外周血MUC1基因表达与食管癌微转移的关系

食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,我国食管癌发病率居世界之首,每年新增发病15万人之多.尽管采用以手术为主的综合治疗,效果仍不尽人意.     

GalNAcT和CK19 mRNA表达与乳腺癌骨髓微转移的相关性

目的:研究乳腺癌患者骨髓中的β1,4-N-乙酰半乳糖胺转移酶(GalNAcT)mRNA和细胞角蛋白-19(CK19)mRNA表达情况.方法:选取初治乳腺癌患者40例,在化疗前抽取骨髓,利用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中GalNAcT和CK19的基因表达;另选择血液系统良性疾病患者10例和5名正常人作为对照组.结果:40例乳腺癌患者GalNAcT mRNA和CK19 mRNA的阳性率分别为42.5%(17/40)和27.5%(11/40);10例血液系统良性疾病患者和5名正常人骨髓GalNAcT mRNA、CK19 mRNA均不表达.两者表达与患者的TNM分期差异有显著性(P＜0.05).而与患者的年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、病理类型以及激素状况等差异均无显著性(P＞0.05).结论:GalNAcT mRNA和CK19 mRNA可作为标志物检测乳腺癌患者骨髓微转移,联合检测可增加骨髓微转移检测的敏感性.     

手术操作与胃癌微转移的关系

目的 探讨手术操作与胃癌微转移的关系.方法 采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测70例胃癌病人手术前、后外周血细胞角蛋白(CK20) mRNA及癌胚抗原(CEA) mRNA的表达情况,并以20例健康志愿者作为阴性对照组,以10例胃癌组织作为阳性对照组.结果 CK20 mRNA及CEA mRNA在术前阳性表达率分别为32.9%和51.4%,而术后二者的阳性表达率分别为62.9%和70.0%,术后阳性率明显高于术前(χ2=12.62、5.06,P<0.05).20例健康志愿者无1例阳性表达.结论 手术操作可以促使胃癌发生微转移.     

乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及其临床意义.方法:应用RT-PCR技术检测48例乳腺癌患者和20例乳腺良性病变患者骨髓中的CK19mRNA表达并分析CK19mRNA表达与临床病理因素的关系.同时应用电化学发光技术检测其外周血中CEA和CA153的表达情况.结果:48例乳腺癌患者中15例CK19mRNA阳性,阳性率为31.25%;乳腺良性病变患者骨髓中未检测到CK19mRNA的表达.CK19mRNA表达与乳腺癌分期有关(P<0.05),与年龄和淋巴结转移状况无显著性相关(P>0.05),与外周血中CEA(r=0.329,P=0.002)和CA153(r=0.312, P=0.002)异常升高呈正相关.结论:CK19mRNA可作为检测乳腺癌患者骨髓微转移的分子指标之一,可为乳腺癌患者的治疗和预后判断提供帮助.     

RT-PCR检测外周血CK19 mRNA及CEA mRNA诊断非小细胞肺癌微转移的研究

目的应用RT-PCR法检测CK19 mRNA、CEA mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达情况并进行比较分析,探讨它们在NSCLC发生、转移及预后中的意义。方法NSCLC患者76例,肺良性疾病患者15例,Ⅳ期非肺癌恶性肿瘤患者30例,健康志愿者20例,均在治疗前抽取外周血,通过RT-PCR法检测CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者的CK19 mRNA和CEA mRNA阳性率显著高于肺部良性疾病患者和健康对照组(P<0.05)。CK19 mRNA和CEA mRNA在NSCLC与Ⅳ期非肺癌患者中的阳性表达率无差异(P>0.05)。CK19 mRNA在外周血中的表达率与肺癌组织学类型无关(P>0.05),CEA mRNA在肺腺癌中高度表达(P<0.05)。CK19 mRNA及CEA mRNA与P-TNM分期无关(P>0.05)结论两种肿瘤标志物均可单独作为RT-PCR检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物,且CEA mRNA可以帮助临床判断病理类型。该方法的建立可能有利于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

细胞角蛋白18基因诊断胃癌淋巴结微转移

目的:建立RT-PCR检测细胞角蛋白-18（CK18）mRNA表达的方法,判断胃癌淋巴结内微转移状况,探讨18 mRNA表达在胃癌患者淋巴结微转移中的临床意义。方法:以细胞角蛋白18 mRNA为标志基因,用RT-PCR法检测35例胃癌的298枚淋巴结及良性胃病变的淋巴结20枚。结果:对照的良性胃病变淋巴结无CK18 mRNA表达,胃癌组的298枚淋巴结病理检查阳性99枚（33.2%）,而RT-PCR法检测细胞角蛋白阳性133枚（44.6%）,差异有显著性（P<0.05）。病理检查为阴性的199枚中,经CK18 mRNA RT-PCR法检测有34枚阳性（17.1%）。 结论:用RT-PCR法检测胃癌淋巴结CK18 mRNA是诊断胃癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,对判断预后、指导术后治疗有重要意义。     

