骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验

我们应用经典的直接抗人球蛋白试验 (Ｃｏｏｍｂｓ试验 )的原理和方法[1,2 ] ,以骨髓单个核细胞 (ＢＭＭＮＣ)悬液取代红细胞悬液作Ｃｏｏｍｂｓ分型试验 (ＢＭＭＮＣ Ｃｏｏｍｂｓ) ,结果发现 ,一部分经典Ｃｏｏｍｂｓ分型试验阴性的血细胞减少症患者ＢＭＭＮＣ Ｃｏｏｍｂｓ分型试验阳性。现将方法及结果报告如下。对象和方法1　检测对象1.1　阳性对照组 :5例 ,男 2例 ,女 3例 ,中位年龄 42岁 (35～ 72岁 ) ,均为Ｃｏｏｍｂｓ试验阳性的自身免疫性溶血性贫血(ＡＩＨＡ)患者。1.2　阴性对照组 :47例 ,男 2 2例 ,女 2 5例 ,中位年龄 31岁(7…     

骨髓细胞Coombs试验对DAT阴性AIHA的诊断价值

抗人球蛋白试验 (Ｃｏｏｍｂｓ试验 ) ,尤其是直接抗人球蛋白试验 (ＤＡＴ)是自身免疫性溶血性贫血 (ＡＩ ＨＡ)的重要诊断方法 ,但约有 2 %～ 30 %的病人虽具有典型ＡＩＨＡ的临床表现 ,肾上腺皮质激素疗效良好 ,但ＤＡＴ阴性[1] ,临床诊断为ＤＡＴ阴性的ＡＩＨＡ。我们对所遇到的 6例此类患者进行了骨髓细胞的Ｃｏｏｍｂｓ试验 ,结果均阳性 ,现报道如下 :1　病例与方法1.1　检测对象　ＡＩＨＡ患者 16例 ,其中男 6例 ,女10例 ,年龄为 2 5～ 6 5岁。缺铁性贫血 (ＩＤＡ) 10例 ,巨幼细胞性贫血 6例 ,骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)13例 ,阵发…     

骨髓单个核细胞Coombs试验在免疫相关性血细胞减少症中的诊断意义

目的 研究骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验(Coombs试验)对免疫相关性血细胞减少症的诊断价值.方法 采用骨髓单个核细胞(BMMNC)悬液取代经典Coombs试验的外周血红细胞悬液,即骨髓单个核细胞Coombs(BMMNC-Coombs)试验检测21例临床拟诊免疫相关性血细胞减少(IRH)或全血细胞减少(IRP)症患者,并以20例明确诊断的血细胞减少患者作为对照.结果 21例拟诊IRH/IRP患者中BMMNC-Coombs试验阳性14例,阳性率66.7%.对照组20例BMM-NC-Coombs试验均阴性.BMMNC-Coombs试验阳性患者经临床应用糖皮质激素等免疫抑制荆均产生了显著疗效.结论 BMMNC-Coombs试验对IRH/IRP的诊断具有较高的灵敏度和特异度,且简便可行,易于推广应用.     

骨髓单个核细胞Coombs分型试验在衄细胞减少症中的临床意义

目的 观察骨髓单个核细胞Coombs分型试验对全血细胞减少症的临床意义。方法 对51例全血细胞减少症患者进行骨髓单个核细胞Coombs分型试验检测，骨髓单个核细胞Coombs分型试验阳性患者给予泼尼松或加用环孢素A治疗。结果 51例血细胞减少患者，骨髓单个核细胞Coombs分型试验阳性40例，阴性11例。阳性患者中，单纯IgG阳性16例，单纯C3阳性4例，IgG＋C3阳性4例，单纯IgM阳性4例，IgG＋IgA阳性4例，抗IgG＋IgM阳性8例。泼尼松或加用环孢素A治疗有效率87．5％。结论 骨髓单个核细胞Coombs分型试验对血细胞减少症患者的鉴别诊断和指导治疗有重要的作用。     

骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验在免疫相关性全血细胞减少症（IRP）中的诊断意义

本文研究骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验在诊断免疫相关性全血细胞减少症（IRP）的临床意义。90例血细胞减少症患者入院后完善血清铁蛋白（SF）,叶酸（FA）及维生素B12浓度,免疫学检查,血小板抗体,乙肝六项,甲肝及丙肝抗体、溶血相关检查、骨髓涂片及染色体核型分析等常规检查。实验组：28例拟诊免疫相关性全血细胞减少症。阳性对照组：自身免疫性溶血性贫血19例。阴性对照组：43例,包括再生障碍性贫血12例、骨髓增生异常综合征14例、巨幼细胞性贫血10例,阵发性睡眠型血红蛋白尿3例,缺铁性贫血4例。所有患者均进行骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验。结果28例拟诊免疫相关性全血细胞减少症患者中13例骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验阳性,阳性率为46．43％,抗体结合类型以IgG型最多见,I舭型较少。19例阳性对照组中仅2例骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验阳性,阳性率为10．53％。43例阴性对照组中1例骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验阳性,阳性率为2．33％。实验组骨髓单个核细胞分型试验阳性率显著高于阳性对照组及阴性对照组（P〈0．01）。结论骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验为免疫相关性全血细胞减少症的诊断提供了一定的依据,并有利于制定更有效的治疗策略,而且为血细胞减少症的鉴别诊断提供了更多的检测手段。     

骨髓单个核细胞Coomb's试验在淋巴瘤合并贫血患者诊断中的意义

目的探讨ML(淋巴瘤)合并贫血(外周血红细胞悬液Coomb,s试验阴性)患者对骨髓的单个核细胞进行Coomb,s试验的临床价值。方法抽取我院自2008年11月至2011年11月以来,于我科治疗的血液病患者临床资料进行回顾性分析,其中A组AIHA(自身免疫性的溶血性贫血)患者10例(阳性对照组),均系外周血红细胞悬液Coomb's试验呈阳性者;B组4名正常人与46例各类型(再障,PNH,IDA等)贫血患者共50例(阴性对照组),均已明确诊断;C组ML合并贫血患者100例(实验组)均系外周血红细胞悬液Coomb,s试验呈阴性者;对3组患者骨髓的单个核细胞进行Coomb,s试验,并予以对比分析。结果对A组骨髓的单个核细胞进行Coomb,s试验,10例均提示为阳性,而B组中50例均提示为阴性,C组23例结果呈阳性,而67例结果呈阴性,A组患者骨髓单个核细胞Coomb,s试验阳性率为100.0%(10/10),C组患者阳性率为23.0%(23/100),两组差异呈显著性(P<0.05)。结论 ML合并贫血(外周血红细胞悬液Coomb,s试验阴性)患者对骨髓的单个核细胞进行Coomb,s试验检查,能够对其诊断以及鉴别诊断均提供有效的实验依据,从而避免误诊情况的发生,同时也能够对患者进行有效并且及时的治疗,应予推广。     

外周血coombs检测结合骨髓单个核细胞coombs检测在AIHA中的诊断应用

目的探讨应用外周血coombs联合骨髓单个核细胞coombs检测在AIHA中的诊断应用。方法对临床怀疑为AIHA患者,同时进行外周血coombs和骨髓单个核细胞coombs检测。对象：临床怀疑为AIHA40例,正常对照组（缺铁性贫血）30例。结果临床怀疑为AIHA40例中,外周血红细胞coombs试验均阳性23例,骨髓单个核细胞的coombs试验阳性31例,而正常对照组30例均阴性。结论对临床怀疑为AIHA患者,应用外周血coombs联合骨髓单个核细胞coombs检测,二者能互补,诊断明确率明显提高,对临床诊断和治疗有一定的价值。     

改良直接抗人球蛋白试验的进展

1945年抗人球蛋白 (Ｃｏｏｍｂｓ)试验问世 ,因其可检测针对自身红细胞的温抗体型 ,被广泛应用于临床。该试验不仅对自身免疫性溶血性贫血 (ＡＩＨＡ)的诊断起重要作用 ,而且已成为不少免疫学方法的基础。随着近代血液学及免疫学技术日新月异地发展 ,Ｃｏｏｍｂｓ试验被不断改良 ,人们对温抗体型自身免疫性溶血性贫血 (ＷＡＩＨＡ)的认识也有了新的提高。一、经典直接抗人球蛋白试验之不足Ｃｏｏｍｂｓ试验分为直接和间接两种。直接试验 (ＤＡＴ)是检查被检者红细胞是否已经在体内致敏 (即结合了自身抗体 /补体 ) ;间接试验是检查被检者血清…     

