东方田鼠血清被动转移小鼠对血吸虫的发育及虫卵肉芽肿的影响

实验研究表明，人工感染日本血吸虫尾蚴能穿透东方田鼠的皮肤并移行至肺脏，感染后第１２天虫体发育停滞，逐渐萎缩，至第２０天消失［１］。为了探明东方田鼠血清抗体对血吸虫的作用，１９９６年３月～１１月，我们用东方田鼠血清被动转移小白鼠，观察小白鼠体内血吸虫的...     

MNNG和大戟对血吸虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性作用的研究

目的：研究N－甲基－N硝基－N－亚硝基胍（MNNG）和大戟水提取液合用对日本血吸虫成虫细胞的促增殖作用。方法：观察MNNG和大戟水提取液合用对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性的影响。用RPMI－1640加10％小牛血清的培养基培养日本血吸虫成虫细胞，在细胞接种1周后分别用MNNG和大戟水提取液处理24h，然后继续培养。用分光光度法测定细胞鸟氨酸脱羧酶活性。结果：MNNG和大戟水提取液联合处理后培养第4、5、6周时细胞鸟氨酸脱羧酶活性显著增高。结论：MNNG和大戟水提取液合用有促进日本血吸虫成虫细胞增殖的作用。     

日本血吸虫尾蚴及童虫可溶性抗原蛋白质组研究

应用免疫蛋白质组研究方法筛选、鉴定日本血吸虫尾蚴、童虫可溶性抗原蛋白质。方法日本血吸虫尾蚴可溶性粗抗原(SCAP)、童虫可溶性粗抗原(SLAP)分别用双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白质，每样本同时制3块胶，1块胶进行银染，2块胶通过电转印后再分别用感染兔和正常兔血清作Western印迹分析，确定特异性阳性反应点，再从相...     

枸杞多糖对大鼠角膜缘干细胞体外增殖的影响研究

目的通过体外分离和培养大鼠角膜缘干细胞(Limbal Stem Cells, LSCs)，观察枸杞多糖(Lyciumbarbarum Polysaccharide, LBP)对LSCs体外增殖的影响，为中药体外培养LSCs的研究提供实验资料。 方法体外分离和培养LSCs，显微镜观察LSCs的细胞形态特征，通过免疫荧光检测转录因子p63初步鉴定大鼠LSCs；分对照组和枸杞多糖处理组，每组20例，免疫印迹检测增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen, PCNA)，初步探讨枸杞多糖对LSCs的增殖影响。 结果镜下观察LSCs体积小，呈多边形或椭圆形，胞核较大，核质比例大，免疫荧光结果显示体外分离的LSCs可表达p63(阳性率为76.41±1.66%)；枸杞多糖处理后LSCs的PCNA蛋白的表达水平高于对照组，并且随着枸杞多糖浓度的增加，PCNA蛋白的表达升高(P<0.05)。 结论枸杞多糖对LSCs的增殖和生长具有促进和维持的作用。     

体外培养的角膜缘上皮细胞生物学特性

目的　观察体外培养的角膜缘上皮细胞生物学特性。方法　体外组织块培养兔角膜缘上皮细胞，倒置显微镜观察活细胞生长情况，透射电镜观察其超微结构，用流式细胞仪检测细胞的增殖能力，使用MTT方法绘制传代细胞的生长曲线。结果 角膜缘组织块培养第6d培养的角膜缘上皮细胞形成单层，培养的细胞具有代谢旺盛和较高的增殖能力，传代的角膜缘上皮细胞在第4d达生长高峰。结论 体外培养的第1、2代角膜缘上皮细胞既保持角膜上皮特性，又县有强的增殖能力。     

PHA对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性作用的研究

目的：研究植物血球凝集素（PHA）对日本血吸虫细胞的促增殖作用。方法：观察PHA对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性的影响,在日本血吸虫成虫细胞接种1周后分别用浓度为100μg/ml,200μg/ml,300μg/ml和400μg/ml的PHA处理24小时,然后用RPMI－1640加10％小牛血清的培养基培养,用分光光度法测定细胞鸟氨酸脱羧酶活性。结果：浓度为200μg/ml的PHA处理后第2,3周时的细胞鸟氨酸脱羧酶活性显著增高,结论：PHA有促进日本血吸虫成虫细胞增殖的作用。     

