阿霉素预处理替代缺血预处理提供鼠肝缺血耐受力的实验研究

目的 探讨缺血预处理（IPC）延迟保护作用的发生机制以及应用阿霉素预处理（DPC）是否可以模拟IPC的延迟保护作用。方法 建立大鼠部分肝脏热缺血再灌注模型。IPC组采用肝脏缺血10min，再灌注10in，DPC组经静脉注射阿霉素（1mg/kg体重），对照组等量生理盐水注射。肝组织HSP70和HO－1蛋白和血清TNF－α、IL－10浓度分别采用Western blot法和ELISA法测定。结果 IPC后HO－1和HSP70含量分别于12h和24h达到高峰；IPC和DPC后24h诱导HSP70、HO－1的量无显著差异（P＞0.05）。对照组缺血再灌注后3h血清中TNF－α、AST、ALT、LDH及W／D（湿重／干重）的水平明显升高，而IL－10的含量降低，和假手术组相比差异显著（P＜0.01）；IPC或DPC后降低了TNF－α的释放和AST、ALT、LDH及W／D的水平，提高了IL－10的含量，和对照组相比差异显著（P＜0.01）。结论 IPC的延迟保护作用与HSP70和HO－1的诱导生成有关，DPC可以模拟IPC的延尺性保护作用，诱导HSP70和HO－1的产生。     

不同时间的缺血预处理对肝硬化大鼠缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨缺血预处理(IPC)对肝硬化大鼠缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并寻找对肝硬化I/R保护作用的最佳有效时间窗和理想方案.方法 通过构建正常大鼠及肝硬化大鼠模型,以正常肝脏I/R(A组)和正常肝脏10-10 min-IPC方案(B组)为对照组,肝硬化组则分别施行单纯I/R(C组)、5-10 min(D组)、8-10min(E组)、10-10 min(F组)及15-10 min(G组)的IPC方案,每组18只,分别在术后1 h、4 h及24 h三个时间点采静脉血,检测血清ALT、AST、LDH及肝组织中MDA、MPO、NO、SOD水平,评价肝功能及肝脏组织炎性浸润及抗损伤程度.结果 肝脏缺血30 min后肝脏功能受损明显,表现为各组的ALT、AST、LDH水平升高,尤以再灌注4 h时显著(P<0.05),但经过缺血预处理后,各IPC组中的NO、MDA、MPO及SOD水平亦显著高于其对应的I/R组,以E组的差别有显著意义(P<0.05).结论 10-10 min的IPC方案对于正常肝脏I/R确有保护作用,而8-10 min的IPC方案能最有效地启动对肝硬化大鼠肝脏I/R的保护作用.     

缺血预处理对肢体缺血再灌注损伤的影响

目的　观察缺血预处理 (IPC)对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法　选择 2 0例需充气止血带止血进行手术的患者 ,随机分为对照组 (n =10 )和IPC组 (n =10 )。IPC组患者术前应用 3次 5min循环缺血 ,间隔 5min再灌注预处理后在止血带下进行手术 ;对照组直接在止血带下进行手术。在肢体缺血前和再灌注 30min、90min、180min分别取静脉血检测血清肌酸磷酸激酶 (CPK)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶 (LDH)、丙二醛 (MDA)和过氧化物歧化酶 (SOD)水平。结果　随着肢体缺血再灌注时间的延长 ,血中CPK、AST、LDH、MDA含量逐渐升高 ,而SOD活性逐渐降低。IPC组在缺血前及再灌注同时间 ,血中CPK、AST、LDH、MDA含量低于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;而SOD活性高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　IPC能有效地减轻肢体缺血再灌注损伤程度 ,减轻脂质过氧化反应 ,提高肢体缺血耐受性     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护机制

目的验证缺血预处理(IPC)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,探讨一氧化氮(NO)与蛋白激酶C(PKC)在IPC过程中的作用.方法在原位灌流的大鼠肝脏缺血再灌注模型上,观察IPC的保护作用.同时经肠系膜上静脉注射NO前体L-精氨酸和蛋白激酶C特异性激动剂1,2-二辛酸甘油(DOG)以及两者的特异性阻滞剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NAME)和多粘菌素B,来检测NO和PKC在IPC中的关系.结果预处理可阻止血清谷丙转氨酶(ALT)[(200.86±40.30)U/Lvs.(257.65±20.18)U/L],谷草转氨酶(AST)[(211.06±13.59)U/Lvs.(309.17±24.79)U/L],乳酸脱氢酶(LDH)[(824.73±127.11)U/Lvs.(1118.60±82.21)U/L]及脂质过氧化物(LPO)[(0.414±0.069)mmol/mgvs.(0.531±0.054)mmol/mg]水平升高(P＜0.05),而使组织超氧化歧化酶(SOD)保持在较高水平[(10.33±0.88)U/mgvs.(6.01±0.91)U/mg],(P＜0.05).NO与PKC均可模拟预处理的保护效应.结论缺血预处理对大鼠肝脏I/R有明确的保护作用,NO与PKC发挥IPC保护作用的途径不同.     

