补肾调冲含药血清对离体卵巢颗粒细胞Bcl-2、P53蛋白表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对大鼠离体卵巢颗粒细胞原癌基因蛋白表达的影响。[方法]采用血清药理学的方法,以不同含药量的大鼠血清与体外培养的卵巢颗粒细胞共同孵育24 h,用免疫组化法检测Bcl-2、P53蛋白的表达。[结果]补肾调冲含药血清可增强Bcl-2蛋白的阳性表达。[结论]原癌基因作为卵巢内局部调节因子,参与卵巢颗粒细胞凋亡过程。补肾调冲含药血清可通过促进卵巢颗粒细胞内抑癌基因的蛋白表达,抑制颗粒细胞的凋亡。     

补肾调冲方含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖、激素分泌和mRNA表达的影响

运用血清药理学方法观察补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖、激素分泌功能以及抑制素B（INHB）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）mRNA表达的影响。方法 向培养的SD大鼠卵巢颗粒细胞中分别加入10%空白血清（对照组）、人转基因重组促卵泡激素（hFSH）含药血清（阳性对照组）、补肾调冲方含药血清（补肾调冲方组）,培养48 h,以闪烁计数器测定3H-TdR掺入DNA的量,流式细胞仪测定细胞周期分布,放射免疫法测定培养液中雌二醇（E2）和孕激素（P）水平,并采用RT-PCR法测定INHB、IGF-1 mRNA的表达量。结果 补肾调冲方含药血清可剂量相关地促进3H-TdR掺入颗粒细胞DNA的量。与对照组相比,补肾调冲方各含药血清组G0/G1期细胞均明显减少,而S期细胞则明显增多;E2、P的量明显升高;颗粒细胞INHB、IGF-1 mRNA表达量均明显增多,且呈剂量相关性。结论 补肾调冲方含药血清能明显促进卵巢颗粒细胞的增殖、增强甾体激素的分泌功能,该作用可能通过增强INHB、IGF-1基因的表达,从内分泌和自分泌两条途径调节卵巢功能而实现的。     

补肾调冲药对去卵巢小鼠作用的实验研究

本实验表明补肾调冲药可使去卵巢小白鼠子宫，肾上腺的重量和雌二醇（Ｅ２）的含量增加。阴道上皮细胞角化率提高，子宫内膜呈增生期，晚期或分泌期的表现，颗粒层细胞呈明显活跃状态。以上实验结果表明补肾调冲药具有类雌激素样作用。     

补肾活血方含药血清对大鼠颗粒细胞类PCOS模型的影响

目的 探讨补肾活血方含药血清对体外培养颗粒细胞类PCOS(多囊卵巢综合症)模型的作用机制. 方法 对大鼠颗粒细胞进行体外分离培养,分成正常组、模型组、含药组、孕马血清组诱导培养,观察细胞形态,收集各组培养液检测E2. 结果 含药组中的类PCOS大鼠颗粒细胞生长良好,E2分泌量最高,与正常组比较差异有显著统计学意义(P<0.01). 结论 补肾活血方含药血清通过促进颗粒细胞的生长增殖和分泌E2的功能,来治疗PCOS.     

补肾调冲法治疗妇科疾病二则

健康的皮肤源于性激素,生殖健康与皮肤息息相关,同盛同衰。临床采用调经调带、补肾助孕治疗方法,在治愈不孕症、月经病、盆腔炎症的同时,使患者皮肤重新焕发光彩,可见中医中药在美容方面有很广的前景。     

韩冰教授补肾调冲方治疗卵巢储备功能下降所致不孕症

韩冰教授认为,肾和冲任是女性生殖功能的核心,具有协同作用,共司经、孕、胎、产等一系列生殖活动.肾虚与冲任失调,影响月经与怀孕,是导致卵巢储备功能下降所致不孕症发生的根本原因.临证强调补肾调冲的重要性,并自拟补肾调冲方结合周期用药治疗.用药忌盲目单用大量补阳药或补阴药,以平衡肾中阴阳为宜,同时重视阴中求阳、阳中求阴.     

