鲍曼不动杆菌多重耐药性和同源性分析

目的了解重症监护病房（ICU）的多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药谱特征及菌株同源性,为临床防治和控制院内感染提供依据。方法收集ICU重症监护病房2009年1～3月分离出的9株鲍曼不动杆菌,研究其耐药情况,并采用自动ribotyping技术进行同源性分析。结果 9株菌对头孢菌素类,氨基甙类等抗菌素均显示出较高水平的耐药性;ribotyping分型9株菌有高度同源性,其中7株同源性达90%以上。结论自ICU分离的鲍曼不动杆菌多重耐药率较高,且大多数菌株有高度同源性,因此,医院应加强ICU病房消毒隔离措施,降低病人院内感染的概率     

多重耐药鲍曼不动杆菌的抗生素治疗

近年来,因多重耐药鲍曼不动杆菌造成的院内感染比例明显增加,其对常用的多种抗生素耐药,治疗困难和病死率高,已成为困扰临床医师的难题。在此回顾近年来关于多重耐药鲍曼不动杆菌的抗生素治疗文献,可用于临床治疗的抗生素有舒巴坦、多黏菌素、米诺环素、替加环素和利福平,鉴于这些抗生素临床较少应用,现探讨四种药物的特点和作用,期望为临床和研究提供帮助。     

174株鲍曼/醋酸钙不动杆菌复合体临床分布及耐药性分析

目的了解鲍曼／醋酸钙不动杆菌复合体（A．calcoaceticus—A．baumanniicomplex,ACBcomplex）在笔者医院各临床科室的分布情况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法所有菌株均采用VITEK2一compact全自动微生物分析仪进行菌种鉴定及药敏分析。结果174株ACBcomplex主要来源于ICU病区（53．5％）,其次为成人外科病区（24．1％）和儿科病区（12．1％）。标本类型主要为痰液（81．2％）、血液（占5．2％）、创口渗出物（占4．0％）等。ACBcomplex对呋喃妥因、头孢唑林耐药率最高,达100％,而对头孢哌酮／舒巴坦的耐药率仅为1．2％。此外,本研究资料显示,耐亚胺培南ACBcomplex均为多重耐药菌株,约占所有菌株的46％。其中分离于成人患者的ACBcomplex对亚胺培南的耐药率为62．9％,而新生儿及儿童的ACBcomplex对其耐药率分别为6．7％和14％。结论笔者医院ACBcomplex主要分布于ICU病区,且耐药率高。多重耐药ACBcomplex已出现于儿科病区,应引起临床医师的足够重视,定期监测ACBcomplex临床分布和耐药情况,可为临床合理使用抗菌药物提供依据。     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因型研究

目的:了解我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因分布情况。方法:用三维试验检测15株多重耐药鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC、MBL(金属β-内酰胺酶)产酶情况;用PCR方法检测各种β-内酰胺酶基因。结果:三维试验检出2株菌产ESBLs;9株菌产AmpC;3株菌合产ESBLs和AmpC酶;3株菌产MBL(均同时产AmpC)。PCR检出15株菌均携带blaTEM基因;2株菌携带blaPER-1基因;14株菌携带AmpC基因;未检出产金属β-内酰胺酶基因。结论:我院多重耐药的鲍曼不动杆菌多含有blaTEM基因和AmpC基因,也首次发现部分产PER型ES-BLs鲍曼不动杆菌。     

对一组醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体细菌的基因型鉴定

目的 探讨鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种的有效方法。方法 运用全自动细菌鉴定系统联合分子生物学方法,经聚合酶链式反应（PCR）扩增鲍曼不动杆菌特异表达的D类碳青霉烯酶基因OXA-51、16S rRNA及醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种特异表达的gyrB基因,以准确鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种种属。结果 20株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体经全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定均与原始种属相一致;经分子生物学方法鉴定结果为Acinetobacter baumannii 16株,Acinetobacter calcoaceticus 3株,Acinetobacter nosocomialis 1株。结论 全自动菌种鉴定系统辅以分子生物学基因分型方法可较为准确地鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各个菌种。gyrB基因作为到种鉴定标志物对于高度亲缘性菌种的鉴定价值更大。     

院内感染多重耐药鲍曼不动杆菌的同源性分析

目的:了解各科室出现的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)是否存在同源性问题,为临床治疗、医院感染控制提供依据。方法:收集2011年9月～2012年1月间由临床标本分离的多重耐药菌株22株,用PFGE方法对其同源性进行研究。结果:22株MDR-Ab分别来自于4组不同分型的克隆株,且其中16株有高度同源性。结论:多个相同克隆株在不同科室及个体间的相互传播可能是医院内鲍曼不动杆菌感染的原因之一。重视医护人员手卫生、加强消毒隔离措施、合理应用抗生素可作为控制医院MDR-Ab感染的重要手段。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性与AmpC耐药基因的研究

