神经生长因子对新生大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

目的 观察神经生长因子（NGF）对分离的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法 以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂，测定谷氨酸（Glu)及过氧化氢（H2O2）诱导的新生大鼠脑细胞内[Ca^2 ]i，观察NGF对此影响。结果 新生大鼠脑细胞内静息[Ca^2 ]i 208±22nmol/L,NGF对神经细胞静息[Ca^2 ]i无明显影响，NGF 1－100μg/L能剂量依赖地抑制Glu和H2O2引起的[Ca^2 ]i升高，其IC50分别为42．5和27．3μg/L。结论 NGF通过降低[Ca^2 ]i的水平来保护大脑皮质神经元抗谷氨酸毒性及过氧化氢损伤。     

神经生长因子对新生大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

目的观察神经生长因子(NGF)对分离的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度([Ca2 ]i)的影响。方法以Fura -2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂 ,测定谷氨酸(Glu)及过氧化氢(H2O2)诱导的新生大鼠脑细胞内[Ca2 ]i,观察NGF对此影响。结果新生大鼠脑细胞内静息[Ca2 ]i208±22nmol/L,NGF对神经细胞静息[Ca2 ]i无明显影响 ,NGF1～100μg/L能剂量依赖地抑制Glu和H2O2 引起的[Ca2 ] i升高 ,其IC50 分别为42 5和27 3μg/L。结论NGF通过降低[Ca2 ]i的水平来保护大脑皮质神经元抗谷氨酸毒性及过氧化氢损伤     

大蒜新素对分离大鼠脑细胞内游离Ca~(2 )的影响

目的:观察大蒜新素对不同刺激剂所致分离大鼠脑细胞内游离钙的影响。方法:以Fura 2-AM为细胞内游离钙的荧光指示剂,用AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接测定了分离新生大鼠脑细胞内游离钙([Ca~(2 )]_i)值,观察了大蒜新素的影响。结果:大蒜新素对脑细胞静息[Ca~(2 )]_i无明显影响,大蒜新素1-100μmol·L~(-1)能剂量依赖性地抑制高K~ 和谷氨酸引起的[Ca~(2 )]_i升高,其中IC_(50)分别为59.7和69.9μmol·L~(-1),高剂量大蒜新素100μmol·L~(-1)能抑制去甲肾上腺素引起的[Ca~(2 )]_i升高。结论:大蒜新素对高K~ 、去甲肾上腺素及谷氨酸引起的[Ca~(2 )]_i升高的抑制作用可能是其抗脑缺血作用机制之一。     

TMB-8抑制神经递质引起的单个脑细胞内游离钙的升高(英文)

目的:研究TMB-8对神经递质引起的单个脑细胞内游离钙升高的作用。方法:应用AR-CM-MIC阳离子测定系统测定游离大鼠单个脑细胞内钙离子浓度。结果:当细胞外液Ca~(2 )浓度为1.3mmol·L~(-1)时,TMB-8 30μmol·L~(-1)能降低谷氨酸,组织胺,5-羟色胺引起的脑[Ca~(2 )]_i浓度的升高。而当细胞外液无钙时,TMB-8能降低细胞内静息[Ca~(2 )]_i;TMB-8 10μmol·L~(-1)则几乎完全抑制了组织胺和5-羟色胺引起的脑[Ca~(2 )]_i升高作用。结论:TMB-8能降低谷氨酸,组织胺,5-羟色胺引起的脑[Ca~(2 )]_i升高。     

Effects of hyperin on free intracellular calcium in dissociated neonatal rat brain cells

目的：研究金丝桃苷（Ｈｙｐ）对新生大鼠的脑细胞内游离钙浓度的作用．方法：分离新生大鼠的脑细胞;用钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ２测定静息和激动剂存在时新生鼠脑细胞内游离钙浓度．结果：在ＣａＣｌ２１３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的Ｈａｎｋｓ液中,静息［Ｃａ２＋］ｉ为（２０８±１２）ｎｍｏｌ·Ｌ－１（ｎ＝１７）,Ｈｙｐ对静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响;Ｈｙｐ１０,４０,１６０μｍｏｌ·Ｌ－１呈浓度依赖性显著抑制ＫＣｌ５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１致［Ｃａ２＋］ｉ增高;Ｈｙｐ１６０μｍｏｌ·Ｌ－１显著抑制去甲肾上腺素１,２,４和８μｍｏｌ·Ｌ－１诱发的［Ｃａ２＋］ｉ的增高;Ｈｙｐ１６０μｍｏｌ·Ｌ－１还可显著抑制谷氨酸和５羟色胺致［Ｃａ２＋］ｉ增高．结论：Ｈｙｐ对新生大鼠脑细胞钙内流有阻滞作用．     

