肾癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型的建立

目的:筛选肾癌特异相关蛋白质,建立用于肾癌诊断的分类树模型,为进一步临床应用奠定基础。方法:采集肾癌患者48例与正常人83例血清,用表面增强激光解吸/电离飞行时间质谱分别检测其蛋白表达谱,用BioMarker Wizard软件筛选出差异蛋白,再用BioMarker Patterns软件建立肾癌诊断最优分类树模型。结果:在48例肾癌患者、83例正常人血清中共检测出44个差异蛋白质峰,在质荷比从2 800到16 100的差异蛋白中有21个蛋白质相对含量差异有统计学意义(P<0.05),从中选出12个差异蛋白建立分类树模型,用于鉴别肾癌患者与正常人,该模型在学习模式下的诊断准确率、灵敏度和特异性分别为98.47%(129/131),97.91%(47/48),98.79%(82/83),在测试模式下这3项指标分别为87.02%(114/131),85.42%(41/48),87.95%(73/83)。结论:肾癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型具有一定优越性,为肾癌早期诊断提供了新途径。     

蛋白质指纹图谱技术在疾病研究中的应用

人类基因组测序完成为通过分析蛋白质来诊断疾病提供了前所未有的机会.作为研究蛋白质全貌的蛋白质组学技术也因此得到了空前的发展.人们对采用蛋白质组学技术寻找新的生物标志物并应用于临床寄予了很高期望.既往,主要是通过双向凝胶电泳比较差异蛋白质寻找蛋白质生物标志物,虽然该技术分离蛋白质有很好的效果,但由于操作繁琐、敏感性低,特别是在分析小分子量蛋白时更是显得力不从心,限制了该技术用于临床标本的大规模筛查分析,使其一直局限于基础研究,难以进入临床研究及应用.     

蛋白质指纹图谱技术在诊断白血病四种分型中的应用

目的对白血病典型的4种分型血清样本进行检测分析,建立白血病分型的蛋白质指纹图谱诊断模型。方法应用蛋白质指纹图谱技术检测16例急性粒细胞白血病M2a、18例慢性粒细胞白血病、14例急性淋巴细胞白血病及16例急性粒细胞白血病M3,采用Biomarker Wizard及Biomarker Patterns 5.0软件进行标记物的比较判别,建立决策树诊断模型。结果由m/z 3 376、8 055及9 421建立决策树诊断模型,其中16例急性粒细胞白血病M2a检出率为75.0%(12/16)、9例慢性粒细胞白血病检出率为100.0%(18/18)、14例急性淋巴细胞白血病检出率71.4%(10/14)、16例急性粒细胞白血病M3检出率为87.5%(12/14)。结论由3个蛋白标记峰构成的蛋白质指纹图谱诊断模型为白血病4种分型的诊断提供了新的借鉴和参考。     

血清蛋白质指纹图谱模型在胃腺癌诊断中的应用

为探讨胃腺癌早期诊断方法，我们采用本院最近引进的蛋白质指纹图谱仪，表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI)，用于检测早期胃腺癌，经对临床检测33例胃腺癌患者，其病理分级为Ⅰ级3例、Ⅱ级13例、Ⅲ级11例、Ⅳ级6例。31例健康查体者，其灵敏度为90．91％(30／33)，特异性为93．55％(29／31)，阳性预测值为93．75％(30／32)。     

蛋白指纹图谱技术在临床的应用与国内外研究进展

蛋白质组学（proteomics）就是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系。蛋白质组学研究技术主要由分离技术和生物质谱技术为支撑平台，生物信息学为桥梁，对蛋白质表达进行研究。通过肿瘤患者体液中蛋白质组的变化，可以发现特异的肿瘤标志物以达到对肿瘤的早期诊断。医生对于肿瘤的有效处置和治疗直接依赖于他们对肿瘤早期状态的诊断能力。对早期状态的肿瘤蛋白质组学分析为肿瘤早期发生提供了新的了解，并为发现早期诊断的候选标志物提供了可能。通过剖析体液的蛋白指纹图谱的研究为早期发现肿瘤、各种药物及化疗放疗的疗效判断提供力有力的依据。肿瘤的早期发现及治疗监测对于其最后的预防和控制是至关重要的。     

