补益类中药材蒸制过程中5-羟甲基糠醛的影响因素探讨

摘 要 目的：考察蒸制温度、蒸制时间对补益类药生成5 羟甲基糠醛（5-HMF）的影响。方法: 利用顶空气相色谱 质谱法（HS-GC-MS）检测其生成的5-HMF。 结果: 不同类补益药蒸制都会生成5 HMF,蒸制温度、蒸制时间在补益类药生成5 HMF过程中均有重要影响。蒸制温度不超过80℃,补益类药蒸制几乎不生成5-HMF,蒸制时间对5 HMF生成亦没有明显影响;但蒸制温度超过80℃,蒸制温度及蒸制时间对5-HMF生成的影响则明显不同。80℃﹤蒸制温度﹤130℃时,补益类药蒸制产生5-HMF的量呈平稳较快增长。当蒸制温度＞140℃时,补益类药蒸制生成5 HMF的量呈显著变化,蒸制温度为140℃时,5 HMF生成量较100℃时增加多达10余倍。在蒸制温度超过180℃时,补益类药蒸制随温度的升高5 HMF生成量则逐渐降低,且蒸制时间越长,5-HMF的生成量相应越少。结论:补益类中药材蒸制过程中需严格控制温度和时间。     

HPLC和GC-MS法测定三种黄精炮制过程中5-羟甲基糠醛的含量

摘 要 目的： 建立HPLC法和GC-MS法测定黄精炮制过程中5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量的方法。方法: 采用HPLC法和GC-MS法测定三种黄精不同炮制过程中的5-HMF的含量,建立炮制时间和含量的相关曲线,研究炮制过程中5-HMF的变化规律。结果:三种黄精用炆法和蒸法炮制后,5-HMF含量均在16h左右均出现峰值,三种黄精中5-HMF含量差异显著,大黄精＞姜形黄精＞鸡头黄精。炮制后各品种黄精中5-HMF含量都有相应的增加,炆制品＞蒸制品。结论: 该结果为黄精炮制过程的进一步研究提供了理论依据。     

五味子提取过程中5-羟甲基糠醛的变化规律及影响因素研究

目的:探究五味子药材提取过程中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量变化规律和影响因素,提高五味子提取物的监控质量。方法:采用高效液相色谱法测定五味子药材提取过程(煎煮、减压浓缩、醇沉、减压干燥、调碱)中各提取液中5-HMF含量,找出其含量变化规律,并针对5-HMF含量明显降低的减压干燥过程,研究该过程中干燥温度和时间对5-HMF含量的影响,同时比较减压干燥和冷冻干燥对5-HMF含量的影响变化。结果:五味子提取过程中5-HMF的含量变化趋势为药材煎煮的过程中产生大量5-HMF,浓缩时5-HMF的含量升高,醇沉和三次浓缩液减压干燥时5-HMF的含量均降低,调碱时5-HMF的含量基本不变;减压干燥时随干燥温度的升高和时间的延长,5-HMF含量降低;冷冻干燥对5-HMF含量的降低效果不如减压干燥。结论:建议适当采用较高的温度减压干燥五味子三次浓缩液,可得到5-HMF含量更低的五味子提取物,提高五味子提取物的质量。     

不同炮制程度牡丹皮炭中5-羟甲基糠醛的含量变化

目的:研究牡丹皮炮制过程中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的变化。方法:取经不同程度炒炭工艺制得的丹皮炭品,加70%乙醇20mL超声2次,每次30min,采用高效液相色谱法测定其中5-HMF的含量。结果:320℃以前,5-HMF的含量随炒制时间和炒制温度的增加而升高,但温度达到320℃时,随炒制时间增加,其含量开始降低。结论:不同炮制程度对牡丹皮炭中5-HMF的含量影响较大。本研究为进一步研究丹皮炭的止血机制和控制其质量提供了理论依据。     

九蒸九晒黄精5-HMF含量的变化

目的:研究黄精九蒸九晒过程中5-HMF含量的变化,为九蒸九晒黄精的质量标准提供依据,并且为今后黄精炮制减毒增效作用机制研究奠定基础。方法:采用超声提取法提取每一蒸黄精的5-HMF的含量,并采用HPLC测定黄精"九蒸九制"过程中5-HMF的含量。结果:未经炮制的黄精,以及一蒸一晒,二蒸二晒的黄精中未检测到5-HMF。黄精从三蒸三晒开始检测到5-HMF,并且随着对黄精蒸晒次数的增加,5-HMF含量会逐渐升高,从第六蒸开始降低。结论:5-HMF是一种糖的热降解产物,5-HMF的含量与黄精的蒸晒次数密切相关。     

