淫羊藿甙诱导白血病细胞凋亡及其对癌基因表达的影响

淫羊藿甙 (ｉｃａｒｒｉｎ ,ＩＣＡ)是从朝鲜淫羊藿中提取的主要单体成分 ,具有多种生物学效应 ,能抑制多种肿瘤细胞株的增殖 ,能诱导白血病细胞ＨＬ 6 0沿粒系方向分化[1] 。我们对ＩＣＡ诱导白血病细胞凋亡进行了观察 ,并检测ＩＣＡ作用后白血病细胞癌基因ｍＲＮＡ和蛋白表达水平的改变。材料和方法1　材料　ＩＣＡ ,淡黄色结晶 ,纯度在 96 %以上 ,购于沈阳药科大学。以乙醇助溶 ,ＲＰＭＩ 16 4 0配制。ＨＬ 6 0细胞系 ,由中国医学科学院血液学研究所提供 ,培养于含体积分数为 10 %的小牛血清的ＲＰＭＩ 16 4 0培养基中。ＩＣＡ对ＨＬ 6 0…     

鬼臼叉甙阿糖胞苷对HL－60细胞诱导分化的研究

鬼臼叉甙阿糖胞苷对ＨＬ－６０细胞诱导分化的研究贝龄，范蕾蕾，高雪芝，戴梅美我们以对ＨＬ－６０细胞具有确定分化作用的诱导剂维甲酸（ＲＡ）和１．２５二羟维生素Ｄ＿３（ＶＤ＿３）为参照，来比较鬼臼叉甙（ＶＰ－１６）和阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）对ＨＬ－６０细胞的...     

淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响

目的 探讨淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法 采用体外成骨细胞培养技术，进行细胞计数和碱性磷酸酶活性测定，观察淫羊藿甙对成骨细胞生长增殖和分化的影响。结果（1）不同浓度的淫羊藿甙对成骨细胞的生长增殖均有促进作用，以10ng/ml 浓度时其作用最强（P＜0．05）；（2）淫羊藿甙可明显抑制分化早期成骨细胞内ALP活性，而对分化晚期成骨细胞内ALP生具有促进作用；（3）淫羊藿甙对成骨细胞的作用与药物作用时间有关。结论 淫羊藿甙促进成骨细胞增殖的同时，增强了成骨细胞活性。     

淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法采用体外成骨细胞培养技术,进行细胞计数和碱性磷酸酶活性测定,观察淫羊藿甙对成骨细胞生长增殖和分化的影响。结果(1)不同浓度的淫羊藿甙对成骨细胞的生长增殖均有促进作用,以10ng/ml浓度时其作用最强(P<0.05);(2)淫羊藿甙可明显抑制分化早期成骨细胞内ALP活性,而对分化晚期成骨细胞内ALP活性具有促进作用;(3)淫羊藿甙对成骨细胞的作用与药物作用时间有关。结论淫羊藿甙促进成骨细胞增殖的同时,增强了成骨细胞活性。     

9—顺式维甲酸诱导HL—60细胞凋亡

目的：检测９－顺式维甲酸（９－ｃｉｓＲＡ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的能力，并探讨其分子机制。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、流式细胞仪分析检测细胞凋亡，应用流式细胞仪检测ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２含量。结果：９－ｃｉｓＲＡ可以诱导ＨＬ－６０细胞在分化后发生典型的凋亡。在ＨＬ－６０细胞分化和凋亡的过程中ｂｃｌ－２含量逐渐下降。９－ｃｉｓＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡能力和降低ｂｃｌ－２表达的能力均显著强于全反式维甲酸（Ａ－ＴＲＡ）。结论：９－ｃｉｓＲＡ具有诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。ｂｃｌ－２表达水平的降低可能是经诱导分化成熟的白血病细胞走向凋亡的重要条件。     

鬼臼乙叉甙诱导HL－60细胞凋亡作用的实验研究

鬼臼乙叉甙诱导ＨＬ－６０细胞凋亡作用的实验研究吴学宾高雪芝金宝翠陈宝安黄晓明高峰细胞凋亡是目前血液肿瘤学研究的热点课题之一。我们仅就鬼臼乙叉甙（Ｖｐ１６）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡作用的实验研究报告如下。材料和方法１材料细胞株：ＨＬ－６０细胞株由上海血液...     

