磁分离酶联免疫检测激素的方法学评价

目前在国内检测人血清内的激素可采用放射免疫(RIA)、酶免疫(EIA)和时间分辨荧光免疫等方法[1] 。瑞士雪兰诺诊断中心发明的磁分离酶联免疫是一种非同位素标记的酶免疫检测技术,称为磁性抗体免疫技术(MAIA)。我们用磁分离酶联免疫方法测定了30份人血清标本中的六种内分泌激素(FSH、LH、PRL、P、E2 、T) ,通过其线性特征、显色稳定性、精密度、特异性等实验结果,并与放射免疫法测定结果作比较,对该方法作出初步的评价。1　实验原理MAIA双抗夹心法测FSH、LH、PRL是以待测物作为抗原,同时与碱性磷酸酶(ALP)标记抗体和异硫氰酸荧…     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法的临床研究

目的探讨丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法的临床研究。方法血液筛查阴性标本450份。质控标本459份,采用双抗原夹心法检测,了解双抗原夹心法敏感性。结果对269份HCV抗体阳性标本进行检测,双抗原夹心法检测有3份标本未检出。敏感性较高98．84％。结论双抗原夹心法不需要稀释血清产品,不受类风湿因子等的干扰,具有较高的特异性;可以同时检出血清中各类抗体,特别是IgM类抗体,因此可以缩短从病毒感染到用ELISA法检出抗体之间的“窗口期”,缩短检测时间,均有重要意义。     

ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析

目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标本进行检测,检测内容包括HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体。结果采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性2例,阳性率为0.50%,梅毒抗体阳性3例,阳性率为0.75%,丙型肝炎抗体阳性4例,阳性率为1%;采用化学发光法检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性3例,阳性率为0.75%,梅毒抗体阳性4例,阳性率为1%,丙型肝炎抗体阳性5例,阳性率为1.25%。结论采用化学发光法检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙型肝炎抗体的敏感性高于酶联免疫法检测,可作为首选检测方案,具有良好的临床应用价值。     

牛奶过敏患者血清特异性抗体检测方法构建

目的:建立双抗原夹心酶联免疫法检测疑似牛奶过敏患者血清特异性抗体。方法:将4种牛奶过敏原P1组分、酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白按质量比3:1:4:2混合作为包被抗原制备酶标反应板;同时4种成分分别标记辣根过氧化物酶制备酶标记抗原,经棋盘滴定确定酶标抗体浓度并最终建立双抗原夹心酶联免疫法检测牛奶特异性抗体。以阴性对照在450nm波长处吸光度(A450)的2.1倍为临界点判定阴、阳性结果,并以德国MEDIWISS酶免疫印记检测试剂检测结果为参比标准计算灵敏度与特异度。结果:本文建立的双抗原夹心酶联免疫法批间精密度为5.8%～13.6%,批内精密度为3.7%～11.3%。与参比方法比对,灵敏度为91.7%,特异度为94%,准确度为93.3%。结论:本文建立的双抗原夹心酶联免疫法可检测血清牛奶特异性抗体,用于牛奶过敏患者的体外诊断。     

放射免疫法和酶联免疫法检测人血浆乙肝表面抗体效价比较

目的比较放射免疫法和酶联免疫法检测人血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价的效果。方法选取中国生物制品检定所提供的国家参比品3份。国家临检中心质控品2份,单采血浆公司血浆1000份,分别用北京北方生物技术研究所放射免疫试剂盒、北京万泰公司酶联免疫定量检测试剂盒．放免仪和酶标仪测定乙型肝炎病毒表面抗体效价。结果酶联免疫法和放射免疫法试剂盒检测表面抗体效价无明显的偏差,两种方法检测结果相关性良好f相关系数r=0．951。结论酶联免疫法检测血浆乙肝表面抗体效价,具有准确度高、特异性强、方法简单快捷、检验成本低等特点,对血液制品行业乙型肝炎人免疫球蛋白生产用原料血浆乙肝表面抗体效价的筛杏具有广泛府用的意义．     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法的应用探讨

