TOC检测法测定羟乙基淀粉200/0.5残留量

目的通过对羟乙基淀粉200/0.5残留量TOC检验方法的验证,确定羟乙基淀粉200/0.5残留量用该检验方法检测的定量限、线性、灵敏度和回收率(准确度),确保该方法对羟乙基淀粉200/0.5残留量浓度检测结果的准确性.方法总有机碳法.结果该检测方法的线性范围为0.200～2.000 ppm;检测方法的回收率为100.7%;擦拭法的回收率为73.0%;精密度与重复性良好;定量限为:0.002 ppm.确定了凡残留量0.002～2.000 ppm范围内均可采用此方法检测.结论此方法操作简单,精密度、准确度、重复性较好.     

毛细管气相色谱法测定多西他赛注射液溶剂中乙醇含量的方法学验证

目的：建立多西他赛注射液溶剂中乙醇含量的气相色谱测定方法。方法：气相色谱法：毛细管色谱柱;载气：氮气;检测器：氢火焰离子化检测器;起始温度为50℃,维持10min,再以每分钟10℃的速率升温至110℃;进样口温度：190℃;检测器温度：220℃;柱流量：3.2ml/min;进样量：1μl。结果：定量限、检测限、溶液稳定性、线性、耐用性、重复性、进样精密度经验证,结果均良好。结论：本法可用于多西他赛注射液溶剂中乙醇含量的测定。     

动态浊度法定量检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中细菌内毒素含量方法的验证

目的   对定量检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中细菌内毒素含量的动态浊度法进行验证。方法   采用动态浊度法定量检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中细菌内毒素含量，并对分析方法的线性、专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性进行验证。结果  动态浊度法的线性相关系数绝对值为0.996；最大有效稀释倍数下专属性回收率为68.81%~73.80%；准确度回收率为53.50%~77.77%；3名实验人员重复性相对标准偏差分别为2.0%、3.6%、2.0%；中间精密度相对标准偏差为7.6%；耐用性回收率为66.49%~108.34%。 结论   动态浊度法检测冻干甲型肝炎中的细菌内毒素含量的方法具有良好的专属性、准确度、线性、重复性、中间精密度和耐用性，符合定量检测和数据完整性的要求。     

冻干甲型肝炎减毒活疫苗三氯甲烷残留量检测方法的建立及验证

目的  建立准确可靠检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中三氯甲烷残留量的方法。方法  采用顶空气相色谱进行三氯甲烷残留量检测,用外标法计算三氯甲烷含量。对方法的专属性、线性、范围、准确度、精密度、定量限和耐用性进行验证。结果  三氯甲烷峰5次进样峰面积的相对标准偏差小于5%,且与其他峰分离度大于1.5。阳性对照溶液在相应保留时间处可见三氯甲烷峰,阴性对照溶液无三氯甲烷峰。三氯甲烷的浓度在10~1 000 ng/ml范围内与峰面积成线性关系。浓度为600 ng/ml的供试品溶液回收率在91.3%~99.0%之间,含量相对标准偏差均小于4%。定量限浓度为0.022 g/ml。结论  建立的三氯甲烷残留量检测方法具有良好的专属性、线性、范围、准确度、精密度和耐用性,符合定量检测的需求。     

GC法测定高哌嗪中乙二胺和哌嗪的残留量

目的 建立气相色谱法（GC）测定高哌嗪中杂质残留乙二胺和哌嗪。方法 采用GC法,色谱柱为CP-sil8 CB（30 m× 0.25 mm×0.50 μm）;进样口温度240℃;升温程序：60℃保持1 min,以5℃/min的速率升温至110℃,再以40℃/min的速率升温至200℃,保持3 min;检测器为氢火焰离子化检测器（FID）,检测器温度为250℃;载气为氮气;分流比为2∶ 1;进样方式为直接进样,进样量1 μL;体积流量：1 mL/min。结果 高哌嗪中乙二胺杂质和哌嗪杂质与主成分间均能有效分离,线性范围分别为20.2～161.7 μg/mL（r=0.999 8）,20.4～163.6 μg/mL（r=0.999 9）。重复性和精密度的RSD值均在规定范围内。结论 该方法适用于高哌嗪中乙二胺和哌嗪杂质的准确测定和质量控制。     

荧光染色法替代中国药典制药用水微生物检验的试验探讨

目的:验证荧光染色技术替代中国药典制药用水微生物检验的可行性。方法:根据微生物检验替代方法验证国内外相关法规的要求,以纯化水为对象,开展准确度、精密度(重复性和中间精密度)、专属性、定量限、线性、范围、耐用性等参数的验证研究,并采用统计学方法对各参数验证结果进行分析。结果:本研究中替代方法的准确度、精密度、定量限和范围相较于药典方法无显著性差异;同时替代方法具有良好的专属性、线性及耐用性。结论:本研究为微生物检验替代方法验证提供实际案例及参考。     

