单倍体相合造血干细胞移植治疗髓母细胞瘤1例*☆

背景:目前部分国外报道显示,自体及全相合造血干细胞移植联合化疗用于转移髓母细胞瘤有一定疗效,可延长患者生存期。但尚未见HLA单倍体相合移植治疗髓母细胞瘤的报道。 目的:首次报道应用单倍体相合造血干细胞 移植治疗髓母细胞瘤。 方法:对晚期骨转移的髓母细胞瘤患儿进行连续6次无关供者淋巴细胞输注联合低剂量化疗, 3次单倍体相合骨髓移植治疗。 结果与结论:造血干细胞移植后患儿出现皮疹, 伴发热, 腹泻, 为黄褐色水样便, 考虑为移植物抗宿主病, 以甲强龙冲击治疗并用丙种球蛋白增强免疫力, 吗替麦考酚酯、他克莫司抗排斥及口服激素、抗CD25单抗、抗肿瘤坏死因子, 并纠酸、维持水电平衡、支持营养等治疗好转出院, 后因颅内复发死亡。异基因淋巴细胞输注可杀伤肿瘤细胞, 改善患者生存质量, 但对于高肿瘤负荷的患者, 效果有限, 如考虑进行异基因干细胞移植, 应注意免疫抑制剂(如CD25单抗和肿瘤 坏死因子a抑制剂)的及时应用。     

亲属活体肾移植68例的相关技术配合

选择2004-04/2007-08于中山大学附属第一医院行活体亲属肾移植术的受者68例，供、受者对实验及治疗方案均知情同意。回顾性总结活体肾移植手术配合的临床资料：包括术前手术间空气消毒，器械、一次性用物及药品准备；术中供体体位摆置，肾灌洗与修整的配合，药物的管理及使用方法；器械护士术中配合步骤。结果示手术器械及物品准备充分，护士熟悉手术步骤，与术者配合默契。68例供体肾热缺血时间1~6 min，冷缺血时间10~118 min。供受体患者术程顺利，各例次均历时三四小时，出血量< 200 mL，术中生命体症平稳，未出现并发症。做好术前准备、加强参加手术人员管理、技能培训是手术配合的前提；严格无菌管理及正确脏器保存是活体肾移植手术配合的关键；缩短供肾热缺血时间和冷缺血时间对保证手术成功及肾移植受者长期存活具有重要意义。     

单倍体相合异基因造血干细胞移植治疗白血病

背景：对于无HLA全相合同胞供者的患者,采用单倍体相合造血干细胞移植面临移植物抗宿主病重、移植相关死亡率高的风险,但通过不同的移植模式,将有可能获取相近的疗效。 目的：观察亲缘HLA单倍体相合异基因造血干细胞移植治疗白血病的疗效,并与亲缘HLA全相合异基因造血干细胞移植相比较。 方法：45例白血病患者分为2组。单倍体组移植方式为外周血或联合骨髓干细胞移植,预处理方案为改良白消安与环磷酰胺或加抗胸腺细胞球蛋白,移植物抗宿主病的预防采用环孢素A+甲氨蝶呤+霉酚酸脂;全相合组移植方式为外周血干细胞移植,预处理方案为BuCY,移植物抗宿主病的预防采用环孢素A+甲氨蝶呤。 结果与结论：两组均获得造血重建时间差异无显著性意义。单倍体及全相合组急性移植物抗宿主病的累积发病率分别为73%对52%(P > 0.05);慢性移植物抗宿主病的累积发病率分别为56%对45%(P > 0.05);移植相关死亡率分别为36%对17% (P > 0.05);单倍体组无复发,全相合组复发2例;两组的预计3年累积无病生存率分别为61%对60%(P > 0.05)。结果提示,亲缘单倍体异基因造血干细胞移植的总体疗效与亲缘全相合异基因造血干细胞移植相似,但中重度急性移植物抗宿主病的发生率较后者为高。     

非清髓性异基因造血干细胞移植基础及临床研究进展

非清髓性异基因造血干细胞移植现在被广泛的用在由于年龄或合并症而不适应行传统HCT的患者身上,采用非清髓性预处理策略,移植后形成供受体造血细胞混合嵌合状态,淋巴细胞供受体双向免疫耐受,即非清髓性干细胞移植。通过非清髓性预处理方案,移植后形成供受体细胞嵌合状态,发挥移植物抗肿瘤效应,来达到治疗目的,与传统HCT中文？相比有较低的移植相关死亡率,术后GVHD中文？发生减少,且扩大了适应症范围,并且非清髓性预处理方案的改进、移植后相关疾病发生的防治可以进一步提高治疗效果。虽然有许多治疗策略被提出,并在动物模型上取得了成功,但其在人体方面的应用仍需得到进一步的证实和研究。     

