黄芪注射液诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡及对细胞周期阻滞的研究

目的:研究黄芪注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法:采用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同浓度黄芪注射液在不同作用时间内对体外培养的人鼻咽癌CNE-2细胞的增殖状态; 应用细胞形态学实验方法和流式细胞术分析细胞生长周期及凋亡情况.结果:黄芪注射液对体外培养的人鼻咽癌CNE-2细胞株有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比;流式细胞仪分析显示,250 mg/L黄芪注射液作用CNE-2细胞48 h有明显的G0/G1期阻滞作用,AnnexinV,PI染色显示CNE-2细胞凋亡率从对照组的1.8%升高到62.4%.HE染色观察到250 mg/L黄芪注射液作用48 h后CNE-2细胞质空泡、核固缩、核染色质聚集等形态学改变.结论:黄芪注射液可抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖,其抗鼻咽癌的活性是通过诱导细胞凋亡而实现的.     

二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)诱导人鼻咽癌CNEl细胞凋亡的生物学效应.方法 通过MTT法检测DADS对CNE1细胞生长的影响;用光学显微镜、流式细胞仪研究DADS诱导细胞凋亡的作用.免疫组织化学法检测细胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达,Western blot法检测细胞内Caspase-3蛋白的表达.结果 DADS能抑制CNE1细胞的生长.DADS处理CNE1细胞后,细胞呈凋亡特征性改变.流式细胞分析显示DADS呈浓度依赖性诱导CNE1细胞凋亡.免疫组织化学结果表明DADS处理细胞后,Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降.随药物浓度的增加Caspase-3蛋白表达增强.结论 DADS具有诱导CNE1细胞凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2/Bax下降,促进Caspase-3活化有关.     

柞蚕抗菌肽对人鼻咽癌细胞CNE 2骨架的作用

目的：探讨柞蚕抗菌肽对癌细胞骨架的破坏作用。方法：用柞蚕抗菌肽对人鼻咽癌细胞CNE2处理12和18h，抗微管蛋白单克隆抗体检测细胞骨架结构的变化。结果：免疫组织化学染色见抗菌肽处理后细胞骨架分布不均匀，形态不规则，散乱，卷缩。结论：柞蚕抗菌肽具有较明显的破坏人鼻咽癌细胞株CNE2细胞骨架的作用。     

应用cDNA表达芯片研究复方黄连对CNE1鼻咽癌移植瘤基因表达的影响

目的：研究复方黄连对鼻咽癌稞鼠移植瘤基因表达的影响。方法：培养的鼻咽癌细胞系CNE1细胞接种Balb/C裸鼠，待移植瘤形成后灌喂复方黄连，然后从移植瘤组织提取RNA，经逆转录标记后的cDNA作为探针，与高通量cDNA表达芯片杂交并用激光共聚焦扫描仪分析基因表达。通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量技术进一步分析差异表达基因的表达。结果：复方黄连处理移植瘤裸鼠30d后，移植瘤明显减小，其抑瘤率为29．5％。同时，移植瘤组织基因表达发生显著变化。用该复方处理的CNE1鼻咽癌移植瘤组织有147条基因表达发生改变，包括102条下调表达的基因和45条上调表达的基因。RT-PCR半定量技术分析证实有3条基因为真正差异表达，它们分别是MAD3，H731和CHK1基因。其中，MAD3和H731基因表达上调。CHK1基因表达下调。结论：复方黄连可抑制CNE1鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长并可影响其基因的表达，它对CNE1鼻咽癌移植瘤的抑制作用与其调节移植瘤基因表达密切相关。     

Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率、移植瘤组织病理学观察.结果 成功建立裸小鼠移植瘤模型,观察30-45d后,发现转染了Rab25 siRNA细胞体内成瘤能力显著下降,与正常对照组及转染空载体组相比,抑瘤率为50.78%、50.64%.结论 阻断细胞内Rab25的表达,可诱导细胞凋亡,缓慢癌细胞生长速度.基于Rab25基因的RNAi技术靶向诱导癌细胞凋亡可望作为卵巢癌治疗的重要辅助手段.     