蛋白指纹图谱技术临床应用前景看好

最近,由中国科学院和教育部高等学校蛋白质组学研究院召开的“SELDI专利技术国际研讨会”表明,蛋白指纹图谱技术(surfacedenhancedlaserdesorption/ionization ,SELDI) ,也称飞行时间质谱技术,在我国已应用于临床诊断,并取得较好的应用前景。SELDI技术是随着蛋白质组学的兴起而出现的一种新技术,是2 0 0 2年诺贝尔化学奖的主要应用技术,使用于各种疾病特异性蛋白指纹图谱的识别和判断。它具有快速、简便、准确和超敏感的特点,特别是可直接检测未经处理的尿液、血液和细胞裂解液等,所以,在实验诊断领域具有非常好的临床应用前景。临床…     

乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱检测及其临床意义

目的用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片检测乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱，初步探讨筛选候选肿瘤标志物建立的诊断模型在乳腺癌诊断中的临床意义。方法用SELDI-TOF-MS技术及配套蛋白质芯片检测49例乳腺癌和37例非乳腺癌疾病患者的血清蛋白质指纹图谱，并运用SPSS10．0软件判别分析处理数据和筛选标志物，以建立诊断模型。结果6个蛋白质峰[8611、16827、25711、28931、25485和2437质荷比(m/z)]组合构建的诊断模型Ⅰ鉴别乳腺癌和非乳腺癌疾病的敏感性为81．6％(40/49)，特异性为78．4％(29/37)。6个蛋白质峰(4470、10854、19193、3883、2011和7470m/z)组合的诊断模型Ⅱ鉴别Ⅰ期乳腺癌与非乳腺癌疾病的敏感性为80．0％(12/15)，特异性为89．2％(33/37)。5个蛋白质峰(2726、27014、2247、4477和19333m/z)组合的诊断模型Ⅲ鉴别Ⅰ期与Ⅱ～Ⅳ期乳腺癌的敏感性为91．2％(31/34)，特异性为93．3％(14/15)。结论SELDI-TOF-MS在乳腺癌的诊断尤其是早期诊断、术前分期及候选肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步深入研究。     

卵巢癌患者血清蛋白指纹图谱检测及其临床意义

目的 运用SELDI-TOF-MS技术（表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术）检测卵巢癌患者、良性卵巢囊肿和正常健康妇女的血清蛋白质指纹图谱，初步探讨筛选出的肿瘤标志物建立的诊断模型在卵巢癌诊断中的临床意义。方法 用SELDI-TOF-MS技术及WCX2芯片检测55例卵巢癌患者和60例对照纽的血清蛋白指纹图谱，并运用SPSS10.0软件判别分析处理数据和筛选标志物，以建立诊断模型。结果 6个蛋白质峰（11500、11650、11800、15800、16000、16250m／z）组合构建的诊断模型1鉴别卵巢癌和对照组的敏感性为94、5％（52／55），特异性为93．3％（56160）。6个蛋白质峰（11590、11700、12000、14800、15500、15900m／z）组合构建的诊断模型Ⅱ鉴别Ⅰ期卵巢癌和对照组的敏感性为82．45％（14／17），特异性为90．0％（54／60）。5个蛋白质峰（11600、11750、16100、16150、16200m／z）组合构建的诊断模型Ⅲ鉴别Ⅰ期卵巢癌患者和Ⅱ～Ⅳ期卵巢癌患者的敏感性为92．1％（35／38），特异性为94．1％（16／17）。结论 SELDI-TOF-MS技术是一种快速、准确、高通量、高灵敏度的蛋白质分析方法，能够直接检测出卵巢癌患者血清中相对特异的肿瘤标志物，其对于卵巢癌的早期诊断具有一定的临床意义。     

蛋白指纹图谱技术在盆腔结核中的诊断价值探讨

目的探讨血清蛋白指纹图谱技术在盆腔结核诊断中的应用价值。方法应用蛋白指纹图谱技术(PFT)检测盆腔结核患者、健康者各25例,以Ciphergen蛋白芯片3.1.1软件比较,分析血清蛋白峰值,筛选疾病相关标志物并进行统计学处理。结果存在有4个蛋白峰值(8048m/z、5335m/z、11 700m/z和11 683m/z)为高表达;其组成的诊断模型可以很好的鉴别盆腔结核与健康者,总准确率86%(43/50),特异度100%(25/25),灵敏度72%(18/25),差异有显著性(P<0.01)。结论血清蛋白指纹图谱检测技术简便、快速,标本用量少,是筛选盆腔结核特异性标志物的有效手段,将成为盆腔结核早期诊断的指标之一。     