目的 了解我院临床分离的60株多重耐药鲍曼不动杆菌(multi-drug resistant Acinetobater baumannii,MDRAB)的耐药性和AmpC耐药基因的存在状况.方法 采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,对该细菌进行总DNA的提取,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因,结合药物敏感试验分析菌株的耐药特征.结果 检出结构基因ampC型49株,占81.7%:blaADC基因型50株,占83%;ACT基因型2株;41株菌同时携带blaADC和ampC结构基因,占68%;2株同时携带blaADC、ACT和ampC结构基因;未检测到其它AmpC耐药基因(MOX、CIT、FOX、DHA).携带AmpC耐药基因的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对于丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%.结论 多重耐药鲍曼不动杆菌的blaADC耐药基因和ampC结构基因同时携带率高,并且是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因.     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶分析

目的分析临床分离的4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性及β-内酰胺酶.方法采用浓度梯度法(E test)测定亚胺培南等12种抗菌药物对4株菌株的最低抑菌浓度(MIC),脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,等电点聚焦电泳(IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)及克隆测序等方法分析β-内酰胺酶.结果4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌来自同一克隆株,耐药谱基本一致,仅1株对头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦中度敏感,对其余抗菌药物均高度耐药.三维试验显示4株细菌存在能水解亚胺培南的酶.3株细菌有pI 5.4、5.8、6.6、7.2条带,另1株少pI 5.8条带,pI 5.4、5.8条带均能被克拉维酸抑制.PCR扩增产物经克隆测序证实同时存在OXA-23、PER-1基因.结论存在同时产OXA-23型碳青霉烯酶和PER-1型超广谱β-内酰胺酶的鲍曼不动杆菌引起的医院感染.     

多重耐药鲍曼不动杆菌药敏情况分析

目的分析多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分离和药敏情况,并与普通鲍曼不动杆菌的情况进行比较。方法回顾性分析49株多重耐药鲍曼不动杆菌和498株普通鲍曼不动杆菌的耐药情况,采用χ2检验分析两类细菌对常用抗菌药物的敏感性差异。结果药敏实验证实产鲍曼不动杆菌多重耐药株和普通株除对阿米卡星、多粘菌素B、氯霉素、氨曲南和头孢唑啉的敏感性差异无统计学意义外(P0.05),对其他抗菌药物如亚南培南、环丙沙星等的敏感性都存在显著性差异(P0.05),多重耐药鲍曼不动杆菌对很多抗菌药物的耐药率相比普通株都有很大程度的提高。结论多重耐药鲍曼不动杆菌存在耐药机制的多样性情况,在临床确诊鲍曼不动杆菌多重耐药株感染时应根据药敏结果合理用药,同时应珍惜使用对多重耐药鲍曼不动杆菌和普通鲍曼不动杆菌治疗同样有效的多粘菌素B及阿米卡星等抗菌药物。     

鲍曼不动杆菌耐药性研究

目的:了解河北省临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药情况,及时监测其耐药现状,为临床治疗提供合理的指导和参考。方法:收集了2004年1月～2008年7月河北省二院(43株)、河北省三院(6株)、河北省四院(2株)、唐山工人医院(12株)、沧州中心医院(11株)、石家庄市医院(8株)、邢台市人民医院(5株)、徐水市医院(3株)临床分离的不同来源的90株鲍曼不动杆菌,分析了菌株的标本来源和医院科室分布情况;测定了美罗培南等7种抗生素的MICs值;结果:(1)90株鲍曼不动杆菌中,来源于痰标本最多,为82株,占91.2%;其他标本依次为分泌物3株(3.3%),尿液2株(2.2%),耳分泌物、脓液、咽拭子各1株,均占(1.1%)。(2)90株鲍曼不动杆菌中,从ICU患者分离的菌株最多,为30株,占33.2%;其他依次为呼吸内科18株(20.0%)、神经外科病房7株(7.8%)、急诊科6株(6.7%)。(3)MICs测定结果:90株鲍曼不动杆菌中,81株对一种及以上抗生素耐药,耐药率为90.0%(81/90),69株对三种以上生素耐药,耐药率为76.7%(69/90)。其中美罗培南(MEM)、亚胺培南(IPM)敏感率分别为58.9%、51.1%,头孢哌酮/舒巴坦(CFP/SB)敏感率为30.0%、左氧氟沙星(LVLX)敏感率为21.1%、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)敏感率20.0%、阿米卡星(AKN)、头孢他啶(CAZ)敏感率分别为16.7%和15.6%。结论:(1)多个科室患者均可受鲍曼不动杆菌的感染,以ICU患者感染率最高;鲍曼不动杆菌可引起病人多部位感染,以呼吸道感染率最高。(2)鲍曼不动杆菌中耐药率很高,且多呈多重耐药。在临床常用的7种抗菌药物中,无一种能完全抑制鲍曼不动杆菌,其中美罗培南和亚胺培南敏感率较高,而头孢他咤和阿米卡星耐药率较高。     