亲缘间单倍体造血干细胞移植治疗白血病4例

背景：建立及维持非血缘供者库需要大量投资,而亲属部分相合的供者则不需要特殊费用,有更强的可操作性。 目的：评估亲缘间半相合造血干细胞移植治疗白血病的疗效。 方法：选取2002-11/2008-03中南大学湘雅医学院附属海口市人民医院血液科住院患者4例,均进行HLA单倍体相合亲缘供者造血干细胞移植。采用改良的Bu/CY预处理方案：阿糖胞苷2.0~3.0 g/(m2•d)×2 d,持续24 h静滴;马利兰4 mg/(kg•d)× 3 d;环磷酰胺50 mg/(kg•d)×2 d;甲基环已亚硝脲25 mg/(m2•d)×1 d;抗胸腺细胞球蛋白25 mg/(kg•d)×4 d。在改良方案的基础上加大阿糖胞苷剂量1倍,且改为持续24 h静滴,使预处理强度增加,促进造血干细胞持久植入。移植物抗宿主病预防：在经典的甲氨蝶呤方案基础上将环孢素A及霉酚酸酯提前至-7 d(回输干细胞前为-)使用。患者移植前后进行ABO血型及DNA检测。 结果与结论：①移植后造血重建检测：4例患者均获得造血重建,未发生预处理相关死亡。造血于细胞移植后-3~+7 d白细胞降为0,并持续2~14 d,+12~+20 d白细胞>1.0×109 L-1,+20~+51 d血小板>20×109 L-1。②移植物抗宿主病的发病情况：4例患者移植物抗宿主病 Ⅳ 级(肠道)1例,出现急性移植物抗宿主病Ⅱ级(肠道)1例,急性移植物抗宿主病Ⅱ级(皮肤)1例。提示随着预处理方案、移植物抗宿主病预防方案的优化,亲缘间单倍相合造血干细胞移植治疗白血病安全有效。     

骨髓间充质干细胞诱导肾移植大鼠免疫耐受：与环孢素A效果的比较

BACKGROUND: Results of previous animal study revealed that four times of injection with 1×107 mesenchymal stem cells (MSCs) before or after renal transplantation can induce immune tolerance, prolong survival time of graft, but the effect is significantly weak compared with the cyclosporine A. OBJECTIVE: To compare the effect of various doses and to further define precise administration regimen by regulating administration time of MSCs on the basis of previous studies. DESIGN, TIME AND SETTING: An in vivo trial of cytology was performed at the Animal Experiment Center of Nanjing Medical University (Nanjing, Jiangsu, China) from March to December in 2008. MATERIALS: Male Wistar rats as donors and male Lewis rats as recipients, totally 35 pairs, were selected to create models of renal transplantation. Using density gradient centrifugation method, bone marrow MSCs were harvested from 3 healthy male Wistar rats. METHODS: Following model induction, recipients were randomly divided into 4 groups: low-dose MSCs group (n=10), high-dose MSCs group (n=11), cyclosporine A group (n=8), and control group (n=6). Low-dose MSCs and high-dose MSCs groups were respectively subjected to injections of 1×106 and 1×107 MSCs 1 week prior to blood flow patency, once a day, for 2 weeks. Cyclosporine A group received cyclosporine A diluted by phosphate buffered saline 2 days after transplantation via intraperitoneal injection, 0.5 mg/(kg.d), once a day till death. Control group underwent phosphate buffered saline after transplantation, once a day till death. MAIN OUTCOME MEASURES: Biochemistry methods were used to detect the levels of creatinine in serum at 3, 5, 10, 15, 25 and 40 days following transplantation. Histology, animal survival days were performed to identify the function of the recipients in 2 animals at 4 days following transplantation in each group. RESULTS: A total of 35 recipient rats were included in the final analysis following model induction. Compared with cyclosporine A group, animal survival was significantly prolonged by MSCs in the high-dose MSCs group, and the effect was weak in the low-dose MSCs group. Creatinine levels were decreased in the low-dose MSCs and high-dose MSCs groups compared with the control and cyclosporine A groups at day 5 following transplantation (P < 0.05), and the difference was not significant at other time points. Renal interstitium infiltration was significantly improved, and no special changes were found in most renal glomerulus and arteries in the high-dose MSCs and cyclosporine A groups compared with low-dose MSCs and control groups. Typical severe acute injection was observed in the control group. Injection was significantly relieved in the low-dose MSCs group. CONCLUSION: Before transplantation and after twice agents treatment, 1×107 MSCs were given daily at 2 weeks following transplantation, which can effectively reach immunoloregulation, protect postoperative graft function, prolong animal’s survival stage, showed similar effects as cyclosporine A.     

