糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS和NT-3表达变化及意义

目的 观察不同病程糖尿病大鼠下颌下腺内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和神经营养因子-3(NT-3)的表达变化,探讨其对糖尿病下颌下腺结构和功能的影响.方法 48只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和治疗组.糖尿病组和治疗组给予腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病模型,治疗组给予胰岛素治疗,于造模后3个月和6个月每组分别处死8只大鼠,测定空腹血糖,并取下颌下腺组织,分别进行HE染色、免疫组织化学染色和计算机图像分析.结果 糖尿病组血糖较同期对照组升高且随着病程的延长显著,治疗组血糖较同期糖尿病组下降.光镜下,与对照组相比,糖尿病组下颌下腺腺泡萎缩加重,颗粒曲管数目减少,管腔变窄,治疗组无明显变化;免疫组织化学法检测显示,nNOS在糖尿病组表达较同期对照组增强,在造模3个月表达最强,治疗组表达较同期糖尿病组降低;NT-3在糖尿病组表达较同期对照组降低且随病程的延长减少,治疗组较同期糖尿病组增强.结论 糖尿病大鼠下颌下腺内nNOS表达升高和NT-3表达下降,可能是引起糖尿病下颌下腺结构和功能紊乱的重要原因;胰岛素治疗可能与nNOS和NT-3的表达改变有关.     

下颌下腺内NT-3的表达及意义

目的　对成人及大鼠下颌下腺内NT 3的定性、定位及生物学意义进行研究。方法　采用HE和免疫组织化学SABC染色方法。结果　成人下颌下腺导管上皮细胞呈NT 3免疫反应阳性 ,其中以纹状管最为明显。大鼠下颌下腺颗粒曲管、纹状管及小叶间导管上皮细胞呈NT 3免疫反应阳性。两者的导管上皮细胞核和腺泡细胞均为阴性。结论　成人及大鼠下颌下腺中有NT 3的表达 ,提示NT 3可能参与了下颌下腺复杂的分泌功能     

Expression of neurotrophin-3 and its receptors in lung tissues of rats with asthma

目的 研究神经营养素3 (NT-3)及其受体酪氨酸激酶C(TrkC)和p75神经营养素受体(p75 NTR)在哮喘大鼠肺组织中的表达情况.方法 将28只4～6周龄的SD大鼠随机分为分为哮喘组(n=16)(以卵蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型)和正常对照组(n=12).取两组大鼠的肺组织制作病理切片,HE染色后光学显微镜下观察支气管和肺组织的病理学特征.采用Real-Time PCR技术检测两组大鼠肺组织中NT-3、TrkC和p75NTR mRNA的表达,并分析三者之间的相关性.结果 光学显微镜观察发现:哮喘组大鼠支气管壁周围有较多淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润,可见支气管气道上皮脱落、杯状细胞增生及黏液栓增多等变化;正常对照组大鼠支气管及肺泡结构未见明显异常.哮喘组大鼠肺组织中NT-3、TrkC和p75NTR mRNA的相对表达量均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析结果显示:NT-3 mRNA与TrkC mRNA的表达、NT-3mRNA与p75NTR mRNA的表达以及TrkC mRNA与p75NTR mRNA的表达均呈正相关(r分别为0.89、0.90和0.82,均P＜0.01).结论 致敏哮喘大鼠肺组织内NT-3 mRNA表达水平升高.NT-3通过上调TrkC和p75NTR mRNA的表达,增强NT-3的功能效应,三者共同参与了哮喘气道神经源性炎症的发生.     

益气养阴活血法对糖尿病大鼠额叶皮质神经元NT-3表达的影响

目的探讨益气养阴活血法对糖尿病大鼠额叶皮质神经元神经营养因子3(NT-3)表达的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发糖尿病大鼠模型,益气养阴活血药灌胃给药进行防治,8周后取脑做NT-3免疫组化染色。结果正常对照组大鼠额叶皮质内NT-3阳性神经元数目多,染色深;糖尿病模型组大鼠额叶皮质内NT-3阳性神经元数目少,染色浅;益气养阴活血法治疗组大鼠数目和染色与正常组大鼠接近。结论益气养阴活血法具有防治糖尿病大鼠额叶皮质神经元退行性变的功效。     