目的探讨丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法的应用。方法分析包括血液筛查阴性标本420份,质控标本430份。结果对240份HCV抗体阳性标本进行检测,双抗原夹心法检测有3份标本未检出。3份样本经ChironRIBA确认试剂检测,结果为阳性。敏感性较高99.85%。结论双抗原夹心丙型肝炎病毒抗体酶联免疫诊断试剂对所检测的质控标本的检测总符合率达99.85%,且敏感性和特异性均较好,有望用于临床血液标本的筛查。     

引起HBsAg钩状效应的原因探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验一步法检测血清乙肝五项时出现HBsAg阴性HBeAg阳性的原因以及与乙肝病毒载量的关系.方法 用稀释法检测出现HBsAg阴性HBeAg阳性标本中HBsAg,并对这些标本用HBV-DNA-PCR法检测乙肝病毒载量,分析钩状效应与病毒载量的关系.结果 一步法检出的HBsAg阴性而HBeAg阳性的标本共12份,经稀释后重新测定HBsAg其中11份为阳性,其乙肝病毒载量在7.81×105～4.26×108 copies/ml.结论 高浓度HBsAg是造成一步法钩状效应的原因,其病人体内存在高载量的乙肝病毒.     

鼠源神经生长因子临床受试者血清抗体检测

目的：采用酶联免疫测定法（ELISA）检测鼠神经生长因子临床用药病人的血清抗体。方法：通过直接标记鼠神经生长因子（NGF），建立了一种检测人抗鼠NGF抗体的检测方法：即双抗原夹心法检测人抗鼠NGF抗体。将此方法应用于检测临床用药病人的血清抗体，并与间接法进行了比较。结果：双抗原夹心源检测94份正常人血清，无一份假阳性，在检测临床病人血清时，亦得到了较好的结果。而间接法的非特异性则达10％。结论：双抗原夹心法方法可靠，可用于鼠源神经生长因子临床试验；血清样本检测证明临床实验病人血清抗鼠NGF抗体含量与正常人无显著差异。     

乳胶凝集免疫比浊法与酶联免疫吸附法检测梅毒特异性抗体的价值比较

目的比较乳胶凝集免疫比浊法(3TP)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测梅毒的价值。方法对60份确认为梅毒的患者血清与60份梅毒特异性抗体检测阴性者血清标本分别采用3TP法与ELISA法进行检测。结果 ELISA法检测梅毒的敏感性及特异性、阳性预测值分别为95.0%(57/60)、93.3%(56/60)、93.4%(57/61)。诊断符合率为9 4.2%(1 1 3/1 20)。3TP法检测梅毒的敏感性及特异性、阳性预测值分别为1 00%(6 0/6 0)、9 5.0%(5 7/6 0)、9 5.2%(60/63)。诊断符合率97.5%(117/120)。两种检测方法比较,差异均无统计学意义。将梅毒血清标本稀释至3TP法能检出的最低稀释浓度后再加倍稀释,ELISA法仍有47份(78.3%)S/CO值在阳性范围内。结论 3TP法与ELISA法检测梅毒的敏感性、特异性均较高,均能用于诊断梅毒血清学筛查,但是ELISA法在梅毒螺旋体低浓度时诊断敏感性更高一些。     

ELISA检测乙肝标志物的影响因素浅析

酶联免疫吸附试验（ELISA法）是目前检验科常用的免疫学检测方法之一,其基本原理是将已知抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面,测定时将受检标本（抗原或抗体）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,     