β-丙内酯残留量检测分析方法的建立及验证

目的  建立准确快速检测灭活疫苗中β-丙内酯（β-propiolactone , BPL）含量的分析方法。方法  采用气相色谱法进行BPL含量检测，用外标法计算BPL含量。对分析方法的专属性、系统适应性、线性和范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性进行验证。结果  BPL溶液和供试品溶液在相应保留时间内可见BPL峰，阴性对照溶液未出峰。BPL峰5次进样峰面积相对标准偏差小于2%且与其他峰分离度大于1.5。BPL的浓度在1.11~35.52 μg/ml范围内与峰面积成线性关系。浓度分别为2.22、4.44和8.88 μg/ml的供试品溶液回收率在97.3%~106.9%之间，相对标准偏差均小于3%。检测限为0.30 μg/ml，定量限为0.49 μg/ml。结论  建立的BPL检测方法具有良好的专属性、系统适应性、线性和范围、准确度、精密度、耐用性，符合定量检测的需求。     

检测黄热病减毒活疫苗中乳糖和山梨糖醇含量的HPLC的建立

目的  建立检测黄热病减毒活疫苗中乳糖和山梨糖醇含量的高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）,并验证该法。方法  建立的HPLC的色谱条件确定为：离子排斥色谱柱 Aminex^® HPX-87H （300 mm×7.8 mm）,流动相0.004 mol/L硫酸、流速0.8 ml/min、柱温50 ℃,进样量20 µl。检测该法的系统适用性,并验证该法的线性、准确度、精密度、专属性、稳定性和耐用性。结果  该法的乳糖与山梨糖醇峰间的分离度为6.68,乳糖和山梨糖醇标准曲线的线性良好,线性的决定系数分别为0.999 98和0.999 87。该法的准确度良好,乳糖和山梨糖醇的回收率分别为100.2%～100.4%和101.0%～101.7%,均符合规定的要求。 6次重复检测的乳糖和山梨糖醇结果相对标准偏差分别为0.00%和0.08%;2名分析员于不同时间检测12次的乳糖和山梨糖醇结果相对标准偏差分别为0.30%和0.99%。该法检测乳糖和山梨糖醇质量浓度的定量限分别为0.05 mg/ml和0.06mg/ml。结论  建立的HPLC可用于检测黄热病减毒活疫苗中的乳糖和山梨糖醇含量。     

HPLC法测定市售左羟丙哌嗪制剂中左羟丙哌嗪含量

目的建立HPLC法测定市售左羟丙哌嗪制剂中左羟丙哌嗪含量。方法色谱柱为Dia-monsil(钻石)C18(150mm4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(三乙胺调pH=3.0)(20:80),检测波长237nm。结果在22.3～223μg/ml线性范围内呈良好线性,r=0.9998,回收率为100.0%,RSD=0.84%。结论本方法简便、快速,可用于市售左羟丙哌嗪制剂的含量测定。     

HPLC法测定对氨基苯磺酸钠中的同分异构体

目的 建立测定对氨基苯磺酸钠中邻、间氨基苯磺酸钠的HPLC法。方法 METROSEP A SUPP5色谱柱（150 nm×4.0 nm，5 μm，METROHM），流动相为0.006 5 mol·L-1碳酸钠溶液-甲醇（90：10），有关物质等度洗脱，体积流量为0.6 mL·min-1，检测波长为240 nm，柱温为30℃，进样量为5 μL。考察所建立方法的系统适用性、专属性、定量限、检测限、精密度（重复性和中间精密度）、线性、准确度、溶液稳定性和耐用性。结果 建立的HPLC法系统适用性、专属性良好；邻、间氨基苯磺酸钠分别在0.005~0.050 μg·mL-1具有良好的线性关系；检测限、定量限、精密度、线性、准确度、溶液稳定性和耐用性均符合要求。3批对氨基苯磺酸钠中均未检测出间氨基苯磺酸钠和邻氨基苯磺酸钠。结论 该方法灵敏、简单，且专属性高，为实现邻、间氨基苯磺酸钠的准确定量提供了依据。     