HL-60细胞属AML－M_2型，NB4细胞为真正的AML-M_3型

ＨＬ－６０细胞属ＡＭＬ－Ｍ２型，ＮＢ４细胞为真正的ＡＭＬ－Ｍ３型何小庆韩锐ＨＬ－６０细胞，１９７７年Ｃｏｌｉｎｓ等［１］报道建株。当时认为是人急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）细胞。其最大的特点是可被分化诱导剂诱导向多个方向分化，ＨＬ－６０细胞自建系以来...     

rhTNF－α对HL－60细胞分化诱导与c－myc基因转录变化的研究

应用细胞总ＲＮＡ点杂交技术，以￣（３２）Ｐ标记的ｖ－ｉｎｙｃＤＮＡ为探针，研究了小剂量ｒｈＴＮＦ－α诱导ＨＬ－６０白血病细胞分比过程中对其ｃ－ｍｙｃ癌基因转录水平的影响。结果发现：１～１００Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ可明显抑制ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平。ｃ－ｍｙｃ转录降低与ＴＮＦ作用的剂量和时间具有依赖关系。采用ＨＬ－６０细胞低ＦＣＳ培养法，比较低浓度ＦＣＳ、ＴＮＦ对ＨＬ－６０细胞分化诱导和增殖抑制作用与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平降低的相关性。认为ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ降低与ＴＮＦ诱导ＨＬ－６０细胞分化特异相关。     

淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响简

背景：中药淫羊藿一直以来被用于骨质疏松的治疗和骨缺损的修复。目的：探讨淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响。 方法：应用数据库文献检索的方法获取淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨性分化影响研究的文献,对符合研究标准的文献进行深入的分析。通过检测淫羊藿诱导骨髓间充质干细胞成骨性分化过程中碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白、转化生长因子β、骨形态发生蛋白、骨钙素、骨涎蛋白等,了解淫羊藿对骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化的机制。结果与结论：淫羊藿对骨髓间充质干细胞的影响呈剂量依赖性,在诱导培养的早期淫羊藿苷可以提高细胞的磷酸酶活性,在诱导培养的晚期增加细胞钙化结节数,促进骨钙素分泌量,显著提高转化生长因子β1、骨形成蛋白2、胰岛样生长因子1、骨桥蛋白和骨涎蛋白等的表达水平。淫羊藿对骨髓间充质干细胞的增殖和成骨性分化有促进作用,可作为一种良好的骨诱导活性因子。     

三氧化二砷对HL-60细胞及NB4细胞端粒酶活性的调节

目的 了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对ＨＬ－６０细胞及ＮＢ４细胞端粒酶活性的调节作用。方法 利用透射电镜、流式细胞仪、半定量端粒重复扩增、－银染色等手段,检测细胞的分化、凋亡,ｂｃｌ－２表达及端粒酶活性。结果 低浓度Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０及ＮＢ４细胞的诱导分化作用不及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）,但对其端粒酶活性的下调作用却比ＡＴＲＡ强烈和迅速。较高浓度Ａｓ２Ｏ３在有效诱导两种细胞凋亡过程中,伴随粒酶活     