79例梅毒血清学实验阳性老年患者的检测结果分析

目的应用不同的实验方法及试剂对老年患者的血清标本进行检测,分析老年患者梅毒血清学阳性率偏高的原因。方法用梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)检测待测血清,阳性标本用甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)和经梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)检测。结果用梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)方法初检山西医科大学附属运城市中心医院性病门诊、输血、介入检查治疗及术前老年患者血清,共检测出79例阳性患者;用甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)检测79例阳性血清,共检测出79例阳性患者;用经梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)检测79例阳性血清,共检测出76例阳性患者。结论老年患者的基础性疾病可能使机体释放诱导产生交叉抗原;老年患者体内可能有螺旋体共生,诱导产生交叉反应抗体;待检测血清须用梅毒Reiter株吸收剂稀释后再进行抗体实验。     

抗蛋白酶3抗体检测及影响因素的研究

目的研究血清样本稀释度、封闭液、孵育条件、洗涤条件及酶标板包被后保存时间对血清抗蛋白酶3(PR3)抗体检测结果的影响。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对159份血清进行抗PR3抗体检测,并用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析确定阳性界限(cut-off)值。结果血清样本最佳稀释度为1∶50;5%脱脂奶粉封闭酶标板能有效地降低本底值;孵育缓冲液中加入牛血清白蛋白及脱脂奶粉比单用磷酸盐缓冲液(PBS)对测定值有明显影响。经ROC曲线分析实验的阳性临界值为正常阴性对照吸光度(A)值的2.5倍,灵敏度和特异性分别为84.62%和98.46%。结论血清抗PR3检测结果受血清样品稀释、封闭液、孵育条件及阳性临界值的选择等多因素的影响。     

内分泌激素的磁分离酶联免疫技术检测

磁分离酶联免疫技术(MAIA)是20世纪80年代中期由瑞士Serono诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术(美国专利号4659678)，亦称为磁性抗体免疫技术。这种技术是与免疫酶系统(磁性颗粒)结合，使用两种高亲和力单克隆抗体的一种测定法，它使双抗体夹心酶联免疫技术在对游离型标记抗体和抗原即抗体复合物分离中完全快速地分离。     

检测HBsAg后带现象的观察与体会

HBSAg检测是诊断乙型肝炎的定性试验,结果的准确性将直接关系到临床医生的诊断与治疗。本文所介绍的应用酶联免疫法（ELISA）检测HBSAg后带现象直接影响到结果的准确性．所谓的后带现象是指在血清免疫学检验中,抗原抗体需要有一定的的比例才可出现可见反应,如果比例不适即可发生抑制反应的现象。抗体过剩称抑制带为前带,抗原过剩则称后带。本文所介绍后带现象,以引起乙肝检测者和临床医生的注意,现报道如下。1材料与方法1．l检测对家均为我院门诊病人,其中乙型肝炎E抗原（＊＊e＊出阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗一HBC）阳性血清…     

膜条酶联免疫法检测特异性IgE抗体的比对分析

目的比较酶联免疫快速膜条法与荧光酶联免疫测定法（unicap法）对9种常见血清特异性IgE抗体检测结果的吻合度,以及该膜条法按照仪器操作和手工操作结果的一致性比较,从而验证膜条法作为半定量检测sIgE抗体的有效性。方法收集来自临床科室标本80份,用仪器和手工方法同时对10种物质进行sIgE检测,分析两种不同操作方法所得结果 ;另外选取部分标本同时用膜条法仪器测定和unicap法对9种常见血清特异性IgE抗体进行检测分析。结果两种实验方法定性结果符合率较理想,对于大部分检测项目,两种操作方法定性结果一致性高。结论 HOB膜条法操作简捷,检测成本低,是一种值得推广的定性检测血清变应原特异性IgE抗体的方法。     