C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养、分化及两种不同品牌血清对其增殖的影响

目的 研究C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)体外分离培养、分化及比较含两种不同品牌血清培养基对其生长的影响,探索体外培养C57BL/6小鼠BMSCs更优方法。方法 差速贴壁法体外分离提取BMSCs,分别用含10%Yeasen胎牛血清和10%Gbico胎牛血清的DMEM/F12培养基进行培养,分别在2 d、4 d、6 d(后)通过倒置显微镜观察两组BMSCs的细胞形态;CCK-8法检测其生长趋势;免疫荧光染色鉴定表型;不同诱导培养基诱导其成骨、成脂分化。结果 成功分离BMSCs,原代培养细胞呈长角形涡状排列生长,第二代BMSCs免疫表型鉴定结果显示CD44、CD90、CD106为阳性表达,CD34为阴性表达;成骨、成脂诱导分化后,细胞茜素红、油红染色均呈阳性;CCK-8检测显示含Gbico血清培养基所培养的BMSCs更容易形成细胞集落且数量更多,生长上升趋势更为明显。结论 两种血清都能促进BMSCs的体外增殖,Yeasen血清有着更高的性价比,Gbico血清则在促进增殖方面表现更加良好。     

家兔实验日本血吸虫病

在尸检或活检遇到日本血吸虫病肝硬化时,血吸虫使得肝硬化形态学发展的分析非常困难。不首先研究实验日本血吸虫病,则不可能对这种肝损害的病理学进行确切的研究。由于严重及肝脏损害和消化器官障碍,在肝硬化发生前,重感染兔已死于感染的急性期。因此,为了观察肝硬化形态学的变化,必须控制尾蚴的数量。本实验用年青雄兔作为实验动物,每兔经皮肤感染300～500条尾蚴,其后2～40周进行观察。     

舍蝇抗菌肽的提取及其对肿瘤细胞生长的抑制作用

目的：研究含蝇抗菌肽的提取对肿瘤细胞生长的抑制作用；方法：对舍蝇幼虫采用针刺损伤及金黄色葡萄球菌感染诱导方法，并通过研磨、加热、阳离子交换柱层析及Sephadex G—50葡聚糖凝胶柱层析等步骤提取抗菌肽；结果：经SDS—PAGE电泳分离到2条带，分子量分别为4kD，9．6kD；结论：提取的舍蝇抗菌肽能有效地抑制人胃癌细胞MGC80—3和BGC—823，人乳腺癌细胞MCF—7及人肺癌细胞SPC—A—1的体外增殖，并且呈浓度依赖关系。     

感染日本血吸虫的家兔的组胺游离试验和皮试反应

据报导,实验动物受日本血吸虫感染时容易产生反应素抗体。反应素抗体作为皮内反应的基础的一部分。我们通过抗原产生组胺释放及皮试反应,观察了感染日本血吸虫病过程中血液中反应素抗体的消长、比较,讨论了两者所得的结果,增长了一些新的见解。研究方法如下:对27只感染了1000～300条日本血吸虫尾蚴的家兔(其中感染7周的8     

ECA透皮剂涂肤防护血吸虫感染的研究

目的　探讨 ECA透皮剂防护血吸虫感染的效果。　方法　以 10 % DMSO作溶剂配置不同浓度的 ECA透皮剂 ,涂于小鼠腹部 ,待干、泥浆摩擦后感染血吸虫尾蚴 ,观察防护作用。　结果　 3% ECA透皮剂涂肤 ,10 0 %抵抗血吸虫感染 ;1%、0 .5 % ECA透皮剂防护率分别达 96 .91%、93.6 2 %。药物对皮肤无明显刺激。　结论　ECA透皮剂涂肤有防护日本血吸虫感染的作用     

