血管性痴呆大鼠海马区长时程增强变化的研究

目的 观察四血管阻断大鼠海马CA1区长时程增强（long-term potentiation,LTP)的变化，并探讨其可能机制。方法 改良Pulsinelli's四血管阻断法建立血管性痴呆大鼠模型；采用电脑控制的穿梭箱系统检测大鼠学习记忆；离体海马脑片诱导的CA1区LTP检测大鼠学习记忆电生理改变；透射电镜观察大鼠海马CA1区的超微结构改变。结果 脑缺血组大鼠AAR在2w时较对照组显著下降（P＜0．05），4w和2m时更加明显（P＜0．01）。对照组海马脑片可明显诱出LTP波形，脑缺血组各时相点均几乎诱不出LTP，条件刺激前后fEPSP斜率变化的百分数与对照组比较差别明显（P＜0．05）；但各时相点间无明显差别。脑缺血组海马CA1区神经元细胞核固缩，线粒体肿胀、颗粒减少、电子密度增高，轴突脱髓鞘，次级溶酶体形成，高尔基复合体扩张空泡、神经毡空泡等慢性缺血缺氧改变。结论 海马脑片CA1区LTP检测能够客观地反映大鼠短时记忆损害，是可靠的学习记忆细胞模型。     

表皮生长因子受体反义寡核苷酸对紫外线诱导的表皮角质形成细胞c-jun 活性的影响

目的探讨表皮生长因子受体（EGF-R）反义寡核苷酸转染体外培养的表皮角质形成细胞株HaCaT后,对紫外线诱导的表皮角质形成细胞转录因子c-jun活性的影响。方法用一种高灵敏度、高特异性的比色法测定不同剂量中波紫外线（UVB）辐射后以及EGF-R反义寡核苷酸转染后紫外线辐射的角质形成细胞c-jun活性的变化;RT-PCR方法测定EGF-R反义寡核苷酸转染后EGF-RmRNA的表达。结果10、20、30mJ/cm^2 UVB辐射角质形成细胞后均可显著增强c-jun活性（P〈0.05）,不同浓度的EGF-R反义寡核苷酸转染后对30mJ/cm^2 UVB诱导的EGF-RmRNA表达和c-jun活性均有显著抑制作用（P〈0.01）。结论脂质体介导的EGF-R反义寡核苷酸转染表皮角质形成细胞可以抑制UVB辐射诱导的表皮角质形成细胞c-jun活性,表明紫外线诱导角质形成细胞c-jun激活是通过EGF-R介导的。     

反义寡核苷酸抑制端粒酶活性对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸(AS-ODN)对鼻咽癌HNE-1细胞株增殖的影响。方法：用PCR-ELISA法检测细胞内端粒酶活性。采用MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性。结果：鼻咽癌细胞株HNE-1与5μmol/L，20μmol/L反义寡核苷酸共同孵1d，对其细胞内端粒酶活性抑制率分别为32.9％、61.6％。而同浓度正义寡核苷酸(S-ODN)对细胞端粒酶活性无抑制作用。5μmol/L、20μmol/L反义寡核苷酸与HNE-1细胞共同孵育2d，对细胞增殖的抑制率分别为34.4％，72.9％，同浓度正义寡核苷酸的抑制率为14.4％、15.6％。20μmol/L反义寡核苷酸和20μmol/L正义寡核苷酸对细胞克隆形成能力的抑制率分别为78.39％、23.37％。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性，此作用有序列特异性和浓度依赖性。该反义寡核苷酸明显抑制了鼻咽癌细胞HNE-1的增殖，此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性。     

反义寡核苷酸抑制端粒酶活性对鼻咽癌细胞癌基因表达的影响

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸（AS-ODN）对鼻咽癌HNE-1细胞株bcl-2及c-myc基因表达的影响。方法：用PCR-ELISA法检测细胞内端粒酶活性。用免疫细胞化学法检测bcl-2和c-myc基因的表达。结果：鼻咽癌细胞株HNE-1与20μmol/L反义寡核苷酸共同孵育1天，对其端粒酶活性抑制率为61.6%。而同浓度正义寡核苷酸（S-ODN）对细胞端粒酶活性无抑制作用。20μmol/L反义寡核酸作用2天后鼻咽癌细胞c-myc基因表达HSCORE评分由3.65下降为1.98，而bcl-2基因表达HSCORE评分无明显变化。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性。此作用有序列特异性。该反义寡核苷酸抑制了鼻咽癌细胞c-myc基因的表达，而对bcl-2基因表达无明显影响。     