肺癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨CK19 mRNA、CEA mRNA能否作为判断肺癌血源性微转移的参考指标.方法取67例肺癌患者及37例健康体检者外周血,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述两个指标的表达.结果肺癌组外周血中CK19 mRNA阳性率(57.6%)及CEA mRNA阳性率(52.2%)均显著高于健康对照组的2.7%和5.4%(均P＜0.01),两个指标联合检测能将对肺癌微转移诊断的灵敏度提高至76.1%;CK19 mRNA的表达与临床分期相关(P＜0.01),CEA mRNA的表达与组织类型相关(P＜0.05).结论 CK19 mRNA和CEAmRNA可作为判断肺癌血源性微转移的参考指标,两者联检可提高诊断价值.     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的：检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA和人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标．方法：采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的定性和半定量表达．以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照．实验数据采用SPSS13．0forWindows软件包统计分析．结果：①CK20mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50．0％和56．2％,相对系数分别为0．89±0．17和0．88±0．17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9．1％和0％,相对系数分别为0．11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0．大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异（P〈0．05）．②CK20mRNA和hTERTmRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关（P〈0．05）;其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关（P〈0．05）．阳性表达者生存率低于阴性者（P〈0．05）．结论：大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后．     

RT-PCR扩增K19检测胃癌区域淋巴结微转移

目的：探讨RT-PCR检测胃癌区域淋巴结微转移的价值及其应用前景。方法：以病理组织学和RT-PCR扩增K19对30例胃癌患者的癌组织标本及126个淋巴结进行检测。结果：30例胃癌患者癌组织均有K19 mRNA表达;126个淋巴结中,组织学阳性26个(20.6%),而RT-PCR阳性42个(33.3%),RT-PCR扩增K19及内参基因β-actin后,所有瘤组织、转移淋巴结显示460和540 bp的扩增片段,非肿瘤患者的淋巴结中仅显示540 bp。 结论：RT-PCR扩增K19 mRNA检测胃癌区域淋巴结微转移是一种敏感、特异的检测方法,优于常规病理组织学。     

RT PCR检测食管癌患者骨髓CEA mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨食管癌患者骨髓微转移的检测及临床意义。方法： 以癌胚抗原（CEA）为分子标记物，采用RT PCR技术检测43例食管癌患者及17例食管良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原的表达。结果： 43例食管癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为34.9 %，食管良性病变患者骨髓中未见表达，两者差异有统计学意义（P＜0.05），CEA mRNA的表达与食管癌患者年龄、性别、病理组织类型、肿瘤细胞分化程度无相关性，但与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。结论：用RT PCR法检测食管癌患者肋骨骨髓微转移具有较高的敏感性和特异性，骨髓中CEA的检测可帮助综合判断疾病的恶性程度及患者预后，有助于发现亚临床转移灶。     

食管癌组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达意义

目的：探讨S期激酶相关蛋白2mRNA在食管癌及其癌旁组织中的表达及其与食管癌临床病理特征的关系．方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测S期激酶相关蛋白2mRNA在45例手术切除的食管癌组织及癌旁组织中的表达．结果：S期激酶相关蛋白2mRNA表达率在食管癌中为66．6％（30／45）,而癌旁组织中为24．4％（11／45）,差异有显著性（P〈0．05）．S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关（P〈0．05）．结论：S期激酶相关蛋白2的高水平表达促进了食管癌的发生发展．并将可能为食管癌的早期诊断和治疗提供新的手段．     

膀胱癌尿脱落细胞中细胞角蛋白20的表达及临床意义

目的 :以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测尿中膀胱移行癌细胞 ,研究尿脱落细胞中细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )的表达及其临床意义 .方法 :应用RT PCR方法检测 4 5例膀胱癌患者以及 18例非肿瘤患者的尿脱落细胞CK2 0 .结果 :4 5例膀胱癌 39例CK2 0表达阳性 ,非肿瘤组 18例中 1例CK2 0表达阳性 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿脱落细胞中CK2 0敏感度 86 .7% ,特异度 94 .4 % .G1,G2 及G3 膀胱癌阳性率分别为82 .8% (2 4 /2 9) ,91.7% (11/12 ) ,10 0 .0 % (4 /4) ,各级间无显著差异 (P >0 .0 5 ) .CK2 0的表达同肿瘤的分期、分级无关 .结论 :CK2 0是一种较为理想的膀胱肿瘤标记物 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿液中CK2 0可用于膀胱癌的诊断     

