方法C57BL/6J雄性小鼠48只分为C48/80组、氯喹组、组胺组3组,每组根据CB2受体拮抗剂MA630的量又分为高剂量组、低剂量组和对照组,MA630（2.5μg、25μg）与致痒剂C48/8010μg/100μl（C48/80组）、氯喹100μg/100μl（氯喹组）、组胺5μmol/100μl（组胺组）共同注射,观察30min内搔痒次数。结果C48/80组与氯喹组注射MA63025μg后明显增加C48/80与氯喹引起的搔痒。结论外周内源性大麻素受体激动剂通过CB2受体发挥抑制搔痒的作用。     

糖类识别受体:甘露糖受体

甘露糖受体属于Ｃ型凝集素超家族成员,可通过胞外区识别和结合特定的糖类分子,在识别病原体、递呈抗原和保持内环境稳定中发挥作用。     

广谱模式识别分子To11-like receptor 2的研究进展

TLR－2（toll-like receptor 2,TLR-2)是哺乳动物TLRs(Toll-like receptors,TLRs)家族的一员,作为细胞表面的天然受体蛋白,主要参与病原微生物产物的识别及炎症信号传导,介导天然抗感染免疫,最后又发现其参与机体对非感染因子所致炎性组织损伤的识别,通过对TLR－2参与的识别和细胞内信号传导机制的研究,可为深入探讨抵卸微生物感染的机制,对自身正常与非正常组织的提供新的思路。     

广谱模式识别分子Toll-like receptor 2的研究进展

TLR-2（Toll-like receptor 2,TLR-2）是哺乳动物TLRs（Toll-like receptors,TLRs）家族的一员,作为细胞表面的天然受体蛋白,主要参与病原微生物产物的识别及炎症信号传导,介导天然抗感染兔疫;最近又发现其参与机体对非感染因子所致炎性组织损伤的识别。通过对TLR-2参与的识别和细胞内信号传导机制的研究,可为深入探讨抵御微生物感染的机制、对自身正常与非正常组织的识别提供新的思路。     

MAS受体与AT1受体的相互作用

RAS的2个重要成员Ang-(1-7)和血管紧张素II（Ang II）主要作用于MAS受体和AT1受体发挥作用。Ang-(1-7)和Ang II之间存在着复杂的相互作用，两者的受体在细胞和组织中相互作用，其可能的机制之一是受体的寡聚化     

牛轮状病毒受体和人轮状病毒受体相似性的研究

目的：应用抗牛轮状病毒受体单抗，探讨牛轮状病毒（BRV）、人轮状病毒（HRV）受体蛋白的相似性。为进一步研究受体性状、作用提供基础资料。方法：使用抗BRV-R-McAb进行ELISA、免疫斑点、细胞保护试验、固相分析及组织细胞的免疫组化染色。结果：发现抗BRV-R-McAb能和抗BRV-IgG、抗HRV-IgG结合，体外能特异性地阻断BRV、HRV攻击MA104细胞。提纯的BRV受体在体外能结合BRV、HRV。免疫组化试验证实：在胎儿小肠粘膜、气管粘膜、MA104细胞表面有轮状病毒受体存在。结论：位于组织细胞膜表面的BRV、HRV受体能被2种病毒识别，为同源性相近的蛋白。     

Regulation of interleukin-2 receptor expression and receptor release

The generation and cell surface expression of IL-2 receptors was monitored by: (i) an ELISA that permits quantitative determination of detergent-solubilized or soluble IL-2 receptors; and (ii) detection of the binding of 125I-labelled recombinant IL-2 and of anti-IL-2 receptor antibodies to receptor bearing cells. Upon lectin stimulation both high and low affinity IL-2 receptors became expressed in parallel at the cell surface. Both high and low affinity receptors were upregulated by IL-2. Upon lectin activation the amount of cell-associated receptors increased and on day 2 of the culture period IL-2 receptors were detectable in the culture supernatant. IL-2 upregulated both high and low affinity IL-2R expression on T-lymphoblasts. IL-2R bearing leukemic cells and T lymphoblasts released IL-2R when cultured in vitro. IL-2R release by T lymphoblasts was enhanced dramatically by IL-2. On the other hand, IL-2-receptor positive leukemic cells released receptors in an IL-2 independent manner. Release of receptors could also be detected in serum-free medium. At least a part of the released receptors could be specifically bound to immobilized pure recombinant IL-2 and to monoclonal anti-IL-2-receptor antibodies. Small but significant amounts of soluble IL-2 receptors were detectable in the sera of normal mice. In sera of mice inoculated with IL-2-receptor positive syngeneic leukemic cells, elevated levels of IL-2 receptors were detectable. Release of IL-2 receptors seems to represent one of the major routes by which the receptors are cleared from the cell surface.     

核受体超家族及其辅调节子的研究进展

核受体(nuc lear receptor,NR)是一类在生物体内广泛分布的,配体依赖的转录因子,其成员众多,构成了一个大家族,可分为三大类:类固醇激素受体、非类固醇激素受体和孤儿核受体。核受体与相应的配体及其辅调节因子相互作用,调控基因的协调表达,从而在机体的生长发育、新陈代谢、细胞分化及体内许多生理过程中发挥重要作用。核受体的功能障碍将导致一系列疾病如癌症、不育、肥胖、糖尿病。核受体能结合经药物设计而被修饰的小分子,从而调控相关疾病如癌、骨质疏松、糖尿病等。它们是有希望的药物设计靶标。因此,寻找孤儿受体的配体和信号通路成…     

A metabotropic glutamate receptor variant functions as a taste receptor

Sensory transduction for many taste stimuli such as sugars, some bitter compounds and amino acids is thought to be mediated via G protein-coupled receptors (GPCRs), although no such receptors that respond to taste stimuli are yet identified. Monosodium L-glutamate (L-MSG), a natural component of many foods, is an important gustatory stimulus believed to signal dietary protein. We describe a GPCR cloned from rat taste buds and functionally expressed in CHO cells. The receptor couples negatively to a cAMP cascade and shows an unusual concentration-response relationship. The similarity of its properties to MSG taste suggests that this receptor is a taste receptor for glutamate.