多重PCR检测鲍曼不动杆菌氨基糖苷乙酰转移酶相关基因

目的分析aac耐药基因亚型在临床分离的耐氨基糖苷类鲍曼不动杆菌中的检出情况,建立检测鲍曼不动杆菌耐药性的分子生物学方法。方法对从临床分离的42株鲍曼不动杆菌,进行药敏试验同时行aac耐药基因PCR检测。结果本地区所分离的鲍曼不动杆菌对庆大霉素耐药率最高(57%),对丁胺卡那耐药率较低(29%)。在对妥布霉素、庆大霉素、丁胺卡那至少一种耐药的鲍曼不动杆菌中,除2株细菌外,均检测到乙酰转移酶基因,其中6株有aac(6′)-Ih、20株为aac(3)-Ia、14株含aac(6′)-Ib、14株同时含aac(3)-Ia和aac(6′)-Ib。结论本地区鲍曼不动杆菌对临床常用氨基糖苷类抗生素庆大霉素耐药率高,其耐药主要是由aac(3)-Ia、aac(6′)-Ib编码的酶引起。     

利用微卫星多重PCR技术鉴定剑尾鱼RR-B系

目的建立多重PCR技术鉴定选育剑尾鱼RR-B系的方法。方法根据可明显鉴定剑尾鱼RR-B系的6对特异性微卫星引物Msa012、Msa014、Msa033、Msb025、Msd003、Msd051,采用不同的组合方式对RR-B系剑尾鱼和红眼红体的非选育剑尾鱼进行多重PCR扩增。结果引物组合1(Msa014、Msb025、Msd003)和组合2(Msa012、Msa033、Msd051)两个三重PCR反应体系能清楚的扩增各个微卫星座位,且各目的片段之间无干扰,易于识别,引物组合1的排除概率为99.98%,引物组合2的排除概率为99.96%,能准确鉴定剑尾鱼RR-B系。结论本检测方法具有较高的稳定性,可快速准确鉴定剑尾鱼RR-B系。     

重复片段引物PCR用于鲍曼不动杆菌分型研究

目的 运用重复片段引物PCR的分析方法对鲍曼不动杆菌进行分子分型研究。方法 选用肠杆菌科基因间的重复序列（ERIC）为引物进行PCR扩增，对22株鲍曼不动杆菌进行分型研究，并与生物学分型及抗生素耐药结果进行比较。结果 经重复片段引物PCR的方法，分离出6种不同基因型的鲍曼不动杆菌，而生物学分型只有2种，且与抗生素谱较为相关。该方法简便易行，且重复性好，适合于医院感染流行病学研究。     

应用多重反转录PCR技术检测病毒性呼吸道感染

目的：为了寻求呼吸道感染病毒的快速诊断并指导治疗，建立一种多重反转录PCR体系。方法：分别设计针对肠病毒、腺病毒、乙型流感病毒和甲型流感病毒标准株的特异性引物，采用多重反转录PCR检测4种病毒。结果：应用此多重反转录PCR系统可以特异的同时检测到同一模板中的肠病毒、腺病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒。通过用多重反转录PCR和单一PCR对36份临床标本的检测相比较，结果表明多重反转录PCR的检测与单一PCR的检测结果是一致的。结论：通过与单一的PCR对比，证明该多重反转录PCR系统可替代单一的PCR用于肠病毒、腺病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的呼吸道感染的快速诊断。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌苯唑西林基因型分析

目的了解我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带苯唑西林（oxacillin,OXA）基因型的情况,为医院感染监控及流行病学调查提供科学依据。方法采用多重PCR方法,分析2010年4-12月我院住院患者分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌68株的OXA基因型。结果 68株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中,7株只携带OXA-51基因（检出率约为10.29%）,60株同时携带OXA-51和OXA-23基因（检出率约为88.24%）,1株同时携带OXA-51和OXA-58基因（检出率约为1.47%）,未扩增到OXA-24基因。结论我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带OXA基因以OXA-51＋OXA-23基因型为主,实验室应加强对产酶菌株的监测。     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药分析及基因型研究

