锌对大鼠生长板软骨细胞ZnT-7表达的影响

目的 研究锌对大鼠生长板软骨细胞锌转移体-7(ZnT-7)表达的影响及其规律.方法 原代培养Wistar大鼠肋生长板软骨细胞,不同浓度的锌螯合剂TPEN分别处理培养生长板软骨细胞12 h.免疫组化检测生长板软骨细胞特异性Ⅱ型胶原表达.免疫荧光技术对ZnT-7进行定位研究,实时RT-PCR和Western blot检测znT-7表达.结果 Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性.ZnT-7在生长板软骨细胞中定位于高尔基体上;Western blot和RT-PCR结果显示;5 μmol/L(TPEN)组与对照组相比略有增高,而10 μmol/L、20 μmol/L组与对照组相比逐渐降低.结论 ZnT-7定位于高尔基体上,同时在缺锌的条件下其对锌离子稳定有一定的代偿作用.     

灵芝对鸡胚视网膜色素上皮细胞影响

选用孵育24h的来亨鸡胚，注人灵液0.4ml,继续孵育到第4－6天取眼球和卵黄囊做成石蜡切片，HE和HEAⅡ（苏木精－伊红－天青Ⅱ）染色：灵芝液对鸡胚无致畸作用，对视网膜色素上皮细胞的色素颗粒的形成有促进作用。     

硫酸铊对鸡胚甲状腺影响的观察

本实验应用组化、免疫组化和放射免疫测定等技术观察硫酸铊对鸡胚甲状腺的影响。结果显示,实验组甲状腺滤泡胶质的甲状腺球蛋白和T_3,T_4量明显减少,血清T_3,T_4量明显低于对照组。提示硫酸铊可使鸡胚甲状腺机能低下。     

邻苯二甲酸酯对软骨细胞凋亡及超微结构的影响

目的:通过研究塑化剂邻苯二甲酸酯对软骨细胞凋亡因子bcl-2和Bax蛋白表达及超微结构的影响,探讨邻苯二甲酸酯在致软骨细胞凋亡中的作用机制。方法:用软骨细胞体外培养的方法,原代培养乳鼠关节软骨细胞,传第3代后加药,按染邻苯二甲酸酯剂量不同分为0/L(对照)、10-10/L、10-8/L、10-6/L组,染邻苯二甲酸酯培养7 d后,透射电镜下观察软骨细胞的超微结构改变,采用western-blot方法检测各实验组中软骨细胞bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:透射电镜下对照组和10-10/L组的软骨细胞呈球形,粗面内质网发达,线粒体膜性结构完整;10-8/L、10-6/L组的细胞内可见脂滴明显增多,胞质内出现大量空泡类物质,细胞内膜结构不清,部分细胞出现核固缩。10-8/L、10-6/L组的软骨细胞bcl-2的蛋白表达(0.620±0.041和0.530±0.035)较对照组表达(0.805±0.032)显著降低(P<0.01);而Bax的表达(0.966±0.038和1.280±0.154)较对照组表达(0.602±0.045)显著增加(P<0.01)。10-10/L组软骨细胞中bcl-2的表达(0.878±0.055)和Bax的表达(0.650±0.039)与对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。此外,10-8/L、10-6/L组相比,bcl-2和Bax的表达也有显著差异(P<0.01)。结论:10-8/L、10-6/L浓度的邻苯二甲酸酯可对软骨细胞超微结构造成损伤,其通过减少抑凋亡因子bcl-2的表达和增加促凋亡因子Bax的表达,从而产生促进软骨细胞凋亡的作用。     

鸡胚锶器官的扫描电镜观察

和显微解剖术和扫描是方法观察第１１－２１期鸡胚锶器官的形态结构。鸡胚锶器官由４对锶弓、锶沟、锶膜和咽囊组成。第１１期第１对锶弓出现于心隆起颅侧。此后，第２－４对锶弓分别出现在心隆起两侧。相邻锶弓之间隔以相应的锶沟、锶沟与咽囊之间的薄层组织为锶膜。在原始咽内部，咽囊最初呈圆弧形小坑状，继而加深变窄呈沟缝状，。第１７期第１、２对咽囊借鳃裂与锶沟相通。     

鸡胚材料体外培养的方法

可供培养的细胞种类极其广泛，由于胚体与成体所处生存环境的不同，开展胚胎组织细胞的培养有着广泛的意义。本文结合自己在胚胎组织细胞培养方面的实践经验，简述鸡胚整胚、器官、组织和细胞体外培养的方法及其应用。     

椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响

目的:研究收涩中药椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜血管模型,观察椿皮含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用。结论:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成具有抑制作用。     

鸡胚颅面部整胚原位杂交的实验

目的：：探讨并优化鸡胚整胚原位杂交的实验,以利于研究鸡胚颅面部发育相关基因的表达。方法：体外转录制备地高辛标记的 RNA反义探针,进而采用整胚原位杂交方法检测鸡胚颅面部发育相关基因的表达。结果：地高辛标记的 RNA反义探针与体内 mRNA特异性结合,在显微镜下观察到 mRNA表达部位呈现深蓝色,背景颜色较浅为浅紫色,可在保持胚胎结构完整的情况下,清楚观察到相关基因的表达。结论：利用优化的整胚原位杂交技术,可保持鸡胚结构完整,染色清晰,直观清楚地看到基因的时空表达,为进一步研究颅面部发育相关基因的表达奠定了基础。     

鸡胚静脉窦区发育的扫描电镜观察

利用显微解剖术，在扫描电镜下直接观察了孵育２．５～８ｄ（１６～３２期）鸡胚的静脉窦，结果：①第２．５天的鸡胚静脉窦借缩窄环与原始心房分界，第８天，静脉窦被完全吸收入右心房而消失；②窦房口瓣由静脉窦壁重叠凸人右心房而成，右瓣最早见于第３．５天，左瓣最早见于第３．５～４天；第４．５～５天，左瓣颅端延伸至右心房腹壁形成假隔；③静脉窦隔于第３～３．５天出现于静脉窦左角口与肝总静脉口之间，第８天与左、右窦房瓣基部融合，参与构成右心房背壁，并将窦房瓣分为颅侧的腔静脉瓣和尾侧的冠状窦瓣两部分。     

氟对人胚肝细胞氧化应激、DNA损伤及凋亡的影响

目的 研究氟对人胚肝细胞(L—02细胞)氧化应激、DNA损伤及诱导凋亡的作用。方法 体外培养的L-02细胞接触40、80、160μg／ml氟化钠24h，检测L—02细胞脂质过氧化物(LPO)水平，还原型谷胱甘肽(GSH)含量，DNA损伤率，细胞凋亡率和周期构成比的情况。结果 氟可使L—02细胞LPO水平升高，GSH含量下降，并且二者均与氟浓度呈明显的剂量-效应关系；氟可使L—02细胞DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数明显升高，高剂量氟组DNA损伤率和凋亡率与低剂量氟组之间存在显著性差异。结论 氟可致L—02细胞出现氧化应激，引起DNA损伤，诱导细胞凋亡，并且三者之间存在明显的相关关系。     

氯丙烯对鸡胚脑神经细胞钙稳态与能量合成影响的研究

进一步研究氯丙烯的中毒机理,探讨氯丙烯对神经细胞内钙稳态与能量合成的影响。方法：用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ、电子探讨针Ｘ线微区分析,ＡＴＰ生物分光分析等方法测定氯丙烯染毒后鸡胚脑神经细胞内游离Ｃａ＾２＋、钙百分含量及ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＳＭＰ含量的改变。结果随着氯丙烯浓度的增加,细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度、钙百分含量明显增加,细胞内ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ含量明显减低,细胞外ＡＤＰ、ＡＭＰ含量明显增高。结论氯     

海金沙草对鸡胚血管新生的抑制作用

目的 研究从海金沙草中分离的各类成分对鸡胚血管新生的抑制作用,筛选出抑制效果最佳的有效成分.方法 系统提取海金沙草的各类组分,利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和鸡胚卵黄囊膜(YSM)模型,观察海金沙各类组分对鸡胚血管新生的作用.结果 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组处理过的CAM和YSM血管新生密度和迁移面积明显低于其他组分和对照组,差异有统计学意义.结论 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组对鸡胚血管新生有明显抑制作用.     

鸡胚神经管缺陷模型的建立

目的 鸡胚胎内注射氨甲喋呤（ＭＴＸ）,制作鸡胚神经管缺陷动物模型。方法 选用上海农业科学院“杭”鸡的受精蛋５５２枚,分成３组,分别为药物（ＭＴＸ）注射组、生理盐水注射对照组及正常对照组。药物注射时间选择在鸡胚孵化第２￣７ｄ,ＭＴＸ剂量分别为０．０１、０．０２、０．０５、０．１及０．２５ｍｇ／ｋｇ。孵化３周后观察结果。结果 孵育第３￣６ｄ注药的鸡（剂量为０．０１、０．０２、０．０５、及０．１ｍｇ／ｋ