拉米夫定体外对慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能的影响

目的:体外研究不同浓度拉米夫定(lamivu- dine,LAM)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者树突状细胞(dendritic cell,DC)功能影响．方法:分离慢乙肝患者外周血单核细胞,在含GM-CSF IL-4及不同浓度LAM(0,0．125, 0．25,0．5,1,2 mmol／L)培养条件下制备DC．观察DC形态学变化并用MTT法测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM) 测定其细胞表型分子CD1a,CD83,CD80及 HLA-DR的表达,ELISA法检测培养上清中 IL-12和IL-6含量．结果:在LAM 0．5 mmol／L组,DC表型分子 CD83,CD1a,HLA-DR的表达最高,CD80与 LAM未处理组相比无明显差异．与LAM未处理组相比,LAM 0．5 mmol／L处理组DC膜表面分子CD1a,CD83,HLA-DR表达增高(CD1a: 54．0±9．2 vs 33．6±10．1,P<0．05;CD83:20．3 ±6．1 vs 11．8±6．2,P<0．05;HLA-DR:74．5± 7．1 vs 52．9±7．7,P<0．05);其上清液中IL-12 分泌水平增高(810．0±91．5 ng／L vs 268．0± 34．3 ng／L,P<0．05),IL-6则显著降低(28．1± 2．6 ng／L vs 55．3±7．4 ng／L,P<0．05);刺激同种异体淋巴细胞增殖能力(SI)增强(1．9±0．6 vs 1．2±0．5,P<0．05)．结论:LAM体外可增强慢乙肝患者树突状细胞活性．     

慢性乙型肝炎病人外周血树突状细胞对 HBsAg的提呈作用

目的 研究慢性乙型肝炎（乙肝）病人外周血培养的树突状细胞（dendritic cell,DC)对HBsAg的提呈作用。方法 从乙肝病人外周血中培养扩增DC,以不同浓度的HBsAg与DC共同孵育1.5h,然后再与10倍的自体T细胞混合培养5d,结束培养前13h加入37kBq/孔（1uCi=37kBq)^3H胸腺嘧啶。收获细胞,用γ液体闪烁计数仪测定cpm。结果 抗原处理的DC刺激T细胞增殖效应（cpm）明显高于未经抗原处理的DC。结论 从慢性乙肝病人外周血培养的DC对HBsAg有较强的提呈作用。     

负载HBcAg对慢性HBV感染患者树突状细胞的活化作用及功能影响

目的:探讨免疫耐受期慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DC)负载HBcAg后细胞表型及免疫功能的改变。方法:从CHB免疫耐受期患者外周血分离培养DC,在DC成熟前,加入重组HBcAg表位肽,诱导HBV特异性DC分化成熟,流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD1a、CD80、CD83的表达水平,应用淋巴细胞增殖试验评估DC功能。结果:负载不同剂量的HBcAg后,DC细胞活化增强,DC细胞共刺激分子标志物CD1a、CD80以及CD83表达率均明显上升,且随着抗原负载剂量的增加,表达率进一步增加,各组之间差异具有统计学意义(均P<0.001);未负载HBcAg的DC细胞激活的淋巴细胞反应较弱,负载HBcAg的DC细胞刺激同种异体健康成人T淋巴细胞增殖能力增强,且随着负载抗原剂量的加大,T淋巴细胞的增殖能力进一步提高,与未负载抗原的对照组相比,差异具有统计学意义(F=428.14,P=0.000)。结论:体外负载HBcAg刺激CHB患者DC细胞可增强其有效抗原提呈能力,促进T淋巴细胞增殖。     

HBsAg负载慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型分子的变化

慢性乙型肝炎(CHB)病毒感染后，树突状细胞(DCs)抗原提呈功能下降，表现为成熟障碍，主要组织相容性复合体(MHC)分子和共刺激分子的表达不同程度下调，刺激混合淋巴细胞反应(MLR)能力减弱。由于DCs不能有效地提呈抗原，无法激活正免疫应答，这可能与乙型肝炎病毒(HBV)持续感染免疫耐受形成的机制有关。     

恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能的体外影响

目的:研究恩替卡韦(ETV)对慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)功能的影响.方法:体外常规分离CHB患者及健康人外周血单个核细胞,诱导扩增后常规培养.第4天将其与一定浓度的恩替卡韦共培养,第8天收获DC进行细胞表型、同种异体混合淋巴细胞反应等相关检测.结果:细胞培养8 d时DC形态分化健康对照组优于CHB ETV处理组,CHB ETV处理组优于CHB组;CHB组CD1a(35.73±3.12 vs 62.31±5.22,P<0.01),CD80(28.19±1.64 vs 45.38±3.10,P<0.01),CD83(22.24±2.14 vs 40.63±7.21,P<0.01)及HLA-DR(36.74±0.98 vs 56.05±3.89,P<0.01)表达明显低于健康对照组,而ETV处理组与CHB组相比CD83 (27.41±9.23 vs 22.24±2.14,P<0.05),CD80(32.67±7.82 vs 28.19±1.64,P<0.05)及HLA-DR(40.84±5.57 vs 36.74±0.98,P<0.01)显著高表达;淋巴细胞增殖能力测定ETV处理组DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力较CHB组增强(1.53±0.09 vs 1.45±0.12,P<0.05).结论:恩替卡韦作为治疗CHB的新一代核苷类药物,除了直接抑制乙肝病毒DNA合成外,也能够增强CHB患者外周血DC的功能,通过调节机体的免疫系统发挥间接抗病毒作用.     

慢性乙型肝炎患者树突状细胞特点及其免疫治疗

树突状细胞（DC）是诱导和维持抗原特异性免疫应答非常重要的抗原提呈细胞（APC），研究表明慢性乙型肝炎（CHB）患者体内DC功能下降，这可能是导致CHB的重要原因之一。DC增强免疫疗法的基本原理是提高CHB患者体内DC功能，诱导强烈的HBV特异性免疫反应清除病毒。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者疗效观察

目的探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者的疗效。方法将60例慢性乙型肝炎患者随机分为治疗组和对照组,治疗组应用阿德福韦酯治疗,对照组给予护肝片治疗,观察2年。结果抗病毒治疗组患者在治疗3个月、6个月、12个月和24个月时血清HBV DNA阴性率分别为86.7%、93.3%、93.3%和93.3%,显著高于对照组（P〈0.05）;抗病毒组患者谷丙转氨酶复常率也显著高于对照组。结论阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者有效。     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞功能的研究

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DC)的免疫功能.方法从慢性乙型肝炎患者外周血中分离单个核细胞,用无血清培养法分离培养DC,用流式细胞仪检测DC表型,用液闪计数仪观察DC对T细胞的增殖作用,用ELISA法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中细胞因子的分泌水平.结果患者组DC的CD86的表达率为(70.2±5.2)%,明显低于正常人组(95.3±3.8)%,P＜0.01;其诱导T细胞增殖能力每分钟液闪计数cpm为10000±2000,明显低于正常人组(cpm为30000±3000),P＜0.01患者MLR中IL-12为(120.0±19.7)pg/ml,γ-干扰素为(799.0±161.3)pg/m1,明显低于正常人组的(280.0±41.1)pg/ml和(3359.0±635.4)pg/ml,P＜0.01.结论慢性乙型肝炎患者外周血DC免疫功能低下,并与DC表面CD86的表达率下降及DC分泌IL-12减少密切相关.     

阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群的变化

目的探讨阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能的影响。方法采用流式细胞术检测40例慢性乙型肝炎患者在服用阿德福韦酯治疗前后外周血T细胞亚群;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA。结果应用阿德福韦酯治疗24周后,患者CD4+T细胞计数为598.4±131.8 cell/L,显著高于治疗前470.1±70.1 cell/L(P<0.01);CD4+/CD8+为1.75±0.37,显著高于治疗前1.21±0.15(P<0.01),而CD8+T细胞计数为345.2±54.1 cell/L,显著低于治疗前393.5±63.4 cell/L(P<0.01)。结论阿德福韦酯可改善慢性乙型肝炎患者的细胞免疫功能,抑制病毒复制。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察阿德福韦酯（ADV）治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效和安全性。方法将43例慢性乙型肝炎患者分为初始治疗组25例和拉米夫定（LAM）耐药组18例，分别给予ADV 10mg口服，每日1次，治疗48周。结果ADV初治组和拉米夫定（LAM）耐药组患者在治疗48周时，ALT复常率分别为72．0％和66．7％，血清HBVDNA阴转率分别达48．0％和44．4％，HBeAg转阴率分别为28．0％和27．8％，HBeAg／HBeAb血清转换率分别为20．0％和16．7％。两组血清HA、LN和PC3均明显下降，两组差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者耐受性良好，无明显肾功能损伤等不良反应。结论ADV治疗慢性乙型肝炎，对初治及拉米夫定耐药患者均能有效控制病毒复制，改善肝功能，促使HBeAg血清学转换，长期服药安全性好。     

