PD-1/PD-L1在系统性红斑狼疮患者外周血表达水平及其临床意义

本研究旨在检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4~+T细胞表面PD-1和B细胞表面PD-L1分子的表达并探索其临床意义。采用流式细胞术检测SLE患者及健康对照外周血CD4~+T细胞上PD-1分子及B细胞上PD-L1分子的表达,并分析其与SLE临床指标的相关性。结果显示,SLE患者外周CD4~+T细胞表面PD-1分子及B细胞上PD-L1分子的表达均明显高于健康对照组(均P0.05),且SLE患者CD4~+T细胞上PD-1分子的表达水平与血清Anti-dsDNA的含量及SLEDAI评分呈正相关(均P0.05),B细胞上PD-L1分子的表达水平与血清dsDNA水平呈正相关(P0.05)。上述结果表明,SLE患者外周血CD4+T细胞上PD-1分子及B细胞上PD-L1分子均发生上调,并与SLE病程和自身抗体水平呈现正相关,提示分别表达于T细胞和B细胞表面的PD-1/PD-L1分子,通过相互作用参与SLE的致病和发展过程。     

致敏小鼠树突状细胞和T细胞PD-1配体/受体的表达

目的 探讨致敏小鼠PD-1信号通路是否有改变.方法 RT-PCR法分别检测致敏及正常小鼠树突状细胞PD-1配体PD-L1、PD-L2及T细胞PD-1受体的mRNA表达情况,流式细胞检测PD-1和配体PD-LI、PD-12的表达.结果 [1]致敏小鼠树突状细胞PD-L1和PD-L2的mRNA表达均显著低于正常小鼠,致敏小鼠T细胞PD-1的mRNA表达也显著低于正常小鼠(P＜0.05).[2]流式细胞检测致敏小鼠树突状细胞PD-L1、PD-L2表达和T细胞PD-1的表达也显著低于正常小鼠.结论 致敏小鼠PD-1信号表达缺陷.     

肝癌患者外周血CD3~+T细胞和CD19~+B细胞中程序性死亡蛋白1(PD-1)及其配体表达水平增加

目的 观察肝细胞肝癌(HCC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中程序性死亡蛋白1(PD-1)和配体以及γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。方法 采集15例早期HCC患者、13例进展期HCC患者和12例健康人(对照组)的外周血并分离PBMC。流式细胞术检测PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达,ELISA检测血清中IFN-γ的水平,利用Pearson相关系数法和One-way ANOVA分析PD-1与IFN-γ的相关性。结果 进展期HCC患者外周血CD3+T细胞和CD19+B细胞中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达水平和血清IFN-γ水平显著高于健康人群和早期HCC患者,HCC患者外周血CD3+T细胞和CD19+B细胞PD-1、PD-L1表达水平与IFN-γ呈正相关。结论 肝癌患者PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2分子表达增加,且PD-1、PD-L1与IFN-γ水平有关联。     

PD-L1在滋养细胞肿瘤中高表达可用于鉴别诊断

正PD-1/PD-L是调控免疫反应和自身免疫耐受机制的关键点。PD-1属于免疫球蛋白超家族成员的细胞表面受体,主要表达于活化的T细胞;PD-L1是PD-1的配体,一旦与受体结合可抑制与T细胞活化相关的蛋白激酶。研究证实PD-L1高表达可促进肿瘤细胞免疫逃逸,且与肿瘤侵袭性及预后差相关。近年来,针对PD-1/PD-L的免疫抑制剂应用于     

PD-L1和PD-L2在组织细胞及树突细胞疾病中的表达

正PD-L1和PD-L2是一种细胞表面蛋白,表达在激活的抗原呈递细胞中,并选择性表达于某些恶性肿瘤中,通过结合T细胞上的PD-1产生抑制性免疫应答。以PD-1或PD-L1为靶标的抗体诱发许多患者的抗肿瘤免疫反应,而且临床过程和PD-L1在肿瘤微环境中的免疫细胞或恶性细胞表达有关。为了解PD-L1和PD-L2在组织细胞及树突细胞疾病中     