HPLC测定6种蜂蜜中5-羟甲基糠醛的含量

目的:建立蜂蜜中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量测定方法。方法:利用高效液相色谱法测定6种蜂蜜中5-HMF的含量。结果:5-HMF在48.64～291.84ng范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为100.02%,RSD为1.69%(n=6);6种蜂蜜中5-HMF的平均含量在0.0328～0.0398mg.g-1。结论:所建立的方法简便,重复性好,可用于检测蜂蜜中5-HMF的含量。     

炮制对北五味子中5-羟甲基糠醛含量的影响

目的 研究炮制对北五味子5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的影响,考察5-HMF作为五味子炮制程度评价指标的可行性。方法 利用HPLC研究炮制时间、温度、辅料用量对五味子中5-HMF含量的影响。结果 随炮制时间的延长及炮制温度的升高,五味子中5-HMF含量明显增加。随炮制辅料用量的增加,5-HMF含量变化呈2种趋势。蜜制五味子随炮制辅料用量增加5-HMF含量逐渐升高,酒制和醋制五味子随炮制辅料用量的增加而含量逐渐降低,到40 g·(100 g)^-1五味子的用量时,辅料量的增加对5-HMF产生量的影响变小。结论 5-HMF对各炮制因素具一定敏感性,可考虑作为炮制程度的一个评价指标引入到五味子质量控制体系中。     

不同产地黄精经不同方法炮制后多糖、5-羟甲基糠醛的含量变化

目的:研究不同产地黄精经不同方法炮制后多糖和5-羟甲基糖醛(5-HMF)的含量变化,为不同产地黄精炮制工艺和不同炮制品质量标准的制订提供理论依据。方法:采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定黄精样品中多糖、5-HMF的含量,并比较不同产地[陕西略阳县、陕西黄陵县、云南富民县(道地产区)、陕西太白县]黄精鲜切、干切、清蒸、酒蒸样品中多糖及5-HMF的含量差异。结果:鲜切黄精以道地产区云南富民县样品多糖含量最高(13.4%),且未检测到5-HMF(0);黄精鲜切、干切、清蒸、酒蒸后多糖含量分别为10.8%~13.4%、8.9%~10.8%、5.5%~6.9%,5.6%~6.5%,5-HMF含量分别为0、0、0.21%~0.50%、0.25%~0.72%。与未炮制样品(鲜切)比较,黄精经干切、清蒸、酒蒸后多糖含量依次减少,清蒸、酒蒸后5-HMF含量依次增加。结论:建议在制订道地和非道地产区黄精炮制工艺时应考虑产地因素;在黄精清蒸和酒蒸后的炮制品的质量标准中应增加5-HMF含量测定指标。     

炮制对北五味子中5-羟甲基糠醛含量的影响

目的研究炮制对北五味子5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量的影响,考察5-HMF作为五味子炮制程度评价指标的可行性。方法利用HPLC研究炮制时间、温度、辅料用量对五味子中5-HMF含量的影响。结果随炮制时间的延长及炮制温度的升高,五味子中5-HMF含量明显增加。随炮制辅料用量的增加,5-HMF含量变化呈2种趋势。蜜制五味子随炮制辅料用量增加5-HMF含量逐渐升高,酒制和醋制五味子随炮制辅料用量的增加而含量逐渐降低,到40 g.（100 g）？1五味子的用量时,辅料量的增加对5-HMF产生量的影响变小。结论 5-HMF对各炮制因素具一定敏感性,可考虑作为炮制程度的一个评价指标引入到五味子质量控制体系中。     

不同因素对5-羟甲基糠醛含量的影响

目的探讨含葡萄糖等单糖注射液分解产物5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量的影响因素，以提高含糖类注射液的质量。方法检测不同pH、灭菌条件及制备工艺对5-HMF含量的影响。结果灭菌温度及时间、制备方法及过程中受热时间均是影响5-HMF含量的因素。结论选择合适的灭菌温度和时间，采用合适的配制方法，可以将含糖类注射液的5-HMF含量控制在最低限度。     