补肾化瘀方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达的影响

目的 通过观察补肾化瘀方对大鼠卵巢颗粒细胞上卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)蛋白的表达,探讨中药对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢局部的影响及作用机制.方法 应用补肾化瘀方作用于以丙酸睾酮联合HCG诱导PCOS大鼠模型,采用免疫组化法,检测PCOS大鼠颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠卵巢体质量增加,呈多囊性改变,卵泡颗粒细胞减少而膜细胞层增加,补肾化瘀方组卵巢形态接近正常组.补肾化瘀方能明显提高PCOS大鼠颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达,补肾化瘀方各剂量组与模型组和妈富隆阳性对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01),而中剂量组与正常对照组比较,差异均无统计学意义.结论 补肾化瘀方能提高PCOS大鼠卵巢颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达,可能与补肾化瘀方具有促进卵泡发育和排出的作用机制有关.     

补肾活血中药对雷公藤致卵巢储备下降大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血中药对雷公藤致卵巢储备下降大鼠颗粒细胞凋亡的影响。方法12周龄雌性SD大鼠60只,随机分为6组：空白组、雷公藤模型组、补肾活血方低、中、高剂量组及对照药六味地黄方组。观察灌服上述不同药物后大鼠一般情况、卵巢指数、卵巢组织病理形态、血清E2、FSH水平及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达。结果Bcl-2、Caspase-3表达：模型组、补肾活血方低剂量组与空白组比较有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）;六味地黄方组和补肾活血方低、中、高剂量组与模型组比较均有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）。Bax表达：模型组、补肾活血方低剂量组与空白组比较有极显著性差异（P〈0,01）;六味地黄方组和补肾活血方中、高剂量组与模型组比较有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）。结论细胞凋亡调节因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与卵巢储备密切相关,补肾活血中药抑制卵巢颗粒细胞凋亡、减少卵泡闭锁是其改善卵巢储备功能的可能机制。     

米非司酮对卵巢颗粒细胞中Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨米非司酮对卵巢颗粒细胞中Caspase-3蛋白表达的影响。方法选用雌性未孕Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为米非司酮低剂量组、米非司酮中剂量组、米非司酮高剂量组及空白对照组,于动情间期早期开始分别予米非司酮1.04mg/(kg.d)、2.604mg/(kg.d)、10.4mg/(kg.d)灌胃,连续4周。用药结束时处死动物,免疫组化检测Caspase-3蛋白在卵巢颗粒细胞中的表达。结果各级生长卵泡的颗粒细胞中均有Caspase-3蛋白表达,对照组颗粒细胞胞浆呈浅棕黄色,低剂量组、中剂量组各级生长卵泡中均可见颗粒细胞胞浆呈棕黄色,高剂量组绝大多数颗粒细胞胞浆呈棕黄至棕褐色,部分出现胞核阳性表达。随着用药剂量增加,Caspase-3蛋白表达增强,积分光密度值呈上升趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论调节Caspase-3蛋白表达可能是米非司酮诱导颗粒细胞凋亡的途径之一。     

补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3的影响

[目的]观察补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。[方法]以70只8周龄雌性SD大鼠为研究对象,采用雷公藤多苷片制作卵巢储备功能下降大鼠模型。观察大鼠一般情况、卵巢指数、卵巢组织病理形态、血清E2、FSH、FSH/LH水平及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。[结果]补肾益冲抗衰汤能使卵巢储备功能下降大鼠动情周期缩短、子宫、卵巢重量增加,大鼠血清FSH水平、FSH/LH降低,血清E2水平增高（P〈0.05或P〈0.01）,使卵巢颗粒细胞抑制细胞凋亡因子Bcl-2蛋白表达增加,促进细胞凋亡因子Bax、Caspase-3蛋白表达减少（P〈0.05或P〈0.01）。[结论]雷公藤多甙片致DOR大鼠模型与人类卵巢储备功能下降的临床表现基本一致。细胞凋亡调节因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与卵巢储备功能密切相关,补肾益冲抗衰汤有抑制卵巢颗粒细胞凋亡、减少卵泡闭锁从而改善卵巢储备功能的作用。     

P53、Fas、Bcl-2基因在尖锐湿疣和宫颈癌组织中的表达

目的:探讨P53、Fas、Bcl-2基因蛋白表达与尖锐湿疣和宫颈癌发病的关系.方法:采用标准免疫组化技术,分别检测24例尖锐湿疣、46例宫颈癌、22例宫颈糜烂和28例正常宫颈组织P53、Fas和Bcl-2基因产物.结果:三种基因蛋白在尖锐湿疣组和宫颈癌组的表达程度和表达率均显著高于宫颈糜烂组和正常对照组(P＜0.001).尖锐湿疣组和宫颈癌组之间在P53的表达程度上差异有显著性(P＜0.05).结论:P53、Fas、Bcl-2基因表达与尖锐湿疣和宫颈癌的发病均有密切关系.     