端粒酶基因hTRT反义寡核苷酸对其酶活性和肿瘤细胞增殖的影响

（1）目的：探讨端粒酶基因hTRT反义寡核苷酸对肿瘤细胞增殖和端粒酶活性的影响。（2）方法：采用MTT法检测反义寡核苷酸对肿瘤细胞HL－60增殖的影响。采用TRAP－PCR法检测反义寡核苷酸处理肿瘤细胞后端粒酶活性的变化；采用Giemsa染色观察反义寡核苷酸处理后肿瘤细胞形态学变化，采用DNA凝胶电泳和三苯胺法检测反义寡核苷酸处理后肿瘤细胞DNA片段化。（3）结果：端粒酶基因hTRT反义寡核苷酸作用48h对肿瘤细胞增殖出现抑制作用。5μmol/L反义寡核苷酸处理24h后，细胞端粒酶活性下降，并且随作用时间的延长，活性不断降低，96h下降至对照组的44．4％，用5μmol/L反义寡核苷酸处理96h的HL－60细胞出现凋亡的形态学特征，处理24，48，72，96h后凋亡指数为0.053,0.127,0.257,0.315,，用5μmol/L反义寡核苷酸处理HL－60细胞96h后，电泳出现DNA梯状条带。作用24，48，72，96h细胞DNA片段化率分别为17．98％，29．34％，35．43％，41．24％；（4）结论：端粒酶hTRT基因反义寡核苷酸能抑制肿瘤细胞的增殖和端粒酶活性，并能诱导肿瘤细胞HL－60凋亡。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸抑制大鼠子宫内膜异位种植的实验研究

目的了解血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对大鼠子宫内膜异位种植的抑制作用。方法用外科自体移植术建立SD大鼠右侧壁腹膜上子宫内膜异位症模型,在建模同时分别腹腔注射不同剂量的VEGF反义寡核苷酸(1 000μmol/L,2 000μmol/L)或生理盐水100μl,隔日1次,共4周。观察VEGF反义寡核苷酸对SD大鼠异位症建模成功率、移植物、在位内膜和卵巢的组织学变化及血清E2,P水平的影响。结果VEGF反义寡核苷酸腹腔注射使大鼠异位症模型的建模成功率明显降低,移植物体积均显著下降(P<0.01)。对照组建模成功的SD大鼠腹膜上的移植物囊肿内壁的上皮、固有膜以及固有膜的基质细胞、腺体样结构都和成熟大鼠的子宫内膜相似,移植物被覆的结缔组织及与其相连的腹膜表面都有丰富的血管形成。而用药组建模成功的SD大鼠移植物腔内面上皮不发达,固有膜较薄,固有膜的基质细胞、腺体样结构减少,移植物被覆的结缔组织及与其相连的腹膜血管稀少。各组血清E2,P水平差异无显著性(P>0.05)。结论VEGF反义寡核苷酸腹腔注射可以抑制大鼠子宫内膜的异位种植和生长,但不影响卵巢功能。     

Orexin-A及其反义寡核苷酸对睡眠剥夺幼鼠空间学习记忆能力的影响

目的 研究Orexin-A及其反义寡核苷酸对睡眠剥夺幼鼠空间学习记忆的影响.方法 小平台水环境法建立幼年大鼠睡眠剥夺模型,同时随机分为Orexin-A注射组、Orexin-A反义寡核苷酸注射组、DMSO对照组及正常对照组,连续7 d经脑室给药,给药及睡眠剥夺第3天开始进行Morris水迷宫训练及测试.结果 从水迷宫训练第2天开始,各注射组平均逃避潜伏期较正常对照组均明显延长(P＜0.01).第4天、第5天Orexin-A注射组平均逃避潜伏期[分别为(59.06±17.34)s,(41.24±17.35)s]较DMSO对照组[分别为(44.71±16.57)s,(29.02±11.52)s]和反义寡核苷酸注射组[分别为(33.29±10.35)s,(24.21±6.36)s]显著延长(P＜0.01),反义寡核苷酸注射组平均逃避潜伏期较DMSO对照组明显缩短(P＜0.01).各注射组穿环数与正常对照组相比均明显减少(P＜0.01).Orexin-A注射组穿环数(4.20±1.61)较DMSO对照组(7.15±1.50)和反义寡核苷酸注射组(9.80±1.20)明显减少(P＜0.01),反义寡核苷酸注射组穿环数明显高于DMSO对照组(P＜0.05).结论 Orexin-A参与了睡眠剥夺幼鼠空间学习记忆能力的损伤,Orexin-A mRNA反义寡核苷酸可显著逆转这一损伤的产生.     