甲基黄酮醇胺对分离的胎鼠脑细胞内游离钙浓度的影响(英文)

目的:观察甲基黄酮醇胺(MFA)对胎鼠脑细胞内游离钙浓度在静息以及激动剂存在时的作用。方法:用钙离子荧光染料Fura 2-AM负载后,测定分离的胎鼠脑细胞内游离钙浓度([Ca~(2 )]_i)及其变化。结果:在含钙1.3mmoL·L~(-1)的Hanks’液中,[Ca~(2 )]_i为197±20nmol·L~(-1)(n=44)。MFA0.15mmol·L~(-1)对静息脑细胞内钙浓度无明显影响。在细胞外钙1.3mmol·L~(-1)条件下,MFA(0.03—0.3 mmoL·L~(-1))浓度依赖性地抑制高钾去极化导致的[Ca~(2 )]_i升高,IC_(50)为0.14(95％可信限:0.05—0.42)mmoL·L~(-1)。在较高浓度时,MFA(0.15—0.3mmoL·L~(-1))也可抑制谷氨酸兴奋所引起的[Ca~(2 )]_i,IC_(50)为0.20(95％可信限:0.01—3.40)mmoL·L~(-1)。结论:MFA抑制高钾去极化引起的[Ca~(2 )]_i升高,在较高浓度时也拮抗谷氨酸兴奋所致的[Ca~(2 )]_i升高。     

小檗碱对神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙升高的影响

以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂，利用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子系统测定小檗碱（Ｂｅｒ）对新生大鼠脑细胞静息Ｃａ２＋和神经递质引起的脑细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响．Ｂｅｒ１，１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１对脑静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响．Ｂｅｒ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量依赖的抑制谷氨酸引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高．Ｂｅｒ１０μｍｏｌ·Ｌ－１能降低Ｈａｎｋｓ液有Ｃａ２＋和无Ｃａ２＋时去甲肾上腺素引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，且能降低５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高（在细胞外液有Ｃａ２＋时）．结果提示Ｂｅｒ可降低谷氨酸，去甲肾上腺素和５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，这可能是其抗脑缺血机理之一．     

L-焦谷氨酸对抗谷氨酸钠诱发的大鼠皮层神经元损伤

目的:在大鼠皮层神经元研究L-吡咯烷酮羧酸(L-PGA)对谷氨酸钠(Glu)诱发神经毒性的拮抗作用。方法:原代培养的皮层神经元取自16d龄的胎鼠,与Glu作用30分钟,24小时后测定神经元的存活及培养介质中亚硝酸盐的浓度;以Fura 2-AM为细胞内[Ca~(2 )]_i荧光探针,AR-CM-MIC阳离子测定系统测定[Ca~(2 )]_i。结果:L-PGA 10-80μmol·L~(-1)浓度依赖地抑制Glu 500μmol·L~(-1)引起的神经损伤,其IC_(50)为(41±9)μmol·L~(-1),95％可信区间:(30.3-54.7)μmol·L~(-1)。L-PGA也能浓度依赖地降低Glu引起的NO释放。L-PGA 1,3,10,30,100μmol·L~(-1)对Glu 100μmol·L~(-1)引起的[Ca~(2 )]_i升高的抑制率分别为20.5％,34.4％,47.7％,70.6％,80.4％。结论:L-PGA可能通过抑制NO形成或细胞内Ca~(2 )浓度的升高而拮抗Glu的神经毒性。     

小檗胺对高钾、去甲肾上腺素及咖啡因引起大鼠心肌细胞内钙动员的拮抗作用(英文)

目的:研究小檗胺(Ber)对氯化钾、NE及咖啡因引起大鼠培养心肌细胞[Ca~(2 )]_i动员的影响,方法:Fluo 3-AM负载后,共聚焦法测定心肌细胞[Ca~(2 )]_i荧光强度的变化。结果:Ber对心肌细胞静息[Ca~(2 )]_i水平无影响,但可剂量依赖性地抑制KCl60mmol·L~(-1)及NE 30 μmol·L~(-1)引起的内钙动员(P<0.01),此作用与维拉帕米相似.Egtazic acid3 mmol·L~(-1)并不能增强Ber对NE引起的[Ca~(2 )]_i升高的抑制作用,无外钙时,咖啡因80-160μmol·L~(-1)的[Ca~(2 )]_i动员不受Ber的影响(P>0.05),结论:Ber与维拉帕米相似,对大鼠心肌细胞靠电压依赖性和受体操纵性钙通道而升高的胞[Ca~(2 )]_i有拮抗作用,并不影响[Ca~(2 )]_i释放。     