黄芪多糖对裸鼠结直肠癌移植瘤的抑制作用

目的:观察黄芪多糖对裸鼠结直肠癌移植瘤生长的影响.方法:30只BALB/C nu/nu裸鼠腋窝皮下注射人结直肠癌HCT-116细胞,建立裸鼠结直肠癌移植瘤模型,荷瘤成功后随机分为模型对照组(生理盐水,20 mL/kg)、黄芪多糖组(黄芪多糖,250 mg/kg)和氟尿嘧啶组(氟尿嘧啶,200 mg/kg),每组10只,...     

二烯丙基二硫对人鼻咽癌CNE2细胞G1期的阻滞作用

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞G1期的阻滞作用及可能机制.方法 体外培养人鼻咽癌CNE2,采用MTT比色实验、流式细胞术和免疫细胞化学的方法分析DADS对CNE2细胞增殖的押制作用、细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达.结果 MTT法显示,不同浓度(30μmol/L、60μmol/L、120μmol/L、240μmol/L)DADS处理CNE2细胞48h后,CNE2细胞的生长有明显的抑制作用,其增殖抑制率分别为6.59%、14.06%、26.50%和62.37%,呈明显的剂量依赖关系(P<0.05).流式细胞仪分析结果显示,DADS明显地将CNE2细胞阻滞在G1期.免疫细胞化学分析表明,在G1期阻滞同时有p21WAF1砌蛋白表达上调,CycliN-E、C-myc蛋白表达下降.结论 对人鼻咽癌CNE2细胞的抑制增殖作用与G1期阻滞有关,其机制可能与上调p21WAF1蛋白表达,下调Cyclin-E、C-myc蛋白表达有关.     

紫杉醇联合放疗对鼻咽癌裸鼠移植瘤的疗效研究

目的:研究紫杉醇联合放疗治疗鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤的疗效,建立紫杉醇联合放疗治疗鼻咽癌的体内研究模型。方法:建立鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤动物模型,分别进行生理盐水(空白对照组)、紫杉醇(紫杉醇组)、放疗(放疗组)、紫杉醇加放疗(紫杉醇联合放疗组)处理,观察实验动物全身状况、移植瘤生长情况测定及计算抑瘤率。结果:与对照组相比,紫杉醇组、放疗组、紫杉醇联合放疗组的移植瘤重量和体积明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);其中紫杉醇联合放疗组疗效最显著,其肿瘤重量和体积与紫杉醇组、放疗组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。移植瘤鼠在经上述方法处理后在活动、进食和体重变化等情况方面差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:紫杉醇联合放疗对鼻咽癌移植瘤具有明显的抑制作用,无明显不良反应。     

靶向Skp2基因siRNA对人大肠癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:应用RNA干扰(RNAi)技术沉默Skp2(Skp2)基因,研究其对人大肠癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:建立裸鼠大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:PBS组,阴性对照序列组(Skp2-NC组),RNA干扰组(Skp2-siRNA组)。分别于瘤体内局部注射PBS、腺病毒Ad-Skp2-NC、腺病毒Ad-Skp2-siRNA,每3d注射1次,共3次。4周后分离瘤体,观察肿瘤抑瘤率并绘制生长曲线。采用蛋白印迹技术检测瘤体中Skp2、p27蛋白表达;免疫组化法检测肿瘤内增殖细胞核抗原(PCNA)表达量变化;原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞凋亡。结果:Skp2-siRNA组抑瘤率为32.40%,与PBS组和Skp2-NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);Skp2-siRNA组Skp2蛋白表达下调,p27蛋白表达增多;PCNA表达量显著低于PBS组和Skp2-NC组;Skp2-siRNA组凋亡细胞相对光密度值为(255.73±1.77)%,与PBS组(100.00±0.47)%和Skp2-NC组(93.07±1.17)%相比,明显增高。结论:Skp2-siRNA能有效抑制裸鼠体内人大肠癌SW480细胞株增殖并促进其凋亡,具有显著的抑瘤效果。     