不同时限缺血预处理对硬化肝脏保护作用的实验研究

目的: 探讨缺血预处理对硬化肝脏缺血再灌注的作用,并寻找一种有效缺血预处理的时间窗和理想方案. 方法: 将64只雄性、肝硬化SD大鼠随机分为八组,每组八只:假手术组(SO组);缺血再灌注组(I/R组);缺血预处理1、2、3、4、5和6组(IPC1、IPC2、IPC3、IPC4、IPC5和IPC6).以肝组织ATP、ADP、AMP及EC(用高效液相色谱法测定),血清ALT、AST、LDH(用全自动生化仪测定)和肝脏胆汁分泌量来评价肝功能. 结果: 再灌注末,IPC3组、IPC4组、IPC5组ATP含量均明显高于I/R组(P分别为0.01、0.07和0.000);同样,测定EC时发现,IPC3组、IPC4组和IPC5组均明显高于I/R组(P=0.000).与I/R组比较,IPC4组和IPC5组的血清ALT差异有显著性(P分别为0.013和0.000);其血清LDH差异亦有显著性(P=0.023,P=0.000),而血清AST却只有IPC5组显著低于I/R组(P=0.001).IPC3组、IPC4组和IPC5组肝脏的胆汁分泌量明显高于I/R组(P=0.028,P=0.023,P=0.008). 结论: 5~10min予一次或两次缺血预处理,能启动IPC对肝硬化大鼠肝脏I/R损伤的保护作用;10 min的缺血预处理,对肝硬化大鼠肝脏I/R损伤的保护作用最强.     

缺血预处理对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的保护作用及其机制的研究

目的　探讨缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IPC)对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的保护作用及其机制。方法　 5 0只雄性SD大鼠随机均分为假手术 (Sham)、单纯热缺血 (warmis chemia ,WI)、IPC、IPC L arginine(NO供体 )和WI NAME(NO合成酶抑制剂 ) 5组。术前、术后 1、2、3d检测血清AST和ALT ,术前、IPC后、热缺血后 0 5、1、2、3h检测肝脏组织NO浓度。AST和ALT用自动生化分析仪检测 ,NO用硝酸还原法检测。结果　WI、IPC、IPC L arginine及WI NAME组术后AST和ALT均高于Sham组 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,IPC和WI NAME组术后AST和ALT低于WI和IPC L arginine组 (P <0 0 5 )。WI、IPC、IPC L arginine及WI NAME组术后 0 5h肝脏组织NO浓度开始升高(P <0 0 5或P <0 0 1) ,IPC和WI NAME组术后肝脏组织NO浓度低于WI和IPC L arginine组 (P <0 0 5 )。结论　IPC对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的缺血再灌注损伤有保护作用。IPC通过抑制大鼠热缺血再灌注肝脏产生NO ,减少NO所诱发的肝脏组织细胞的凋亡或坏死 ,保护肝脏功能。     

己酮可可碱对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的　观察大鼠肝脏缺血再灌注后肿瘤坏死因子 -α (TNF α)早期释放及核因子κB(NFκB )活化对炎性介质表达和中性粒细胞浸润的影响。探讨其对肝缺血再灌注损伤的意义。方法　建立大鼠肝脏部分热缺血模型 ,己酮可可硷 (PTX )组于缺血前 1h腹腔注射PTX 5 0mg/kg ,对照组同法等量生理盐水注射 ,另设假手术组。结果　对照组相比 ,PTX组TNF α浓度、NFκBp65含量 (IOD )、巨噬细胞炎性蛋白 -2 (MIP 2 )和细胞间黏附因子 -1(ICAM 1)mRNA表达量 (IOD )、髓过氧化物酶(MPO )活性 (U/g)均明显降低 (均P <0 .0 5 )。再灌注 6hPTX组天门冬氨酸转氨酶 (AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH )含量 (U/L)和湿重 /干重 (W /D )水平也显著降低 (均P <0 .0 5 )。结论　PTX通过减少TNF α的早期释放 ,抑制NFκB活化 ,从而下调趋化因子、黏附分子表达和减少中性粒细胞浸润 ,从而得以减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

