乙肝血清学标志物与荧光PCR检测HBV-DNA结果分析

目的探讨荧光PCR法检测乙肝病毒DNA含量与乙肝病毒感染血清学标志物模式之间的相关关系。方法对437份血清标本以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒标志物(HBVm),同时用实时荧光PCR法对乙肝病毒定量检测,两种检测结果进行相关性分析。结果 126例大三阳(HBsAg、HBeAg、HBcAb为阳性)标本中,检出HBV-DNA阳性率为94.4%,拷贝数为(4.13±1.57)×107/mL。在107例小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb为阳性)标本中,检测出HBV-DNA阳性率42.1%,拷贝数为(3.76±1.94)×105/mL。在74例HBsAg、HBcAb为阳性标本中,检测出HBV-DNA阳性率为35.1%,拷贝数为(2.39±1.74)×104/mL。在41例HBsAb阳性标本中,有1例标本检出HBV-DNA阳性,阳性率为2.4%,拷贝数为(3.27±1.03)×103/mL。而在78例全阴标本中,也检测出2例HBV-DNA阳性,阳性率为2.6%,拷贝数为(3.55±1.46)×103/mL。结论 HBV-DNA在各种乙肝血清学标志物模式中,均可检出,但检出阳性率相差甚大,而血清中未检测出HBVm者不能排除HBV感染。     

PCR反向膜杂交技术检测乙型肝炎病毒

目的探讨PCR反向膜杂交技术在乙型肝炎病毒(HBV DNA)检测中的应用.方法用PCR反向膜杂交技术定性检测100例血清标本中的HBV DNA,结果与常规PCR法和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法比较.结果 100例血清标本,本法阳性率为53.0%,常规PCR法为47.0%.HBsAg(+)和HBeAg(+)与HBV DNA有很好的相关性.结论该技术能快速、敏感和高度特异地对PCR产物进行鉴定,亦可检测HBV的真实感染和复制情况,有助于乙型肝炎的临床诊断.     

福州地区无偿献血者HBV感染检出情况分析

目的 了解福州地区无偿献血者的血液标本在1遍ELISA结合1遍核酸扩增技术(NAT)的血液筛查模式下,HBV感染的检出情况.方法 采用HBsAg ELISA试剂和美国诺华Procleix Ultrio Assay系统对福州地区2014全年的86 183份无偿献血者血液标本进行筛查,结合HBsAg中和确证试验排除HBsAg ELISA检测的假阳性标本,分析HBV感染检出情况以及经HBsAg ELISA筛查后标本中残存HBV DNA的阳性率.对检出的HBsAg(-)/HBV DNA(+)标本按献血者的性别、年龄和是否重复献血进行分组比较,并对其中部分标本进行HBV相关血清标志物的检测.结果 HBsAg ELISA检出HBV感染标本800份,经中和确证后HBsAg(+)标本合计700份,检出率0.812％,其中有175份HBsAg经确证阳性的标本,NAT结果为无反应性.本研究中共检出62份HBsAg(-)/HBV DNA(+)标本,HBsAg(-)标本中HBV DNA(+)的检出率为0.073％.HBsAg(-)/HBV DNA(+)在>40岁年龄组的检出率高于<25岁和25～40岁年龄组,不同性别和是否重复献血者组间检出率差异均无统计学意义.对48份HBsAg(-)/HBV DNA(+)标本HBV血清标志物补充试验发现,2份标本HBV相关血清标志物全阴,40份标本HBcAb阳性伴或不伴有HBsAb阳性,检出率高达83.3％.结论 NAT虽然不能完全替代目前的血清学检测,但是作为一种有效的补充检测手段,与ELISA结合检测,能够有效降低由于窗口期和隐匿性乙型肝炎感染(OBI)引起的输血传播HBV的风险,提升血液安全.     

