基层医院临床生化检验技术（续19）

第八章 肝脏功能试验 第一节 血清胆红素测定 Malloy-Evelyn 法(甲醇法)1 原理 血清中胆红素与重氮试剂作用生成紫红色的重氮胆红素,以甲醇作为间接反应的加速剂比色测定总胆红素,并可同时测定结合胆红素。2 试剂2.1 0.73mol/L亚硝酸钠溶液 亚硝酸钠5g用蒸馏水溶解后加至100ml,置4℃冰箱内保存。临用时按用量吸出,再用蒸馏水稀释10倍。2.2 5.78mmol/L 4-氨基苯磺酸溶液,4-氨基苯磺酸100mg加入浓盐酸1.5ml,用蒸馏水溶解后加至100ml。     

格里斯试剂比色法测定亚硝酸盐的改进

格里斯试剂比色法又称盐酸萘乙二胺法 ,其原理是样品经过沉淀蛋白质、除去脂肪后 ,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化 ,再与盐酸萘乙二胺偶合成紫红色染料 ,与标准比较定量。GB/ T50 0 9.33-1 996食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法把格里斯试剂比色法作为第一法。在实际操作过程中发现 ,该方法存在一些问题。一是按照GB/ T50 0 9.33-1 996配制对氨基苯磺酸溶液 ( 1 0 g/ L)在室温下很难完全溶解 ;二是 GB/ T50 0 9.33-1 996先将两种显色剂等体积混合后再加入 ,根据该方法的原理。亚硝酸盐先与对氨基苯磺酸重氮化 ,再与盐酸萘乙…     

一次性使用输液器环氧乙烷残留量检验方法探讨

一次性使用输液器已被广泛用于临床 ,镇江市药品检验所一直采用 GB/T 1 42 33.1 - 1 998[1] 比色分析法测定环氧乙烷残留量 ,实验中发现该方法的标准曲线线性关系不好 ,建议以原法建立限度检查。1　试剂与仪器乙二醇 ,亚硫酸钠 ( AR) ,碱性品红 (指示剂 ) ,高碘酸 ( CP) ,UV- 2 65 ,UV- 2 4 0 1紫外分光光度计 (日本岛津 )。2　方法与结果2 .1　溶　液试液制备均同 GB/T1 42 33.1 - 1 998[1] 。2 .2　试验步骤精密移取试液 2 .0 ml于 1 0 ml纳氏比色管中 ,另取两支纳氏比色管 ,分别精密加入 0 .1 mol/L盐酸 2 ml,一支精密加入 1 .5 ml…     

分光光度法测定水中微量铝的体会

人体摄入过量铝可对多系统产生危害。为研究水质酸度对铝测定结果的影响,我们采用分光光度法对水质中铝进行了测定,井对实验条件进行了探讨,现报告如下。1 材料与方法1.1 仪器和试剂1.1.1 仪器:721分光光度计,50ml玻璃比色管,0.45um微孔滤膜和酸式砂芯漏斗。1.1.2 试剂:试剂均采用去离子水配制,试剂均为AR级。铝标准贮备液:18.5×10~(-3)mmol/L,称取0.500g铝粉用浓盐酸溶解,NaOH中和,再用5×10~(-4)mmol/LNaCl溶解,定溶至1.0L。铝标准使用液:(A3.7×10~(-7)mmol/L,B3.7×10~(-8)mmol/L)。用5×10~(-4)mmol/L NaCl溶液稀释铝贮备液配制成。显     

人血清中氟卡胺HPLC立体选择测定

本文报道了人血清中氟卡胺的HPLC立体测定方法。氟卡胺标准贮备液及内标溶液(2,5-二乙氧基-N-(2-哌啶基甲基)苯甲酰胺盐酸盐)分别由10mg外消旋醋酸盐溶于1000ml去离子水中(10μg/ml),工作标准液则将贮备液稀释10倍而得。在试管中放入1.0 ml血浆,然后加入50μl内标溶液(50 ng),1 ml Tris盐酸(2.0 M,pH 8.5)缓冲液和过量(3 g)氯化钠。NaCl极度溶解后,用5 ml氯丁烷:2-丙醇(95∶5v/v)旋涡提取30秒钟。在室温以每分钟3000     