目的 分析20株鲍曼不动杆菌对耐碳青霉烯类抗生索的耐药性及对碳青霉烯酶基因的研究.方法 用API鉴定条进行细菌鉴定及K-B法进行药敏试验,用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增和基因型的测序分析.并通过网上Genbank进行比对以确定编码酶基因的类型.结果 20株鲍曼不动杆菌对左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多粘菌素B的耐药率分别为50%、25%、4%.其它抗生素的耐药率均在90%以上.携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有17株(85%),携带OXA-51基因有15株(75%),OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增为阴性.随机各抽取3株OXA-23基因阳性株进行测序后通过在网上Genbank比对发现与OXA-23标准株99%同源,OXA-51基因阳性株与OXA-51标准株98%同源.结论 本院耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的耐药率最低,其次是丁胺卡那霉素,以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主,应引起临床高度重视,防止在院内广泛传播.     

泛耐药鲍曼不动杆菌引起医院感染情况研究

目的评估环境中鲍曼不动杆菌导致医院感染的风险。方法采集相应环境标本,分离鉴定其中的鲍曼不动杆菌,分析临床分离菌和环境分离菌的耐药性差异。结果自临床患者分离了3株多重耐药鲍曼不动杆菌,自环境物品表面采集了20份样品,分离出了1株鲍曼不动杆菌。经检测临床和物体表面分离出的鲍曼不动杆菌均为多重耐药菌,对临床常用抗生素均表现为耐药。结论临床分离株与环境物表分离菌具有高度一致性,提示环境中存在的鲍曼不动杆菌有导致医院感染的风险,须加强医院环境消毒和监控。     

不动杆菌医院感染流行病学调查及耐药性现状

不动杆菌广泛存在于自然界、医院环境及人体皮肤表面,为条件致病菌,已成为严重的医院感染病原菌。由于该菌耐药性不断增强,大多数为多重耐药,临床治疗十分棘手,因此了解不动杆菌的临床分布特征及耐药性机制对有效治疗和预防该菌感染非常重要。本综述通过资料的总结,掌握医院内该菌感染现状和耐药性特征,对其进行预防和合理使用抗生素治疗提供了有效的资料。     

Multiplex Polymerase Chain Reaction for Rapid Identification of Diarrheagenic Escherichia coli

Despite the fact that diarrhaegenic Escherichia coli (DEC) has been identified as a major etiologic agent of childhood diarrhea which represent a major public health problem in developing countries, only a few studies have been performed in Bangladesh to identify these organisms. To detect DEC in patients with acute diarrhea, a total of 300 stool specimens were tested by multiplex polymerase chain reaction (PCR). The multiplex PCR was designed for the detection of target genes of "eae" for enteropathogenic E. coli (EPEC), "stx" for enterohemorrhagic E. coli (EHEC), "ipaH" for enteroinvasive E. coli (EIEC), "aspU", "CVD432" and "aggR" for enteroaggregative E. coli (EAEC) as well as "elt" and "est" for enterotoxigenic E. coli (ETEC). Out of 300 stool specimens collected from patients with acute diarrhea, the DEC was detected in 18% (54/300) cases. The dominating strain was ETEC (13%, 39/300), followed by EAEC (5%, 15/300) and no EHEC, EIEC and EPEC could be detected. Both heat-stable toxin (ST) and heat-labile toxin (LT) genes of ETEC were detected in 66.68% (26/39) strains and only ST or LT as single gene was detected in 23.07% (9/39) or 10.25% (4/39) strains respectively. The multiplex PCR assay could be used as a rapid as well as efficient diagnostic tool for identification of DEC in the clinical laboratory settings.     

多耐药鲍氏不动杆菌对替加环素的耐药分析

目的探讨替加环素对多耐药鲍氏不动杆菌的体外抗菌活性。方法从2009年4月至2010年3月中山大学附属第三医院住院患者中分离41株多耐药鲍氏不动杆菌(multidrug-resistant Acineto bacterbaumannii,MDR-AB),采用SIEMENS公司MicroScan Walk Away40全自动微生物鉴定仪鉴定菌株,用K-B法测定鲍氏不动杆菌对12种抗菌药物的敏感性。结果鲍氏不动杆菌主要分离自痰标本,占80.5%;病区主要分布在ICU(37%)和神经外科(22%)。除亚胺培南外,其余11种抗菌药物的非敏感率均大于80%。替加环素的非敏感率为80.4%,敏感率为19.5%;亚胺培南的敏感率最高,为36.6%,非敏感率为63.4%。结论多耐药鲍氏不动杆菌对替加环素的非敏感率很高,可能与外排泵系统有关。替加环素对MDR-ABA感染的治疗效果不容乐观。