前胡丙素对分离的成年鼠正常及肥厚心室肌细胞内游离钙的影响(英文)

目的:研究分离的成年大鼠正常及肥厚左室肌细胞[Ca~(2 )]_i及前胡丙素的作用.方法:用Fura 2-AM测定单细胞[Ca~(2 )]_i.结果:外钙为1.0mmol·L~(-1)时,正常左室肌细胞静息钙87±4 nmol·L~(-1),肥厚细胞123±7 nmol·L~(-1).肥厚心肌细胞中,加入KCl 20,40,60 mmol·L~(-1),[Ca~(2 )]_i增加29％,78％和185％,幅度高于正常细胞.前胡丙素1,10,100 μmol·L~(-1)浓度依赖地抑制KCl及去甲肾上腺素诱导[Ca~(2 )]_i增加.作用与硝苯啶相似.结论:肥厚心肌细胞静息钙高于正常细胞;前胡丙素抑制激动剂引起的[Ca~(2 )]_i升高源于其钙通道阻断作用.     

Value of serial sections of the mouse urinary bladder in the determination of the incidence of bladder carcinoma

The urinary bladders of 517 BALB/c mice with previously diagnosed transitional cell carcinoma were re-examined to determine if serial sections would significantly increase the incidence of bladder carcinoma. Out of the 517 bladder carcinomas, a total of 62 (12%) would not have been diagnosed without the examination of serial sections.     

金银花抗氧化作用的分子学机理研究

目的探讨金银花抗氧化作用分子学机理。方法采用过氧化氢（H2O2）作用于人正常RBL肝细胞，制作氧化应激损伤的细胞模型。将培养的细胞分为四个实验组：正常对照组（C），H2O2损伤组（H2），金银花前保护组（Jb），金银花后保护组（Ja）。采用TUNEL和DNA Ladder法，检测各组细胞凋亡情况。应用免疫组化和Western blot观察各组细胞的HSP-70、NF-kB、Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达及免疫反应活性。应用MTT实验检测RBL细胞的生存率。结果Jb组的细胞凋亡率明显低于H2和Ja组，Bcl-2表达增高，HSP-70、NF-kB、Bax和Caspase-3的表达降低。结论金银花对RBL细胞氧化应激损伤具有一定保护作用．且前保护作用效果好于后保护作用，其保护作用机理可能是通过抑制HSP-70和NF-kB的表达，阻抑NF-kB信号传导途径并提高细胞内抗氧化防御酶系水平。     

蒺藜皂苷对PC12细胞凋亡的保护作用及机制

目的探讨蒺藜皂苷(gross saponin tribulus terrestris,GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,倒置相差显微镜观察细胞形态,Hoechst 33258荧光核染色,流式细胞仪检测PC12细胞亚二倍体峰比率及Western blot方法检测与凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax。结果与模型组比较蒺藜皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P<0.01),凋亡细胞减少,凋亡比率下降(P<0.01),Bcl-2表达增加(P<0.05),而Bax的表达降低(P<0.05)。结论蒺藜皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡及影响凋亡相关蛋白的表达有关。     

山楂叶总黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨山楂叶总黄酮(FMCL)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制。方法用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,倒置显微镜观察细胞生长状况和形态变化,琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状图谱,流式细胞仪检测PC12细胞亚二倍体比率及线粒体膜电位的变化。结果与模型组比较FMCL 100、30mg.L-1两组PC12细胞活性增强,贴壁生长数量增多,而圆缩脱落者减少,未见典型DNA梯状图谱,凋亡比率下降,线粒体膜电位回升,且在一定范围内存在剂量依赖关系。结论山楂叶总黄酮可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。     

槲皮素对过氧化氢损伤小鼠成纤维细胞的保护作用

目的探讨槲皮素对过氧化氢(H_2O_2)损伤小鼠成纤维细胞(NIH-3T3)的保护作用。方法体外培养NIH-3T3细胞,取对数生长期的NIH-3T3细胞分成四个实验组。对照组(C)仅加含有10%胎牛血清的DMEM培养基。实验1(Q_1)组先用0．5mmol/LH_2O_2作用细胞30min,然后再用含有50μmol/L的槲皮素培养基作用24h。实验2(Q_2)组先用含有501μmol/L的槲皮素培养基作用24h,再换含有0．5mmol/L H_2O_2作用细胞30min。H_2O_2实验(H_2)组先用含有0．5mmol/L H_2O_2作用细胞30min,再换仅含有10%胎牛血清的DMEM培养基作用24h。取培养细胞提取DNA和制备1×10~7/ml细胞悬液的滴片,应用TUNEL和Ladder电泳检测细胞凋亡率；应用Weaster blod和细胞免疫组化技术检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、HSP-70、NF- kB蛋白质的表达。结果由TUNEL和Ladder实验得出,Q_1组的细胞凋亡率明显低于H_2组和Q_2组。由Weaster blod和细胞免疫组化技术检测分析得出,Q_1组与Q_2、H_2组相比,Bcl-2的表达明显增高,Bax、Caspase-3、NF-kB、HSP-70的表达减低。结论槲皮素可能主要是通过抑制NF-kB的表达,提高HSP-70的表达,对H_2O_2诱导的NIH-3T3细胞损伤产生保护作用。     