Coombs试验与Ham试验双阳性实验分析

对 6 0 8例自身免疫溶血性贫血 (ＡＩＨＡ)和 2 15例阵地性睡眠性血红蛋白尿症 (ＰＮＨ)患者作溶血性贫血 (溶贫 )系列检查 ,测出 2 6例患者直接抗人球蛋白试验 (Ｃｏｏｍｂｓ试验 )和血清酸溶血试验 (Ｈａｍ试验 )均为阳性。经分析和随访 ,明确了诊断 ,现报道如下。1　材料和方法1 1　病例选择　 2 6例双阳性患者均来自本院血液科 ,诊断标准根据文献[1] 。其中男 8例 (ＡＩＨＡ5例 ,ＰＮＨ3例 ) ,女 18例 (ＡＩＨＡ15例 ,ＰＮＨ3例 )年龄 16～70岁 ,平均年龄 35岁。1 2　资料收集　初、复诊患者进行血浆游离血红蛋白 (Ｐ Ｈｂ)、结合珠蛋白…     

粒细胞集落刺激因子受体在急性白血病中的表达及其临床意义

我们采用流式细胞技术 ,对急性白血病 (ＡＬ)患者骨髓单个核细胞表面粒细胞集落刺激因子受体 (Ｇ ＣＳＦＲ)的表达进行了检测 ,以探讨Ｇ ＣＳＦＲ在ＡＬ的表达规律及临床意义。对象和方法1　研究对象1.1　细胞系 :Ｕ937、Ｋ5 6 2、ＨＬ 6 0、ＮＢ4、Ｒａｊｉ细胞由本院中心实验室和山东省医学科学院基础免疫实验室提供。1.2　病例 :初治ＡＬ 4 9例 ,男 34例 ,女 15例 ,年龄 14～ 5 9岁 ,中位年龄 34.5岁 ,均为 1998年 7月～ 2 0 0 0年 10月山东省立医院及济南军区总医院血液科门诊和住院患者。所有病例均按文献 [1]标准确诊。按ＦＡＢ分型 ,…     

骨髓增生异常综合征患者Fas、FasL和FAP-1基因的表达

有报道骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)患者存在凋亡诱导基因Ｆａｓ、ＦａｓＬ的表达异常[1,2 ] 。ＦＡＰ 1为Ｆａｓ相关酪氨酸磷酸酶 ,可与Ｆａｓ胞浆内链相互作用 ,抑制Ｆａｓ介导的细胞毒作用[3 ] ,其在ＭＤＳ细胞中的表达 ,国外报道尚少 ,国内未见报道。我们采用ＲＴ ＰＣＲ对 2 6例ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞(ＢＭＭＮＣ)中Ｆａｓ、ＦａｓＬ和ＦＡＰ 1的ｍＲＮＡ表达进行了研究。对象和方法1　病例　 2 6例ＭＤＳ患者 ,男 12例 ,女 14例 ,中位年龄 46 (17～ 79)岁。按 1982年ＦＡＢ标准诊断和分型[4 ] ,ＲＡ患者须符合 :①外周血至少二系细…     

红细胞结合荧光标记抗人IgG值的测定及临床应用

近 40年来 ,对免疫性溶血性贫血的诊断 ,Ｃｏｏｍｂｓ试验是一种经典的检验方法。但Ｃｏｏｍｂｓ试验敏感度不高 ,相当部分患者因此被误诊。为寻找一种敏感性高、特异性强的定量检测红细胞抗体的方法 ,我们采用Ｃｈａｎｄｏｒ[1] 的定量检测方法 ,即荧光标记羊抗人ＩｇＧ (ＦＩＴＣ -ＳＡＨＩｇＧ)结合红细胞值 ,测定血液病患者的红细胞ＩｇＧ水平 ,将结果报道如下。1　材料与方法1 1　试剂与仪器　 (1)荧光标记羊抗人ＩｇＧ(ＦＩＴＣ -ＳＡＨＩｇＧ) ,上海生物制品研究所生产 ,效价 1∶16 ;(2 ) 0 8%乙二胺四乙酸二钠 (ＥＤＴＡ二钠 ) ;(3…     