生长抑素联合应用黄芪对裸鼠结肠移植瘤的影响

目的探讨生长抑素联合应用黄芪对裸鼠结肠原位移植瘤生长和转移的作用及其作用机制。方法建立裸鼠结肠原位移植瘤模型80个,随机分为生长抑素联合黄芪组、生长抑素组、黄芪组、生理盐水组,每组20只,分别腹腔注射对应药物。处死实验裸鼠后测量瘤体体积并称重,计算各组的抑瘤率和相对肿瘤增值率,比较各组的肝、肺、腹膜转移率和腹水发生率。结果生长抑素联合黄芪组、生长抑素组、黄芪组、生理盐水组的移植瘤瘤体积分别为（1 061±165）mm3、（1 361±251）mm3、（1 392±326）mm3、（1 698±435）mm3,肝、肺或腹膜转移率分别为10%、35%、40%、90%,腹水发生率分别为10%、40%、34%、90%。生长抑素联合黄芪组、生长抑素组、黄芪组的抑瘤率分别为（89.34±3.45）%、（60.31±6.81）%、（61.52＋5.21）%;相对肿瘤增殖率分别为（25.62±6.94）%、（53.61±12.36）%、（63.95±15.92）%。生长抑素联合黄芪组与生长抑素组、黄芪组的差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论生长抑素联合应用黄芪比单独应用生长抑素或黄芪更能显著抑制裸鼠结肠原位移植瘤的生长和转移。     

粉防己碱对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡作用的研究

目的：探讨粉防己碱（Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡的影响。方法：将人鼻咽癌细胞株CNE分为不同浓度Tet处理组,并设立对照组。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE体外生长的抑制作用;采用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳技术、流式细胞术Annenxin V/PI EGFP观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡的影响;采用逆转录-多聚酶链反应技术（RT-PCR）观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡相关基因mRNA表达的影响。结果：Tet呈浓度依赖性抑制癌细胞体外生长（P〈0.05）。Tet处理细胞72 h后,电镜下可见细胞缩小,核裂解,凋亡小体形成;随着Tet浓度的提高,各Tet处理组DNA凝胶电泳梯形条带和细胞凋亡率渐趋明显。与对照组相比较,Bcl-2 mRNA的表达渐减弱,Bax基因mRNA表达渐增强（P〈0.05）。结论：Tet可抑制癌细胞生长,促进癌细胞凋亡,其抗癌作用机制可能与下调Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达有密切联系。     

全反式维甲酸对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用.方法 将人胰腺癌细胞株SW1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/L ATRA每次0.1 mL隔日瘤内注射.观察瘤体质量和体积变化,TUNEL法观察ATRA干预后移植瘤组织内的细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3的表达.结果 成功建立两种人胰腺癌细胞株的移植瘤模型;口服和瘤内注射ATRA后,抑瘤率在Bx-PC3移植瘤分别为64.24%和55.78%,在SW1990移植瘤分别为44.03%和49.13%;TUNEL法和电镜观察证实,ATRA诱导后移植瘤内出现细胞凋亡;免疫组化显示,caspase-3表达增加.结论 ATRA口服或瘤内注射均能抑制胰腺癌移植瘤的生长,活化胰腺癌细胞内caspase-3,促进细胞凋亡.     