水浸束缚应激对大鼠下颌下腺内瘦素表达的影响

目的:观察应激状态下大鼠颌下腺内瘦素表达的变化,探讨应激反应对颌下腺瘦素分泌的影响及其意义.方法:采用水浸束缚应激(WRS)方法,将20只SD大鼠随机均分为WRS组(n=10)和对照组(n=10),用免疫组织化学方法观察大鼠颌下腺内瘦素的定位与分布;用ELISA法检测两组大鼠血清和颌下腺组织中瘦素水平.结果:瘦素免疫反应阳性细胞主要定位于颌下腺导管的颗粒曲管和纹状管,腺泡细胞为阴性,其中颗粒曲管上皮细胞呈强阳性反应. WRS组大鼠颌下腺导管上皮细胞瘦素免疫反应细胞的染色强度高于对照组. 与对照组相比,WRS组大鼠血清和颌下腺中瘦素水平均显著升高(P＜0.01).结论:瘦素表达于大鼠颌下腺导管上皮细胞;水浸束缚应激可致大鼠血清和颌下腺中瘦素浓度增加,颌下腺内瘦素可能参与应激反应过程的调节.     

神经营养因子-3在成年大鼠胃和睾丸分布的研究

用特异的神经营养因子-3(NT-3)兔抗血清,以免疫组化ABC法染片观察了NT-3 样免疫反应物(NT-3-IR)在成年大鼠胃和睾丸的分布.结果:NT-3-IR主要分布于胃的部分上皮细胞、壁细胞、主细胞和平滑肌细胞. 阳性产物的亚细胞定位除胞浆外,亦有细胞核内染色;NT-3-IR在睾丸主要分布于曲精小管上皮的部分各级生精细胞,阳性染色位于细胞浆.结果提示:NT-3 可能与胃和睾丸的某些生理功能有关,且两者发挥功能的方式可能有异.     

IN-1以及联合NT-3对大鼠脊髓损伤后NF表达变化的影响及意义

目的探讨大鼠脊髓损伤后给予髓磷脂相关生长阻逆蛋白抗体(IN-1)以及和神经营养素3(NT-3)联合作用后神经元中丝蛋白(neurofilaments,NF)的表达有无变化。方法健康Sprague-Dawley(SD)大鼠18只,平均随机分为损伤对照组、IN-1组及IN-1和NT-3联合作用组。各组分别在术后28天取材行HE染色、免疫组化染色检测NF表达的变化。结果联合组NF染色灰度值明显小于其他两组(P<0.05或P<0.01)。结论IN-1及联合应用NT-3后可以促进脊髓损伤后轴突的再生,促进运动功能的恢复。     

神经营养素3及其受体在哮喘大鼠肺组织中的表达

目的研究神经营养素3(NT-3)及其受体酪氨酸激酶C(TrkC)和p75神经营养素受体(p75NTR)在哮喘大鼠肺组织中的表达情况。方法将28只4～6周龄的SD大鼠随机分为分为哮喘组(n=16)(以卵蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型)和正常对照组(n=12)。取两组大鼠的肺组织制作病理切片,HE染色后光学显微镜下观察支气管和肺组织的病理学特征。采用Real-Time PCR技术检测两组大鼠肺组织中NT-3、TrkC和p75NTR mRNA的表达,并分析三者之间的相关性。结果光学显微镜观察发现:哮喘组大鼠支气管壁周围有较多淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润,可见支气管气道上皮脱落、杯状细胞增生及黏液栓增多等变化;正常对照组大鼠支气管及肺泡结构未见明显异常。哮喘组大鼠肺组织中NT-3、TrkC和p75NTR mRNA的相对表达量均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。相关性分析结果显示:NT-3 mRNA与TrkC mRNA的表达、NT-3mRNA与p75NTR mRNA的表达以及TrkC mRNA与p75NTR mRNA的表达均呈正相关(r分别为0.89、0.90和0.82,均P0.01)。结论致敏哮喘大鼠肺组织内NT-3 mRNA表达水平升高。NT-3通过上调TrkC和p75NTR mRNA的表达,增强NT-3的功能效应,三者共同参与了哮喘气道神经源性炎症的发生。     

大鼠失神经支配表情肌NT-3基因转染的实验研究

目的:观察神经营养素3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染大鼠失神经支配表情肌的情况及对其功能恢复的影响.方法:离断大鼠面神经的下颌缘支和颊支后无张力外膜吻合制备面神经损伤模型,以直接注射法将脂质体DC-Chol和重组质粒pcDNA3.1( )-NT-3混匀后注入受损神经处的神经所支配的肌肉内.采用PT-PCR技术检测转基因处肌肉的NT-3表达,并观察NT-3基因转染后大鼠触须活动情况.结果:经脂质体DC-Chol介导NT-3基因可有效地转染组织并得到表达,大鼠转基因实验侧的触须拂动比对照侧提前开始恢复.结论:经脂质体介导的外源性NT-3在损伤局部表达并具有促进和加快面神经功能恢复的作用.     