白血病细胞分泌肿瘤坏死因子α及受诱导分化剂影响

作者观察２８例急性白血病患者原代白血病细胞和ＨＬ－６０细胞自发分泌及在脂多糖（ＬＰＳ）诱导下分泌肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）情况，并用咐醇酯（ＴＰＡ）等５种诱导分化剂诱导原代白血病细胞和ＨＬ－６０细胞，探讨白血病细胞诱导分化与ＴＮＦα分泌之间关系。结果：６例急性单核细胞白血病患者的白血病细胞在ＬＰＳ诱生下可以分泌ＴＮＦα，其中３例在无ＬＰＳ时还可自发分泌ＴＮＦα。用ＴＰＡ等诱导分化后部分原代白血病细     

rhTNF—a对HL—60细胞分化诱导与c—myc基因转录变化的研究

应用细胞总ＲＮＡ点杂交技术，以３２Ｐ标记ｖ－ｍｙｃ ＤＮＡ为探针，研究了小剂量ｒｈＴＮＦ－ａ诱导ＨＬ－６０白血病细胞分化过程中对其ｃ－ｍｙｃ癌基因转录水平的影响。结果发现：１－１００Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ可明显抑制ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ水平。ｃ－ｍｙｃ 转录降低与ＴＮＦ作用的剂量和时间具有依赖关系。采用ＨＬ－６０细胞低ＦＣＳ培养法，比较低浓度ＦＣＳ，ＦＮＦ对－６０细胞分化诱导和增殖抑制作用与     

阿糖胞苷诱导HL—60细胞凋亡中bcl—2,c—myc基因表达水平的变化

阿糖胞苷诱导ＨＬ－６０细胞凋亡中ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ基因表达水平的变化仇志根马伴吟杨毅吴王月现已证明，阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。我们采用Ａｒａ－Ｃ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，并观察了凋亡调控基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ表达...     

淫羊藿与骨代谢研究现状

淫羊藿（Hera Epimdii）为小蘖科植物，李时珍在《本草纲目》中记载具有“益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力”的功效。现代药理研究发现淫羊藿的主要成分是淫羊藿黄酮类、淫羊藿多糖、淫羊藿甙、淫羊藿苷和淫羊藿次苷等，临床应用广泛，本文就其与骨代谢研究现状综述如下：     

淫羊藿苷对大鼠间充质干细胞骨向分化过程中转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2表达的影响

背景:淫羊藿苷作为补肾中药淫羊藿的主要有效成分,能够有效促进间充质干细胞向成骨细胞分化.目的:观察淫羊藿苷在诱导间充质干细胞骨向分化过程中对转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2表达的影响,阐释其可能的诱导机制.方法:运用全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞:以20 mg/L淫羊藿苷作为间充质干细胞药物干预浓度,根据干预条件的不同将实验分为;空白组、经典组(加经典成骨诱导剂)、淫羊藿苷组、淫羊藿苷+经组:ELISA法检测各组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达.结果与结论:经典组、淫羊蓍苷组、淫羊藿苷+经组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2值均高于空白组(P<0.05):各组第7天的转化生长因子β1,值高于14,21 d(P<0.01),各组不同诱导时间骨形态发生蛋白2值之间相比差异无显著性意义(P>0.05).提示上调转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达量可能是淫羊藿苷诱导各组促进间充质于细胞骨向分化的作用机制之一.     

诱导分化剂对白血病细胞产生肿瘤坏死因子α作用探讨

急性白血病患者原代白血病细胞的ＨＬ－６０细胞在诱导分化前后产生肿瘤坏死因子α的作用被研究。急性淋巴细胞白血病患者原代白血病细胞在诱导分化前后均不能产生ＴＮＦα，而急性非淋巴细胞白血病患者的原代白血病细胞在５种诱导分化剂诱导分化后能产生ＴＮＦα，白血病细胞产生ＴＮＦα与细胞分化密切相关。     