造血干细胞移植后的免疫重建

造血干细胞移植既可重建造血系统,又可重建免疫系统,因此被广泛用于治疗造血系统及免疫系统缺陷疾病。但移植后受者免疫重建迟于造血重建,面临着肿瘤复发和移植后感染的问题,因此移植后如何促进免疫重建成为研究热点。文章就移植后免疫状态、促进免疫重建策略及间充质干细胞在移植免疫中的作用作以综述。     

ABO血型不合外周血造血干细胞移植10例☆

背景：ABO血型不合供受者之间进行外周血造血干细胞移植,面临受者血型的转变、移植后输血的选择等问题。 目的：观察ABO血型不合外周血造血干细胞移植治疗血液病的临床疗效和近远期并发症。 方法：回顾性分析了2005/2008武警总医院收治的10例ABO血型不合异基因外周血同胞供者造血干细胞移植患者的资料。总结植入效果,血型转变,移植物抗宿主病以及不良反应。 结果与结论：9例患者恢复造血功能,血型转变为完全供者型,1例患者白细胞血小板恢复,但红细胞植入延迟。所有患者在输注移植物时未出现短暂的血红蛋白尿,无严重急性溶血和迟发型溶血的发生,1例出现严重的移植物抗宿主病。可见ABO血型不合外周血造血干细胞移植对移植疗效无明显影响,红细胞植入延迟的预防和处理十分重要。     

造血干细胞移植后减低强度非清髓性预处理方案联合低剂量环孢素A治疗多发性骨髓瘤1例并文献复习

2006-08广州市第一人民医院收治1例44岁男性多发性骨髓瘤患者，供者为其胞妹，HLA配型完全相合。供者给予粒细胞集落刺激因子6 μg/（kg?d ）连续皮下注射5 d，采集外周血干细胞，采集量按受者体质量计为单个核细胞8.8×108/kg，CD34+细胞5.7×106/kg，直接输注给患者。非清髓性预处理方案：氟达拉滨35 mg/（m2?d），-9 d至-5 d；白消胺注射液 3.2 mg/（kg?d），-4 d，-3 d；环磷酰胺60 mg/（kg?d），-2 d，-1 d。移植物抗宿主病预防方案：环孢素A+短程甲氨蝶呤，形成供者嵌合体后，采用低剂量环孢素A。移植后T细胞免疫功能重建快，+24 d性染色体和微卫星法DNA指纹图监测显示为供者型完全嵌合体，骨髓瘤细胞和血清M蛋白均逐渐消失，未出现严重感染，+34 d出现皮肤I级急性移植物抗宿主病，慢性移植物抗宿主病表现为口腔溃疡。随访15个月，仍处于完全缓解状态。减低强度的氟达拉滨+白消胺+环磷酰胺预处理方案联合低剂量环孢素A治疗，可形成稳定完全的供者嵌合体，且移植物抗宿主病程度轻，此方法用于治疗多发性骨髓瘤可行有效。     

人羊膜间充质干细胞支持造血的体外实验

背景：骨髓是目前间充质干细胞的主要来源,但由于取材不便、细胞数量受年龄限制等原因,其应用具有一定局限性。近年来,羊膜作为间充质干细胞的新来源受到越来越广泛的关注。目的：探讨人羊膜来源间充质干细胞在体外对造血干细胞的扩增是否有支持作用,以及怎样提高羊膜间充质干细胞和造血干细胞共移植成功率。方法：利用组织块培养法,从足月分娩的人羊膜中分离培养羊膜间充质干细胞。密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,采用免疫磁珠分选技术分选其中CD34+细胞。分别用脐血单个核细胞和CD34+细胞与羊膜间充质干细胞共培养,连续4周,每周计悬浮细胞浓度,并以骨髓间充质干细胞组及无滋养层组作为对照。采用集落形成实验,把扩增的脐血单个核细胞和CD34+细胞分别接种至甲基纤维素半固体培养基中,14 d后根据典型形态特征计数造血集落数。结果与结论：羊膜间充质干细胞可促进人脐血单个核细胞和CD34+细胞扩增,扩增后两者在甲基纤维素半固体培养基中能够形成造血祖细胞集落,其造血支持作用与骨髓间充质干细胞相似,两者对比无明显统计学差异。提示,羊膜间充质干细胞体外具有与骨髓间充质干细胞相似的造血支持作用,有可能为造血干细胞体外扩增及临床间充质干细胞与造血干细胞联合移植、提高造血干细胞移植成功率提供一种更加理想的间充质干细胞新来源。     