HBcAb滴度和HBVDNA与HBsAg弱阳性关系分析

目的 统计分析乙肝病毒表面抗体(HBsAg)弱阳性和假阳性血清乙肝病毒核心抗体(HBcAb)滴度和乙肝病毒DNA(HBVDNA)阳性率,揭示 HBcAb滴度水平和HBV DNA与HBsAg弱阳性和假阳性的关系.方法 采用ELISA法和PCR荧光探针法分别检测HBsAg弱阳性血清的HBcAb滴度和HBV DNA,与HBsAg中和试验相对比,统计分析HBsAg弱阳性及假阳性时HBcAb滴度水平和HBV DNA阳性率.结果 中和试验确证为HBsAg弱阳性的血清HBcAb滴度均≥1∶320,中和试验确证为HBsAg阴性的血清HBcAb滴度均≤1∶100,二者HBcAb滴度差异有统计学意义(P<0.01);HBsAg弱阳性血清HBV DNA阳性率为34%,阴性组未检出.结论 HBsAg弱阳性血清HBcAb滴度水平显著高于HBsAg阴性血清,HBcAb滴度的检测对鉴别HBsAg弱阳性有重要参考价值;HBV DNA在HBsAg弱阳性血清中的阳性率较低,对鉴别HBsAg弱阳性价值不大.     

住院患者梅毒筛查方法探讨

目的:比较梅毒螺旋体抗体颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、微粒子化学发光免疫法(CMIA)、甲苯胺红不加热血清试验法(TRUST),探讨一种适合临床梅毒筛查的检测方法。方法:对5 710例临床患者血清标本分别用ELISA,CMIA,TRUST检测,阳性标本再进行TPPA确证实验。运用SPSS17.0统计软件对结果进行统计学分析。结果:ELISA检测出阳性标本128例,阳性率2.24%,TPPA复检阳性126例(126/128);CMIA检测出阳性标本132例,阳性率2.31%,TPPA复检阳性126例(126/132);TRUST检测出阳性标本38例,阳性率0.66%,TPPA复检阳性37例(37/38)。结论:CMIA,ELISA,TPPA三种方法阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05),TRUST与CMIA,ELISA,TPPA三种方法阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。为了减少漏检,提高诊断率,应联合使用TRUST与CMIA或ELISA两种梅毒血清学试验检测方法。     

4017例乙型肝炎血清标志物和HBV-DNA载量相关性分析

为探讨血清HBV-DNA载量与HBV血清标志物的相关性,采用实时荧光定量PCR对4 017例HBV感染者血清标本中HBV-DNA含量进行检测,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测其乙型肝炎免疫标志物。结果表明,HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组患者血清HBV-DNA检出率为96.82%;HBsAg、HBeAg阳性组检出率为100.00%;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组检出率为26.79%;HBsAg、HBcAb阳性组检出率为45.89%;HBcAb阳性组检出率为0.29%。结论:患者血清中HBV血清标志物与HBV-DNA的阳性率存在相关性。采用FQ-PCR法检HBV-DNA能更客观地反映HBV复制的程度和传染性,为临床提供准确可靠的实验数据。     

乳汁乙肝病毒检测与母乳喂养

目的:探讨乙肝产妇乳汁中乙肝病毒标志物(HBV-M)和HBV DNA的关系,为乙肝产妇产后母乳喂养提供指导。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乳汁中HBV-M,采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乳汁中HBV DNA含量情况。结果:100例血清HBsAg阳性产妇中HB-sAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)(大三阳)23例,占23%,HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)(小三阳)35例,占35%,HBsAg(+)、抗-HBc(+)42例,占42%,分别对100例血清HB-sAg阳性的乳汁作HBV-M及HBV DNA检测,发现大三阳组HBV-M的检出率及HBV DNA阳性率明显高于其他两组。结论:根据乳汁中传染危险性采取措施,指导母乳喂养。     

