抗TNF-α、IL-1β IgY抗体抗豚鼠过敏性支气管哮喘的实验研究

目的:探讨抗TNF-α、IL-1β IgY抗体治疗过敏性支气管哮喘的作用机制.方法:卵清白蛋白雾化吸入制备Hartley豚鼠过敏性支气管哮喘动物模型,随机分正常对照组(A组)、过敏性支气管哮喘模型组(B组)、0.1%抗TNF-α、IL-1β IgY(C组)和1.0%抗TNF-α、IL-1β IgY雾化吸入治疗组(D组).各组豚鼠治疗结束后2、4、8、24小时处死,肺组织切片H.E.染色;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)Wright's染色计数炎症细胞.结果:①肺组织病理改变:B组各时间点可见肺泡管和肺泡壁结构受损,肺泡腔内充满渗出液、上皮细胞和白细胞,肺间质水肿、炎性细胞浸润、毛细血管扭曲或扩张淤血、有效血流的毛细血管显著减少.C组和D组肺泡管和肺泡壁结构受损轻于B组,肺泡腔内偶见少量炎症细胞,支气管腔及肺泡中的粘液栓较B组明显减少,支气管周围少见炎性细胞浸润,支气管粘膜上皮修复现象明显.②BALF细胞学变化:与B组相比,C和D组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数量显著下降(2、4、8小时,P均<0.05);巨噬细胞显著上升(2、4、8小时,P均<0.05).结论:抗TNF-α、IL-1β IgY抗体雾化吸入治疗豚鼠过敏性支气管哮喘能够显著减轻炎症病理反应.0.1%与1.0%的抗TNF-α、IL-1β IgY抗体疗效相当.     

Rh血型抗-D阳性个体中未见DEL型

目的分析Rh血型系统抗-D抗体阳性个体的RhCcEe表型及检测DEL等位基因,观察产生抗-D同种免疫反应个体中是否存在DEL型。方法对因输血或妊娠产生抗-D同种抗体的个体,采用间接抗人球蛋白试验(IAT)排除部分D型或弱D型,然后进行RhCcEe表型检测,同时采用PCR方法检测RHD1227A等位基因鉴别DEL型和真实Rh(D)阴性表型。同时检测99名IAT确认的、抗-D抗体阴性的Rh(D)阴性健康人作对照。结果 99名抗-D抗体阴性组共检出C抗原阳性(包括CC或Cc)个体44名(44.4%);DEL型24名(24.2%)。抗-D抗体阳性组经IAT确认共118名Rh(D)阴性,C抗原阳性22名(18.6%),未发现DEL型个体,均与抗体阴性组存在显著性差异(P<0.01)。结论抗-D抗体阳性组未见DEL型,提示DEL型个体或不会因输血或妊娠针对Rh(D)抗原发生抗-D同种免疫反应;由于DEL型多携带C抗原,因此造成抗-D阳性组C抗原频率显著降低。     

应用免疫印迹技术检测抗Scl-70和抗Jo-1抗体

本文通过对兔胸腺可抽提核抗原(ENA)制备方法的改良应用免疫印迹技术(IBT)检测抗Scl-70与抗 Jo-1抗体,对 157例各种风湿性疾病及 36名正常人的对照研究,表明 70 kD(Scl-70)多肽抗体是进行性系统性硬化症(PSS)伴弥漫性硬皮病(DS)的标记抗体,阳性率为45.5％,而55kD(Jo-1)多肽抗体是多发性肌炎(PM)的标记抗体,阳性率为25％。     

脂多糖对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞增殖细胞核抗原及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响

目的:研究脂多糖(LPS)对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞(AM)增殖细胞核抗原(PCNA)及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的作用。方法:应用免疫组织化学SABC法和免疫荧光标记技术,检测不同时期LPS对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞PCNA表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响。结果:吸烟大鼠AM上PCNA表达在第3、4月达高峰,LPS刺激的各组PCNA表达明显高于不加LPS组(P＜0.01);肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达在加入LPS组表达显著高于未加LPS组(P＜0.01),且与AM上PCNA表达的变化相平行。结论:吸烟引起气道AM增殖速率加快,AM在肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤与修复过程中起重要作用。     

JO—1抗原的制备及其抗体的测定

用兔胸腺丙酮粉(Pel Freeze),通过离心和硫酸铵层析处理提取出一种能与多发性肌炎(PM)、皮肌炎(DM)患者血清中的抗体起反应的Jo 1抗原。用此抗原及抗Jo 1抗体的标准血清与正常人和各种自身免疫病患者进行免疫双扩散法检测,结果在多发性肌炎、皮肌炎患者血清中出现抗Jo 1抗体的沉淀线,并与标准血清完全吻合。说明抗Jo 1抗体的特异性很强。实验中出现其他非抗Jo 1抗体的沉淀线,经鉴定系由于此抗原中尚含Sm、RNP、SSA、SSB抗原所致。     