缺血预处理对大鼠小体积供肝的保护作用及机制

目的探讨缺血预处理（IPC）对大鼠小体积供肝的保护作用及其机制。方法120只SD大鼠随机分为3组（每组20对）：无热缺血组（NWI）、缺血再灌注组（WI）和缺血预处理组（IPC）。用双袖套法建立大鼠小体积肝移植模型。各组10只受体大鼠于术前1d、术后1、2、3、5d取血，用自动生化分析仪检测AST和ALT。NWI组于供肝灌注前及植入后0．5、1、2、3h，WI组于热缺血前及植入后0．5、1、2、3h，IPC组于IPC前、IPC后及植入后0．5、1、2、3h取肝组织，用硝酸还原法检测其NO浓度。结果IPC可降低大鼠小体积肝移植术后血清AST和ALT浓度，提高再灌注早期肝脏组织NO的浓度，降低再灌注晚期肝脏组织NO的浓度（P〈0．05）。结论NO在大鼠肝脏的缺血再灌注损伤中可能具有双重作用。IPC对大鼠小体积供肝的缺血再灌注损伤有保护作用。其机制可能是通过促进供肝再灌注后早期NO合成，改善肝脏微循环，同时抑制供肝再灌注后晚期NO合成，减轻过量NO的损伤作用，从而保护移植肝脏功能。     

缺血或药物预处理对大鼠供肝缺血再灌注损伤的抑制作用

目的　探讨缺血预处理 (IPC)或阿霉素预处理 (DPC ,模拟IPC)对大鼠供肝延迟性保护作用的发生机制。方法　将供鼠分为 3组。IPC组 :供鼠采用肝脏预先缺血 10min后再开放 ;DPC组 :供鼠经静脉注射阿霉素 (1mg/kg体重 ) ;对照组 :供鼠用等量生理盐水注射。观察各组预处理后血红素氧化酶 1(HO 1)和热休克蛋白 70 (HSP70 )含量 ;建立上述各组大鼠原位肝移植模型 ,并设假手术对照组 ,观察肝移植后各组对供肝缺血再灌注损伤的影响。结果　IPC组HO 1、HSP70含量分别于预处理 12h和 2 4h达到高峰 ;IPC和DPC组预处理 2 4h ,诱导的HSP70、HO 1含量差异无显著性 (P >0 .0 5 )。对照组肝移植后 6h ,肝组织中ICAM 1mRNA表达和内皮细胞ICAM 1分子表达明显增强 ,髓过氧化物酶 (MPO)活性增高 ,血清中天冬氨酸转氨酶 (AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH)及肝组织湿重 /干重 (W/D)水平明显升高 ,和假手术组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。IPC或DPC组肝移植后减弱了ICAM 1mRNA和蛋白表达及MPO活性 ,AST、ALT、LDH及W/D的水平亦明显降低 ,与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　IPC的延迟保护作用是通过降低中性粒细胞的粘附浸润来实现的 ,这与IPC诱导生成HSP70和HO 1有关。DPC可以模拟IPC的延迟性保护     

缺血预处理对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IP)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。 方法　采用SD大鼠原位肝移植动物模型 ,供肝冷保存时间 10 0min ,无肝期 2 5min。 64只SD大鼠随机均分成两组 :对照组 ,获取供肝前仅以肝素生理盐水经门静脉灌注 ;IP组 ,获取供肝前阻断肝门血供 10min ,再灌注 10min ,然后再以肝素生理盐水经门静脉灌注。每组受体的一半 (n =8)用于观察存活率 ,另一半 (n =8)用于移植肝脏再灌注 2h后取血及肝脏检测。结果　IP组的 1w存活率、胆汁分泌量、抗氧化酶活力、血清NO水平均明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,血清ALT、AST、LDH、TNF及肝组织中的过氧化产物含量均明显低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,组织的病理改变也轻于对照组。结论　IP能够提高血清NO水平 ,降低血清TNF含量 ,对大鼠移植肝脏的缺血再灌注损伤具有保护作用     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤中MPO、TNF-α、ET、NO的影响