维甲酸诱导HL-60细胞Fas蛋白表达

目的：探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和９顺式维甲酸（９ｃｉｓＲＡ）对ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及维甲酸对抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡敏感性的影响。方法：用流式细胞仪检测ＨＬ６０细胞膜Ｆａｓ蛋白表达水平；分别采用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪检测抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结果：ＨＬ６０细胞Ｆａｓ弱表达。经１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ或９ｃｉｓＲＡ分别预处理４天后，ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性均显著提高。９ｃｉｓＲＡ提高ＨＬ６０细胞对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性的能力强于ＡＴＲＡ。结论：维甲酸可上调ＨＬ６０细胞表达Ｆａｓ，这可能与维甲酸诱导ＨＬ６０细胞分化相关。进一步深入探讨其分子机制，将为肿瘤治疗，特别是自体骨髓移植中骨髓净化提供新方法     

外源性野生型p53基因在HL60－n细胞表达的意义

为研究外源性野生型ｐ５３基因在白血病细胞表达的意义，采用重组逆转录病毒载体介导的人野生型ｐ５３ｃＤＮＡ转移ＨＬ６０－ｎ细胞。结果发现外源性野生型ｐ５３基因可以诱导ＨＬ６０－ｎ细胞死亡，死亡细胞呈凋亡的形态学特征。流式细胞仪分析显示野生型ｐ５３基因诱导ＨＬ６０－ｎ细胞死亡不伴有细胞周期Ｇ１期的生长阻滞。ＮＢＴ还原试验还提示野生型ｐ５３基因无诱导ＨＬ６０－ｎ细胞分化的作用。这些结果阐明了野生型ｐ５３基因抑制白血病细胞生长的部分机制     

淫羊藿苷促进羊骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化

背景:寻找一种简单有效、安全价廉且可替代生长因子的生物活性物质,是骨组织工程的客观要求,中药来源的植物黄酮淫羊藿苷可通过提高成骨细胞功能促进成骨,但是对骨髓间充质干细胞的作用尚未明确.目的:探讨淫羊藿苷对羊骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-09/2009-02在南方医院创伤骨科实验室完成.材料:清洁级成年雄性中国青山羊3只,由南方医院实验动物中心提供.淫羊藿苷标准品由中国药品生物制品检定所提供,批号110737-200312,纯度98.3%.方法:体外分离培养羊骨髓间充质干细胞,传至第3代后,按2×103/孔接种至96孔板,分别加入100,10,1,0.1μmol/L淫羊藿苷培养基150μL进行培养;设立对照组,仅加入等量普通DMSO培养基.主要观察指标:采用MTT法检测细胞生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期,通过碱性磷酸酶试剂盒测定细胞碱性磷酸酶活性,放免法检测细胞骨钙素表达,茜素红染色观察钙化结节形成能力.结果:0.1 μ mol/L淫羊藿苷可明显促进羊骨髓间充质干细胞增殖,增加S期和G2/M期细胞数量:随着淫羊藿苷浓度的增加,促细胞增殖活性降低,100 μmol/L淫羊藿苷表现为明显的抑制细胞增殖作用.淫羊藿苷呈剂量依赖性促进羊骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素表达.10,100 μ mol/L淫羊藿苷诱导钙化结节形成能力优于0.1和1μmol/L淫羊藿苷,对照组羊骨髓间充质干细胞未形成钙化结节.结论:淫羊藿苷对羊骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化具有促进作用,可被视为一种良好的骨诱导活性因子.     

钙离子在VP—16诱导HL—76细胞凋亡的作用

为了研究Ｃａ＾２＋在ＶＰ－１６（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡中的作用,采用流式细胞术,激光共聚焦显微镜和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法进行观察,结果显示,ＶＰ－１６可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,并可引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度的增加,细胞外钙离子螯合剂ＥＧＴＡ不抑制其诱导的细胞凋亡,而细胞内钙离子螯合剂ＢＡＰＴＡ－ＡＭ可抑制此过程,并且可抑制细胞色素Ｃ的释放,实验结果提示,Ｃａ＾２＋在细胞凋亡和细胞色素Ｃ的释放过程中起重要的作用。