Enhancement by IL-18 of the protective effect of a Schistosoma japonicum 26kDa GST plasmid DNA vaccine in mice

Two recombinant plasmids pVAX/Sj26GST and pVAX/mIL-18 containing Schistosoma japonicum 26kDa GST and murine IL-18 were evaluated for their ability to protect mice against S. japonicum challenge. Mice were given 2 intramuscular immunizations 3 weeks apart, and challenged with S. japonicum cercariae 4 weeks later. Adult worm and egg burdens were determined 48 days post-challenge. All animals vaccinated with pVAX/Sj26GST alone or with pVAX/mIL-18 developed specific anti-SWAP (soluble worm antigen preparation) ELISA antibody and splenocyte proliferation response. Co-injection of pVAX/mIL-18 significantly increased the production of IFN-gamma and IL-12, indicating that IL-18 enhances the Th1-dominant immune response. Challenge experiments showed that worms were reduced in the pVAX/Sj26GST group by 30.1% and by 49.4% in animals given pVAX/mIL-18 additionally. Corresponding hepatic and fecal egg reductions were 44.8% and 53.0%, and 50.6% and 56.6%, respectively. These results indicate that IL-18 may be an effective adjuvant for a schistosomiasis vaccine.     

叶酸对胎鼠神经干细胞体外增殖的影响

目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法检测细胞增殖状态;设立正常对照组,叶酸低、高剂量(培养液中添加叶酸4.0 40 mg/L)和叶酸缺乏组(培养液中添加叶酸拮抗剂甲氨蝶呤0.4mg/L);通过nestin+BrdU免疫荧光双标记和绘制细胞生长曲线(MTT法)检测叶酸对细胞增殖状态的影响。结果无血清培养液中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞组成的神经球,BrdU免疫标记证实培养的NSCs具有增殖能力。免疫荧光双标记和MTT结果显示,两个叶酸干预组NSCs增殖能力较对照组显著增强。结论体外培养的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进神经干细胞的生长。     

Lack of resistance to Schistosoma japonicum in mice immunized with irradiated S. mansoni cercariae

Mice immunized with irradiated Schistosoma mansoni cercariae were resistant to challenge with S. mansoni cercariae (mean resistance 53%) but not to challenge with S. japonicum cercariae (mean resistance -5%). Furthermore, the antibodies induced by vaccination with irradiated S. mansoni cercariae were more reactive with S. mansoni than with S. japonicum schistosomula. These results support the concept that the resistance induced by vaccination with irradiated cercariae is immunologically specific.     

血清浓度对高原体外肝细胞培养的影响

目的了解在高原环境条件下血清对培养肝细胞生长的影响,初步确定进行体外肝细胞培养的适宜血清浓度。方法采用已适应本地环境的成年家兔肝细胞进行体外单层培养,在常规RPMI1640培养基的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0%、2%、10%及20%),观察培养细胞形态、数量及培养上清中白蛋白和尿素水平变化。结果无血清组始终未见明显细胞贴壁及增殖,其他组细胞均于接种4 h开始贴壁,8 h开始增殖,10%血清组和20%血清组细胞均于6 d生长满瓶,并形成均匀的单层,而2%血清组细胞则于8 d生长满瓶;2%血清组的细胞数量峰值明显低于10%血清组和20%血清组;除无血清组外,培养上清中白蛋白和尿素水平均呈现显著升高,其中10%血清组和20%血清组的白蛋白及尿素峰值水平明显高于2%血清组。结论在高原环境条件下,体外培养肝细胞的生长、增殖及其生物学功能维持明显依赖于常规基础培养基中添加的血清浓度;对于普通肝细胞培养实验而言,10%血清浓度较为适宜。     

Sj 26基因转染树突状细胞抗血吸虫感染作用

目的探讨日本血吸虫Sj26基因转染树突状细胞（DC）抗血吸虫感染保护性免疫作用。方法利用Sj26基因转染、空质粒pcDNA3转染和未处理DC分别免疫BALB／c小鼠3次，攻击感染后计数成虫和虫卵。结果Sj26基因转染DC免疫小鼠诱导34．5％的减虫率和48．5％的减卵率，明显高于空质粒pcDNA3转染DC组（16．8％和15.8％）和未处理DC组（14．6％和14．4％），空质粒pcDNA3转染DC和未处理DC组之间差异无统计学意义。结论Sj26基因转染DC可诱导抗血吸虫感染的保护性免疫作用。     