PD-L1 与TIL 在免疫治疗中的预测作用及临床意义

随着程序性死亡因子-1(PD-1)/程序性死亡因子配体-1(PD-L1)单抗陆续在中国获批,PD-1/PD-L1抑制剂是目前肿瘤免疫治疗领域的研究热点之一。研究显示PD-1/PD-L1单抗免疫治疗效果与肿瘤细胞中PD-L1的表达水平有关,然而仅仅依靠肿瘤细胞中PD-L1的表达并不能完全预测PD-1/PD-L1单抗治疗效果。PD-1/PD-L1单抗免疫治疗效果也与肿瘤微环境中肿瘤浸润的淋巴细胞(TIL)有关。根据瘤细胞PD-L1的表达以及TIL将肿瘤分为四种免疫类型,不同类型应用PD-1/PD-L1单抗治疗疗效不同。因此,本文对肿瘤细胞PD-L1表达联合TIL预测PD-1/PD-L1单抗免疫治疗疗效进行综述。     

HIV-1感染过程中CD8~+T细胞PD-1水平增高与其活化状态正相关

目的分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8~+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义。方法收集HIV-1感染者87例,健康志愿者22例,密度梯度法分离外周血单个核细胞;采用流式细胞术分析其CD8+T细胞PD-1、CD38、HLA-DR、ki67的表达水平;观察用抗PD-L1 m Ab阻断PD-1/PD-L1通路后CD8~+T细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平变化。结果 HIV-1感染者CD8~+T细胞PD-1表达水平显著高于健康对照组;CD8~+T细胞PD-1水平与病毒载量呈正相关,与CD4~+T细胞数呈负相关;CD8~+T细胞PD-1与CD38、HLA-DR表达呈正相关,与ki67表达无相关性;体外阻断PD-1/PD-L1通路后TNF-α、IFN-γ的表达量增加。结论 HIV-1感染者外周血CD8~+T细胞PD-1表达增加;PD-1过表达与HIV感染过程中CD8~+T细胞功能受抑、免疫耗竭及疾病进程相关;体外阻断PD-1/PD-L1通路可恢复CD8~+T细胞功能。     

人PD-1Δex3基因的克隆、表达及其生物学活性的鉴定

目的:构建表达人PD-1Δex3(ΔPD-1)基因的真核表达载体,检测其表达和生物学活性。方法:通过RT-PCR的方法获得人PD-1全长(PD-1)基因,设计特异性引物,PCR方法获得PD-1Δex3基因的2个cDNA片段,通过重组PCR的方法获得ΔPD-1基因,将目的片段双酶切后与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP/PD-1和pIRES2-EGFP/ΔPD-1并进行鉴定;脂质体转染法将重组载体导入293T细胞;流式细胞术(FCM)检测转染细胞膜表面PD-1的表达;Western blot法检测培养上清中可溶性PD-1(sPD-1)的表达;间接免疫荧光实验分析ΔPD-1蛋白与PD-1两个配体PD-L1和PD-L2的结合。结果:酶切和测序结果均证实插入的基因序列正确,成功构建两个真核表达载体;FCM分析和Western blot检测结果表明,PD-1转染细胞膜表面高表达PD-1蛋白,细胞培养上清中无sPD-1蛋白,而ΔPD-1转染细胞膜表面不表达PD-1蛋白,细胞培养上清中则有大量sPD-1;间接免疫荧光实验结果表明,ΔPD-1蛋白能够与PD-1两种配体产生特异性结合。结论:成功进行PD-1Δex3基因的真核表达,证实PD-1Δex3基因编码sPD-1蛋白,该蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究PD-1Δex3在PD-1/PD-L信号通路中的生物学作用提供了有价值的物质基础。     

PD-1/PD-L1在系统性红斑狼疮患者疾病活动中作用的研究进展

PD-1/PD-L1作为重要的免疫调节通路,在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血中T细胞、B细胞及各种固有免疫细胞表面的表达情况及发挥效应的途径各不相同.该文概述了目前已知的PD-1/PD-L1通路在SLE发病及病情活动中所起的重要作用,并为该疾病的治疗提供策略...     