乙型肝炎患者血清HBV-DNA检测结果与乙型肝炎五项标志物的相关性分析

目的探讨乙型肝炎患者血清HBV-DNA检测结果与乙型肝炎五项标志物的相关性。方法用ELISA法检测乙型肝炎五项血清标志物(简称乙型肝炎五项),实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果 HBsAg阳性(表2)乙型肝炎患者HBV-DNA阳性率50.1%,HBsAg阴性乙型肝炎患者HBV-DNA阳性率13.7%;HBeAg阳性(表3)乙型肝炎患者HBV-DNA阳性率95.2%;HBeAg阴性乙型肝炎患者HBV-DNA阳性率29.1%。结论 HBsAg是HBV感染的标志,HBeAg是反映HBV复制活跃的可靠性指标,但仅靠HBsAg或HBeAg判定HBV感染、复制与否,并非完全合适,HBsAg和HBeAg阴性的部分乙型肝炎患者HBV-DNA检测结果阳性,提示HBV复制仍然存在,所以在临床上应选择乙型肝炎五项与HBV-DNA联合检测,这对于乙型肝炎患者在判定病毒复制、传染性及抗病毒治疗方案选择上具有重要的临床指导意义。     

乙肝病毒前S1抗原与血清HBV DNA及HBVM的关系

目的探讨乙肝病毒前S1抗原与HBeAg及血清HBV DNA之间的相关性,其在乙肝病毒复制、诊疗中的应用价值。方法应用PCR法检测HBV DNA,双抗体夹心ELISA法检测乙肝病毒前S1抗原和ELISA法检测HBeAg。结果 160例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA及前S1抗原的总检出率分别为45.0%(72/160)和49.4%(79/160);在72例HBV DNA阳性患者中前S1抗原和HBeAg阳性率分别为76.6%(53/72)和55.6%(40/72)(P<0.05);在HBV DNA载量升高时,前S1抗原阳性率、HBeAg阳性率均随之增高。结论乙肝病毒前S1抗原检测可作为乙肝病毒复制、传染性的指标,同时也可用于指导临床由于病毒变异和其他原因造成HBeAg阴性CHB患者的诊断和治疗。     

乙肝病毒DNA定量水平和乙型肝炎病毒标志物定量检测指标相关性研究

目的：探讨乙型肝炎病毒( HBV )标志物定量检测指标与HBV DNA定量水平的相关性。方法从2013年1月-2014年6月检验科采用酶联免疫吸附试验( ELISA)确诊的在感染性疾病科门诊就诊和住院的大三阳368例和小三阳507例中,各随机选取50例作为大三阳组和小三阳组。大三阳组和小三阳组的血标本同时做HBV标志物定量和HBV DNA定量检测。结果大三阳组HBsAg含量和HBV DNA定量检测结果均明显高于小三阳组( P<0．01);大三阳组HBV DNA定量阳性率明显高于小三阳组(P<0．01);HBV DNA阳性的大三阳患者HBV DNA含量与HBsAg、HBeAg含量均具有相关性(P<0．01)。结论 HBV DNA水平与HBV标志物中的HBsAg和HbeAg水平呈明显正相关;定量检测HBV DNA、HBsAg和HbeAg对判断HBV感染者传染性具有重要临床意义。     

乙型肝炎患者检测病毒前S1抗原的意义

目的探讨乙型肝炎病毒前S1抗原检测在临床应用中的意义。方法共检测160例乙型肝炎患者（HBsAg均为阳性），乙型肝炎病毒血清标志物（HBV—M）和PreS1Ag的检测采用ELISA法，HBV—DNA检测采用PCR荧光定量法，选择同期在我院体检的健康体检者共160例为对照组。并对结果进行分析。结果对照组的血清PreS1Ag和HBV—DNA检测结果均为阴性；HBV患者检测结果：PreS1Ag在“大三阳”标本中阳性率明显高于“小三阳”，同时在HBsAg阳性血清中，PreS1Ag检出率明显高于HbeAg，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PreS1Ag阳性能较好地反映血清HBV—DNA状态，可作为HBV具有传染性的指标之一，能完善HBV的检测。     

献血员感染HBV窗口期的病毒核酸筛查

目的探讨实时荧光定量PCR技术在临床输血安全领域研究的意义以及我国目前输血残留感染HBV风险,进一步提高临床输血安全性。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术定量检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性献血员血浆中乙型肝炎病毒(HBV)DNA。结果 11456份HBsAg献血员血浆中有41份(0.358%)HBVDNA阳性;对其中34份HBVDNA例阳性标本于3-6月后进行随访检测,有4例HBsAg呈阳性,4例HBVDNA仍为阳性。结论目前我国存在输血残留感染HBV的风险,ELISA技术和荧光定量PCR检测技术在输血领域对HBV检测存在技术互补性。HBVDNA检测可以缩短献血员感染HBV窗口期,提高临床输血的安全性。     