反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞端粒酶活性的抑制

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸（AS－ODN）对鼻咽癌HNE－1细胞株端粒酶活性的影响。方法：用PCR－ELISA法检测细胞内端粒酶活性。结果：鼻咽癌细胞株HNE－1与5μmol/L，20μmol/L反义寡核苷酸共同孵育1d，对其端粒酶活性抑制率分别为32．9％，61．6％。而同浓度正义寡核苷酸（S－ODNA）对细胞端粒酶活性无抑制作用。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性，此作用有序列特异性和浓度依赖性。     

双侧海马注射神经肽Y Y2受体反义基因对大鼠学习记忆影响的初步探讨

目的：探讨神经肽YY2(NPY Y2)受体在大鼠学习记忆中的作用。方法：双侧海马插管，注射Y2受体的反义、错义寡核昔酸或生理盐水，采用跳台法记录训练期的错误次数(学习成绩)、记忆测试期的潜伏期和错误次数(记忆成绩)。结果：注射Y2受体反义寡核苷酸组大鼠训练期的错误次数较对照组无显著性差别，而记忆测试期的潜伏期较对照组显著缩短，错误次数显著增加，提示该组大鼠记忆能力受到显著损害。结论：NPY Y2受体参与了大鼠的记忆形成过程。     

海马内M1和M2受体与学习记忆关系的研究

目的 研究海马内M1和M2受体亚型对学习记忆的调节。方法 SD大鼠分为3组，海马内分别微重注射M1、M2反义寡核苷酸(MASODN)，以海马内注射生理盐水作为对照组，观察药物对大鼠被动逃避反应步入潜伏期的影响。结果 海马内注射M2ASODN大鼠的步入潜伏期显著缩短，较对照组减少75％，海马内注射M2ASODN大鼠的步入潜伏期显著延长。结论 海马内M1受体可正向调节学习记忆，而M2受体负向调节学习记忆。     

海马缺锌对大鼠学习记忆的影响

本实验以大鼠穿梭箱主动回避反应（ＡＡＲ）的习得为学习记忆指标，采用了行为观察和脑内电活动记录的方法，通过低锌（ＺＤ）、常锌（ＺＮ）大鼠模型，研究了海马内锌在学习记忆中的作用。结果为：ＺＤ组体重增长值、饲料效价、血清锌、海马锌、ＡＡＲ习得率及海马ＣＡ１区的长时程突触增强效应明显低于ＺＮ组，提示海马内锌可增强海马突触的传导，促进学习记忆。     

Antisense oligodeoxynucleotide inhibits expression of recombinant porcine follicle-stimulating hormone receptor

Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ（ＯＤＮｓ）ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｎｅｗｔｏｏｌｆｏｒｔｈｅｄｉｓｃｏｖｅｒｙｏｆｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｉｎｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓ,ｉｎｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｉｎｖｉｖｏ．Ｉｄｅａｌｌｙ,ａｎａｎｔｉｓｅｎｓｅＯＤＮｉｓｔａｒｇｅｔｅｄｉｎａｓｅｑｕｅｎｃｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｍａｎ－ｎｅｒｔｏｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓ（ＲＮＡｏｒＤＮＡ）ｔｏｏｆｆｅｒｔｈｅｅｘｃｉｔｉｎｇｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｓｅｌｅｃｔｉｖｅ…     

硫代修饰c-fos反义寡脱氧核苷酸的潜在抗焦虑作用研究

目的 :探讨硫代修饰c fos反义寡脱氧核苷酸的潜在药理学价值及分子机制。方法 :建立焦虑的动物模型 ,将硫代修饰c fos反义寡脱氧核苷酸注入大鼠侧脑室 ;高架十字迷宫和空场实验评估大鼠焦虑行为 ,免疫组织化学技术检测Fos蛋白表达 ,计算机图像分析系统定量。结果 :c fos反义寡核苷酸减少了下丘脑室旁核部位的Fos免疫反应阳性神经元 ,抑制率 5 7.0 3%。并可以拮抗应激所至的焦虑相关行为 ,与diazepam效果类似而不影响中枢神经系统兴奋性。结论 :提示c fos是焦虑形成机制中不可或缺的环节 ,c fos硫代修饰反义寡核苷酸具有潜在的抗焦虑作用     

人参茎叶皂甙和人参根皂甙及赛庚啶对大鼠主动回避反应的影响

本文研究了人参茎叶皂甙（ＧＳＬＳ）和人参根皂甙（ＧＲＳ）及赛庚啶（ＣＹＤ）对大鼠穿梭箱主动回避反应的影响学习和记忆成绩用回避反应率（ＡＲ）和回避潜伏期（ＡＬ）评价．多次用药后，ＧＳＬＳ３０ｍｇ／ｋｇ通过显著增加ＡＲ和显著缩短ＡＬ而易化了１０月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ种鼠单路回避反应的学习和记忆获得，但损害了雄性大鼠双路回避反应的学习获得．多次腹腔注射ＧＳＬＳ３０ｍｇ／ｋｇ和ＧＲＳ４０ｍｇ／ｋｇ均相似显著改善了由东莨菪碱（０．８ｍｇ／ｋｇ）损害的Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠单路回避反应的学习和记忆获得．此处，单次腹腔注射ＣＹＤ０．５ｍｇ／ｋｇ通过显著减少ＡＲ和显著延长ＡＬ而损害了雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠双路回避反应的学习的记忆获得．     