PD-1/PD-L1参与肿瘤免疫逃逸的研究进展

程序性死亡分子1及其配体(PD-1/PD-L1)是一对负性免疫共刺激分子,正常情况下,组织细胞表面的PD-L1与淋巴细胞表面的PD-1结合后,可抑制淋巴细胞功能,诱导活化的淋巴细胞凋亡,从而在自身免疫耐受及防止自身免疫性疾病中发挥重要作用。多种肿瘤细胞表面也表达PD-L1,肿瘤细胞表达的PD-L1,可与肿瘤浸润淋巴细胞表面的PD-1分子结合,抑制淋巴细胞的功能及细胞因子的释放,并诱导淋巴细胞凋亡,从而抵抗淋巴细胞的杀伤作用,最终导致肿瘤发生免疫逃逸。     

PD-1及其配体在实体肿瘤中的应用

程序性死亡生长因子-1( PD-1/CD279)是新近研究的热门分子,PD-1与其配体PD-L1/2(B7-H1/CD274)最终导致淋巴细胞“耗尽”以及诱导免疫耐受。 PD-L1在肿瘤细胞中可呈高表达,其异常表达与患者预后密切相关。最近越来越多的研究关注于PD-1、PD-L1/2在各类实体肿瘤中的表达,日前美国食品及药物管理局 FDA 批准 Keytruda ( pembroli-zumab)用于治疗对其它药物治疗无效的晚期或无法切除的黑色素瘤患者,其机制是Keytruda能阻断PD-1细胞通路,这些均提示针对PD-1、PD-L1/2分子治疗可能成为肿瘤治疗的突破点,且PD-1、PD-L1/2在实体肿瘤的表达可能成为预后评估新生物学的标志物。该文现就PD-1、PD-L1/2在肿瘤中的研究新进展作一综述。     

弥漫大B细胞淋巴瘤中PD-1、PD-L1的表达

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)及程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1,PD-L1)的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测184例DLBCL组织中PD-1、PD-L1的表达,分析两者表达与DLBCL临床病理特征的关系。结果 184例DLBCL中肿瘤细胞PD-1、PD-L1阳性率分别为1. 63%、43. 48%;微环境细胞PD-1、PD-L1阳性率分别为11. 41%、26. 09%。肿瘤细胞及微环境细胞PD-1的表达与患者性别、年龄、Hans分型、CD5、EBER、ALK以及CD30的表达差异均无显著性(P均 0. 05)。非生发中心B细胞样(nongerminal center B-cell-like,non-GCB)型DLBCL肿瘤细胞(47. 55%)及微环境细胞(31. 47%)中PD-L1的阳性率高于生发中心B细胞样(germinal center B-cell-like,GCB)型DLBCL肿瘤细胞(29. 27%)及微环境细胞(7. 32%)(P均0. 05); EBV+DLBCL肿瘤细胞(75. 00%)及微环境细胞(58. 33%)中PD-L1的阳性率高于EBV-DLBCL肿瘤细胞(40. 74%)及微环境细胞(24. 07%)(P均0. 05); CD30+DLBCL(66. 67%)微环境细胞中PD-L1的阳性率高于CD30-DLBCL微环境细胞(27. 00%)(P=0. 005)。结论 PD-L1在non-GCB型以及EBV+DLBCL肿瘤细胞及微环境细胞中有更高的阳性率;且PD-L1在CD30+DLBCL微环境细胞中有更高的阳性率。     

PD-1及其配体在原发性干燥综合征患者唇腺中的表达及临床意义

目的:观察干燥综合征(Sjogren's syndrome,SS)患者唇腺活检组织中程序性死亡分子-1(programmed death-1,PD-1)、程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)、程序性死亡配体-2(programmed death ligand-2,PD-L2)的表达,以及其与临床病理特征的相关性.方法:对所有患者和正常对照组的唇腺活检标本进行HE染色观察淋巴细胞浸润程度,免疫组织化学观察PD-1,PD-L1和PD-L2的表达.结果:SS患者唇腺活检组织中PD-1,PD-L1和PD-L2的表达较正常对照组明显增强.SS患者唇腺活检标本淋巴细胞的浸润程度与PD-1和PD-L2的表达强度无明显相关性,与PD-L1的表达强度呈正相关.SS患者疾病活动度评分与PD-1,PD-L1及PD-L2的表达强度均无明显相关性.SS患者疾病损害评分与PD-1的表达强度无明显相关性,与PD-L1和PD-L2的表达强度呈负相关.结论:PD-1,PD-L1及PD-L2在SS患者唇腺活检组织中的表达明显增强,PD-1/PD-L信号通路可能在SS的免疫病理损害中起重要作用.     