中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定

目的:建立中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱含量测定方法,提出特征性有效成分哈巴俄苷的含量限度建议。方法:Ultrasphere ODS 分析柱 (250 mm 4.6 mm,5 mm),流动相为乙腈和1% 醋酸水溶液,线性梯度洗脱(20:8050:50) (20 min),流速为 1 mLmin-1,室温,检测波长为278 nm。结果:哈巴俄苷与肉桂酸回收率分别为97.13% 和99.38%,RSD分别为0.80% 和0.51%,全国20份商品饮片和8份不同产地完整药材中哈巴俄苷和肉桂酸的含量分别为0.041~0.244% 和0.012~0.068%。结论:本文方法快速、简便、准确,可用于玄参的质量控制。建议规定玄参中哈巴俄苷含量应不低于0.05%。     

玄参HPLC指纹图谱的比较研究

目的:建立HPLC指纹图谱测定方法,分析测定玄参商品饮片和不同加工方法制成的玄参饮片的指纹图谱。方法:色谱条件为Zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,0.025%磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm,流速1 mL.min-1,柱温25℃。结果:发现16个色谱峰为玄参商品饮片的共有峰,确定了其相对保留时间和相对峰面积的范围。指纹图谱的数据表明,20批玄参饮片相似度为0.488～0.929,质量差异较大;不同加工方法制成的玄参饮片化学成分差异较大,提示先润后切和先蒸后切加工的玄参质量有差异。结论:玄参HPLC指纹图谱测定是评价玄参药材及饮片质量的较好方法。     

Correlation between 5-hydroxymethylfurfural content and color of Rehmanniae Radix and Rehmanniae Radix Praeparata

In the present study, we explored the correlation between 5-hydroxymethylfurfural (5-HMF) and color of Rehmanniae Radix (RR) and Rehmanniae Radix Praeparata (RRP). The color was observed by human eyes under sunlight. The chromatic value and color difference were detected by a colorimeter. The water content was determined by an oven-drying method. The 5-HMF content was determined by an HPLC method. The correlation between the 5-HMF content and the color was analyzed by bivariatecorrelation analysis. The results showed that the color was greyish-brown and dark brown for RR, and it was black for RRP. The deepening color of RRP was reflected in the decrease of L^*, a^* and b^* values. The water content was in accord with the requirement of Chinese Pharmacopoeia. The 5-HMF contents of RR and RRP were 0.9711–25.71 µg/g and 213.4–4010 µg/g, respectively. The average 5-HMF contents of RR and RRP were 8.059 µg/g and 1433 µg/g, respectively. The 5-HMF content in RRP was higher than that in RR. The correlations between 5-HMF content and L^*, a^* and b^* values were significant. The color of RRP was deeper than that of RR. The 5-HMF content of RRP was higher than 0.02%, while it was less than 0.02% of RR, which could be used as a marker component for judging RR and RRP.     

玄参“发汗”前后化学成分与药理作用比较

目的:分析玄参“发汗”前后的化学成分、药理作用和“发汗”工艺,为玄参的加工、临床应用和进一步研究提供参考。方法:以“玄参”、“炮制”、“发汗”、“化学成分”、“药理作用”等作为关键词,搜索各大数据库的相关文献,查阅相关专业书籍,系统整理并进行综述。结果和结论:经“发汗”后,玄参的化学成分中,环烯醚萜类总量下降,其中的哈巴苷和哈巴俄苷变化不大,类叶升麻苷、安格洛苷C和毛蕊花糖苷含量明显上升,多糖类与DNA含量下降。在药理作用中,抗炎和镇痛作用明显增强,免疫作用轻度增强。在“发汗”工艺上,以完整主根为原料,经过35℃烘箱干燥的处理手段,发汗3 d的方式,核苷类成分含量最高;微波真空干燥下,干燥温度60℃,干燥3.5 h条件下,得到的哈巴苷和哈巴俄苷含量最多。     

不同工艺干燥的玄参中桃叶珊瑚苷含量比较

目的 建立测定玄参中桃叶珊瑚苷含量的高效液相色谱法,探讨不同干燥工艺对玄参质量的影响.方法 分别对鲜玄参进行自然晾晒干燥、烘箱干燥和微波真空干燥;采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(5:95),检测波长为206 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min.结果 桃叶珊瑚苷进样量在0.11～1.81 μg与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 7,n=6);采用微波真空干燥和自然晾晒干燥的玄参中桃叶珊瑚苷含量远高于烘箱干燥的玄参.结论 高效液相色谱法测定玄参中桃叶珊瑚苷含量,方法专属性好、准确、稳定可靠.微波真空技术用于中药玄参的干燥,不仅工艺简单、干燥时间短,而且能较好地保留桃叶珊瑚苷等有效成分.     