骨髓单个核细胞抗人球蛋白163例检测分析及临床价值

自身免疫性疾病累及全身各个系统种类多达40余种，大多数为慢性疾病。由于病因不明，发病机制涉及多基因、多因素以及环境等因素。临床治疗效果并不十分理想。经典Coombs实验问世以来，对自身免疫性疾病的诊断起到十分重要的作用。随着Coombs方法的不断改进，其精确性不断提高，加深了人们对溶血性贫血的进一步认识。近年，我们以骨髓单个核细胞（bone marrow monouclear cells，BMMC）悬液取代红细胞悬液作Coombs试验，证实部分血细胞减少症细胞患者的骨髓单个核细胞的Coombs试验（BMMNC）有自身抗体的结合。     

直接原位逆转录-聚合酶链反应检测慢性粒细胞白血病bcr/abl mRNA

逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)检测慢性粒细胞白血病(慢粒 )ｂｃｒ ａｂｌｍＲＮＡ已应用于临床诊断和微小残留病的检测 ,但该方法不能反映ｂｃｒ ａｂｌｍＲＮＡ和细胞结构之间的关系 ,且ＲＮＡ提取操作要求较高 ,应用受到一定的限制。我们拟建立直接原位ＲＴ ＰＣＲ检测慢粒ｂｃｒ ａｂｌｍＲＮＡ的方法。材料和方法1　细胞　抽取经临床确诊的慢粒患者外周静脉血 ,Ｆｉｃｏｌｌ分离出外周血单个核细胞。2　细胞涂片及固定　取 2× 10 6 /ｍｌ单个核细胞悬液 5 0 μｌ,离心涂片于包被 0 .2ｇ Ｌ多聚赖氨酸的载片上 ,用体积分数为4%的…     

环孢菌素A治疗难治性Evans综合征的疗效观察

我们应用环孢菌素Ａ(ＣｓＡ)的综合治疗方案治疗 12例难治性Ｅｖａｎｓ综合征 ,取得了初步疗效 ,现报告如下。病例和方法1　病例　 12例均为 1998～ 2 0 0 0年我院住院的Ｅｖａｎｓ综合征患者 ,其中男性 4例 ,女性 8例 ,年龄 13～ 6 2岁 ,平均年龄39 2岁。其中原发 8例 ,继发 4例 ,继发于系统性红斑狼疮(ＳＬＥ)者 2例 ,继发于类风湿关节炎 (ＲＡ)者 2例。Ｃｏｏｍｂｓ试验均为阳性 ,温抗体型 10例 ,其中ＩｇＧ +Ｃ3 型 6例 ,Ｃ3 型 2例 ,ＩｇＧ型 1例 ,ＩｇＭ +Ｃ3 型 1例 ,无ＩｇＡ型患者 ;温、冷双抗体阳性 2例。 12例患者于应用ＣｓＡ治…     

环孢菌素A体外对骨髓增生异常综合征患者因祖细胞的作用

近年来国内外相继报告了临床应用环孢菌素Ａ(ＣｓＡ)治疗再生障碍性贫血 (ＡＡ)取得较好疗效 ,ＣｓＡ用于骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)亦有个别报道 ,为研究ＣｓＡ对ＭＤＳ的疗效 ,我们观察了ＣｓＡ在体外对 17例ＭＤＳ患者ＣＦＵ ＧＭ、ＣＦＵ Ｅ的作用。材料和方法1　骨髓来源　ＭＤＳ患者 17例采用ＦＡＢ诊断和分型标准 ,其中难治性贫血 (ＲＡ) 10例 ,环形铁粒幼细胞性难治性贫血(ＲＡＳ) 1例 ,ＲＡ伴有原始细胞增高 (ＲＡＥＢ) 5例 ,转变中的ＲＡＥＢ(ＲＡＥＢ ｔ) 1例。所有患者试验前均未接受过免疫抑制剂、细胞毒性药物及细胞因子的…     