CpG ODN2216刺激慢性乙型肝炎患者浆样树突状细胞表型和功能的变化

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血浆样树突状细胞(pDCs)的特点,并探讨pDCs在乙型肝炎病毒(HBV)感染发病机制中的作用。方法收集20例慢性乙型肝炎患者和15名健康人外周抗凝血,应用流式细胞仪分析pDCs的频率；同时检测CpG ODN2216刺激后pDCs表型及分泌干扰素(IFN)α功能的变化；并分析HBV慢性感染患者外周血pDCs频率、数量和功能的变化及其与临床病情的关系。结果应用免疫磁珠分选技术可得到纯度大于95%的pDCs。经CpG ODN2216刺激后纯化的pDCs能高表达共刺激分子CD80、CD86、CD40和CD83,并分泌大量的IFNα。与健康人比较,HBV感染患者外周血中pDCs频率明显下降,分别为0．287%±0．142%和0．192%±0．110%；经CpG ODN2216刺激后,其表面共刺激分子CD80和CD40表达明显下降,产生IFNα的能力也显著降低,分别为(3142．9±1292．3) pg/ml和(972．6±705．5)pg/ml。相关性分析表明,患者pDCs产生的IFNα水平与丙氨酸氨基转移酶水平呈明显负相关,但与血清病毒载量无明显相关性。结论CpG ODN2216可以刺激pDCs成熟并分泌大量IFNα。慢性乙型肝炎患者外周血pDCs频率、表型和功能明显下降,这可能是HBV持续感染的重要致病机制。     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者肝组织学的影响

本研究观察了23例慢性乙型肝炎(CHB)患者阿德福韦酯(ADV)抗病毒治疗前后的肝脏组织学的变化及肝组织病毒抗原的表达情况,现报道如下. 一、材料与方法 1.病例选择:选择2007年7月至2009年7月在宁夏医科大学附属医院感染性疾病科门诊及住院的CHB患者.诊断均符合中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》[1].初治患者均符合下列条件:(1)HBV DNA≥104IU/ml,ALT≥2×ULN(持续＞6个月).     

Treatment of patients with chronic hepatitis B with adefovir dipivoxil

Adefovir dipivoxil, a nucleotide analog of adenosine monophosphate, is an antiviral agent that suppresses hepatitis B virus (HBV) replication through inhibition of DNA polymerase and by chain termination. To determine the effectiveness of adefovir, three populations of patients with chronic hepatitis B patients were studied: hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive patients, HBeAg-negative patients, and patients with lamivudine-resistant tyrosine-methionine-asparate-aspartate (YMDD) mutants. All three groups of patients were treated for 48 weeks with adefovir 10 mg/d, and significant reduction in serum HBV DNA and normalization of serum alanine aminotransferase (ALT) were noted. Significant improvement in liver histology was noted in HBeAg-positive and in HBeAg-negative patients. Significant HBeAg loss and HBeAg seroconversion rates were noted in HBeAg-positive patients and in lamivudine-resistant patients. No major drug-related side effects were noted. Adefovir 10 mg/d orally is safe and effective for treatment of chronic hepatitis B.     

阿德福韦酯联合苦参素治疗经阿德福韦酯应答不佳的慢性乙型肝炎的临床研究

目的 观察阿德福韦酯联合苦参素治疗经阿德福韦酯治疗2年后应答不佳的慢性乙型肝炎的疗效.方法 选取初始接受阿德福韦酯治疗,经两年治疗后所有患者血清HBV DNA水平维持在1.0×104copies/mL～9.9×105copies/mL之间的慢性乙型肝炎患者75例.分为联合组和单用组,联合组(39例)给予阿德福韦酯(10 mg,1次/d,口服)和苦参素(住院期间苦参素针0.6静脉滴注1次/d,出院后改苦参素胶囊0.3,口服,3次/d).单用组(36例)继续给予阿德福韦酯(10 mg,1次/d,口服)治疗.观察治疗26周、52周时的应答情况.结果 两组患者在治疗26周、52周时,联合组ALT复常率显著高于单用组,差异有显著性(P＜0.05).联合治疗26周、52周后,HBV DNA阴转率均明显高于单用组(30.7%vs 8.3%、53.8%vs22.2%),差异有显著性(P＜0.05).第52周时,两组患者的HBeAg血清学转换率有显著性差异(28.2%vs7.7%,P＜0.05).结论 对于经过阿德福韦酯抗病毒治疗应答不佳者,阿德福韦酯联合苦参素治疗显示良好的协同效果.     