血清蛋白质组图谱的检测与识别是否有望成为临床癌症早期诊断的新方法？

使用蛋白质质谱技术发现可以早期确诊组织癌变的新肿瘤标记物是近年来癌症蛋白质组学研究的一个重要方向。高通量的蛋白质质谱技术的发展不仅为人们在蛋白质水平上全面了解组织癌变的分子机理提供了物质基础，也加速了组织特异的血清肿瘤标记物的发现。最近出现的基于蛋白芯片（ProteinChip）的SELDI-TOF质谱巧妙地将色谱分离和蛋白质谱两技术结合为一体，使其可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成。基于器官组织的生理状态变化会引起血清蛋白质组的改变的理论，人们试图使用SELDI-TOF质谱来检测组织特异的血清蛋白质组图谱，进而实现癌症的早期诊断。该技术已在前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌的诊断研究中取得令人侧目的进展。作为一项引人关注的新型技术，它同时也引发了热烈的学术辩论。本文围绕SELDI-TOF技术原理、其在肿瘤标记物发现研究中的应用，使用血清蛋白质组图谱诊断癌症的研究进展和与其有关的学术辩论作简要综述。     

多肿瘤标志物蛋白芯片检测在肺癌诊断中的价值

目的:探讨多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌诊断中临床应用价值。方法:应用化学发光法多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统,测定并分析254例病理或细胞学首次确诊的肺癌患者,以及276例健康体检者血清中12种肿瘤标志物(CA19-9、NSE、CEA、CA242、CA125、CA153、AFP、ferritin、f-PSA、PSA、β-HCG及HGH)的表达水平。结果:肺癌组的C-12芯片检测阳性率显著高于健康体检组(68.90%vs17.03%,χ2=152.95,P<0.01),敏感性和特异性分别为68.9%和82.9%;肺癌组中ferritin、CA125、CEA及CA19-9的阳性率分别为41.04%、35.86%、33.47%和13.15%。结论:多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺部恶性病变的诊断中有较高的临床应用价值。     

肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型的建立

目的建立肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨其对肺癌的诊断价值。方法收集127例肺癌患者、108例正常人血清标本,随机分成训练组(肺癌89例、正常人68例)与测试组(肺癌38例、正常人40例),应用表面增强激光解吸/电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)检测其蛋白质指纹图谱。用BioMarker Pattern软件分析训练组中肺癌与正常人血清中的差异蛋白后,建立肺癌诊断的最优分类树模型,然后用测试组血清标本盲法验证该模型的诊断效率。结果分类树诊断模型由质荷比分别为5 808、5 971和7 780的3种蛋白质组成。盲法验证显示,该模型诊断肺癌的准确率为92.3%,敏感性与特异性分别为92.1%(35/38)和92.5%(37/40)。结论肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型较以往的传统方法具有更高的敏感性与特异性,值得进一步研究。     

肺腺癌患者血浆microRNA-10b表达及临床意义

目的 探讨肺腺癌患者血浆microRNA-10b（miR-10b）与临床特征的关系及其作为肺腺癌肿瘤标志物的可行性。方法 46例肺腺癌患者（肺腺癌组）与42例体检健康者（对照组）,采用实时荧光定量PCR检测2组血浆miR-10b水平,分析miR-10b与肺腺癌临床特征间关系。绘制ROC曲线,评估miR-10b的诊断效能。结果 肺腺癌组血浆miR-10b水平（1.632（0.836,2.313））较对照组（0.497（0.221,0.766））上调3.284倍（P〈0.01）;miR-10b表达在淋巴结转移上差异有统计学意义（P〈0.05）,在肿瘤原发灶情况、TNM分期上差异无统计学意义（P〉0.05）;miR-10b为1.212时,诊断肺腺癌的敏感性为64.3%,特异性为82.4%,AUC为0.765。结论 肺腺癌患者血浆miR-10b表达明显上调,miR-10b有望成为肺腺癌的早期诊断标志物。     