高脂血症大鼠海马nNOS及NT-3免疫阳性神经元的变化

目的观察高脂血症大鼠海马中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及神经营养因子-3(NT-3)的变化,并探讨其临床意义. 方法采用HE和SABC免疫组织化学染色方法,结合计算机图像分析系统,比较两组海马各区平均光密度(MOD)值. 结果与对照组相比,实验组血清总胆固醇(6.65 mmol/L)及血清低密度脂蛋白胆固醇(4.41 mmol/L)升高明显,差异有显著性.实验组海马各区nNOS免疫阳性神经元MOD升高,尤以CA3区明显;NT-3免疫阳性神经元MOD降低,以CA1区最为显著.结论高脂血症大鼠海马中nNOS表达增强而NT-3表达减弱,表明高脂血症可导致海马神经元功能改变.     

烟酰胺磷酸核糖转移酶在大鼠涎腺的表达及定位

[目的]研究烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl transferase,Nampt)在大鼠涎腺的表达和分布.[方法]应用半定量逆转录聚合酶链法(RT-PCR)和免疫印迹法检测大鼠正常腮腺、颌下腺和大舌下腺组织Nampt mRNA及蛋白质的表达.采用免疫组织化学法检测大鼠腮腺、颌...     

人胎儿大唾液腺内NT-3的表达及意义

目的对胎儿大唾液腺内NT-3的表达、分布及生物学意义进行研究.方法采用免疫组化SABC法.结果 14～32周胎儿大唾液腺内纹状管和小叶间导管上皮细胞呈NT-3免疫阳性反应.3种大唾液腺中NT-3的免疫染色强度相似,且在胚胎发育的14～32周,免疫反应强度未见明显变化.结论胎儿大唾液腺内有NT-3表达,可能与维持胎儿唾液腺的发育和功能活动有关.     

模拟失重降低大鼠血清和下颌下腺Ghrelin水平

目的观察模拟失重状态下大鼠血清和下颌下腺内Ghrelin表达的变化,为探讨航天失重环境下消化系统功能紊乱的机制提供实验依据。方法采用尾悬吊模拟失重模型,30只Sprague-Dawley大鼠随机分为4周悬吊组（n=15）和正常对照组（n=15）,用酶免疫分析（EIA）法测定动物血清和下颌下腺组织中Ghrelin的浓度。结果与正常对照组比较,模拟失重组大鼠血清和下颌下腺组织中Ghrelin水平均显著降低【（7．14±1．65）μg／Lus（5．72±1．42）μg／L,P〈0．05;（8．36±1．87）μg／gVS（6．45±2．06）μgg,P〈0．01）1。结论模拟失重环境可致大鼠血清和下颌下腺组织中Ghrelin水平下降。Ghrelin可能参与模拟失重环境下消化系统功能紊乱的调节。     

Morphological characteristics of submandibular glands of miniature pig

Background Miniature pig (minipig) is increasingly used as a large animal model for a variety of biomedical studies. Little information is available in the literature on anatomy, histology and sialograghy of the submandibular gland of the minipig. The purpose of this study was to characterize the morphology of a miniature pig’s (minipig) submandibular gland as a large animal model for further biomedical studies.Methods Five minipigs were subjected to sialographic, anatomic, histologic, histochemical and ultrastructural evaluations for submandibular glands. Results Sialograms showed a long, horizontal main excretory duct and a pear-shaped gland located inferoposterior to the angle of the mandible. The submandibular glands lied superficial to the suprahyoid, and infrahyoid muscle groups, and were covered by the inferior portion of the parotid gland. The submandibular glands were characterized by a mixed parenchyma of mucous and serous secretory acini. Alcian blue (AB) staining and periodic acid-Schiff (PAS) reactions demon-strated that minipig submandibular glands synthesized and secreted acid mucous substances by serous cells and polysaccharide, and neutral mucous substances, by mucous cells. Conclusion The submandibular gland of the minipig is considered a useful large salivary gland animal model for biomedical studies.     