NMM抗肿瘤DNA疫苗原液大肠杆菌菌体蛋白质残留量检测方法的建立与验证

目的 建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的双抗体夹心ELISA试验方法。方法 使用双抗体夹心ELISA试验方法检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白残留量,采用四参数logstic曲线进行回归分析,并对该方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证,验证通过对5批样品进行检测。结果 采用双抗体夹心ELISA试验方法进行大肠杆菌蛋白质残留量检测时,DNA疫苗原液无需进行稀释。NMM抗肿瘤DNA疫苗原液对大肠杆菌菌体蛋白质的检测无干扰及抑制作用,方法的专属性良好;本法检测限为0.41 ng/ml;定量限为0.98 ng/ml;该方法测定宿主菌蛋白质残留量在0～100 ng/ml范围内线性良好,R2≥0.9999;本方法重复性试验中宿主菌蛋白质含量RSD值均低于15%,中间精密度实验中样品吸光值RSD值低于10%,精密度结果良好。在检测线性范围内加入高、中、低3种浓度的大肠杆菌菌体蛋白,回收率均值为100.35%(n=9,RSD=3.58%);本方法检测实验条件发生微小变动时（不同人员、不同批次试剂盒）,对测定结果的影响...     

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗中庆大霉素残留量检测方法的验证

目的  验证口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）中庆大霉素残留量的检测方法。方法  应用庆大霉素ELISA试剂盒建立庆大霉素残留量的检测方法。对该方法标准曲线的线性、线性范围内的准确度、精密度、专属性、耐用性、检测限及定量限进行验证。结果  验证的标准曲线线性良好,相关系数>0.98。该法检测高、中、低浓度的庆大霉素标准品的回收率为92.7%～123.6%;检测同一批次的供试品的相对标准偏差为8%;不同试验人员检测同一批次供试品和不同批次试剂盒检测同一批次供试品,相对标准偏差均<15%;庆大霉素加样回收率为95.9%～121.3%;该法在（37±1） ℃温度范围内耐用性良好;该法测定庆大霉素的检测限为0.040 ng/ml,定量限为0.135 ng/ml。结论  用于检测口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）中庆大霉素残留量的方法是有效的。     

反相HPLC法测定雌酮硫酸酯哌嗪片的含量

目的:用高效液相色谱法测定雌酮硫酸酯哌嗪含量。方法:采用 ODS Hypersil色谱柱（5μm,250mm x 4.6mm）,以甲醇-乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液（20:20:60）为流动相,检测波长为213nm。结果:线性范围为雌酮硫酸酯哌嗪0.3-2.2μg/mL,r=0.9997;平均回收率为 99.36％,RSD=0.93％。结论:反相HPLC法测雌酮硫酸酯哌嗪含量快速、无干扰、精密度好、灵敏度高。     

LC-MS/MS法同时测定因卡膦酸二钠中磷酸三乙酯和亚磷酸二乙酯的含量

摘要：目的:建立同时测定因卡膦酸二钠中磷酸三乙酯、亚磷酸二乙酯杂质含量的LC-MS/MS方法。方法:采用WATERS ACQUITYUPLC HSS C18分析柱（30 mm×2.1 mm,1.8μm）,柱温为35℃,以0.1%甲酸水∶乙腈（7∶3,V/V）为流动相,流速为0.5 ml·min-1,进样体积为1μl。通过多反应离子监测模式（MRM）对磷酸三乙酯、亚磷酸二乙酯进行监测,其定量离子分别为m/z 127.1、m/z 111.1。结果:磷酸三乙酯与亚磷酸二乙酯分别在1.00～200.00 ng·ml-1及3.30～200.00 ng·ml-1检测范围内线性良好,线性相关系数r分别为0.999 7,0.999 9。分析方法的专属性、重复性、中间精密度、准确度、溶液稳定性、耐用性等验证参数均在2020版中国药典相应指导原则的规定范围内。结论:该LC-MS/MS定量方法准确度高、重复性好、耐用性强,可同时检测因卡膦酸二钠中磷酸三乙酯、亚磷酸二乙酯中的含量。     

结核DNA疫苗宿主蛋白残留检测方法的建立

目的 建立结核DNA疫苗中大肠杆菌宿主蛋白残留量检测的方法。方法 采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)建立结核DNA疫苗中宿主蛋白残留量检测的方法,对方法的准确度、专属性、线性范围和耐用性等进行验证,并采用建立的方法对结核DNA疫苗原液进行测定。结果 大肠杆菌宿主蛋白含量在2～24ng·L^-1范围内,相关系数R²>0.990,线性关系良好;该法宿主蛋白含量在高中低浓度范围内,回收率在70%～120%之内,准确度良好;该法不易受辅料、核酸、孵育温度和孵育时间影响,专属性和耐用性较好;三批原液的宿主蛋白残留量(HCP)均<1μg·mg^-1。结论 此方法有较好的准确度、专属性、重复性、中间精密度和耐用性,可用于结核DNA疫苗的宿主蛋白残留量的检测。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留定量PCR检测法的验证