目的：探讨缺血预处理（IPC）对肝脏缺血再灌注（I/R）损伤中的中性粒细胞和某些细胞因子的影响。方法：采用大鼠部分肝脏原位缺血再灌注损伤模型,30只Wistar大鼠随机分成：①正常对照组;②缺血再灌注对照组;③预处理组。②、③组均在60min再灌注完成后取血及肝组织标本,检测血清AST、ALT、LDH、NO、ET-1、TNF-α、及肝组织中髓过氧化酶（MPO）活性和肝细胞病理改变。结果：预处理组与再灌注对照组比较,肝功明显改善,NO含量升高,ET-1、TNF-α浓度和MPO活性明显降低,两组比较差异具有显著性。结论：缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,可能与提高内源性NO水平、减轻中性粒细胞在肝脏中的渗出和聚集、抑制ET-1、TNF-α的合成有关。     

腺苷A1受体系统在兔脑预缺血延迟相保护效应中的作用

目的 探讨腺苷A1受体系统在兔脑预缺血延迟相保护效应中的作用。方法 股动脉放血至平均动脉压35－40mmHg时,阻断双侧颈总动脉诱导脑缺血。脑缺血3min存活3d（预缺血处理）后、脑缺血10min（预缺血延迟相保护模型）;用腺苷A1受体激动剂氮6－环戊基腺苷（CPA）代替预缺血处理,用其拮抗剂8－环戊基－1,3－二丙基黄嘌呤（DPCPX）阻断该受体;免疫组化分析热休克蛋白70（SHP70）表达。观察缺血3d后海马CA1区正常神经密度和HSP70的表达。结果 （1）CPA能减轻脑缺血损害,但其保护作用不如预缺明显（约占后者的70％）,DPCPX阻断该受体后,预缺血延迟相保护作用消失;（3）3min脑预缺血神经元无损害,但伴HSP70明显表达;DPCPX阻断腺苷A1受体后,3min脑预缺血发生明显损害,且HSP70表达明显削弱。结论 （1）预缺血延迟相保护作用与腺苷A1受体系统激活有关;（2）DPCPX阻断预缺血延迟相保护作用的机制与削弱HSP70表达有关。     

Pharmacologic stimulation of adenosine A2 receptor supplants ischemic preconditioning in providing ischemic tolerance in rat livers

BACKGROUND: Ischemic preconditioning (IPC) is a promising strategy for conferring ischemic tolerance. We confirmed the acquisition of ischemic tolerance in the liver immediately after IPC and the role of adenosine kinetics in this process. METHODS: Male Lewis rats were used. IPC was administered with a 10-minute ischemia followed by a 10-minute reperfusion. Ischemic tolerance was tested with a 45-minute ischemia. Changes in the adenosine concentrations in liver tissue were evaluated, and the effects of adenosine A1 or A2 receptor agonists or antagonists were examined either in place of or against IPC. RESULTS: The 7-day animal survival was significantly better in the IPC group than in the control group (87% vs 53%; n = 15, P < .05). The release of liver-related enzymes during reperfusion was suppressed better in the IPC group (P < .01). Recovery of adenosine triphosphate levels was faster in the IPC group (P < .01). After IPC, adenosine concentrations in liver tissue immediately increased to 1555 +/- 299 pmol/g wet tissue and were maintained at that level during a subsequent 45-minute ischemia. The ischemic tolerance generated by IPC was mimicked by the administration of adenosine A2 receptor agonist and opposed by adenosine A2 receptor antagonist. CONCLUSIONS: The ischemic tolerance of the liver immediately after IPC can be supplanted by selective pharmacologic stimulation of adenosine A2 receptors.     

Protective effect of ischemic preconditioning on liver

ＡＶａｓｃｕｌａｒＳｕｒｇｅｒｙ ,ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＲｅｎｊｉＨｏｓｐｉｔａｌ ,ＳｈａｎｇｈａｉＳｅｃｏｎｄＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｓｈａｎｇｈａｉ2 0 0 0 0 1,Ｃｈｉｎａ (ＺｈａｎｇＹＺａｎｄＺｈａｎｇＢＧ)ＳｈａｎｇｈａｉＪｉｎｓｈａｎＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ ,Ｓｈａｎｇｈａｉ 2 0 15 0 0 ,Ｃｈｉｎａ (ＰａｎＲＬ)ｓｈｏｒｔ ｔｉｍｅｐｒｅ ｉｓｃｈｅｍｉａｃａｎｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｉｓｓｕｅｏｒｏｒｇａｎａｇａｉｎｓｔｔｈｅｆｏｌｌ…     

Sevoflurane mimics ischemic preconditioning effects on coronary flow and nitric oxide release in isolated hearts.