亲属成人间活体肝移植1例临床分析

背景：活体肝移植的开展扩大了供体来源,有效缓解了供肝匮乏的局面,且活体供肝冷缺血时间短、质量好;若供、受者为亲属,可能具有免疫相容的优势。 目的：总结1例亲属成人间活体肝移植的临床体会,探讨成人间活体肝移植治疗终末期肝病的手术方式及移植效果。 方法：乙型肝炎后肝硬化(失代偿期)并门脉高压症患者1例,女性,年龄54岁,拟行肝移植手术。供者为患者外甥,23岁,既往身体健康。经术前评估后,切取供者右半肝并原位移植给受者。术后常规给予免疫抑制、防治感染、护肝、支持等治疗。 结果与结论：术后供者生命体征平稳,手术历时4 h,失血约150 mL,术后第5天肝功能基本恢复正常,术后10 d行上腹部CT平扫加增强提示符合活体肝移植供体右半肝切除术后改变。术后受者生命体征平稳,手术历时7 h,失血约500 mL,彩超检查移植肝血管通畅,血供良好;生化指标逐渐恢复至正常范围,提示移植肝功能情况良好。术后供、受者无严重并发症发生,均健康存活,门诊随访肝功能正常。结果说明成人间活体肝移植为术前周密的准备工作,选择最佳的移植手术时机以及手术的成功创造了最佳条件,是在尸体供肝短缺的情况下治疗终末期肝病的理想方法。 关键词：肝移植;活体;成人;终末期肝病;器官;亲属     

输血支持在造血干细胞移植中的应用*☆

背景：接受造血干细胞移植的患者经常需要血液制品输注支持,而患者对红细胞和血小板输注的需求差异非常大,这主要依赖于造血干细胞移植的类型和患者本身的疾病性质。 目的：评价中山大学附属中山医院接受造血干细胞移植患者移植期间输血的需求和数量。 方法：收集中山大学附属中山医院2004-01/2010-06接受造血干细胞移植患者的资料,包括移植的适应证、移植的类型、CD34+细胞的数量、红细胞和血小板的输注数量、费用、脱离输注时间以及中性粒细胞和血小板植入时间;红细胞输注的阈值是血红蛋白计数为70 g/L,而血小板的输注阈值是计数为20×109 L-1。研究分析了患者移植期间红细胞和血小板输注的需求、输注量、输血费用,以及患者的生存情况。 结果与结论：自体造血干细胞移植组中有14例(93%)患者,而异基因造血干细胞移植组中有35例(90%)患者显示了造血细胞植入和脱离输注证据。自体造血干细胞移植组取得脱离红细胞输注天数为14.6 d,明显短于异基因造血干细胞移植组。与异基因造血干细胞移植组比较,自体造血干细胞移植组红细胞输注单位明显减少;而异基因造血干细胞移植组的红细胞输注费用明显高于自体造血干细胞移植组。输血花费昂贵,但却是造血干细胞移植中必不可少的一部分,异基因造血干细胞移植组需要更多的输血支持。脱离输注时间有望成为评估造血干细胞移植成功的指标。     

异基因造血干细胞移植治疗白血病9例

摘要：重庆医科大学附属第一医院血液内科2007-01/2008-04应用异基因造血干细胞移植治疗白血病患者9例,6例急性髓细胞性白血病,3例慢性髓系白血病;供者中6例为HLA 完全相合的同胞,2例为HLA 9/10相合的无关供者,1例为半相合供者;预处理采用经典的BU/CY方案或GIAC方案;移植物抗宿主病的预防采用环孢菌素A+吗替麦考酚酯+甲氨喋呤方案或环孢菌素A+吗替麦考酚酯+甲氨喋呤+抗胸腺细胞球蛋白方案。结果全部患者均获得造血重建,中性粒细胞≥ 0. 5×109 L-1、血小板> 20×109 L-1 的中位时间分别是11,15 d;无急性移植物抗宿主病发生,1例发生慢性移植物抗宿主病;随访3~16个月无病生存率为77.8%。死亡2例。 关键词：异基因造血干细胞移植;移植物抗宿主病;白血病     

Autologous hematopoietic stem cell transplantation for very active relapsing-remitting multiple sclerosis: report of two cases

Autologous hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT) has been proposed as a rescue treatment in multiple sclerosis (MS) patients not responding to first- or second-line therapies. To date, most of the treated cases had a secondary progressive disease course. However, patients with high inflammatory activity, but no secondary progression of the disease, could be candidates to take greater advantage of AHSCT. In this paper, we report two cases with very active, relapsing-remitting (RR) MS, who underwent AHSCT, and obtained a dramatic resolution to disease activity.     