The strain specificity of vaccination with ultra violet attenuated cercariae of the Chinese strain of Schistosoma japonicum

Mice vaccinated with ultra violet (u.v.) attenuated cercariae of the Chinese mainland strain of S. japonicum were resistant to homologous challenge, but were not resistant to challenge with the Philippine strain of S. japonicum. Thus vaccination using u.v. attenuated S. japonicum cercariae is strain specific.     

In vivo and in vitro inhibition of B16 melanoma growth by vitamin B6

The effect of vitamin B6 on the growth of B16 melanoma cells in vivo and in vitro was studied. B16 melanoma cells grown for three days in medium supplemented with 5.0 mM pyridoxine or 0.5 mM pyridoxal showed an 80% reduction in cell proliferation compared with control culture. Cells cultured for six hours in medium supplemented with 0.5 mM pyridoxal took up and incorporated 13 and 32% less [3H]thymidine, respectively, than did control cultures. A 17% reduction in [3H]glucose uptake was observed at this time point. When the incubation time was decreased to three hours, an inhibition of cellular uptake of [3H]thymidine (22%), [3H]uridine (14%), and [3H]glucose (15%) was observed; however, little or no inhibition in incorporation was detected. In in vivo studies, mice pretreated with pyridoxal for two weeks and then injected with B16 melanoma cells had a 62% reduction in tumor weight compared with controls at the end of a three-week period. If tumors were first established in mice and then treated with pyridoxal for six days, a 39% reduction in tumor growth was observed. There were no differences observed in body weights or liver weights in any of the animal groups. These results indicate that supraphysiological doses of vitamin B6 can inhibit the growth of B16 melanoma cells both in vitro and in vivo. The exact mechanism by which pyridoxal exerts its inhibitory effect was not ascertained, but experiments suggest that the vitamer may be acting on the plasma membrane to reduce precursor transport into the cell.     

膀胱无细胞基质复合阴道平滑肌细胞修复兔阴道缺损

目的探讨膀胱无细胞基质（BACM）复合阴道平滑肌细胞修复兔阴道缺损的可行性,寻求理想的阴道修复材料。方法将24只成年新西兰雌兔按随机数字表法分3组,每组8只,A组用于制备BACM和阴道无细胞基质（VACM）,分别在B、c两组新西兰兔获取1cm^2阴道前壁组织,分离培养兔阴道平滑肌细胞,免疫组化染色鉴定。以1×10^7个细胞／cm。种植于BACM和VACM上,体外培养5d后形成VACM-平滑肌细胞复合物[对照组（C组）]和BACM-平滑肌细胞复合物[实验组（c组）],用于修复兔中段阴道缺损,于移植后3、6、12周观察阴道修复情况。结果制备的BACM和VACM均为白色透明状,HE染色和扫描电镜观察为规则排列的网状胶原纤维,无细胞碎片;体外培养的阴道平滑肌细胞为梭形,呈典型的“峰和谷”样,免疫组化染色示仪-肌动蛋白阳性,种植到BACM和VACM上5h后,均可见部分细胞黏附于无细胞基质上,随时间推移,细胞逐渐增多并伸展成梭形,实验组和对照组移植后3周均可见基质表面已形成完整的上皮层,部分平滑肌细胞长入,移植后6周形成多层复合上皮,平滑肌束明显增多,移植后12周其组织结构与正常阴道组织结构相似,阴道造影证实修复部位阴道宽敞,未见明显狭窄和瘢痕形成,两组组织修复再生情况一致。结论BACM和VACM复合阴道平滑肌细胞修复阴道缺损的组织再生规律基本相同,但BACM来源广泛,具有良好的组织相容性,是一种较好的修复阴道缺损的支架材料。