抗氧化营养素对DNA损伤的保护作用

（１）目的探讨抗氧化营养素对ＤＮＡ氧化损伤的影响。（２）方法实验分为实验组和对照组，实验组（ｎ＝２５）连续服用β－胡萝卜素，维生素Ｃ和Ｃ（ＶｉｔＥ，ＶｉｔＣ）２８０ｄ，对照组（ｎ＝２５）未服药，两组均取全血分离淋巴细胞，反应单细胞琼脂电泳（ＳＣＧＥ）检测ＤＮＡ的自发损伤及经不同浓度Ｈ２Ｏ２（３０，１００，３００μｍｏｌ／Ｌ）处理后的ＤＮＡ损伤程度。（３）结果两组淋巴细胞自发性ＤＮＡ损伤率都很低，分     

褪黑素对氧化损伤培养心肌细胞的保护作用

目的　建立心肌细胞氧化损伤模型 ,探讨褪黑素(MT)的保护作用 .方法　 1采用两种荧光探针 DCFH- DA和 Fluo- 3- AM分别标记细胞 ,用激光共聚焦显微镜观察低浓度 H2 O2 对心肌细胞内活性氧 (ROS)和游离钙 ([Ca2 + ]i)的影响 . 2 TBA法检测不同时间细胞丙二醛 (MDA)含量 . 3生化法检测细胞内乳酸脱氢酶 (L DH)的漏出量 . 4台盼拒染法观察心肌细胞存活率 .结果　与对照组相比 ,低浓度 H2 O2(10 0 mol· L- 1 )可使细胞内 ROS、[Ca2 + ]i、MDA、L DH明显升高 (P<0 .0 1)和细胞存活率明显下降 (P<0 .0 1) ;MT预处理后细胞内 ROS、[Ca2 + ]i、MDA、L DH升高明显减弱 ,细胞存活率明显升高 ,两组相比差异显著 (P<0 .0 1) .结论　 MT从多个方面都表现出良好的抗过氧化损伤效果 ,具有明显保护损伤心肌细胞的作用     

仙草提取物对小鼠脾淋巴细胞DNA氧化损伤保护作用的研究

目的:观察仙草提取物对原代培养脾淋巴细胞H2O2所致DNA氧化损伤的保护作用。方法:原代培养24 h的脾淋巴细胞悬液,随机分为6组,其中4组细胞用不同浓度的仙草提取物溶液预先处理60 m in,再加入50μm o l/L的H2O2,H2O2染毒组直接加入相同浓度的H2O2,空白对照组加入等量的PBS溶液,6组细胞共同在4℃下染毒20 m in,收获细胞同时进行单细胞凝胶电泳,最后用激光共聚焦显微镜拍摄图像,计算DNA迁移的细胞率和总彗星长度。结果:H2O2可致原代培养脾淋巴细胞DNA的严重损伤,而仙草提取物能不同程度地降低H2O2诱导产生的DNA损伤,在10、50、100μg/m l的浓度下,彗星细胞出现率从阳性对照组的100%分别降低为88%、60%和36%(P分别<0.05、0.01、0.01),总彗星长度也从对照组的(49.56±6.94)μm,逐渐降低为(41.14±5.64)μm、(38.89±9.81)μm、(28.62±4.66)μm(P分别<0.05、0.01、0.01)。结论:仙草提取物具有显著的抗氧化功能,能在一定浓度范围内保护细胞免受氧自由基对DNA的氧化损伤。     

茶多酚对DNA损伤保护作用的机制

茶多酚是从绿茶中提取的多酚类化合物，主要包括黄烷醇（亦称儿茶素）约占80％，黄酮类约占4％、茶多酚酸类约占5％及花色素类约占3％，具有多种生物学活性和药理作用。许多学者对茶多酚的功能进行了大量研究，发现茶多酚有抗突变、抗肿瘤、预防癌症、降血脂、抗动脉硬化与防治高血压、抗病毒、调节机体免疫功能等作用。近年来，茶多酚对DNA损伤的保护作用及其机制的研究成为新热点，现就茶多酚对DNA损伤保护作用及其机制的研究进展综述如下。     