非清髓性外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血1例*☆

目的：异基因造血干细胞移植是治愈地中海贫血的唯一方法。观察应用强免疫抑制剂及胸腺球蛋白与减量的消胺为预处理方案，异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血的移植后效应以及降低并发症的特点。 方法：选择2002-11于广州市第一人民医院血液科住院的11岁患者。出生时即诊断为纯合子重型β-地中海贫血。经患者家属同意和医院伦理委员会批准。对患者实施异基因外周血造血干细胞移植。供者为妹妹，血型相同，HLA配型全相合的杂合子轻型β-地中海贫血。预处理方案：氟达拉滨35 mg/(m2 d)，马利兰 4 mg/（kg d）；抗胸腺细胞球蛋白200 mg/d。外周血造血干细胞动员粒细胞集落刺激因子150 μg/d×7 d；于移植前1 d至移植后1 d连续3 d采集细胞总量为：CD34+ 3.22×106/kg，单个核细胞4.52×108/kg，CD3+T细胞22.33×107/kg，当天输注。移植物抗宿主病的预防：环孢素A联合甲基泼尼松龙并渐减量，甲基泼尼松龙在2个月内停药。采用骨髓细胞的XY/XX的荧光原位杂交和微卫星法DNA指纹图检测植入证据。 结果：血小板和白细胞在移植后10，14 d最低值为：1.26×109 L-1， 28.8×109 L-1；移植后30 d，血小板> 50×109 L-1,血红蛋白> 60 g/L, DNA指纹图为混合性嵌合体，性染色体示供者细胞占96%。移植后44 d，血红蛋白< 45 g/L，XY染色体占94%，行动员供者干细胞输注，输注CD34+1.02×106/kg，单个核细胞1.20×108/kg，T细胞（CD3+）2.2×107/kg，2周后血红蛋白上升；移植后75 d供者嵌合体占40%，停用环孢素A,供者嵌合体上升至96%，移植后120 d，仍然为混合性嵌合体状态。无移植物抗宿主病、肝静脉闭塞病、出血性膀胱炎和感染的发生。 结论：以氟达拉滨和抗胸腺细胞球蛋白强烈免疫抑制剂、减量马利兰为基础预处理方案，实施异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血，可达到造血细胞在患者体内的迅速植入，减少移植相关并发症的发生。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病14例

海口市人民医院2003-11/2008-11收治的14例白血病患者,均采用改良Bu-CTX2预处理方案的异基因外周血造血干细胞移植进行。具体预处理方案为阿糖胞苷2.0~3.0 g/(m2•d),×2 d,24 h持续静滴;马利兰4 mg/(kg•d) ×3 d;环磷酰胺50 mg/(kg•d),×2 d;甲基环已亚硝脲250 mg/(m2•d),×1 d;抗胸腺细胞球蛋白25 mg/kg•d),×4 d。移植前3 d,供者行重组人粒细胞集落刺激因子皮下注射,于用药第4,5天采集外周血干细胞,并分别于当天由锁骨下静脉输入患者体内,回输单个核细胞数为(7.82~9.11) ×108/kg,CD34+细胞数为(2.9~7.7)×106/kg。结果14例患者完全植入,均获得造血重建,移植后11~25 d白细胞> 1.0×109 L-1,移植后11~51 d血小板＞20×109 L-1。3例出现Ⅰ度急性移植物抗宿主病,2例出现Ⅱ度急性移植物抗宿主病,1例出现Ⅳ度急性移植物抗宿主病;3例出现出血性膀胱炎;所有患者目前均正常生活或工作。提示采用改良Bu-CTX2预处理方案的异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病是安全有效的方法。     

丁基苯酞加强造血干细胞移植及内源性干细胞动员治疗脑梗死的效应

Exogenous stem cell transplantation and endogenous stem cell mobilization are both effective for the treatment of acute cerebral infarction. The compound dl-3-butylphthalide is known to improve microcirculation and help brain cells at the infarct loci. This experiment aimed to investigate the effects of dl-3-butylphthalide intervention based on the transplantation of hematopoietic stem cells and mobilization of endogenous stem cells in a rat model of cerebral infarction, following middle cerebral artery occlusion. Results showed that neurological function was greatly improved and infarct volume was reduced in rats with cerebral infarction. Data also showed that dl-3-butylphthalide can promote hematopoietic stem cells to transform into vascular endothelial cells and neuronal-like cells, and also enhance the therapeutic effect on cerebral infarction by hematopoietic stem cell transplantation and endogenous stem cell mobilization.