荧光免疫测定法与酶免疫测定法、放射免疫测定法对庆大霉素的测定比较

荧光免疫测定法(FIA):荧光免疫测定试剂盒内含N-二(羟乙基)甘氨酸缓冲液、抗体-酶试剂和荧光基因性庆大霉素试剂等三种试剂。另备有标准液(含硫酸庆大霉素浓度为1.0,4.0,8.0和12.0μg/ml)。测定时,用N-二(羟乙基)甘氨酸缓冲液3.0ml 分别将血清样品液60μl 及标准液60μl 稀释,然后加抗体-酶试剂     

一种新的HPLC法测定肾损伤病人血中万古霉素

万古霉素系糖肽类抗生素,临床上用于耐青霉素金葡菌所致感染。本品在肾脏功能损伤病人中血清半衰期延长,由于受体温影响,导致晶状降解产物CDP-1蓄积。在此介绍一种同时测定万古霉素和CDP-1含量的HPLC法。试剂将盐酸万古霉素贮备液加到冷藏血清中,制备5、10、20和50μg/ml万古霉素标准液。将新鲜配制盐酸CDP-1碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pHg.0)的贮备液加到冷藏血清中,制备1、2、5和10μg/mlCDP-1标准液。用水配制0.4mg/ml维生素B_(12)内标液。各标准液于-20℃贮存。仪器采用Beckman Gold HPLC系统。色谱分析采用十八硅烷柱,粒度5μm。也可使用ODS反相C_(18)柱(4.6mm×22cm)。色谱条件万古霉素和内标B_(12)的检测波长分别为235nm和360nm。采用梯度洗脱的     

梯度洗脱HPLC法测定盐酸平阳霉素及注射药物中的有关物质

目的 建立梯度洗脱HPLC法测定盐酸平阳霉素及注射用盐酸平阳霉素中的有关物质.方法 采用C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,己烷磺酸钠溶液(己烷磺酸钠7.53g与乙二胺四乙酸二钠3.72g以0.08mol/L乙酸溶液溶解并稀释至1000ml,用氨溶液调节pH为4.3)为流动相A,甲醇:乙腈(70:30)为流动相B,梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温30℃.结果 盐酸平阳霉素溶液在10～500μg/ml范围内,溶液浓度与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999;最低检测浓度1μg/ml.结论 本法可用于测定盐酸平阳霉素及注射用盐酸平阳霉素中的有关物质.     

测定饮用水中锡的分光光度法探讨

依据《生活饮用水卫生规范》中的检验方法 ,运用分光光度法对饮用水中锡的含量进行测定 ,发现该方法存在一些问题 ,根据实际情况对该法进行适当改进 ,具体方法探讨如下。1　试剂1.1　氨水 (1+1)。1.2　硫酸溶液 (1+9)。1.3　抗坏血酸溶液 (10 g/L) :称取 10 g抗坏血酸于适量纯水中 ,并用纯水稀释至 10 0 ml。1.4　明胶溶液 (5 g/L ) :称取 0 .5 g明胶 ,溶于少量纯水中 ,并稀释至 10 0 ml。1.5　酒石酸溶液 (10 0 g/L) :称取 10 g酒石酸溶于少量纯水中 ,并稀释至 10 0 ml。1.6　苯芴酮溶液 (0 .3g/L) :称取 0 .0 3g苯芴酮 (1,3,7-三羟基 - …     

分光光度法测定盐酸如氟沙星片剂含量的研究

盐酸如氟抄星(Rufroxacin Hec)为新一代氟喹诺酮类抗菌药。其特点是抗菌谱广,抗菌作用强,长效。其制剂盐如氟沙星片剂应用分光光度法测定其含量获得了满意结果。6份平均回收率为100.18％,RSD为0.80％。 1 仪器与试药 Lambcla 2 分光光度计(美国Perkin Elmer),7520型分光光度计(上海分析厂)。 盐酸如氟沙星对照品和盐酸如氟沙星片(中国药科大学医药化工研究所),盐酸分析纯(南京化学试剂厂)。 2 吸收光谱的绘制 2.1 取盐酸如氟沙星对照品精密称定,加0.1mol/L盐酸液制成每毫升约含10μg的溶液。 2.2 按照处方配比,取适量淀粉、微晶纤维素和滑石粉等制成不含盐酸如氟沙星的模拟溶液。 2.3 取样品适量,用0.1moL/L盐酸液制成每1ml中的含盐酸如氟沙星10μg的溶液,过滤,取续滤液作为样品溶液。 分别取上述溶液,以0.1mol/L盐酸液为空白,绘制     

RP-HPLC法测定盐酸地尔硫(艹/卓)缓释胶囊中盐酸地尔硫(艹/卓)的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定盐酸地尔硫(艹/卓)含量的方法.方法:采用岛津LC-2010AHT,Diamondc18(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为缓冲液(取d-樟脑磺酸1.16 g,用0.1 mol/L醋酸钠溶液溶解并稀释至1 000ml,用0.1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.2)-乙腈-甲醇(50:25:25),检测波长240nm.结果:20～200μg/ml范围内溶液浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.1%,RSD为0.2%(n=9).结论:该方法简单、快速、准确,重现性及专属性好.     