BACKGROUND: Like ischemic preconditioning, certain volatile anesthetics have been shown to reduce the magnitude of ischemia/ reperfusion injury via activation of K+ adenosine triphosphate (ATP)-sensitive (K(ATP)) channels. The purpose of this study was (1) to determine if ischemic preconditioning (IPC) and sevoflurane preconditioning (SPC) increase nitric oxide release and improve coronary vascular function, as well as mechanical and electrical function, if given for only brief intervals before global ischemia of isolated hearts; and (2) to determine if K(ATP) channel antagonism by glibenclamide (GLB) blunts the cardioprotective effects of IPC and SPC. METHODS: Guinea pig hearts were isolated and perfused with Krebs-Ringer's solution at 55 mm Hg and randomly assigned to one of seven groups: (1) two 2-min total coronary occlusions (preconditioning, IPC) interspersed with 5 min of normal perfusion; (2) two 2-min occlusions interspersed with 5 min of perfusion while perfusing with GLB (IPC+GLB); (3) SPC (3.5%) for two 2-min periods; (4) SPC+GLB for two 2-min periods; (5) no treatment before ischemia (control [CON]); (6) CON+GLB; and (7) no ischemia (time control). Six minutes after ending IPC or SPC, hearts of ischemic groups were subjected to 30 min of global ischemia and 75 min of reperfusion. Left-ventricular pressure, coronary flow, and effluent NO concentration ([NO]) were measured. Flow and NO responses to bradykinin, and nitroprusside were tested 20-30 min before ischemia or drug treatment and 30-40 min after reperfusion. RESULTS: After ischemia, compared with before (percentage change), left-ventricular pressure and coronary flow, respectively, recovered to a greater extent (P<0.05) after IPC (42%, 77%), and treatment with SPC (45%, 76%) than after CON (30%, 65%), IPC+GLB (24%, 64%), SPC+GLB (20%, 65%), and CON+GLB (28%, 64%). Bradykinin and nitroprusside increased [NO] by 30+/-5 (means +/- SEM) and 29+/-4 nM, respectively, averaged for all groups before ischemia. [NO] increased by 26+/-6 and 27+/-7 nM, respectively, in SPC and IPC groups after ischemia, compared with an average [NO] increase of 8+/-5 nM (P<0.01) after ischemia in CON and each of the three GLB groups. Flow increases to bradykinin and nitroprusside were also greater after SPC and IPC. CONCLUSIONS: Preconditioning with sevoflurane, like IPC, improves not only postischemic contractility, but also basal flow, bradykinin and nitroprusside-induced increases in flow, and effluent [NO] in isolated hearts. The protective effects of both SPC and IPC are reversed by K(ATP) channel antagonism.     

不同预处理对肝硬化兔缺血再灌注肝组织HSP70及ET-1表达的影响

目的:探讨两种预处理方式,即经典缺血预处理(IPC)与肢体缺血预处理(LIPC),对肝硬化兔肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及可能的作用机制。方法:皮下注射CCl4-橄榄油溶液制备兔肝硬化模型,随后将模型兔随机分为假手术组,肝I/R组(I/R组),IPC+肝I/R组(IPC组),LIPC+肝I/R组(LIPC组),每组7只。肝I/R模型制作方法:阻断入肝血流30 min,再灌注2 h;IPC诱导方法:在行肝I/R处理前阻断入肝血流10 min,开放10 min;LIPC诱导方法:在行肝I/R处理前24 h,采用止血带捆扎兔单侧后肢5 min,再开放5 min,重复3次。各组于再灌注2 h后切取肝组织,行组织形态学观察,用ELISA法测定内皮素1(ET-1)含量及Western blot法检测热休克蛋白(HSP70)的表达。结果:与假手术组比较,其余各组在肝硬化病变的基础上均出现不同程度的变性、水肿和炎性细胞浸润,但IPC组与LIPC组明显轻于I/R组,而LIPC组及IPC组间病变程度无明显差异;与假手术组比较,其余各组肝组织ET-1含量和HSP70的表达均明显增加(均P<0.05),但IPC组与LIPC组肝组织ET-1含量低于I/R组,HSP70的表达高于I/R组(均P<0.05),而上述2项指标在LIPC及IPC组间均无统计学差异(均P>0.05)。结论:LIPC和IPC均能对肝硬化肝I/R损伤有保护作用,且保护强度相似,其机制可能均与抑制ET-1的释放及增加HSP70的表达有关;LIPC具有无创性,可能具有更大的临床应用前景。