几种猪囊尾螺抗原用于斑点—ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液１００００ｇ上清、囊液１０００００ｇ上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗在等５种囊尾蚴抗原，对１２４份各类血清进行斑点－ＥＬＩＳＡ试验，结果除２种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。２种囊注抗原中以１０００００ｇ离心者为优，检测７０例囊虫病患者，阳性率为８２．８％；３０例正常人，假阳性率为６．７％；５例华支睾吸虫及５例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但９例包虫病患者血清均出现交     

几种猪囊尾蚴抗原用于EITB法诊断囊尾蚴病的观察

本研究对囊液10000g和100000g离心后的上清、头节抗原、全囊抗原及头节尿素溶解性抗原等5种抗原进行SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。考马斯亮蓝染色依次出现10、10、13、14和5条显色带，银染结果依次出现20、20、21、21和13条显色带。分子量范围为＜6.6kDa－＞116kDa。选择囊液100000g（以下简称囊液）、全囊和头节尿素等3种抗原对105份各类血清进行酶联免疫电转移印斑（EITB）检测。结果囊尾蚴病患者血清与3种抗原反应可出现1－13条反应带，分子量范围6.6kDa－＞116kDa。如以≤21.5kDa条带作为判断标准，则囊液抗原、全囊抗原和头节尿素抗原的阳性率依次为54％、48％及58％，假阳性率依次为6％、10％及0％。头节尿素抗原对血吸虫、华支睾吸虫和肺吸虫病患者血清未出现交叉反应，10例包虫病患者血清中有2例出现交叉反应。     

猪囊虫体表抗原用于 ELISA 诊断囊虫病的研究

应用猪囊尾蚴体表抗原对66例临床确诊的囊虫病人用 ELISA 进行检测,同时以囊液粗抗原作比较观察。阳性率分别为95.5%和68.2%,两者差异非常显著(P<0.005)。两种抗原对同批血清的反应强度也呈现明显差异(P<0.05)。用囊虫体表抗原和囊液粗抗原同时检测50名健康人血清,假阳性率分别为2%与12%;两种抗原与10例包虫病人血清分别有8例和4例出现交叉反应。     

猪囊尾蚴抗原的研究

应用高效液相色谱仪对猪囊尾蚴囊液抗原(CFAg)、全囊虫抗原(CWAg)、头节抗原(CSAg)进行了分析,分别分离出12、12、14个峰,主峰的数目分别是4、3、3个。CFAg与CWAg有7个相同的峰,第一峰的蛋白质分子量均为669kD。CFAg与CSAg有5个相同的峰,除其中一个峰的蛋白质分子量在29～66kD之间外,其余均在29kD以下。CWAg与CSAg有6个相同的峰。     

猪囊尾蚴病免疫和诊断抗原的分子生物学研究进展

猪囊尾蚴病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病。猪囊尾蚴特异性和保护性抗原的研究是猪带绦虫病、猪囊尾蚴病免疫和诊断的基础。天然抗原来源有限,限制了其应用,而重组抗原的应用可解决质量控制和抗原来源的问题。该文就近年来猪囊尾蚴病免疫和诊断抗原的分子生物学研究进展进行了综述。     

囊尾蚴病诊断抗原研究进展

囊尾蚴病（Cysticercosis）是由猪带绦虫幼虫（Taenia soliummetacestode）寄生于人、猪、野猪等动物体内所引起的一种人畜共患寄生虫病,广泛分布于亚洲、非洲和拉丁美洲,全球囊尾蚴病患者约5000万人,我国是囊尾蚴病高发区之一。囊尾蚴病的有效诊断是控制该病的关键,免疫学诊断方法,尤其是酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA）和免疫印迹试验（Western-blot或EITB）,以其特异、经济、快速等优点而成为囊尾蚴病免疫学诊断技术研究的热点。     

循环抗体和循环抗原检测诊断囊虫病的价值

本文对81例囊虫病人血清同时用 ELISA 和 Dot—ELISA 检测循环抗体和单抗抑制性 ELISA检测循环抗原,并评价了三法诊断该病的价值。前两法的阳性率均为96.3%,但特异性都较差,特别是与包虫病具有明显的交叉反应。81例中血清循环抗原的阳性率为69.1%。血或脑脊液的循环抗原有一项阳性的阳性率为91.1%。此法特异性高,75例正常人、30例包虫病、79例其他寄生虫病患者、5例非寄生虫病患者血清和10例非寄生虫病患者的脑脊液中循环抗原的测定均为阴性。对19例经肠虫清治疗半年到1年的患者(均为随机到本院复诊的患者)的血清检测,前二法的阳性率仍高达84.2%,而循环抗原的值除1例为0.64μg/ml 外,其余病例均为阴性。     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。     