乙型肝炎病毒前S1蛋白与HBV—DNA关系探讨

目的 分析HBsAg阳性血清乙型肝炎病毒前S1蛋白(Pre—S1)与乙型肝炎病毒DNA(HBV—DNA)的关系，探讨Pre—S1的应用价值。方法 用荧光定量PGR技术检测248例HBsAg阳性血清HBV—DNA的含量，同时用ELISA法检测Pre—S1蛋白。结果 大三阳组HBV—DNA的阳性率为98．6％，Pre—S1阳性率为84．6％；小三阳次之，分别为26．9％、22．47％。在不同HBV血清型模式(HBVM)中，Pre—S1的出现与HBV—DNA的含量有关系。结论 Pre—S1与HBV—DNA一样可作为HBV复制的指标，特别在HBeAg阴性时，起到补充作用。     

乙肝患者血清病毒标志物与HBV-DNA的检测结果分析

目的:探讨乙型肝炎患者体内乙肝病毒(HBV)标志物与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的关系及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标志物,并对212份HBV标志物阳性标本采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA。结果:Ⅰ组(HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性)、Ⅱ组(HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性)、Ⅲ组(HBsAg、抗-HBc阳性)血清中HBV-DNA阳性率分别为97.17%、47.13%、47.37%;Ⅰ组血清中HBV-DNA阳性率显著高于Ⅱ组与Ⅲ组血清中HBV-DNA阳性率(P<0.01)。结论:患者血清HBV-DNA的阳性率与HBV血清标志物的存在状态相关。检测乙肝病毒,采用FQ-PCR法检测HBV-DNA能更准确、直接地反映体内病毒复制情况。     

乙型肝炎病毒表面抗原阳性孕妇及其新生儿外周血中乙型肝炎病毒的研究

目的了解乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其新生儿外周血乙型肝炎病毒(HBV)的感染状况。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测新生儿外周血HBsAg;巢式聚合酶链反应(nPCR)检测孕妇及其新生儿外周血HBV-DNA;选择性聚合酶链反应(sPCR)检测孕妇及其新生儿外周血单个核细胞(PBMC)中HBV-DNA,三项指标任一项阳性即判定为新生儿HBV宫内感染。结果HBsAg阳性孕妇血清HBV-DNA阳性率为43.1%(53/123),PBMCHBV-DNA阳性率为30.8%(37/123);新生儿血清HBsAg阳性率为6.5%(8/123),HBV-DNA阳性率为19.5%(24/123),PBMCHBV-DNA阳性率为26.0%(32/123)。新生儿任一项阳性者50例,合计宫内感染率40.6%(50/123)。结论检测PBMCHBV-DNA对血清中HBV-DNA检测进行补充,可以比较准确地反映HBsAg阳性孕妇新生儿宫内HBV感染的状况。     

乙型肝炎病毒前S2抗原检测的临床应用

目的讨论乙型肝炎病毒前S2抗原(Pre-S2)检测在临床中的应用价值。方法将256例乙型肝炎患者标本用酶联法(ELISA)检测Pre-S2、乙型肝炎病毒(HBV)标记物,荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)。结果211例HBSAg( )中,前S2抗原阳性率为62%;102例HBSAg( )、HBeAg( ),标本中,前S2抗原阳性率为65.7%,在同时检测HBV-DNA与前S2抗原的102例各种感染模式中,前S2抗原与HBV-DNA的阳性率也是比较吻合的。结论乙型肝炎患者Pre-S2与HB-SAg、HBV-DNA是伴随关系,是HBV复制活跃和疗效观察的良好指标,抗HBe阳性及e系统阴性乙型肝炎患者Pre-S2检出率偏高有待探讨。     