全反式维甲酸对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤内注射。观察瘤体质量和体积变化,TUNEL法观察ATRA干预后移植瘤组织内的细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3的表达。结果成功建立两种人胰腺癌细胞株的移植瘤模型;口服和瘤内注射ATRA后,抑瘤率在Bx-PC3移植瘤分别为64.24%和55.78%,在SW 1990移植瘤分别为44.03%和49.13%;TUNEL法和电镜观察证实,ATRA诱导后移植瘤内出现细胞凋亡;免疫组化显示,caspase-3表达增加。结论ATRA口服或瘤内注射均能抑制胰腺癌移植瘤的生长,活化胰腺癌细胞内caspase-3,促进细胞凋亡。     

芒果甙诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其对细胞内钙含量的影响

目的研究芒果甙在体外对人鼻咽癌细胞系CNE2细胞凋亡和细胞内钙离子（IECa^2＋）含量的影响。方法采用流式细胞术检测不同浓度芒果甙作用24、48、72h后诱导CNE2细胞凋亡和IECa^2＋含量的影响。结果（1）芒果甙作用24、48、72h后,不同浓度的芒果甙均可诱导CNE2细胞凋亡,随着芒果甙浓度的升高和作用时间的延长而增高;（2）不同浓度芒果甙作用24、48、72h后,CNE2细胞内IECa^2＋含量显著上升,且随着芒果甙浓度的升高和作用时间的延长而增高。结论芒果甙能显著诱导CNE2细胞凋亡;CNE2细胞内IECa^2＋含量的升高在芒果甙诱导CNE2细胞凋亡中起到重要作用。     

人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1抗体Fab联合丝裂霉素C对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察联合应用人源抗EB病毒鼻咽癌潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)抗体Fab片段与丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)对LMP1阳性鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:建立LMP1阳性鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,20只成瘤裸鼠随机分成4组,即Fab组、MMC组、Fab+MMC组和对照组。腹腔注射药物,每3天1次,共5次。观察肿瘤生长、测量肿瘤体积,计算抑瘤率。免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达、流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:Fab组、MMC组和Fab+MMC组抑瘤率分别为18.90%、28.95%、49.12%。Fab组、Fab+MMC组VEGF表达量明显低于对照组(P<0.05)。MMC组VEGF表达量和对照组相比,无统计学意义(P>0.05)。MMC组、Fab+MMC组肿瘤细胞凋亡率分别为(11.84±1.50)%、(17.55±3.21)%,与对照组凋亡率(3.90±0.55)%相比,有显著差异(P<0.01);Fab组凋亡率为(7.34±2.68)%,与...     

吗啡对顺铂诱导的鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠 移植瘤生长抑制作用的影响

 【目的】 以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制&#65377;【方法】 建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组&#65380;单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只&#65377;吗啡5 mg/kg每天给药1次,顺铂3 mg/kg每3 d给药2次,均为腹腔注射&#65377;用药14 d后处死动物,完整剥离肿瘤,记净瘤质量&#65377;TUNEL染色计算细胞凋亡数,免疫组化染色检测肿瘤组织Bax,Bcl-2,cleaved-caspase-3以及CD34的表达情况&#65377;【结果】 单纯顺铂用药组的瘤质量明显小于其它3组(P < 0.05),吗啡联合顺铂用药组的瘤质量明显小于对照组(P < 0.05);TUNEL染色及cleaved-caspase-3染色显示单纯顺铂用药组的凋亡细胞数明显多于其他3组(P < 0.05)&#65377;单纯顺铂用药组与其他3组相比Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2表达量减少,单纯吗啡组的Bcl-2表达最强&#65377;CD34微血管染色显示单纯顺铂用药组的微血管密度显著少于其它3组(P < 0.05),单纯吗啡用药组的微血管密度显著多于对照组(P < 0.05)&#65377;【结论】 吗啡通过拮抗顺铂诱导细胞凋亡及促进CNE-2细胞裸鼠移植瘤组织的血管生成,抵抗了顺铂抑制肿瘤生长的作用&#65377;     

大蒜素对ketr-3裸鼠肾癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨大蒜素对ketr-3裸鼠肾癌移植瘤的作用。方法:建立ketr-3裸鼠肾癌皮下移植瘤模型,分成三组,分空白对照组、NaCl溶液对照组、大蒜素对照组,观察瘤体变化。结果:在移植瘤生长过程中,空白对照组与NaCl溶液对照组肿瘤生长迅速,大蒜素试验生长速度相对缓慢。结论:大蒜素组瘤体生长较对照组受到抑制。