P53融合蛋白对肺癌细胞生长的影响

目的研究蛋白转导域(PTD)与人野生型P53(wtP53)融合表达的融合蛋白PTD-P53对肺癌细胞增殖的影响。方法用PTD-P53处理人肺癌细胞H1299和NIC-H157后,采用细胞增殖抑制实验(MTT法)分析处理后观察细胞的生长情况,流式细胞术(FCM)分析处理后观察细胞的周期变化。结果PTD-P53对肺癌细胞的生长有明显的抑制作用,处理后细胞周期出现阻滞现象。结论采用PTD-P53治疗肺癌将会是一种有效的途径。     

应用SELDI-TOF-MS技术诊断2型糖尿病肾病

目的比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值。方法采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱。结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证。结果在相对分子量2 000~30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01)。筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6 666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型。利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%。结论利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径。     

流式细胞术检测肺癌患者P16蛋白表达水平的应用价值

目的 探讨流式细胞术（FCM）检测肿瘤相关基因P16蛋白表达的应用价值。方法 用人白细胞共同抗原45（CD45）和P16荧光标记抗体同步标记肺穿刺肿瘤标本中血细胞和肿瘤细胞的P16蛋白，经FCM测定CD45^＋P16^＋和CD45^-P16^＋细胞比率后，对每份穿刺标本血细胞P16^＋与肿瘤细胞P16^＋细胞的比值（r）进行比较。结果 肺癌患者39份穿刺标本中正常血细胞与肿瘤细胞的P16蛋白低表达率分别是15．39％（6／39）和69．23％（27／39），二者差异有统计学意义（P〈0．05）。61．90％（13／21）的异倍体肿瘤r〉4；22．22％（4／18）的二倍体肿瘤r〉4，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论FCM可同步测定血细胞与肿瘤细胞P16蛋白表达水平，并可比较区分出表达程度的差异性，在临床科研应用中有较好的前景。     

穿刺法兔VX2肺移植瘤模型的建立及其影像学评价

目的 尝试建立适于影像学评价的兔VX2肺移植瘤模型.方法 新西兰大白兔30只,随机分为两组,实验组采用CT引导下穿刺VX2肿瘤组织块注入法建立兔肺移植瘤模型,以常用的VX2肿瘤组织悬液注射法作为对照组,以病理结果作为金标准.结果 实验组肺内成瘤率86.67%(13/15),胸膜种植率40.00%(6/15),平均生存时间(57.84±6.00)天.对照组成瘤率100%(15/15),胸膜种植率86.67%(13/15),平均生存时间(29.00±7.01)天.生存时间采用Kaplan-Meier曲线分析,两组差异有统计学意义(P<0.01);实验组胸膜及胸壁种植率低于对照组(P<0.05),两组肿瘤种植成功率差异无统计学意义(P>0.05).结论 CT引导下穿刺VX2肿瘤组织块注入法建立兔肺移植瘤模型在肺内形成孤立结节,较常用的肿瘤组织悬液注射法明显降低了胸膜及胸壁种植率,延长了实验动物生存时间,适合于影像学研究.     

肺原发性肝样腺癌临床病理观察

目的探讨肺原发性肝样腺癌的临床病理特征、免疫表型、诊断和鉴别诊断。方法对2014年1月收集的1例肺原发性肝样腺癌的临床表现、大体及组织学形态、免疫组化等进行观察研究,并复习相关文献。结果患者为64岁吸烟男性,因咳嗽、咯血8 d入院。肿物大体呈卵圆形,切面灰白,境界清楚;镜下具有肝细胞癌样和腺癌分化特征,间质可见丰富的血窦。免疫组化示肿瘤细胞Hepatocyte、AFP、CK8/18、CK19、CK(pan)阳性;而CK7、CK14、CK5/6、TTF-1、CEA、Vimentin等阴性。结论肺肝样腺癌是原发于肺的上皮性恶性肿瘤,诊断的确立主要依赖发现相似于肝细胞癌的形态(肝样结构),并通过临床病理与免疫组化检测除外肝细胞癌等疾病的转移。