乙肝病毒血清学标志物与HBV DNA的关系研究

目的：探讨乙肝血清标志物（HBVM）与HBV DNA的相关性及临床意义。方法：用荧光定量PCR（FQ-PCR）和化学发光酶免疫测定（CLEIA）分别对617份血清进行HBV DNA和HBVM检测并对比分析。结果：HBsAg、HBeAg、HbcAb阳性组HBV DNA阳性率为100%（232/232）;HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为66.9%（164/245）;HBsAg、HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为60.7%（17/28）;HBsAg、HBeAg阳性组HBV DNA阳性率为100%（2/2）;HbsAb、HBeAb、HbcAb阳性组HBV DNA阳性率为3.6%（2/56）;HbsAb、HbcAb阳性组HBV DNA阳性率为4%（1/25）;其余HBVM不同表现模式HBV DNA阳性率为0。HBeAg（＋）组与HBeAg（-）组HBV DNA阳性率和HBV DNA定量差异均有显著性（P〈0.01）。结论：有机结合血清学标志物和HBV DNA定量检测,才能准确反应不同个体HBV感染状态及病毒复制情况,进而指导临床以取得较好的治疗效果。     

PCR和ELISA检测不同人群TTV的感染状况

目的　检测湛江地区不同人群TTV的感染情况。方法　应用PCR和ELISA法同时检测正常献血员血清标本 5 12份 ,HBsAg阳性血清标本 60份 ,抗 HCV阳性血清标本 48份。结果　正常献血员、HBsAg阳性、抗 HCV阳性标本用PCR法检测TTVDNA阳性率分别为 10 .94%、13 .3 3 %和 16.67%;ELISA检测抗 TTVIgG ,阳性率分别为 7.42 %、10 .0 0 %和 10 .42 %。两种检测方法结果差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,不同人群TTVDNA和TTVIgG阳性率差异也无显著性 ( P >0 .0 5 )。结论　该地区献血员人群TTVDNA、TTVIgG与HBsAg阳性、抗 HCV阳性无明显相关性     

HBV感染孕妇血清与新生儿胃液中HBsAg与HBeAg的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇血清与新生儿胃液中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒核心抗原(HBeAg)的关系。方法收集HBsAg阳性住院待产孕妇血清及其所产新生儿胃液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)对其HBsAg、HBeAg进行检测。结果100例孕妇血清经实验室复查,HBsAg均阳性,其中HBeAg阳性孕妇18例。100例新生儿共有35例胃液HBsAg或HBeAg阳性,其中HBsAg总阳性率为31.00%,HBeAg总阳性率为14.00%,HBeAg阳性孕妇所生新生儿胃液HBsAg和HBeAg阳性率分别为77.78%和55.56%,与单纯HBsAg阳性组和其他组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿胃液HBsAg、HBeAg与孕妇血清HBV病毒携带状态,尤其是HBeAg密切相关,提示新生儿HBV的感染可能通过消化道途径。     

乙型肝炎病毒携带者孕妇3243例乙型肝炎病毒外膜大蛋白检出情况

目的观察乙型肝炎病毒携带者孕妇乙型肝炎病毒外膜大蛋白检出情况。方法对3243例孕妇采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb5项指标及乙型肝炎病毒外膜大蛋白(LHBs)、HBV-DNA。结果 3243例孕妇中,血清HBsAg阳性241例,HBsAg阳性的孕妇血清中LHBs阳性率高于HBeAg。135例HBV-DNA阳性孕妇血清中,LHBs(OD值)与HBV-DNA拷贝数之间具有良好的相关性,两者阳性率差异也无统计学意义。71例HBeAg阳性标本中,LHBs和HBV-DNA阳性率分别为91.5%、93.0%,170例阴性标本LHBs和HBV-DNA阳性率分别为50.0%、40.6%。241例乙型肝炎病毒携带者孕妇中LHBs与HBV-DNA诊断结果符合率为74.7%。结论 LHBs在乙型肝炎病毒携带者孕妇中有较高的阳性检出率,在HBeAg阴性的乙型肝炎病毒携带者中,LHBs较HBV-DNA更能敏感反映HBV的感染复制状态。