红细胞在不同pH下致敏对头孢他啶针剂的IgM和IgG抗体检测结果的影响

目的研究在用微柱凝胶免疫法检测人血中头孢他啶针剂的IgM和IgG抗体时,红细胞在不同pH下被药物致敏后对检测结果的影响。方法 O型红细胞在苯巴比妥缓冲液（pH=7.0,8.0,9.6）中用头孢他啶于室温下孵育2小时后作为致敏后的红细胞,以致敏后的红细胞（pH=9.6）为初试抗原,测试600份待检血清,根据检测结果选出10份血清样品,阳性3份,弱阳性3份,阴性4份,再分别用经pH8.0及pH7.0时致敏的红细胞检测,比较结果的异同。结果红细胞在不同pH下致敏对4份阴性结果的血清和3份阳性结果的血清都没影响,但3份弱阳性标本在pH8.0时一份转阴,在pH7.0时3份都转阴。结论用微柱凝胶免疫技术检测人血中头孢他啶IgM和IgG抗体时,红细胞致敏的pH小于9.6可能出现假阴性结果。     

磁性免疫微球在人血清白蛋白纯化中的应用

目的为了快速地从人血清中提纯人血清白蛋白，利用磁性免疫微球作为提取手段，再用间接酶联免疫法测定人血清白蛋白的回收率。方法将经过羧基修饰的聚苯乙烯微球作为载体，用EDC(碳化亚胺)活化微球表面的羧基，再将兔抗人血清白蛋白抗体包被于微球上，这种微球-抗体复合物能特异性地捕获人血清白蛋白，磁分离复合物后，通过将兔抗人血清白蛋白抗体作为捕获抗体，将酶联羊抗人血清白蛋白抗体作为检测抗体，建立起间接酶联免疫法，用于检测人血清中和磁性免疫微球上吸附人血清白蛋白的浓度，得到微球从人血清中提纯人血清白蛋白的回收率。结果第1次提纯的回收率为(86±4)%，重复利用微球2次，回收率分别为(69.0±0.6)%和(40.8±0.8)%，而提纯的人血清白蛋白的纯度为90%。结论以上结果表明，免疫磁性微球提纯人血清白蛋白的实验是有效的，为工业上大规模提纯人血清白蛋白提供了一条新的思路。     

血站系统梅毒抗体检测方法的对比分析

梅毒螺旋体(Treponema Pallidum,TP)侵入人体后,血清中可产生非特异性反应素抗体和抗TP抗原的特异性抗体.目前血站系统梅毒检测采用快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热试验(TRUST)检测非特异性反应素抗体,常产生假阳性或假阴性结果[1],近年来国内开始采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体,而常用的TP抗原血清学试验如TPPA、TPHA等大多用于确证试验.我站于2001年开始TRUST法与TP-ELISA法对献血者标本进行初、复检,取得良好效果.笔者应用TRUST法与TP-ELISA法对19853例无偿献血者标本进行检测,并将阳性标本与梅毒抗体确证试验梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法进行对比分析.     

两种方法检测血清甲胎蛋白(AFP)的比较

目的对电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白作对比分析.方法随机抽取150份临床送检的标本,用电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法测试甲胎蛋白的含量,对测试数据进行相关性试验、线性试验、精密度试验、回收试验.结果两法无显著性差异(P＞0.05),但电化学发光免疫法的线性范围较宽(1-980ng/ml),重复性较好(批内CV值3.4%,批间CV值3.5%),回收率较高(97.2%).结论电化学发光免疫法检测血清甲胎蛋白优于微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白     

免疫比浊法测定胱抑素C抗原过量研究

目的:通过对免疫比浊法测定胱抑素C抗原抗体剂量反应曲线的研究分析,筛选试剂研制过程中最合适的抗体用量,研制出优质的试剂,同时准确掌握试剂盒抗原过量的情况,指导临床应用过程中及时对抗原过量的标本进行稀释,从而确保高浓度临床标本测定的准确性.方法:通过配制一系列浓度由高到低的抗原溶液,与采用不同抗体用量但各项性能仍符合注册标准的试剂进行反应,记录反应吸光度,绘制抗原抗体剂量反应曲线,通过对比不同抗体用量配制的试剂的抗原抗体剂量反应曲线达到峰值时的抗原浓度值及吸光度值,结合仪器吸光度测定量程,确定试剂盒研制过程中抗体的最佳用量.