抗氧化营养素对DNA损伤的保护作用

①目的探讨抗氧化营养素对ＤＮＡ氧化损伤的影响。②方法实验分为实验组和对照组，实验组（ｎ＝２５）连续服用β－胡萝卜素、维生素Ｅ和Ｃ（ＶｉｔＥ，ＶｉｔＣ）２８０ｄ，对照组（ｎ＝２５）未服药。两组均取全血分离淋巴细胞，应用单细胞琼脂电泳（ＳＣＧＥ）检测ＤＮＡ的自发损伤及经不同浓度Ｈ２Ｏ２（３０，１００，３００μｍｏｌ／Ｌ）处理后的ＤＮＡ损伤程度。③结果两组淋巴细胞自发性ＤＮＡ损伤率都很低，分别为１２．３和１２．１专用单位，两组比较无显著性差异（ｔ＝０．０６３，Ｐ＞０．０５）。经ＤＮＡ诱裂剂Ｈ２Ｏ２处理后，两组均随Ｈ２Ｏ２剂量的增加而呈现出ＤＮＡ损伤程度的逐渐加重，但在相同剂量条件下，实验组的ＤＮＡ损伤程度均明显低于对照组，均有显著性差异（ｔ＝２．３２０，Ｐ＜０，０５；ｔ＝３．９５０，Ｐ＜０．０１；ｔ＝５．５４９，Ｐ＜０．０１）。④结论抗氧化营养素有降低ＤＮＡ损伤的作用。     

DNA氧化损伤在肺癌发生中的作用

目的:为探明DNA氧化损伤在人群肺癌发生中的作用及其分子机制而进行本研究。方法:使用针对DNA经受氧化损伤标志物8-羟基-脱氧鸟苷(8-OH-dG)的鼠抗人单克隆抗体,通过免疫学方法检测150例肺癌、120例癌旁肺组织、40例肺良性病变和40例正常肺组织中DNA氧化损伤标志的含量;同时检测相应肺组织中P53、C-MYC、K-RAS、BCL-2、hTERT等癌变相关基因的表达,分析DNA氧化损伤与上述癌变相关基因表达的关系;并在B(a)P-7,8二醇-9,10环氧化物(BPDE)和NiS诱导的体外人气管上皮细胞癌变模型上检测癌变过程中DNA氧化损伤的变化。结果:肺癌组织、癌旁肺组织、肺良性病变和正常肺组织氧化损伤标志物8-OH-dG的阳性率分别为92.7％(139/150)、17.5％(21/120)、10.0％(4/40)和5.0％(2/40),肺癌的氧化损伤高于其他肺组织(P<0.01)。按性别、年龄、细胞类型和吸烟史分层,未见其与DNA氧化损伤之间的关联。分析DNA氧化损伤与癌变相关基因的关系,发现肺癌组织K-RAS、BCL-2基因的过度表达与DNA氧化损伤的含量高有关,而P53、C-MYC和hTERT基因表达与DNA氧化损伤无关联。在体外用BPDE和NiS作用于人气管上皮细胞系诱导其转化和癌变过程中,DNA氧化损伤标志8-OH-dG出现于细胞转化之前,其量与细胞癌变进程相一致。结论:DNA氧化损伤在肺癌变的过     

废气煤烟颗粒提取物诱发DNA氧化损伤的实验研究

目的：观察煤烟颗粒诱发ＤＮＡ氧化损伤及其可能机制。方法：应用ＥＳＲ波谱技术分析测定煤烟颗粒的自由基性质结构信息;应用ｕｄｅｎｆｒｉｅｎｄ反应体系研究其对ＤＮＡ氧化损伤作用。结果：ＥＳＲ分析显示煤烟颗粒的ｇ值为２．００１６,近似半醒自由基ＱＨ性质;可诱发脱氧核糖（ｄＲ）或脱氧腺苷（ｄＡ）羟化降解,羟自由基清除剂ＤＭＳＯ和甘露醇能抑制这种效应。燃油烟颗粒的ｇ值为２．１００８,宽谱,类似大气中飘尘自由基     

自由基对线粒体DNA的氧化损伤与衰老

自由基是一类氧化剂，对生物具有多中损害作用，衰老的自由基学是有关衰机理的诸多学说之一，线粒体ＤＮＡ组成结构特殊，易受自然基攻击；目前认为，线粒体ＤＮＡ的氧化损害是由自由基引起衰老的分子基础。     