Bcl-2、P53和Bax在尖锐湿疣组织中的表达及意义研究

目的探讨尖锐湿疣（CA）组织中Bcl-2、Bax和P53蛋白的表达及其与CA发病的关系。方法采用免疫组织化学SP法分别检测28例CA组织和14倒正常上皮组织中Bcl-2、Bax和P53蛋白的表达情况。结果28倒CA组织中Bcl-2、Bax和P53蛋白表达率分别为46．43％、75.00％和71．43％，而在正常上皮组织中的表达平分别为14.29％、57．14％和28.57％，Bcl-2、P53的表达在正常组织和CA组差异有显著性（P〈0.05）：Bcl-2和Bax的表达呈负相关（rs=-0.611，P〈0.05）。结论CA组织中Bcl-2、Bax和P53蛋白表达异常及其Bcl-2和Bax二者的相关性可能与CA的者病有关。     

宫颈癌组织中Survivin,Bcl-2,P53蛋白的表达

目的:探讨宫颈癌组织中Survivin、Bcl -2及P53蛋白的表达及意义。方法:采用SP免疫组织化学方法, 检测10例正常宫颈组织,18例宫颈不典型增生组织,21例宫颈原位癌组织,69例宫颈浸润癌组织中Survivin、bcl -2 及P53蛋白的表达。结果:正常宫颈组织中Survivin、bcl -2、P53蛋白均不表达;宫颈不典型增生、原位癌及浸润癌组 织中,Survivin阳性表达率分别为50.0%,52.4%和91.3%;Bcl 2阳性表达率分别为44.4%,57.1%和63.8%;P53 阳性表达率分别为0,28.6%和59.4%。3者阳性表达率均随病变程度加深而逐渐升高(P均<0.05)。宫颈癌组 织中Survivin与Bcl -2及P53表达均密切相关(rs分别为0.409,0.373,P均<0.05)。结论:Survivin阳性表达出现 在宫颈癌恶性转化的早期,其与宫颈癌组织中Bcl -2及P53的异常表达密切相关。     

P53、Bcl-2和Bax在膀胱癌的表达及意义

目的 探讨P53、Bcl-2、Bax蛋白在膀胱癌中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学（SP法）测定67例膀胱癌和13例正常膀胱黏膜组织中P53、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 P53、Bcl-2、Bax蛋白在膀胱癌中阳性表达率分别为74.6％,64.2％,70.1％,而在正常膀胱黏膜组织中阳性表达率为15.4％,23.1％,100％.P53和Bcl-2蛋白的表达与膀胱癌病理分级呈正相关（rP53=0.667,rBcl-2=0.625,均P＜0.05）,与临床分期呈正相关（rp53=0.638,rBcl-2 =0.717,均P＜0.05）;Bax蛋白表达随着膀胱癌病理分级、临床分期下降,但无相关性（P ＞0.05）;P53蛋白的表达与Bcl-2蛋白表达存在正相关（r=0.778,P＜0.05）.结论 P53蛋白可能参与了膀胱肿瘤增殖水平的调控,Bcl-2、Bax蛋白可能参与了细胞凋亡的调节.P53蛋白可能通过调节Bcl-2蛋白的表达参与膀胱癌的发生、发展.     

P53和Bcl-2在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的通过检测P53、Bc1-2蛋白在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达,探讨其表达的临床意义。方法应用免疫组化法检测组织芯片中P53、Bc1-2蛋白在88例胰腺导管腺癌和11例正常胰腺组织的表达情况。应用人工读片和激光扫描细胞仪两种方法检测分析其相关性及临床意义。结果 P53和Bcl-2蛋白在正常胰腺组织的阳性率分别为0和100%（11/11）,胰腺癌组织中的阳性率分别为63.6%（56/88）和54.5%（48/88）,两种蛋白在胰腺癌组织和正常胰腺组织中的阳性率差异均具有统计学意义（均P〈0.05）;两者表达与原发性胰腺导管腺癌临床分期、病理分级及有无淋巴结转移有关（P〈0.05）。经Spearman秩相关检验,P53蛋白和Bc1-2蛋白相关系数为-0.2254,成负相关表达（P〈0.05）。Cox风险分析提示,P53蛋白、Bc1-2蛋白阳性表达患者生存时间明显缩短（P〈0.05）,生存单因素分析胰腺癌的病理分级、临床分期及有无淋巴结转移、P53蛋白和Bc1-2蛋白表达有关（P〈0.05）。结论 P53、Bc1-2蛋白在胰腺癌的发生发展中可能起着重要的作用,P53、Bc1-2蛋白表达的联合检测有助于胰腺癌的预后判断。     

