稽留流产患者外周血CD~4+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞在稽留流产患者外周血中的比例变化。方法:选取16例稽留流产患者,采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测其外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:稽留流产患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+ T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+ CD25+ Foxp3+的表达显著降低。结论:稽留流产患者CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显减少,提示稽留流产的发生可能与患者外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+下降有关;而在妊娠早期CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显升高,表明其可能是调控母-胎间免疫耐受形成的重要因素,参与了正常妊娠的维持。     

子痫前期患者蜕膜中CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性 T细胞及NK细胞的相关研究

目的:对子痫前期(PE)患者蜕膜中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)和NK细胞进行相关研究,探讨子痫前期发病机制中相关的免疫学变化。方法:选择子痫前期患者30例(轻度13例、重度17例)、正常晚期妊娠妇女30例。采用免疫组织化学法检测胎盘蜕膜CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和NK细胞后计数并检测其平均灰度值。结果:①子痫前期患者蜕膜CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞阳性表达率均明显低于正常晚期妊娠者(P均<0.05);②子痫前期患者蜕膜NK细胞数高于正常孕妇(P均<0.05)且NK细胞CD56组化染色平均灰度值高于正常孕妇(P均<0.05)。结论:子痫前期患者蜕膜的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞均低于正常孕妇;蜕膜的NK细胞数均高于正常孕妇,这一结果造成母胎免疫耐受失衡且NK细胞呈激活状态,杀伤活性增强,导致子痫前期。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究上皮性卵巢癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法:采用流式细胞术检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA表达水平。结果:卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P<0.05);Foxp3 mRNA在卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中表达明显增高(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+调节性T细胞可能在卵巢癌免疫耐受中发挥重要作用。     

CD4~+ CD25~(high) CD127~(low)调节性T细胞在宫颈癌患者外周血中的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25high CD127low调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)在宫颈癌患者外周血中的表达特点及临床意义。方法:采用流式细胞术检测21例宫颈癌患者和11例健康者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg、CD4+ T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的表达水平。结果:21例宫颈癌患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg占总CD4+ T细胞的(11.17±2.14)%,高于健康对照组(6.96±0.94)%(t=5.974,P<0.05),与NK细胞呈负相关(r=-0.468,P<0.05);CD4+T、CD8+T细胞占总T细胞的比例与健康对照组比较差异均无统计学意义;随疾病进展,宫颈癌患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg水平升高,Ⅱ期+Ⅲ期患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg占总CD4+ T细胞的(10.80±1.48)%,明显高于Ⅰ期患者(9.34±1.42)%(P<0.05)和健康对照组(6.96±0.94)%(P<0.05)。结论:宫颈癌患者外周血CD4+ CD25high CD127low Treg表达水平可能是一个较好的反映宫颈癌患者免疫功能状态的参考指标,其在外周血的升高程度与肿瘤临床分期有关,可能参与了宫颈癌的发生发展。     

吸毒人员外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3调节性T细胞表达

目的:探讨外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞与吸毒人员机体免疫的关系。方法:采集114名吸毒人员外周血,根据不同吸毒方式和吸毒年限进行分组,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达。结果:不同吸毒方式的吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达,以口吸、静脉注射、混合吸顺序递减(49.07%±14.88%、34.96%±13.41%、26.72%±8.49%),各组间两两比较,差别有统计学意义(P<0.01);同一吸毒方式不同吸毒年限的吸毒人员CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达相比较,≤10年的口吸组(51.79%±10.44%)较>10年口吸组(37.14%±12.29%)明显降低(P<0.01),而混合吸毒组明显升高(27.06%±8.99%到35.47%±11.02%,P<0.05),静脉注射组变化不明显(P>0.05)。结论:通过检测吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞的表达,反映了不同吸毒方式和吸毒年限的吸毒人员机体免疫功能损伤程度,不仅可作为一项准确、可靠监测指标,也将为吸毒人员的免疫功能的检测提供新的思路。     

肺癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞检测及其临床意义

目的了解肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的比例和其临床意义,探讨CD4+CD25+调节性T细胞与临床分期的相关性。方法流式细胞分析仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例。结果肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比为(15.7±1.6)%,明显高于健康对照者(7.1±1.5)(p<0.05),且外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平与患者病情分期呈显著正相关。结论肺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞比例较高,对肺癌患者具有免疫抑制功能。     