阿德福韦酯初始治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的观察阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者的临床疗效及不良反应。方法选择慢性乙型肝炎患者433例,分为HBeAg（＋）组270例,HBeAg（-）组163例,口服阿德福韦酯10mg,1／d,连续服用。检测肝功能指标ALT、AST、TBIL及HBV血清学标志物HBV DNA、HBVM。结果随治疗时间的延长,2组患者血清ALT复常率、HBV DNA阴转率或HBeAg血清转换率均逐渐升高,HBV DNA下降幅度逐渐增大。在12个月时2组ALT复常率分别为77．4％和74．7％,HBV DNA阴转率为56．5％和54．2％,HBV DNA下降幅度3．79log10和2．96log10,HBeAg（＋）组HBeAg血清转换率为25．6％;在24个月时2组ALT复常率分别为92．9％和85．7％,HBV DNA阴转率分别为72．6％和66．7％,HBV DNA下降幅度分别为3．90log10和3．14log10,HBeAg（＋）组HBeAg血清转换率为33．3％。2组临床疗效相似,各指标未见统计学差异。所有病例均未见严重不良反应。结论阿德福韦酯是一种有效的抗HBV药物,对HBeAg（＋）和HBeAg（-）慢性乙型肝炎均能有效控制病毒复制,改善肝功能,促使HBeAg血清学转换。长期用药安全性及耐受性良好。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床观察

目的 通过阿德福韦酯(代丁)治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝)35例临床疗效观察.方法 每3个月检测HBVDNA水平及肝功能等指标.结果 治疗12个月,近期乙肝病毒阴转14例,达40%.结论 治疗慢乙肝,阿德福韦酯是安全、经济并有一定疗效的核苷类似物.     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者外周血IFN-γ和IL-18的影响

目的:观察阿德福韦酯治疗前后慢性乙型肝炎患者外周血干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-18(IL-18)的变化,探讨阿德福韦酯抗乙型肝炎病毒(HBV)的免疫效应机制。方法:选择参加阿德福韦酯Ⅱ期临床试验的42例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,检测阿德福韦酯治疗前、治疗4、12、24、48周末患者血清IFN-γ和IL-18水平,以及HBV DNA及ALT水平变化。结果:治疗前患者IFN-γ及IL-18水平明显高于正常对照组(P<0.01)。治疗后,HBV DNA水平逐渐降低,各检测时间点之间比较差异均有统计学意义(P<0.01),ALT在治疗4周时较治疗前有所升高(P<0.05),然后逐渐下降直至正常。IFN-γ及IL-18水平逐渐升高,在12周时达到高峰(P<0.01),然后逐渐降低。完全应答组治疗前INF-γ和IL-18水平高于部分应答组和无应答组(P<0.01)。完全应答和部分应答组治疗后INF-γ和IL-18水平与治疗前比较均明显升高(P<0.01),而无应答组IFN-γ和IL-18治疗前后比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:阿德福韦酯除直接抑制病毒复制外,可促进Th1型细胞因子分泌,调动机体对HBV的细胞免疫,有利于HBV的清除。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的耐药性分析

目的 探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎耐药性产生的原因.方法 从阿德福韦酯Ⅲ期临床试验中筛选出30例原发治疗失败或继发耐药患者,应用巢式逆转录聚合酶链反应扩增HBVRT区,比对RT区核苷酸及氨基酸序列,找出变异位点.结果 30株阿德福韦酯治疗失败者中有21株HBV表现出原发性耐药,其中5株具有多态性位点rtN118H(23.8%,5/21).另外9株发生继发性耐药,继发耐药毒株在RT保守区(C结构域rtM207V)和非保守区多个区域均有变异.没有发现典型的nN236T和rtA181V/T突变.结论 多态性位点rtN118H与阿德福韦酯原发耐药可能有关.HBV RT C结构域rtM207V变异及其他处于非保守区的变异可能与HBV继发性耐药有关,天然耐药准种的存在可能是HBV对阿德福韦酯迅速耐药(继发性)的基础.上述结论 有待进一步表型验证实验加以证实.