继发性红细胞增多症患者血清P53和Bcl-2蛋白表达水平及意义

目的：探讨继发性红细胞增多症患者血清P53蛋白和Bcl-2蛋白表达水平的变化情况。方法：采用ELISA法测定18例继发性红细胞增多症患者及20例健康人（对照组）血清P53蛋白和Bcl-2蛋白水平,并分析其与血红蛋白（Hemoglobin,Hb）浓度之间的相关性。结果：继发性红细胞增多症患者血清P53蛋白和Bcl-2蛋白水平均显著高于健康人差异有统计学意义（P〈0.001）,Bcl-2蛋白水平增加最为显著。血清P53蛋白和Bcl-2蛋白水平均与Hb浓度呈显著正相关。结论：P53蛋白和Bcl-2蛋白高表达可能与继发性红细胞增多症的发生发展相关。     

胰腺导管腺癌组织中PUMA、P53、Bax和Bcl-2蛋白的表达及临床意义

目的 观察胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDA)组织中PUMA、P53、Bax和Bcl-2蛋白的表达,探讨PUMA在PDA发生、发展中的作用及其与P53、Bax和Bcl-2蛋白表达的关系。方法 采用免疫组织化学EnVision方法检测65例PDA组织及配对癌旁组织中PUMA、P53、Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。结果 PDA中PUMA蛋白阳性表达率为30.8%(20/65),明显低于相应癌旁组织49.2%(32/65),差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤大小及有、无淋巴结转移患者肿瘤组织PUMA表达差异有统计学意义(P<0.05),而不同年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、肿瘤分期和有无神经浸润患者PUMA表达差异无统计学意义。肿瘤组织PUMA蛋白表达与P53、Bcl-2蛋白表达均负相关(P=0.019,P=0.015),而与Bax蛋白表达无相关性。结论 PDA组织中PUMA蛋白表达下调与肿瘤大小、淋巴结转移有关,PUMA可能参与了PDA的发生、发展,其蛋白表达水平的检测可能有利于PDA预后判定。     

Bcl-2、PTEN和P53在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性的研究

目的探讨Bcl-2、PTEN和P53基因在非小细胞肺癌组织中的表达及与临床病理预后的关系。方法采用免疫组化S-P法检测96例非小细胞肺癌组织中Bcl-2、PTEN和P53蛋白的表达。结果⑴96例非小细胞肺癌组织中Bcl-2、PTEN和P53蛋白阳性表达总的阳性率分别为59.4%(57/96)、52.1%(50/96)和60.4%(58/96)。⑵Bcl-2蛋白的阳性表达在肺癌病理分级组间比较,差异有统计学意义(P <0.05);与肺癌P-TNM分期组间比较,差异亦有统计学意义(P <0.05)。⑶PTEN、P53蛋白的阳性表达在肺癌P-TNM分期及淋巴结转移组间差异均有统计学意义(P <0.01),PTEN在肺癌病理分级组间差异亦有统计学意义(P <0.01)。结论 Bcl-2、PTEN和P53基因在非小细胞肺癌的组织发生发展起着重要作用,三种基因蛋白产物的检测对非小细胞肺癌患者的预后评估有积极意义。     

低强度电磁场对大鼠生精细胞P53及Bcl-2表达的影响

目的探讨低强度电磁场对大鼠生精细胞P53和Bcl-2表达的影响。方法选择Wistar大鼠60只,随机分为于0．1mT,12．8mT电磁场暴中露2周和12周组及对照组,每组10只。持续2周和12周,摘眼球取血,测血清卵泡雌激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）含量,麻醉大鼠后摘取睾丸,应用免疫组织化学的方法检测睾丸P53和Bcl-2的表达,并应用图像分析系统进行测定。结果与正常对照组相比较,于0．1mT、12．8mT电磁场中暴露2周和12周,P53灰度值升高,Bcl-2灰度值下降,两者均有统计学意义。结论随着电磁场强度的升高和在磁场中暴露时间的延长,大鼠生精细胞P53的表达明显上调,Bcl-2的表达逐渐下降。