非酒精性脂肪性肝病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及意义

目的观察非酒精性脂肪性肝病患者外周血单个核细胞(PBMC)CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系,初步探讨其意义。方法 46例非酒精性脂肪性肝病患者根据体质指数分为肥胖组(21例)及非肥胖组(25例),42名健康医务工作者作为健康对照。检测空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数;采用流式细胞术检测患者外周血PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,并计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比;分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗间的关系。结果与健康对照组相比,非酒精性脂肪性肝病患者外周血PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均显著下降(P<0.01,P<0.05),但在肥胖组与非肥胖组间差异均无统计学意义(P>0.05);肥胖者胰岛素抵抗指数较非肥胖者显著升高(P<0.01);肥胖组内PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数值及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均与胰岛素抵抗指数呈明显负相关(r=-0.989,P<0.01)。结论非酒精性脂肪性肝病患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例减少,可能存在自身免疫调节功能的紊乱;PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与非酒精性脂肪性肝病的形成和发展。     

肺结核患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测及意义

[目的]通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义。[方法]采用流式细胞技术多色荧光分析法,测定84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性者之间的差别。[结果]肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P0.05);各型结核之间、抗酸杆菌阳性与阴性之间的差异有统计学意义(P0.05);初治肺结核与复治肺结核也有一定的差异,但无统计学意义(P0.05)。[结论]CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免疫功能的指标,它对肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义。     

卵巢癌患者外周血CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞及Foxp3的检测及临床意义

目的:检测CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)及Foxp3在卵巢癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫调节中的作用及临床意义。方法:采用流式细胞术检测75例卵巢癌患者PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比以及CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的表达,并与73例正常对照组进行比较。结果:卵巢癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比及Foxp3表达水平均较正常对照组增高(P<0.05),治疗后上述指标较治疗前减低(P<0.05)。结论:卵巢癌患者外周血调节性T细胞增高可能是其免疫异常的主要原因之一,定期检测外周血中上述指标的变化有助于了解卵巢癌患者的病情变化及判断预后。     

化疗对乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞的影响

目的观察化疗对乳腺癌患者外周血免疫指标的变化并探讨其影响。方法采用流式细胞术分析129例乳腺癌患者化疗前后CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞的比率及T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8;B淋巴细胞CD19;NK细胞(CD16+CD56)和CD4/CD8比值的动态变化。结果化疗后的乳腺癌患者CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+细胞比率较化疗前降低,T淋巴细胞亚群中CD3、CD4、CD4/CD8增高,CD8、NK和CD19降低;乳腺癌患者外周血调节性T细胞的数量与临床分期和组织分化程度相关。结论乳腺癌患者化疗后调节性T细胞的数量降低,免疫调节抑制功能下降,免疫功能得到提高,但体液免疫及NK功能未见提高。     

CD4+CD25+T细胞在溃疡性结肠炎患者中的表达及意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞和其特异性标志物Foxp3的表达及其在UC不同病期的变化,探讨其在UC发病机制中的意义。方法研究纳入2007年2月至2008年12月在我院就诊的UC患者40例,其中活动期23例,缓解期17例;同时选择33例肠易激综合征（IBS）患者及32名健康者作为对照。用流式细胞仪检测UC患者、IBS患者和正常对照者的外周血CD4＋CD25＋T细胞阳性率,用RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3mRNA的表达,用酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF—β）的浓度。结果活动期和缓解期UC患者、IBS患者、正常对照者外周血CD4＋T细胞总数相比差异无统计学意义（P=0．126）。CD4＋CD25＋T细胞在CD4＋T细胞中所占比例在活动期和缓解期UC患者中均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．01）,活动期患者较缓解期患者更低（P〈0．001）,并且与疾病活动指数（r=-0．660,P〈0．001）及红细胞沉降率（r=-0．572,P=0．001）均呈显著负相关,而IBS患者和正常对照者间差异没有统计学意义（P=0．343）。PBMC中Foxp3mRNA的表达在活动期和缓解期UC患者均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．001）。而血清IL-10和TGF—β的浓度在活动期和缓解期UC患者、IBS患者和正常对照者4组间无明显差异（P均〉0．05）。结论活动期UC患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞明显降低,缓解期UC患者的表达有所升高,并且与临床疾病活动相关,提示这类细胞可能参与了UC疾病的发生发展,Foxp3表达降低可能是导致CD4＋CD25＋T细胞发育障碍的重要因素。     