鼠疫组分疫苗诱导小鼠体液免疫应答研究

目的通过检测鼠疫组分疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫应答,对其免疫原性进行评价。方法将小鼠随机分成4个实验组,免疫后5周内眦采血,检测血清中抗F1抗原和rV抗原IgG及IgA抗体;充分暴露气管,沿气管上端剪一楔形口,用PBS冲洗肺泡制备肺冲洗液,检测肺冲洗液中抗F1抗原和rv抗原IgG及IgA抗体。结果血清中可产生较高效价的抗F1抗原和rV抗原IgG抗体以及较低效价的抗F1抗原IgA抗体。肺冲洗液中可检测到抗F1抗原和rV抗原的IgG抗体,但无特异性IgA产生。结论鼠疫组分疫苗能诱导小鼠产生较强的血清抗体应答,肺冲洗液可检测到一定的IgG抗体,该疫苗有希望成为我国新一代鼠疫疫苗。     

结节病的遗传

本研究的目标是评价出生并永久居住在德国一个地区的人群中结节病(SD)和Ⅱ类组织相容性抗原之间的联系。选取由组织学证实的73例SD病人(Ⅰ组),其中有两例病人属同一家族。病人对照组(Ⅱ组)是37例由慢性外源性过敏性肺泡炎引起的肺纤     

抗Rh(D)血型抗体制备的研究进展

1　多克隆抗Rh(D)抗体与ABO血型系统不同, Rh阴性个体的血清中没有抗D抗原的天然抗体。Rh阴性个体只有接受Rh阳性个体的血液后, 才可产生Rh(D)抗体。传统的抗Rh(D)抗体是通过筛选人血清而制备的, 以免疫志愿者为主要来源。然而, 并不是所有Rh阴性的志愿者都能产生抗Rh(D)抗体, 一般注入 1个单位的全血, 80%的个体会产生抗体, 而 5mLRh 红细胞只能使 40%的人发生免疫反应 [2]。为维持志愿者体内抗Rh(D)抗体的滴度, 需要对其进行多次免疫。鉴于伦理道德等问题, 目前大多数国家已禁止用D抗原对志愿者进行免疫制备抗Rh(D)抗体 [3]。…     

口服幽门螺杆菌疫苗后小鼠粘膜免疫应答研究

为观测幽门螺杆菌 (Hp )全菌抗原和粘膜佐剂LT口服免疫Balb/c小鼠后的粘膜免疫应答 ,采用ELISPOT和ELISA法分析免疫小鼠胃粘膜、派伊尔小结 (PP )抗原特异性抗体分泌细胞和小肠粘液唾液sIgA抗体。结果表明抗原免疫组、抗原 +佐剂组胃粘膜、PP抗原特异性sIgA ASC、IgG ASC数量明显增加 ,尤以sIgA ASC为甚 ,并且抗原 +佐剂组明显高于单纯抗原组和对照组 ;小肠粘液唾液特异sIgA水平两免疫组均明显高于对照组 ,提示口服免疫可有效诱导粘膜免疫应答 ,局部特异sIgA在抗Hp感染中具有重要作用     

西尼罗病毒与乙脑病毒免疫交叉反应的实验研究

为明确西尼罗病毒(WNV)与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应,本文分别用WNV全抗原与JE减毒活疫苗免疫小鼠,采用间接免疫荧光试验检测血清中2种病毒IgG抗体水平及其交叉反应情况。结果表明:WNV组在第4次免疫后的14天和35天出现2个高峰,平均效价分别为6088和4305;JEV组第4次免疫后,小鼠血清JEV抗体呈现缓慢上升的趋势。无论是在WNV全抗原免疫小鼠血清中还是在JE减毒活疫苗免疫小鼠血清中,同一血清对WNV抗原和JEV抗原均有反应,且抗体效价差异有显著性。在抗WNV抗体阳性血清中,两者交叉反应相对较强,在抗JEV抗体阳性血清中,两者交叉反应较弱。WNV与JEV存在一定交叉反应,但是否有交叉保护作用则需要中和试验等进一步证实。     

小鼠体内抗麻风杆菌PGL—1抗体水平消长的观察

用间接ELISA测定用BCG、、不完全佐剂、~(60)Co照射麻风杆菌(IML)和犰狳麻风菌素提纯麻风杆菌(LML)免疫BALB/c小鼠后的抗麻风杆菌PGL-I循环抗体水平。所用抗原为耻垢分枝杆菌(Ms)和PGL-1。结果表明:在不完全佐剂免疫组没有检到任何种抗体;在BCG免疫组没检到抗PGL-1抗体,但检到IgG和IgM类交叉反应抗体;在IML和LML免疫组均检到IgG和IgM类交叉反应抗体和特异的抗PGL-1抗体。上述各类抗体水平在免疫后一个月逐渐升高,并持续2～3个月,尔后下降。IgM类抗体占优势,尤以抗PGL-1抗体为显。没发现IgG和IgM类抗体出现时序上的差别。     