PDL1 和IFN-α与系统性红斑狼疮患者免疫功能异常的关系研究

目的:探讨PD-L1和IFN-α与系统性红斑狼疮(SLE)患者免疫功能异常的关系。方法:选取2018年1月～2019年12月于我院就诊的SLE患者52例(SLE组)和健康志愿者48例(对照组)。根据抗dsDNA抗体检测结果,将SLE组分为抗dsDNA抗体阳性组(18例)和阴性组(34例)。ELISA检测血清PD-L1和IFN-α,分别采用ELISA法和间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体,流式细胞术检测细胞表面PD-1和PD-L1,速率散射比浊法检测补体C3和C4,免疫比浊法检测CRP。结果:与对照组相比,SLE患者外周血CD4~+T细胞表面PD-1和PD-L1表达上调,阳性组高于阴性组(P0.01);CD8~+T和CD19~+B细胞表面PD-1表达上调,PD-L1表达下调,阳性组与阴性组比较差异均有统计学意义(P0.01);与阴性组和对照组相比,阳性组血清PD-L1、补体C3和C4显著降低,而IFN-α、CRP、SLEDAI及抗dsDNA抗体滴度显著增高(P0.01);SLE患者血清PD-L1与IFN-α、SLEDAI、抗dsDNA抗体滴度和CRP呈显著负相关(r=-0.468,-0.494,-0.493,-0.352,P0.05),与补体C3和C4呈显著正相关(r=0.498,0.326,P0.05)。结论:PD-L1和IFN-α异常表达于SLE患者T、B淋巴细胞表面和血清,共同参与细胞及体液免疫功能调节。     

RNAscope原位杂交技术在胃癌PD-1、PD-L1表达分析中的应用

目的 探讨RNAscope原位杂交技术在检测胃癌程序性死亡受体-1(programmed death 1, PD-1)及程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1, PD-L1)表达中的应用价值。方法 利用RNAscope原位杂交技术检测255例胃癌中PD-1、PD-L1 mRNA表达水平;应用免疫组化EnVision法检测255例胃癌中PD-1、PD-L1蛋白表达水平。结果 RNAscope检测结果显示：PD-1、PD-L1 mRNA阳性为细胞质或细胞核中有棕黄色颗粒状物。PD-1 mRNA阳性定位于肿瘤间质免疫细胞,PD-L1 mRNA阳性定位于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞。PD-1 mRNA阳性率为20.39%(52/255),PD-L1 mRNA阳性率为14.12%(36/255)。免疫组化检测显示：PD-1阳性定位于细胞质,PD-1主要表达于肿瘤间质免疫细胞;PD-L1可表达于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞,肿瘤细胞PD-L1阳性定位于细胞膜(部分或完全膜染色),免疫细胞PD-L1阳性定位于细胞质或细胞膜。PD-1蛋白阳性率为14.12%(36/255)...     

PD-1/PD-L1信号通路与肿瘤

程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)及配体(Programmed death ligand-1,PD-L1)作为一组免疫检验点共抑制分子通过激活下游信号通路抑制T细胞的活化、增殖及细胞因子的分泌,诱导效应T细胞凋亡。肿瘤发生时,PD-1/PD-L1表达异常增加,参与肿瘤的免疫逃逸,与肿瘤浸润、转移及病人预后密切相关。抑制PD-1/PD-L1信号通路可逆转T细胞抗肿瘤效应。     

PD-1/PD-L1信号通路与肿瘤免疫逃逸

PD-1及其配体PD-L1、PD-L2广泛表达于多种细胞表面,是一组与免疫负调控有关的共刺激分子。PD-1/PD-L1信号通路的激活有利于肿瘤逃脱机体免疫监视,但具体的肿瘤免疫逃逸机制尚未清楚。就抗PD-1和抗PD-L1抗体疗效而言,仍然需要对肿瘤免疫逃逸机制做更深入的研究。文章就现有研究成果作一综述如下。     