糖尿病大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体表达变化

目的观察糖尿病大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体表达的变化.方法 SD雄性大鼠24只,随机分为实验组12只(4、12周各6只)及对照组12只.用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,分别于4、12周后测体重和血糖,应用HE和免疫组织化学SABC法,观察组织学变化并检测瘦素及其受体表达.结果与对照组比较,实验组腺实质趋于萎缩.对照组大鼠下颌下腺导管上皮细胞呈瘦素及瘦素受体免疫反应中等阳性,免疫反应物分布于细胞胞质内,细胞核和腺泡细胞呈阴性.4周糖尿病组瘦素及其受体免疫反应呈较强阳性;12周时呈强阳性.结论随糖尿病病程延长,大鼠下颌下腺组织发生退变且瘦素及其受体表达增强,为探讨瘦素变化在糖尿病发病机制中的作用及意义提供了形态学依据.     

Early and late effects of X-irradiation on submandibular gland: a morphological study in mice

BACKGROUND: Radiotherapy for head and neck cancers causes permanent salivary gland dysfunction and xerostomia. The aim of this study was to determine changes in mice submandibular glands after X-irradiation. METHODS: The submandibular glands of male C57BL/6 mice were locally X-irradiated in the head and neck region with a single dose of 7.5 or 15 Gy and analyzed morphologically and morphometrically at 1, 3, 6, 10, 40, and 90 days after irradiation. RESULTS: Two phases of gland reaction to irradiation have been noted. The first, early phase is observed up to 10 days after irradiation. The second, late phase was observed 90 days after irradiation. Also, a dose-related effect was noticed. The most prominent morphological changes were pyknotic nuclei, vacuolization of acinar cells and lysis of acini and granular convoluted tubules. Changes were detected at 3 and 6 days after irradiation followed by tissue regeneration. Ninety days after irradiation, prominent pathological changes (vacuolization and pyknotic nuclei of acinar cells, lysis of acini and granular convoluted tubules and edema) were detected, but the most remarkable change was disseminated mononuclear infiltration. Also, a statistically significant reduction in number of acinar cells was detected in both irradiated glands. CONCLUSIONS: Occurrence of disseminated mononuclear infiltration in gland during late post-irradiation phase makes the mouse model potentially better than the rat model for investigation of irradiation-induced salivary gland damage.     

糖尿病大鼠早期视网膜NT-3和GFAP的表达

用链尿佐菌素 (STZ)腹腔注射制作大鼠糖尿病 (DM )模型。分别于模型建立后 1周、2周、1月处死大鼠 ,取眼球做冰冻切片。用免疫组化法定量、半定量分析视网膜神经营养因子 3 (NT 3 )和胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)的含量。结果 :与正常对照组比较 ,DM 1周、2周大鼠视网膜NT 3、GFAP表达无明显改变 ,DM 1月大鼠视网膜含NT 3的神经元数量及神经元内NT 3的含量减少 (P <0 .0 1 ) ,GFAP阳性细胞数量增加 (P <0 .0 5 )。提示 :糖尿病大鼠早期视网膜神经元即已发生损害 ,同时视网膜含NT 3神经元数和神经细胞内NT 3含量均减少 ;视网膜神经细胞的损害可能与NT 3的减少有关。     

NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤后的运动功能分析

目的 NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤, 以期改善损伤神经运动功能.方法 (1) 用贴壁法体外培养人脐带间充质细胞 (HUMSC) , 同时进行分离, 提纯和鉴定; (2) 构建NT-3基因真核表达载体, 利用基因转染技术将其转入HUMSC, 构建NT-3-HUMSC细胞, 体外检测其存活情况及NT-3表达情况; (3) 筛选作用于SOCS3的特异性靶点, 进行序列同源性分析, 设立阴性对照, 设计并合成SOCS3-siRNA, 同时在体外检测功能; (4) 建立SD大鼠脊髓损伤模型分为为:假手术组10只;T12全脊髓横断损伤模型40只, 随机分为4组, 生理盐水治疗组10只;siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组10只;NT-3-HUMSCs治疗组10只;SOCS3-siRNA治疗组10只.以上各组造模成功后, 分别存活1、2月和3月进行运动功能评价.结果 (1) siRNA+NT-3-HUMSCs联合治疗SD大鼠脊髓损伤组BBB评分明显高于NT-3-HUMSCs、siRNA和生理盐水组, 差异有统计学意义 (P<0.05) ; (2) siRNA+NT-3-HUMSCs联合治疗SD大鼠脊髓损伤组爬网格实验表明神经功能恢复明显高于NT-3-HUMSCs、siRNA和生理盐水组, 差异有统计学意义 (P<0.05) .结论 NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤, 可以改善SD大鼠脊髓损伤的运动功能.