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的：分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达水平，探讨其临床病理意义。方法：随机选择和收集53例上皮性恶性肿瘤患者的外周血，应用巢式RT－PCR法联合检测其CK19、CK20mRNA表达情况，另取15例上皮性肿瘤组织的为阳性对照，15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果：53例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为35．8％（19／53，CK20阳性率41．5％（22／53），两者至少1项阳性者69．8％（31／53）。15例肿瘤组织中CK20阳性率为100％（15／15），CK19阳性率86％（13／15）；15例阴性对照CK19阳性2例，CK20阳性1例，结合肿瘤的临床病理资料分析，肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度，临床分期及淋巴结转移存在明显的相关性，而与肿瘤患者的年龄，性别，肿瘤分化程度无明显相关。结论：CK19、CK20mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。     

RT-PCR法检测食管鳞癌患者淋巴结微转移的预后意义

目的 评价逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测淋巴结食管癌微转移的预后意义。方法 同时运用RT—PCR法和常规病检法对23例食管鳞癌患者区域淋巴结(n=104)转移灶进行测定，并且分析两种检测结果对术后生存的影响。生存分析用Kaplan—Meier法，预后分析用COX比例风险模型。结果 寿命表法估计术后5年生存率，mN阴性者为57．14％，mN阳性者为15．38％(P=0．0103)。通过30个月(2～60个月)的中位观察期发现，存在淋巴结微转移的患者术后无瘤生存期显著短于无微转移者(Log-rank时序检验，P=0．0016)。多因素分析显示有无淋巴结微转移(mN)可作为一项独立的预后因素(P=0．0210)，病检法测定结果(pN)对预后无显著影响(P=0．1031)。结论 RT-PCR法检测淋巴结微转移结果对食管鳞癌患者术后生存有显著影响，同时为术后辅助治疗提供依据。     

胃癌组织中肝素酶mRNA的表达意义

目的:探讨肝素酶mRNA在胃癌及其癌旁组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系. 方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝素酶mRNA在47例手术切除的胃癌组织及癌旁组织中的表达. 结果:胃癌组织中肝素酶表达阳性率明显高于相应的癌旁组织(74.5% vs 19.1%, P<0.01). 肝素酶阳性表达率与胃癌患者的肿瘤直径、有无淋巴结转移、浸润深度以及TNM分期有关,而与胃癌患者的年龄、性别、分化程度及有无远处转移无关. 结论:肝素酶的高水平表达促进了胃癌的生长、浸润及转移,与胃癌预后不良有关系.     

p18 mRNA的表达与食管癌的关系

目的：研究食管癌患者p18 mRNA的表达,分析其表达与食管癌病理特征的关系,探讨p18基因在食管癌生长、转移中的作用。方法：选取34例经外科手术的食管癌患者（经术前及术后病理证实）食管癌组织作为实验组,同时选取34例食管癌患者的癌旁正常组织（癌旁正常组）和30例慢性胃炎患者内镜活检组织（慢性胃炎组）作为对照。采用原位...     

食管癌组织中存活蛋白的异常表达

目的通过比较食管癌组织和癌旁组织中存活蛋白的表达情况,探讨凋亡抑制因子存活蛋白与食管癌之间的关系。方法 T-A克隆制备存活蛋白定量PCR标准品pTA/存活蛋白;采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组织化学法检测33例经病理证实的食管癌组织(实验组)及其相应的癌旁组织(对照组)中存活蛋白的mRNA和蛋白质表达水平,并分析存活蛋白表达与食管癌临床病理特征间的关系。结果 FQ-PCR结果显示,实验组中存活蛋白的阳性表达率为81.82%(27/33),对照组中阳性表达率为39.40(14/33),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学结果在实验组和对照组中的阳性率与FQ-PCR结果一致,但对照组中的阳性细胞多为炎症细胞(非上皮细胞);存活蛋白的表达与患者年龄、性别及肿瘤分化程度无关(P>0.05),与肿瘤分期和淋巴结转移高度相关(P<0.05)。结论存活蛋白在食管癌组织中的阳性表达可能与肿瘤发生、浸润和淋巴结转移密切相关。     

RT-PCR测定非小细胞肺癌骨髓微转移

目的 探讨RT－PCR法检测非小细胞肺癌骨髓微转移的临床可行性。方法 以CK19mRNA作为标记物，运用RT－PCR方法检测41例非小细胞肺癌手术患者骨髓中CK19mRNA的表达，并以肺癌组织作为对照。结果 肺癌组织中CK19mRNA表达的阳性率100％，41例非小细胞肺癌患者骨髓中CK19mRNA阳性15例，阳性率36．64％，非肿瘤对照组均阴性。结论 以CK19mRNA作为肿瘤标记物，用RT－PCR法作为检测骨髓中肺癌微转移的手段是敏感和可行的。