DNA氧化损伤模型的构建

目的探索Fenton反应(Fe2+H2O2→Fe3++     

双环醇对刀豆蛋白A 所致小鼠肝细胞核DNA损伤的保护作用

目的探讨双环醇对刀豆蛋白A(ConA)引起小鼠肝脏细胞核和DNA损伤的保护作用。方法用ConA诱发小鼠肝损伤模型,观察双环醇对血清转氨酶(ALT),肝细胞核DNA片断化、肝细胞核内DNA对CuSO4-邻啡罗啉-维生素C-H2O2系统损伤的敏感性以及肝脏中H2O2含量的作用。结果双环醇50、150mg/kg灌胃能保护ConA引起的小鼠肝损伤,降低血清中ALT水平,P值分别小于0.05、0.01;减轻肝脏细胞核和DNA的损伤,荧光测定DNA片断化数值降低（P<0.05,P<0.01）,DNA条带出现百分率由ConA组的100%降低至25%;防止肝细胞核DNA对CuSO4-邻啡罗啉-维生素C-H2O2系统损伤的敏感性的降低,并能阻抑肝脏H2O2的升高（双环醇150mg/kg组P<0.05）。双环醇在体外加药（终浓度分别为4,16,64×10-7mol/L）也能直接保护CuSO4-邻啡罗啉-维生素C-H2O2系统对纯品DNA的损伤。结论双环醇对ConA引起的小鼠肝细胞核DNA损伤具有明显的保护作用。     

左卡尼汀对心肌细胞H2O2损伤的保护作用

目的 研究左卡尼汀对H2O2引起的心肌细胞损伤的保护作用.方法 利用体外培养乳鼠心肌细胞,0.2 mM H2O2作用12 h建立氧化应激损伤模型,观察不同浓度左卡尼汀(50,100,200 mg/L)对心肌细胞活力、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果 与正常组比较,模型组细胞活力下降,细胞MDA含量增加,SOD活性下降(P＜0.01);与模型组比较,不同浓度的左卡尼汀可以提高心肌细胞活力,降低细胞MDA含量,增加SOD活性.结论 左卡尼汀对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用.     

Protective Effects of Alismatis Rhizoma on H2O2-induced Damage of Vascular Endothelial Cells

目的 观察泽泻含药血清对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞活性、形态学、SOD及NO的影响,探讨泽泻含药血清抗氧化损伤的可能机理.方法 100μmol/L H2O2造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,cck-8法检测各组细胞增殖情况;黄嘌呤氧化酶法和硝酸还原酶法检测各组细胞上清液中SOD的活力和NO含量.结果 100μmol/LH2O2可抑制血管内皮细胞活性,降低SOD活力和NO的分泌,而泽泻则能改善100 μmol/L H2O2对血管内皮细胞的损伤,对血管内皮细胞具有一定的保护作用.结论 泽泻可以通过调控抗氧化损伤机制保护血管内皮细胞,这可能是泽泻抗氧化损伤机理所在.     

硫化氢对H2O2损伤PC12细胞的保护作用

目的 探讨硫化氢对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用.方法 以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,甲氮甲唑蓝法检测细胞增殖状况;Hoechst荧光染色观察细胞形态和核形态;碘化丙啶染色、流式细胞术检测细胞凋亡.结果 硫化氢可明显减少H2O2诱导的PC12细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数;200和400 μmol/L硫化氢均可降低200和400 μmol/L H2 O2作用24 h后对PC12细胞生长的抑制率,明显抑制200和400 μmol/L H2O2作用24 h后对PC12细胞凋亡的诱导作用.结论 硫化氢对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用.     

硫胺素和核黄素对H2O2诱导的DNA氧化损伤的影响

目的 探讨硫胺素和核黄素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞ECV304的DNA氧化损伤的影响.方法 于细胞培养液中分别加入硫胺素(终浓度为10、100、500、1000 mg/L)或核黄素(终浓度为20、100、300、500 nmol/L)预处理24 h,给予H2O2(终浓度为25 μmol/L)反应30 min,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)分析DNA氧化损伤情况.以不加H2O2、硫胺素和核黄素者为阴性对照组;以加H2O2而不加硫胺素、核黄素者为阳性对照组.结果 H2O2诱导ECV304细胞DNA断裂损伤,SCGE分析显示,阳性对照组拖尾细胞率、彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩等指标均较阴性对照组升高;经10、100、500 mg/L硫胺素或20、100、300 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标均较阳性对照组显著下降(P<0.05或P<0.01);经1000 mg/L硫胺素或500 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 适宜浓度的硫胺素和核黄素能降低H2O2诱导的DNA氧化损伤,高浓度的硫胺素和核黄素不能保护H2O2诱导的DNA氧化损伤.     