目的  验证Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留定量PCR（quantitative PCR,qPCR）检测法。方法  用试剂盒提取Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗原液的DNA,采用qPCR法检测Vero细胞DNA,并验证方法的线性、专属性、准确性、精密度、耐用性及定量限;同时采用DNA探针杂交法检测样品。结果  qPCR检测Vero细胞DNA标准曲线在0.003 0~300.000 pg/μl之间线性良好;对Hep-2细胞、大肠埃希菌、酵母细胞DNA均无扩增反应;高、中、低浓度样品加标回收率在50%~150%,准确性良好;定量检出限为0.003 0 pg/μl;精密度良好（相对标准偏差＜15%）;反应体系配制好后置于2~8 ℃ 30 min后进行检测,相对标准偏差＜15%,耐用性良好。DNA探针杂交法与qPCR结果均小于0.1 pg/μl。 结论  qPCR检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留具有良好的线性、专属性、准确性、精密度和耐用性,可适用于该项检测。     

气相色谱法测定氟比洛芬酯中杂质1-溴乙基 乙酸酯及2-溴乙基乙酸酯的限度

目的：建立有效的气相色谱法测定氟比洛芬酯中1-溴乙基乙酸酯及2-溴乙基乙酸酯的限度的方法。方法：色谱柱：毛细管色谱柱;载气：氮气;检测器：电子捕获检测器;起始温度为50 ℃,维持3 min,以每分钟2 ℃的速率升温至80 ℃,维持5 min,以每分钟5 ℃的速率升温至100 ℃,再以每分钟20 ℃的速率升温至180 ℃,维持3 min;进样口温度：150 ℃;检测器温度：300 ℃;柱流量：4.0 mL·min-1;进样量：1 μL。结果：定量限、检测限、溶液稳定性、线性、耐用性、重复性、进样精密度经验证,结果均良好。结论：本法可用于氟比洛芬酯中测定两杂质的限度。     

气相色谱法测定氟比洛芬酯中杂质1-溴乙基 乙酸酯及2-溴乙基乙酸酯的限度

目的：建立有效的气相色谱法测定氟比洛芬酯中1-溴乙基乙酸酯及2-溴乙基乙酸酯的限度的方法。方法：色谱柱：毛细管色谱柱;载气：氮气;检测器：电子捕获检测器;起始温度为50 ℃,维持3 min,以每分钟2 ℃的速率升温至80 ℃,维持5 min,以每分钟5 ℃的速率升温至100 ℃,再以每分钟20 ℃的速率升温至180 ℃,维持3 min;进样口温度：150 ℃;检测器温度：300 ℃;柱流量：4.0 mL·min-1;进样量：1 μL。结果：定量限、检测限、溶液稳定性、线性、耐用性、重复性、进样精密度经验证,结果均良好。结论：本法可用于氟比洛芬酯中测定两杂质的限度。     

多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法的建立及验证

目的 建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法并进行验证。方法 以不同新型冠状病毒变异株mRNA为靶基因,选取各自保守序列设计引物和探针,建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法,并进行了线性范围、重复性、准确度、中间精密度、耐用性和适用性等方法学验证。结果 mRNA浓度在1～150 pg·mL^-1内时线性良好;重复性变异系数(coefficient of variation,CV)<10%;准确度回收率84%～114%,CV<10%;中间精密度和耐用性CV均<5%;并且4种不同二价新型冠状病毒mRNA疫苗组份比例检测结果CV均≤5%。结论 建立的多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法灵敏度高,稳定性好,特异性强,适用于多价新型冠状病毒mRNA疫苗进行组分比例和含量检测。     

气相色谱法测定猪凝血酶冻干粉中磷酸三丁酯残留量

建立了气相色谱法测定猪凝血酶中磷酸三丁酯残留量,并进行了方法学验证.采用聚乙二醇毛细管柱Agilent HP-INNOWAX(30 m×250μm×0.25μm),溶剂为正己烷;气化室温度190℃,分流比1:1,进样量1μl;FID检测器温度210℃;载气为高纯氮气,流速为3 ml/min;柱温150℃,运行时间13 min.结果显示该方法专属性强;标准曲线的线性范围为2.406~19.25μg/ml;低、中、高3个浓度水平的平均回收率分别为97.1%、101.1%和98.2%,总平均回收率为99.8%,总相对标准偏差为2.37%;中间精密度总标准偏差为5.01%;检测限为0.762μg/ml,定量限为2.54μg/ml;3批样品的磷酸三丁酯残留量均低于《中华人民共和国药典》2015年版三部的限量要求(<10μg/ml).该方法专属性强、准确度、精密度、稳定性、耐用性良好,可用于猪凝血酶冻干粉中磷酸三丁酯残留检测.