酸碱滴定法测二氧化碳结合力浅析

血清中碳酸氢根与标准盐酸反应放出二氧化碳,剩余盐酸用标准氢氧化钠溶液滴定,根据盐酸的消耗量,求出二氧化碳之含量。 1 材料与方法 1.1 试剂盒:北京北化试剂分厂生产的试剂盒。 1.2 方法:取试管分别加入0.02％酚红2滴,血清0.1ml,生理盐水1ml,0.01mol/L盐酸0.5ml,     

在玻璃碳电极上肼苯哒嗪的电流测定法

本文介绍基于在流体中玻璃碳电极上的电化学氧化作用,用流动注入法连续测定盐酸肼苯哒嗪。方法:用往复泵使流动相Walpole 醋酸盐缓冲液-无水甲醇(40∶60)流经一Metrohm EA-1096型电化学池(具E611型检测器),流速:1.0ml/min。池中配有玻璃碳工作电极、银-氯化银参比电极与另一玻璃碳辅助电极。用微量注射器将样品注入进样口,进样量:50μl。整个系统用HPLC 不锈钢管(0.02cm)连接固定,在室温下用记录器记录电流。标准、样品液制备:用Walpole 醋酸盐缓冲液(pH4.2)配制盐酸肼苯哒嗪贮备液(0.1mg/ml),再将其稀释成1～50μg/ml 的标准液,用作制备工作曲线。     

变性珠蛋白小体(Heinz小体)检查及标本保存法

变性珠蛋白小体检查方法虽然简单,但影响因素较多,容易造成失败或对结果观察的困难,为此我们在检查方法上进行探讨,现将试验方法介绍如下。一、试剂与方法(一)试剂: 1.取0.015％美兰溶液0.1ml 和1.25％亚硝酸钠溶液0.1ml 混合后,用0.37％NaCl=10稀释即为反应液;2.取龙胆紫2g 加少量蒸馏水溶解后,加 NaCl0.73g,再加蒸馏水致100ml 配成2％龙     

分光光度法测定药物制剂中的可待因

本文介绍一种测定可待因的分光光度法,此法系基于可待因与溴甲酚绿(1:1)作用生成黄色复合物,其在pH3.8的氯仿抽提液于418nm波长处有最大吸收。复合物可稳定10天,并在3～12μg/ml浓度范围内符合比尔定律。制剂中的赋形剂、色素、调味剂及其它药物如片剂中的乙酰水杨酸(20mg)、咖啡因(0.1g)、苯巴比妥(20mg);糖浆中的盐酸去氧肾上腺素(2mg)、氯化铵(30mg)、薄荷脑(30mg)、苯甲酸钠(15mg)、甘油(10mg)、乙醇(5mg)、糖精钠(30mg)、扑热息痛(20mg)、愈创木酚磺酸钾(50mg)、苋菜红(20mg)在不超过一定限量(即以上括号中所示的量)的情况下对本法无干扰。如含有盐酸麻黄碱、安替比林、抗组胺药及含有叔胺基团或季铵盐的药物可按下述薄层层析法分离后测定。表中列出可待因的回收率(从略)。试剂:所有溶液均用分析纯试剂配制。pH3.8缓冲溶液(英国药典标准);可待因缓冲溶液(取69.84mg溶于N/10氢氧化钠液2ml,用上述缓冲溶液稀释至1000ml)。操作方法:吸取上述可待因液3ml,置50ml分液漏斗中,加溴甲酚绿液20ml,产生的黄色复合物分次用氯仿5ml、3ml、2ml剧烈振摇提取,提取液收集于10ml量瓶中,加氯仿至刻度,于418nm波长处测定吸收度,以氯仿作空白。样品检验:取含有可待因100μg及通常与可待因配伍的各种药物的混合溶液,按上述操作方法检验即可。如有干扰,可先用硅胶进行薄层层析。取一定体积含有可待因约4mg的药物制剂,以4N氢氧化钠液碱化,用氯仿抽提五次,每次10ml,抽提物进行层析(乙酸乙酯-甲醇-氨水=75:15:10),分离所得可待因溶于N/10盐酸液,以N/10氢氧化钠液中和,置250ml量瓶中,用缓冲溶液稀释至刻度,吸取一定量按上述操作方法进行检验。本法优点是简单灵敏,可用于一些药物制剂中的可待因测定。     