结直肠癌患者肿瘤组织浸润巨噬细胞PD-L1 表达及其临床意义

目的:通过检测结直肠癌患者肿瘤组织中巨噬细胞及其程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1)表达,探讨肠道巨噬细胞PD-L1在结直肠癌中的作用。方法:收集26例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织,应用机械联合胶原酶消化法制备单细胞悬液,流式细胞仪检测巨噬细胞比例及其PD-L1表达;采用Transwell共培养体系,巨噬细胞、人结肠癌细胞系SW480和人外周血单个核细胞共培养,流式细胞仪检测巨噬细胞PD-L1和淋巴细胞程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)表达,共培养体系加入抗PD-1抗体检测淋巴细胞增殖的变化。结果:与癌旁组织相比,癌组织中巨噬细胞比例上升、CD8~+/CD3~+T细胞比例显著下降,癌组织浸润巨噬细胞PD-L1、CD206和CD163阳性细胞比例显著上升,差异均有统计学意义(P0.05);与空白对照组相比,与SW480细胞共培养的巨噬细胞表面PD-L1、CD206和CD163表达水平显著上升,淋巴细胞表面PD-1表达水平显著上升,淋巴细胞增殖率显著下降,共培养体系中加入抗-PD-1抗体可显著升高淋巴细胞增殖率,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:结直肠癌组织中存在高比例的巨噬细胞,并向M2极化,高表达PD-L1,抑制淋巴细胞增殖。因此,通过调节巨噬细胞极化状态或抑制其PD-L1表达可能是结直肠癌肿瘤免疫治疗的新途径。     

程序性死亡蛋白配体-1/程序性死亡蛋白-1在老年胃癌患者外周血CD8+T淋巴细胞中的表达及临床意义

目的 通过分析程序性死亡蛋白配体-1/程序性死亡蛋白-1(programmed death ligand-1/programmed death-1,PD-L1/PD-1)在老年胃癌患者外周血CD8+T淋巴细胞中表达情况,探讨其临床意义.方法 选择同一时期90例老年胃癌患者(具有不同临床分期)及90例老年健康体检者,分别采取新鲜外周血后经流式细胞仪检测血中CD8+T淋巴细胞表面PD-L1/PD-1表达情况,结合老年胃癌患者的临床分期,分析PD-L1/PD-1在不同胃癌分期中的表达意义.结果 PD-L1/PD-1在老年胃癌患者外周血CD8+T淋巴细胞呈高表达,相较于老年健康者差异具有统计学意义(t=7.043,P<0.05);外周血CD8+T淋巴细胞的PD-L1/PD-1阳性表达均随着临床分期的增加而增加,呈明显的正相关性(r=0.883,P<0.05);外周血CD8+T淋巴细胞的PD-1阳性表达随着临床分期的增加而增加,两者之间呈正相关性(r=0.811,P<0.05);临床分期较晚的老年胃癌患者外周血CD8+T淋巴细胞PD-L1/PD-1表达比其他相对较早的临床分期老年胃癌患者显著上升(t=4.377,P<0.05).结论 PD-L1/PD-1信号通路异常在老年胃癌患者病变的发生发展过程中发挥了重要作用,外周血CD8+T淋巴细胞PD-L1/PD-1的表达对评判患者的预后具有指导作用.     

PD-1/PD-L1在非小细胞肺癌中的研究进展及展望

PD-1(programmed cell death-1,程序性死亡受体1)与其配体PD-L1(programmed cell death-ligand 1,程序性死亡配体1)属于CD28/B7家族,是一对共刺激分子,具有负性调控作用。PD-1通过与其配体PD-L1结合调节肿瘤的微环境,使肿瘤细胞免于机体免疫系统的监视和清除。目前已有较多研究显示PD-1/PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平与患者的临床病理因素及预后存在显著的相关性。在非小细胞肺癌的治疗领域,以PD-1/PD-L1为代表的免疫治疗成为继手术治疗、化疗、放疗、分子靶向治疗之后的新焦点。PD-1/PD-L1抑制剂在一系列非小细胞肺癌临床试验中也显示出了巨大的临床潜力。本文就PD-1/PD-L1的生物学结构及其在非小细胞肺癌中的作用机制、研究进展及展望作一综述。