白藜芦醇对过氧化氢诱导鼠晶状体上皮细胞凋亡保护作用的实验研究

目的 探讨白藜芦醇对过氧化氢(H2O2)诱导鼠晶状体上皮细胞凋亡损伤的保护作用.方法 取健康SD大鼠透明晶状体60只,随机分为5组,每组12只,分别给予高、中、低剂量(5、10、20μmol/L)的白藜芦醇和100 μmol/L H2O2,利用透射电镜观察超微结构变化并测定凋亡因子caspase-3及caspase-9的表达.结果 伴随白藜芦醇给药浓度的增加,透射电镜下鼠晶状体上皮细胞损伤的程度减轻,此外,白藜芦醇对caspase-3及caspase-9的表达具有抑制作用.结论 白藜芦醇可以抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞的凋亡,对氧化损伤性白内障具有预防作用,为寻求有效防治白内障药物提供了可靠的实验依据.     

红景天苷对H2O2诱导子鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨红景天苷对H2O2诱导子鼠心肌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法在原代培养的SD大鼠子鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量红景天苷（10、30、90μg／m1）对心肌细胞凋亡率、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。结果红景天苷可以减少心肌细胞凋亡率,降低MDA和LDH含量,增加SOD活性。结论红景天苷对H2O2诱导的子鼠心肌细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与其抗脂质氧化有关。     

羟基积雪草苷对氧化应激条件下黑素细胞的保护作用及其诱导自噬机制的研究

目的：积雪草是一种传统中医药物,具有很多医学作用,如创伤愈合和抗氧化。中医也发现它可用于白癜风复色和炎症后色素沉着。本研究评估羟基积雪草苷对氧化应激下人黑素细胞作用效果及机制。方法：正常的人黑素细胞予 0.01 mmol/L 过氧化氢处理,再予不同浓度的羟基积雪草苷（0、10、50、100 μg/mL）。评估人黑素细胞树突的回缩速率,流式细胞术及细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)检测线粒体膜电位（MMP）,透射电子显微镜(TEM)观察线粒体超微结构,吖啶橙染色检测自噬,蛋白质印迹检测自噬体形成的指标LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 的比值。结果：在过氧化氢引发的氧化应激条件中,羟基积雪草苷在一定浓度下抑制了黑素细胞树突的回缩,提高了膜电位并减少了 [Ca2+]i的积累,减弱了线粒体的损伤,增强了自噬活动。结论：人黑素细胞遭受氧化应激损伤时,羟基积雪草苷可通过自噬激活起到抗氧化作用。因此,羟基积雪草苷可成为氧化应激引起的白癜风的有效治疗手段。     

Research on the effect of contents from Saururus chinensis on H2O2-induced LO2 Cell Damage

目的 研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用.方法 供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7'R,8'R)- 3,3',4,4’,5,5'-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵A、里卡灵B、三白草素、二氢愈创木酸;黄酮类成分:异槲皮苷、槲皮苷.LO2细胞接种于96孔板培养,加入100 μmol/L的受试成分,培养24 h后加入20 μL 1.2 mmol/L H2 O2作用1h.使用MTT法检测各组细胞存活率.结果 异槲皮苷和槲皮苷对H2O2损伤LO2细胞有显著保护作用,里卡灵A和二氢愈创木酸对细胞有显著损伤作用.结论 该实验可以为三白草保肝作用的研究提供理论基础.     

盐酸右美托咪定对H2O2诱导的肺泡巨噬细胞氧化应激的影响

目的：观察n2肾上腺素受体激动剂盐酸右美托咪定是否能够对抗过氧化氢（H2O2）诱导的肺泡巨噬细胞氧化损伤。方法：选择合适浓度H2O2和作用时间建立细胞氧化损伤模型,应用0．01,0．10,1．00umol／L浓度盐酸右美托咪定分别处理24h后,再应用MT比色法检测H2O2诱导的损伤细胞的存活率;用相应试剂盒测定细胞乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenase,LDH）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）释放量。结果：50～300Fmol／LH2O2浓度依赖性地引起肺泡巨噬细胞氧化损伤,降低细胞存活率,增加LDH和TNF-a释放。0．01～1．00Fmol／L盐酸右美托咪定可以浓度依赖性地对抗H2O2诱导的细胞氧化损伤,使细胞存活率明显增加,减少LDH和TNF-α释放,这种作用具有剂量依赖性。α2受体拈抗剂育亨宾能够完全拈抗盐酸右美托咪定的这种保护作用,并且育亨宾本身对细胞的氧化损伤没有影响。结论：盐酸右美托咪定能保护肺泡巨噬细胞对抗H2O2诱导的氧化应激损伤,此作用可能通过α2肾上腺素受体发挥作用。