抗独特型抗体对小鼠心肌移植耐受的诱导作用

目的探讨抗独特型抗体对小鼠移植耐受的诱导作用.方法以C57BL/6小鼠脾细胞免疫Balb/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1),Ab1交联KLH后,免疫Balb/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2),以之为移植受体,观察Ab2对小鼠心肌移植耐受的诱导作用.结果Ab1交联KLH和弗氏佐剂免疫可以有效诱导抗独特型抗体(Ab2),和对照组相比,Ab2诱导组的小鼠移植物的存活时间明显延长.结论移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型的抗体,可以对小鼠特异性低免疫反应状态起到有效的诱导作用.     

HCV 多中和抗原表位嵌合病毒样颗粒免疫获得血清内中和抗体评价

目的:纯化的HCV 多中和抗原表位及HCV 包膜蛋白E2 嵌合的HBV S 抗原病毒样颗粒免疫新西兰兔,测定免疫血清内的中和抗体。分析中和抗体对HCVpp 感染Huh7.5 的中和作用。方法:纯化的HCV 多中和抗原表位及包膜蛋白E2 嵌合的HBV S 抗原病毒样颗粒(VLPs-MEpS、VLPs-E2S)10 滋g 皮下接种新西兰兔,间隔2 周共免疫3 次,采集不同时间免疫兔血清,ELISA 方法测定血清内的抗体,PBS 组作为对照;制备1b 型HCVpp,观察血清抗体对HCVpp 感染Huh7.-5 的中和作用,对免疫血清保护性进行初步评价。结果:免疫后血清中产生一定水平的中和抗体,血清中和抗体测定VLPs-MEpS 明显高于VLPs-E2S(P<0.05)。VLPs-MEpS 与VLPs-E2S 组均显著高于对照PBS 组(P<0.01)。对HCVpp 抑制作用,VLPs-MEpS 高于VLPs-E2S 组(P<0.05),最高中和率可达61.49%,二者均高于对照组(P<0.01)。结论:嵌合病毒样颗粒免疫新西兰兔后产生一定水平中和抗体,该中和抗体具有保护作用,为研发中和抗体表位疫苗奠定基础。     

弗氏佐剂与氢氧化铝佐剂对诱导小鼠获得性免疫应答作用的比较

为研究、比较不同佐剂对诱导小鼠产生获得性免疫应答的不同作用,以卵清白蛋白(OVA)为抗原,分别混合完全弗氏佐剂(CFA)或Al(OH)3佐剂,对C57BL/6小鼠进行常规免疫,采用流式细胞技术对细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4进行检测;ELISA方法对特异性抗OVA抗体滴度及抗体亚型进行了检测。结果显示在免疫后CFA组产生以IFN-γ为主的细胞因子而Al(OH)3组产生以IL-4为主的细胞因子;两组中均产生特异性抗OVA IgG抗体,但CFA组以IgG2a亚型为主,而Al(OH)3组则以IgG1亚型为主,不产生IgG2a亚型抗体。实验表明,经CFA加抗原免疫后机体产生的免疫应答以Th1型细胞免疫为主,抗体类型为IgG2a;而Al(OH)3佐剂则诱导机体产生Th2型细胞免疫应答,抗体类型为IgG1。     

抗Ro-52抗体在自身免疫性肝病中的检测

目的 探讨抗Ro-52抗体对自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,AILD)的临床意义.方法 对采用免疫印迹法检测抗Ro-52抗体的115例AILD患者的临床资料进行回顾性分析,比较抗Ro-52阳性和阴性MLD患者肝功和免疫学指标,对可能有相关性的血清学指标进行诊断试验一致性评价.结果 抗Ro-52抗体在自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)(37例)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)(57例)、MH/PBC重叠综合征组(21例)的阳性率分别为32.43%、24.56%、33.33%,差异无统计学意义(x2=0.949,P>0.05).抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(anti-soluble liver antigen/liver-pancreas,anti-SLA/LP)在抗Ro-52阳性AIH组频率(58.33%)高于阴性组(16.00%)(x2=6.955,P<0.05),抗SLA/LP抗体在抗R0-52阳性AIH/PBC重叠综合征组频率(85.71%)高于阴性组(28.57%)(x2=6.109,P<0.05).抗Ro-52抗体和抗SLA/LP抗体结果有一致性(κ=0.466,P<0.05).AIH/PBC重叠综合征组抗Ro-52阳性患者IgG水平高于阴性患者(t=2.508,P<0.05).结论 抗Ro-52抗体在AIH、PBC和MH/PBC重叠综合征中的分布没有差别;抗Ro-52抗体与抗SLA/LP抗体检测结果有一致性;抗Ro-52抗体阳性MH/PBC重叠综合征患者IgG水平高于抗体阴性者.     