骨髓增生异常综合征造血干/祖细胞体外增殖、分化特征研究

我们对骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)患者骨髓ＣＤ34 细胞进行检测和富集 ,并对富集后的骨髓细胞进行体外培养 ,以研究其增殖分化特征及对不同造血因子的反应。病例和方法1　病例来源　 1 993年 3月～ 1 997年 1 0月于我院住院的ＭＤＳ患者 2 9例 ,其中男性 2 0例 ,女性 9例 ;中位年龄 3 7岁(2 4～ 65岁 )。按ＦＡＢ诊断及分型标准[1]1 1例为低危组 (ＲＡ/ＲＡＳ) ,1 8例为高危组 (ＲＡＥＢ/ＲＡＥＢ ｔ)。2　试剂来源　所用单克隆抗体包括抗Ｔ细胞 (ＣＤ3、ＣＤ2 )、ＮＫ细胞 (ＣＤ5 6 )、Ｂ细胞 (ＣＤ2 0 )、粒细胞 (ＣＤ11ｂ)、红细胞 (…     

再生障碍性贫血患者血浆细胞因子的测定

再生障碍性贫血 (ＡＡ)患者血浆中的各种造血调控因子在其骨髓造血功能衰竭中所起的作用是目前研究的热点。我们检测了ＡＡ患者血浆ＩＬ 18、ＩＬ 6、ＩＬ 8、肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)及血浆膜攻击性补体复合物 (ｓＣ5ｂ 9) ,并探讨其在ＡＡ发病中的作用和临床意义。病例和方法1　研究对象　ＡＡ患者 2 2例 ,均为我科住院及门诊患者。男 9例 ,女 13例 ;年龄 16～ 6 8岁 ,平均 34 .4岁 ;初诊 16例 ,复诊 6例。依据第四届全国再生障碍性贫血会议修订的诊断标准进行诊断分型。其中 ,慢性再生障碍性贫血 (ＣＡＡ) 16例 ,重型再生障碍性贫血Ⅰ…     

荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因

目的 建立荧光原位杂交（FISH）技术,直接原位检测间期细胞中BCR／ABL融合基因,辅助临床诊断和治疗慢性粒细胞性白血病（CML）。方法 应用FISH技术检测15例CML患者骨髓培养细胞BCR／ABL融合基因,其中5例CML患者同时取骨髓直接涂片检测,5例CML患者同时取外周血浓缩单个核细胞直接涂片检测。以5例非CML患者骨髓培养细胞为阴性对照。结果 15例患者骨髓标本成功培养10例,染色体分析检测到Ph1染色体8例。15例患者骨髓培养细胞FISH检测BCR／ABL融合基因阳性14例。5例CML患者同时做骨髓直接涂片FISH检测,结果阳性4例。5例CML患者同时做血标本浓缩单个核细胞FISH检测阳性2例。5例非CML患者FISH结果均阴性。结论 FISH技术能直接原位检测间期细胞中BCR／ABL融合基因,且快速、可靠、成功率高,是诊断和监测CML的一项有效新技术。     

荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因

目的建立荧光原位杂交(FISH)技术,直接原位检测间期细胞中BCR/ABL融合基因,辅助临床诊断和治疗慢性粒细胞性白血病(CML)。方法应用FISH技术检测15例CML患者骨髓培养细胞BCR/ABL融合基因,其中5例CML患者同时取骨髓直接涂片检测,5例CML患者同时取外周血浓缩单个核细胞直接涂片检测。以5例非CML患者骨髓培养细胞为阴性对照。结果15例患者骨髓标本成功培养10例,染色体分析检测到Ph1染色体8例。15例患者骨髓培养细胞FISH检测BCR/ABL融合基因阳性14例。5例CML患者同时做骨髓直接涂片FISH检测,结果阳性4例。5例CML患者同时做血标本浓缩单个核细胞FISH检测阳性2例。5例非CML患者FISH结果均阴性。结论FISH技术能直接原位检测间期细胞中BCR/ABL融合基因,且快速、可靠、成功率高,是诊断和监测CML的一项有效新技术。