1,25二羟基维生素D3对大鼠脾调节性T细胞及其特异性转录因子表达的影响

目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响. 方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组.分别给予对照组和LPS组赋形剂,VitD3组用1,25(OH)2VitD3(0.25 μg/只·d-1),连续灌胃14 d.第15天LPS组和VitD3组腹腔注射致死剂量LPS(10 mg/kg).6 h后处死,用流式细胞仪检测脾CD4 CD25 调节性T细胞比例,用Realtime RT-PCR检测脾中Foxp3 mRNA的表达. 结果:1,25(OH)2VitD3明显上调大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞的比例及其特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达. 结论:1,25(OH)2VitD3预干预对大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3的基因表达有显著影响.1,25(OH)2VitD3有可能通过促进CD4 CD25 调节性T细胞的发育,发挥其免疫调节作用.     

实验性抗磷脂综合征小鼠CD4~+CD25~+调节性细胞及foxp3表达的变化

目的:观察实验性抗磷脂综合征(experimental anti-phospholipid antibody syndrome,EAPS)进展过程中小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量和功能变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立实验性APS模型,免疫12周后检测抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)、抗心磷脂抗体(ACA)、流产率(%)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、血小板计数(PLT PBC)。以流式细胞术检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果:模型小鼠anti-β2-GP1、aCL水平明显升高,aPTT延长,PLT PBC降低,流产率提高,差异有统计学意义(P0.05)。模型小鼠PBMC中foxp3基因表达在4周短暂高于对照组(P0.05),8周后随着APS进展开始逐渐降低,12周后明显低于对照组(P0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P0.05)。结论:CD4+CD25+Treg数量和功能下降参与抗磷脂综合征的发病机制。     

转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对NK细胞免疫活性影响的研究

目的:利用载有Foxp3基因的腺病毒载体转染,使小鼠CD4+CD25-T细胞强制性高表达Foxp3,并研究体外诱导获得的Foxp3高表达T细胞对NK细胞免疫活性的调节作用及其机制。方法:将载有Foxp3基因的逆转录病毒转染CD4+CD25-T细胞获得持续性高表达Foxp3的CD4+T细胞。CD4+Foxp3+T细胞与NK细胞共培养后,通过51Cr标记法检测NK细胞的杀伤毒性。在Transwell共培养实验体系中,通过TGF-β阻断实验来检测NK细胞杀伤毒性。结果:通过逆转录病毒转染幼稚CD4+CD25-T细胞获得了表达Foxp3的CD4+T细胞模型。CD4+Foxp3+T细胞在与NK细胞共培养后,能显著抑制NK细胞毒性杀伤作用。在共培养体系中加入抗TGF-β抗体后,其抑制率显著降低。与NK细胞直接接触的CD4+Foxp3+T细胞可以诱导NK细胞免疫抑制。结论:强制性表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,能抑制NK细胞的细胞毒性杀伤作用。转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对NK细胞发挥作用依赖于细胞之间的直接接触,与转染后T细胞表面表达TGF-β有关。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与卵巢癌的相关性研究

目的:探讨卵巢癌患者病灶间质中及上皮内CD3+TILs、CD4+TILs、CD8+TILs、Treg的分布特点。方法:采用免疫组织化学方法检测40例卵巢癌患者病灶间质中及上皮内CD3+TILs、CD4+TILs、CD8+TILs、Treg的表达情况及10例正常卵巢组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、Treg的表达情况。结果:卵巢癌组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞数量与正常卵巢组织中相比显著增加,且卵巢癌组织上皮内Treg数量增加。结论:卵巢癌局部微环境中机体对肿瘤抗原可以产生免疫反应,但Treg的存在而抑制了肿瘤的特异性免疫。