对免疫复合物中抗原的细胞免疫应答

文章分析了人血清白蛋白(HSA)与特异性抗-HSA抗体结合成免疫复合物后对体内细胞免疫应答的能力.试验所用单独HSA抗原和与同源性及异源性抗-HSA抗体结合的免疫复合物以及兔IgG均在Hank's     

类风湿关节炎患者血清IgG-IgM型类风湿因子免疫复合物检测的临床意义

目的 探讨血清IgM型类风湿因子与变性IgG抗原形成的复合物定量检测对类风湿关节炎诊断的临床意义.方法 收集类风湿关节炎(RA)患者36例、非RA患者41例和体检健康者40名作为研究对象.用包被有鼠抗人μ链抗体的ELISA孔板及HRP标记的兔抗人IgG对血清中IgM型类风湿因子(RF)与变性IgG抗原形成的免疫复合物水平进行检测,同时用胶乳凝集法检测RF,并对二者结果进行相关性分析;用ELISA试剂盒进行抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)的定性检测,并比较其与IgG-IgM型RF免疫复合物对于RA诊断的敏感性和特异性.结果 待检血清最佳稀释倍数为100倍.IgG-IgM型RF免疫复合物对于RA的敏感性为72.2％,特异性为95.3％.IgG-IgM型RF免疫复合物OD值与RF阳性程度相关系数为0.687(P ＜0.01).结论 血清IgG-IgM型RF免疫复合物水平对RA具有较高的敏感性和特异性,可作为RA诊断的参考指标.     

关于过敏性肺炎的病理诊断

过敏性肺炎(hypersensitivity pneumonitis),也称为外源性过敏性肺泡类,是由于吸入有机性或小分子无机抗原引起的免疫瓜性肺损伤,属于一种弥漫性实质性肺疾病.     

前列腺炎合并不育症患者的抗精子抗体评价

目的评价前列腺炎合并不育症患者的抗精子抗体关系.方法应用混合球蛋白试验(MAR试验)、浅盘精子凝集试验(TAT试验)和浅盘精子制动试验(SIT),对35例前列腺炎合并不育症患者(A组)的血清和精子表面抗精子抗体进行检测,随机选择35例男性不育门诊初诊者作对照(B组).结果 A组采用TAT检出血清抗精子抗体阳性5例,滴度水平在1:8～16,SIT未测出阳性,采用MAR试验检出精子表面抗体阳性8例.B组采用TAT检出血清抗体阳性4例,SIT阳性1例,采用MAR试验检出精子表面抗体阳性2例.经t检验,A组精子表面抗精子抗体阳性率显著高于B组(P＜0.01).结论前列腺炎合并不育症患者存在着精子免疫因素,且表现出精子表面抗体发生率升高,临床对这类不育患者治疗要重视前列腺炎的抗炎处理.     

CD46、Nectin-4 在麻疹病毒感染人肺泡上皮细胞中的作用

目的:探讨CD46、Nectin-4 在麻疹病毒感染人肺泡上皮细胞中的作用。以及CD46 和Nectin-4 之间的相互作用。方法:分为麻疹病毒感染前处理组和感染后2 h 组,均用抗CD46 抗体、抗Nectin-4 抗体处理人肺泡上皮细胞,并设对照组。检测细胞内病毒滴度的变化,采用Western blot 和Real-time PCR 检测NP 蛋白的表达水平,并运用免疫共沉淀检测CD46与Nectin-4 的相互作用。结果:与对照组相比,麻疹病毒感染前用抗CD46 抗体、抗Nectin-4 抗体处理的人肺泡上皮细胞内麻疹病毒滴度显著降低,分别为对照组的48.03% 和49.53%,同时用抗CD46 抗体、抗Nectin-4 抗体处理使病毒滴度下降为27.15%,差异均有统计学意义(P<0.01)。然而,在麻疹病毒感染2 h 后用抗CD46 抗体、抗Nectin-4 抗体处理,人肺泡上皮细胞内麻疹病毒滴度和NP 蛋白量未见显著减少。Western blot 和Real-time PCR 结果与上述结果一致;免疫共沉淀实验显示,CD46 与Nectin-4 存在相互作用。结论:CD46、Nectin-4 在麻疹病毒感染肺泡上皮细胞中起到介导作用,CD46 与Nectin-4 可能存在协同作用,该作用对麻疹病毒的感染起到了增强效果。