红景天玄参组合物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨红景天与玄参组合物对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用。方法通过体外活性评价,筛选出红景天与玄参组合物最佳配比;采用颈内动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,观察模型大鼠的行为、脑梗死面积和脑含水量的变化;测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量。结果当红景天与玄参以1∶1配比时,综合评分最好;且组合物中剂量组(0.39 g/kg)、高剂量组(1.2 g/kg)均能显著缩小局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑梗死面积、降低梗死率,并能减少脑含水量(P<0.05),同时使脑缺血72 h大鼠的行为学症状得到显著改善(P<0.05),明显提高SOD活性并降低MDA的含量(P<0.05)。结论红景天与玄参组合物对局灶性脑缺血再灌注大鼠具有一定保护作用,且作用明显优于单用红景天或玄参。     

养阴清肺丸质量分析

目的通过对养阴清肺丸114批样品进行标准检验及7项探索性研究检验,对该品种的质量及标准状况作出总体分析及评价。方法标准检验依据《中国药典》2005年版增补本,其中包括显微鉴别、TLC及HPLC检验。探索性研究检验采用灰分测定法测定成方制剂中总灰分;建立白芍的显微鉴别方法以监测白芍药材未经去皮、炮制不规范等质量问题;增加了玄参的TLC鉴别;运用GC-MS、GC法进行薄荷等挥发性药材的特征图谱测定;建立HPLC法测定制剂中的芍药苷以研究不同企业所用白芍原料的差异;采用HPLC法测定辅料蜂蜜中的有害成分5-羟甲基糠醛(5-HMF);运用加速试验考察药包材的密闭性。结果 26.5%的样品总灰分严重超标;白芍的显微鉴别结果表明20%的生产企业使用炮制不规范的白芍饮片;玄参的TLC都可以检出,但斑点颜色深浅差别较大;近50%的样品缺失薄荷药材的特征峰;芍药苷质量分数最高值约为最低值的4倍,说明不同企业所用药材原料差异较大;由于没有炼蜜的法定限量标准,导致各生产企业使用炼蜜的质量差别极大,5-HMF严重超标,最高达到6mg/g,是未加工蜂蜜国家限量标准(0.04mg/g)的150倍;加速试验结果表明"塑料球壳"与"铝塑板"这两种包装材料的密封性较好。结论各生产企业养阴清肺丸的质量参差不齐,一些企业在原料、辅料、生产工艺及包装材料方面存在着不同程度的问题。按现行质量标准检验合格率97.4%,依据探索性研究方法检验合格率为45.6%,结果表明探索性研究增加了标准的专属性、可控性及安全性,为进一步修订药品标准、控制药品质量提供参考。     

响应面法优化玄参提取工艺研究

目的:优化玄参的提取工艺。方法:以3种环烯醚萜苷(桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷)和3种苯丙素类(毛蕊花糖苷、安格洛苷C、肉桂酸)的总峰面积为响应值,在单因素试验基础上采用Box-Behnken Design响应面法对甲醇浓度、液料比、超声时间进行优化。结果:最佳提取工艺条件为甲醇浓度88.15%,液料比36.23,超声25.65 min。在此条件下提取总面积预测值为3.12×106,采用改良条件(甲醇浓度88%,液料比36,超声提取26 min)进行验证实验,测得值为3.11×106,实测值与理论值偏差小于1%。结论:响应面法可用于玄参活性成分的提取工艺的优化。     

基于中药血清化学与网络药理学筛选玄参质量标志物

目的：基于中药质量标志物（quality marker,Q-Marker） "五原则" ,结合中药血清化学与网络药理学,分析和预测玄参质量标志物。方法：采用液质联用技术鉴定玄参水煎液中化合物以及灌胃给药后大鼠血清中原型成分,经网络药理学预测原型成分主要作用靶点、通路,依据靶点、通路与玄参传统功效关联性,筛选出与传统功效密切相关的活性成分,并基于原型成分生源关系确定其特异性,综合研究结果确定玄参Q-Marker。结果：在玄参水煎液以及大鼠血清中分别鉴定出50个化合物和5个原型成分;网络药理学预测哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C调节糖脂代谢、保护血管的药理作用与传统功效联系更为密切。结论：哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C可作为玄参Q-Marker用于质量控制。     

消炎灵片质量标准研究

目的提高消炎灵片的质量标准。方法用薄层色谱法鉴别玄参、肿节风;用高效液相色谱法测定肿节风中异秦皮啶含量。结果平均回收率为99.28%,RSD为1.86%。定性定量方法简便,准确,专属性强。结论建立的方法可更有效的控制消炎灵片的质量。