大鼠不同类型学习记忆的发育变化研究

目的研究发育过程中不同类型学习记忆的变化特点.方法采用主动回避反应（AAR）、被动回避反应（PAR）、空间分辨记忆（SDM）和味觉厌恶条件反射（CTA）四种模式对学习和记忆过程进行系统研究。结果2月龄（2m）大鼠在AAR、PAR两种模式中，学习和记忆成绩最好，1m大鼠成绩最差;在SDM测试中，2m、6m大鼠的训练和测试成绩都强于1m大鼠;以足电震为非条件刺激的CTA模式中，年龄越小建立越快。结论大鼠发育过程中，不同类型的学习记忆有独特的时间出现过程.     

人白细胞相关抗原B27及细菌多肽在脊柱关节病发病中的作用

目的了解细菌多肽应具备什么基本条件才能被人白细胞相关抗原（ＨＬＡ）Ｂ２７递呈而导致脊柱关节病。方法以来自衣原体热休克蛋白６０、能与Ｂ２７分子结合的９肽作为原型，用人工方法将９肽的每一个氨基酸残基均以另外１９种氨基酸替换，将合成的１８０种９肽分别与Ｂ２７Ｔ２细胞孵育，观察其与抗Ｂ２７单克隆抗体Ｂ２７Ｍ２的反应性。结果与Ｂ２７分子结合的９肽其第２位氨基酸残基应是精氨酸，以其它１９种氨基酸替换均使Ｂ２７Ｍ２的反应性明显降低；第６，８，９位氨基酸残基的选择性亦较高，仅有６～８种氨基酸能诱导与Ｂ２７Ｍ２的反应性；第３，５，７位氨基酸残基没有什么选择性，几乎任何一种氨基酸残基对Ｂ２７Ｍ２反应性的影响均不大。结论第２，９位氨基酸残基是９肽与Ｂ２７紧密结合所必需的，而第６，８位氨基酸可能与抗Ｂ２７单克隆抗体的识别有密切关系     

精神分裂症动物模型学习记忆实验研究

目的研究精神分裂症动物模型大鼠学习记忆能力的变化特点。方法用MK801建立精神分裂症的动物模型。将动物分成正常组和模型组。采用主动回避反应(AAR),一次性被动回避反应(OPAR),空间分辨记忆(SDM)3种模式对学习记忆过程进行系统研究。结果在大鼠AAR实验中,对照组大鼠AAR习得率明显高于模型组,并且消退也慢于模型组;在大鼠OPAR实验中,大鼠电击24h后,模型组大鼠STL较短;在大鼠SDM实验中,模型大鼠操作错误的次数明显多于对照组,训练时不吃的次数亦多于对照组,对照组完成一次训练的总时间需要216s左右,而模型组大鼠需要306s左右。结论精神分裂症的动物模型伴有学习记忆能力下降,并与神经系统的谷氨酸含量密切相关。     

他莫昔芬对雌性大鼠学习记忆能力的影响

目的：探讨腹腔注射选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬（tamoxifen,TC）对雌性大鼠学习记忆能力的影响。方法：将60只成年雌性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、TC2．5mg·kg^-1组、TC5．0mg·kg^-1组、TC10．0mg·kg^-1组5组,采用Morris水迷宫、跳台及八臂迷宫等行为学实验检测TC对雌性SD大鼠空间辨别学习记忆能力、被动回避条件反射能力及主动学习记忆能力的影响。结果：与溶剂对照组相比,3周后,TC各剂量组被动回避条件反射能力明显下降（P〈0．05）,表现为跳台实验中的逃避潜伏期显著减少,错误反应次数明显增加。6周后,TC各剂量组大鼠的空间辨别学习记忆能力、被动回避条件反射能力及主动学习记忆能力均明显下降（P〈0．05）,表现为Morris实验定位航行的潜伏期增加,目的象限的停留时间减少,第一次到达平台的时间延长;跳台实验中逃避潜伏期显著减少,错误反应次数明显增加;八臂迷宫实验中主动学习过程中总路程明显延长,典型性错误次数显著增加。结论：雌性SD大鼠腹腔注射TC6周后,其学习记忆能力随着TC剂量的增加而降低,TC对雌性SD大鼠的学习记忆能力具有明显的损伤作用。