GC-MS法测定人尿液中甲基苯丙胺的浓度

目的:建立测定人尿液中甲基苯丙胺浓度的方法。方法:取尿液样本2 ml,加入0.1 mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液调节其pH>11,加入乙酸乙酯,进行液-液萃取,取乙酸乙酯层加热浓缩,最后取1μl浓缩液进样。采用气-质联用(GC-MS)法测定,以选择离子检测扫描(SIM)模式进行定量分析,选择离子为m/z 58.91。结果:甲基苯丙胺尿药浓度在0.5²0μg/ml浓度范围线性关系良好(r=0.993 4),最低检测限为0.05μg/ml;日内、日间RSD<5%,平均回收率为106%20μg/ml浓度范围线性关系良好(r=0.993 4),最低检测限为0.05μg/ml;日内、日间RSD<5%,平均回收率为106%¹09%。结论:本方法快速、准确、重复性好,可用于尿液样本中甲基苯丙胺浓度的测定。     

用6,7-二氯喹啉-5,8-二酮的分光光度法测定异烟肼

异烟肼的含量测定有容量分析法、紫外、荧光、原子吸收和色谱等方法。英国药典(BP,1980年版)和美国药典(USP,1985年版)分别用溴量法和亚硝酸钠法,但这两种方法均不理想。本文采用异烟肼与6,7-二氯喹啉-5,8-二酮(DCQD)反应,生成有色化合物后进行分光光度法测定。该方法具有灵敏度、选择性和稳定性好等优点。标准溶液的制备:精密称取约50mg的标准异烟肼溶于水中,在100ml容量瓶中稀释至刻度,取这种溶液存一系列50ml容量瓶中制成20～250μg/ml的溶液,备用。样品溶液的制备:对纯品直接溶于水中配制成200μg/ml的溶液。对片剂、合成药的混     

碱式碳酸铋的制酸力考察

目的:检查碱式碳酸铋的制酸力。方法:酸碱中和滴定法,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定与碱式碳酸铋反应后剩余的盐酸标准溶液,计算出碱式碳酸铋的制酸力。结果:测得碱式碳酸铋的制酸力为每1g消耗盐酸滴定液(0.1mol/L)不少于38ml(按干燥品计算)。结论:建立的制酸力的检查方法可有效控制本品质量,本品按干燥品计算,每1g消耗盐酸滴定液(0.1mol/L)不得少于38ml。     

二硝基氟苯比色法测定新霉素

硫酸新霉素的主成分为新霉素B、C及很少量降解产物新霉素A,本文报道一种新的比定法,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为显色剂,对其滴眼剂进行含量测定,具快速,简便、准确等特点。标准曲线取硫酸新霉素适量,以0.02M硼酸缓冲液(pH9.0)配制浓度10-55μg/ml(间隔5μg/ml)系列标准液。各精密吸取5ml,置20ml试管中,精密加入0.25%DNFB甲醇液2ml(新鲜配制),室温放置50′后,再精密加入1.0mol/L盐酸1.5ml,摇匀。在波长365nm     

用简便灵敏的分光光度法测定抗坏血酸

本文报道一种简便、快速、准确和广泛用于测定抗坏血酸的分光光度法.其原理是抗坏血酸与1,10-菲咯啉和铁(Ⅲ)离子络合生成三-(1,10-菲咯啉)-铁(Ⅱ)络合物(试亚铁灵),其最大吸收波长为510nm,一般赋形剂和其它化合物对测定均无干扰,最佳pH值为1.5～6.5.试剂:(1)20mg/L抗坏血酸标准液;(2)1,10-菲咯啉-铁(Ⅲ)显色剂:取0.198g 1,10-菲咯啉单水合物、1mol/L盐酸2ml和0.16g硫酸铁铵混合,用水稀释至100ml.纯抗坏血酸的测定;精密称取样品水溶液(含抗