黄芩总黄酮对金葡菌肺感染模式识别受体TLR2/Nod2及其相关炎性因子表达的影响

目的观察黄芩总黄酮对金葡菌感染后肺脏模式识别受体TLRs和Nods及其相关炎性因子表达的作用,探讨其抗炎药理可能的作用靶点和机制。方法通过构建体外金葡菌感染鼠肺上皮细胞和体内金葡菌急性小鼠肺感染模型,利用RT-PCR技术,通过多种给药形式观察TLR2/Nod2和下游相关炎性因子的mRNA的表达,金葡菌的增殖数量,以探讨其可能的作用靶点和机制。结果黄芩总黄酮不能减少侵入到胞内的活菌数目,但可以下调由于金葡菌侵入导致的TNF-α的大量合成。金葡菌侵入后Nod2表达大幅升高,黄芩总黄酮有明显的抑制作用,并且和TNF-α的变化呈现一定的相关性。TLR2/MyD88的表达无变化。结论黄芩总黄酮的抗炎作用可能与其下调Nod2受体表达进而抑制下游炎性因子表达相关。     

输卵管妊娠破裂型与流产型患者血清中PGE2与bcl-2蛋白含量的变化

目的探讨输卵管妊娠破裂型与流产型患者血清中PGE2与bcl-2蛋白含量变化及其意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测26例破裂型输卵管妊娠患者与20例流产型输卵管妊娠患者以及15例正常妊娠妇女血清PGE2与bcl-2含量。结果输卵管妊娠患者血清PGE2与bcl-2含量高于正常同期妊娠妇女,分别为(1992±402)ng/L、(90±44)u/L,(411±297)ng/L和(49±31)u/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);破裂型输卵管妊娠患者血清PGE2与bcl-2蛋白含量高于流产型输卵管妊娠患者,分别是(2159±386)ng/L、(104±45)u/L,(1775±315)ng/L、(72±38)u/L,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论破裂型输卵管妊娠患者血清中PGE2与bcl-2含量高于流产型输卵管妊娠患者,PGE2与bcl-2含量与不同类型输卵管妊娠有一定关系。     

In vitro and in vivo studies of the ability of tetraethyl lead to inhibit cholinesterase activity

In vitro experiments show that tetraethyl lead does not affect cholinesterase activity. Transient biologically insignificant depression of plasma cholinesterase was observed in rhesus monkeys after intravenous administration of 12 mg tetraethyl lead/kg body weight. Doses greater than 19 mg/kg given intravenously were rapidly fatal, with signs of gastrointestinal disturbance, nervousness and incoordination. However, depression of circulating and brain cholinesterase could not be correlated with the onset of symptoms and death. These results do not support the use of 2-pyridine-aldoxime as an antidote for tetraethyl lead poisoning.     

2,3-吲哚醌对多巴胺能细胞氧化损伤的保护作用

目的采用过氧化氢(H2O2)作为损伤因素,检测2,3-吲哚醌(isatin,ISA)对MES 23.5细胞的保护作用及其机制。方法 MTT比色法检测H2O2的毒性作用及ISA的保护作用。细胞分为:对照组,H2O2 20μmol.L-1组,和ISA 100μmol.L-1+H2O2 20μmol.L-1组,采用流式细胞技术(FCM)检测线粒体膜电位(△ψm)的变化;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化。结果 H2O2组细胞存活率明细降低。ISA 100μmol.L-1及以上浓度处理的细胞存活率均高于H2O2组(P<0.05)。H2O2组细胞内R123平均荧光强度较对照组明显降低而ISA组明显增强(P<0.01)。H2O2组细胞内Fluo-3荧光强度明显高于对照组(P<0.01),而ISA组细胞内荧光强度明显低于H2O2组(P<0.01)。结论 ISA可减轻H2O2导致的DA能MES 23.5细胞损伤,其机制与减轻△ψm异常,降低[Ca2+]i水平有关。