猪囊尾蚴特异循环免疫复合物致病作用的研究

本文对脑型和混合型猪囊尾蚴病患者脑脊液（ＣＳＦ）中特异循环免疫复合物（ＣＩＣ）进行了检测，其结果与患者ＣＴ表现及吡喹酮治疗第一个疗程过程中患者出现的高颅压情况存在一定联系。人工免疫复合物（ＩＣ）对ＢＡＬＢ／ｃ鼠作用后进行病理检查，发现脑实质和肾脏小血管均出现充血现象．部分小血管内皮细胞遭到破坏。因此认为特异循环免疫复合物可能是脑型、混合型猪囊尾蚴病患者在第一疗程中出现高颅压反应的主要因素之一。     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

Dot-IGSS检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测96份确诊为脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的循环抗原(CAg),阳性率分别为94.79%和92.71%.检测51例非囊虫病者和62例其他脑部疾病患者的CSF,两种方法均为阴性.诊断指数分别为194.79%和192.71%,检测CAg的最小量Dot-IGSS为244ng/ml,Dot-ELISA为488ng/ml.试验表明两法诊断脑囊虫病均具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行,有希望用于脑囊虫病的临床诊断.     

四种抗原用于Dot-IGSS和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病的比较

以日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA),用斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病.结果显示:Dot-IGSS法,4种抗原分别检测50例日本血吸虫病人血清,抗体检出率均达100.0%,50例正常人阴性符合率98.0%—100.0%,与肝吸虫病人的交叉反应率0%—2.0%(P>0.05),Dot-ELISA法、AWA、AW和SEA阳性符合率均为100.0%,JWU为90.0%,低于其它抗原(P<0.05),与正常人阴性符合率及肝吸虫病人交叉反应率分别为94.0%—100.0%及0%—6.0%.各抗原检出抗体滴度,Dot-IGSS均高于Dot-ELISA(P<0.05—0.01).抗原浓度在500.0μg/ml,两法抗体检出结果无差异(100.0%),至6.25μg/ml,酶标法检出率为0,而金标法仍为70.0%—80.0%(P<0.01).     

斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。     

IFAT和McAb-LAT诊断囊虫病的研究

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体胶乳凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ＜０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ＜０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为４４．１１％。ＩＦＡＴ和ＭｃＡｂ－ＬＡＴ在囊虫病临床诊断中具有较高价值，循环抗原的检测在脑型囊虫病活动期诊断和疗效考核中具有重要意义     

斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot—ELISA诊断肺吸虫病研究

目的 探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法 采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测28例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、20份健康 人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的抗体IgG。结果 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原与28例斯氏狸殖吸虫病人血清均呈阳性反应,与其它2种吸虫病和健康人血清未发生反应。结论 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA为诊断肺吸虫病敏感、特异的诊断方法。     

金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究

为探讨检测患者血清中特异IgG4对脑囊虫病诊断和疗效考核的价值,应用金标抗人IgG4单抗浸测试验检测患者血清特异IgG4。结果检测疗前组脑囊虫病患者91例,特异IgG4阳性者84例,阳性率92.3％;同时检测其它寄生虫病27例、中枢神经系统疾病16例和健康对照25例,除1例肝包虫病病人血清出现弱交叉反应外,其它均为阴性;检测经抗囊药物不同疗程治疗的脑囊虫病患者血清,发现随着疗程的增加,临床症状的好转,患者血清特异IgG4明显降低或消失。表明检测患者血清特异IgG4对脑囊虫病的诊断和疗效考核具有较好的应用价值。     

Dot—ELISA在脑囊虫病诊断中的应用

本文报告用Dot-ELISA法检测脑囊虫病患者的血清和脑脊液的抗体。108例确诊为脑囊虫病患者的血清阳性率为81.6～96.1％,14例确诊为脑囊虫病患者脑脊液的阳性率为85.7～100％。54例正常人血清在1:40稀释度以上,均未出现假阳性;与并殖吸虫病患者及华支睾吸虫病患者血清均未出现交叉反应;与包虫病及脑血管疾病患者血清有一定的交叉反应。     

检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病的研究

目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中囊尾蚴循环抗原（ Ｃ Ａｇ）诊断脑囊虫病。方法：用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ提纯的蛋白质分子量为 ６４ ｋ Ｄａ、５３ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 的囊尾蚴抗原分别免疫家兔,制备相应的抗血清,以双夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ。结果：抗５３ ｋ Ｄａ 抗原抗血清对 ３２ 例脑囊虫病活动型患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ 的检出率分别为９３．８％ 和９１．７％ ,１６ 例脑囊虫病非活动型患者仅１ 例 Ｃ Ｓ Ｆ Ｃ Ａｇ 阳性。 Ｃ Ａｇ 检出率明显高于用抗６４ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测的结果（ Ｐ＜ ０．０５）。结论：抗５３ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测活动型脑囊虫病患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中的 Ｃ Ａｇ 敏感性较高,特异性较强,可用于活动型脑囊虫病的诊断和疗效考核。