黄曲霉毒素B1的检测方法

黄曲霉毒素具有毒性大,致癌力强,样品中含量低等特点,而黄曲霉毒素B1是全部黄曲霉毒素中毒性最强的,这要求检测方法灵敏度高,特异性强,集分离与检测为一体。目前黄曲霉毒素B1测定的方法有薄层层析法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法等。所有这些方法主要是根据黄曲霉毒素B1的化学结构和生物特性结合仪器来对黄曲霉毒素B1进行定性、定量的分析,使之更加完善。笔者就目前使用较多,受人们关注的几个代表性方法作如下讨论。     

黄曲霉毒素M1的危害、污染现状及检测方法进展

本文针对黄曲霉毒素M1 的理化特性、危害、产生及防治进行了总结 ,详细介绍了黄曲霉毒素M1 的四类检测方法 ,并进行了比较 ,同时展望了检测方法的发展方向     

黄曲霉毒素M_1研究进展

本文对黄曲霉毒素M_1的理化特性、产生与分布、毒理学、检测方法、去毒方法及各国的限量标准等方面进行了综述。特别对黄曲霉毒素M_1的致癌机制和检测方法的进展作了较为系统的阐述。     

免疫荧光层析试纸条法检测食用油中的黄曲霉毒素B_1

目的建立快速检测食用油中黄曲霉毒素B1的免疫荧光层析试纸条法,用于鉴别正规的食用油和地沟油。方法应用自行研制的免疫荧光层析试纸条,对20份检验合格的食用油样本和10份地沟油样本进行免疫荧光试纸条法检测,同时采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法作比较;采用含黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素M2、黄曲霉毒醇、黄曲霉毒素Q1的模拟样本进行特异性检测。结果本免疫荧光层析试纸条法的检测下限为5μg/L;20份检验合格的食用油样本均未检出黄曲霉毒素B1,10份地沟油中有8份检出含有黄曲霉毒素B1,荧光免疫层析试纸条法和LC-MS/MS法具有高度的相关性,r0.950 0;对于其他的黄曲霉毒素具有高度特异性。结论用免疫荧光层析试纸条法检测地沟油中黄曲霉毒素B1是可行的。     

腐乳中6种黄曲霉毒素污染状况调查

目的掌握绍兴市场上腐乳的黄曲霉毒素污染情况,并从生产工艺中寻找黄曲霉毒素产生的途径。方法抽取绍兴市场上腐乳样品37份检测黄曲霉毒素,并进行腐乳生产工艺流程监测。结果 37份样品中,1份青腐乳检测出黄曲霉毒素B11.5μg/kg,腐乳生产流程监测未检出黄曲霉毒素。结论绍兴市场中腐乳黄曲霉毒素没有超标,需加强腐乳生产工艺流程监测。     

市售食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2污染情况分析

目的了解市售谷物、坚果和食用油等7类食品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2污染情况。方法建立高效液相色谱-串联质谱法检测黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2。结果共检测266份样品,黄曲霉毒素的总检出率为4.5%,最高总含量为72.8μg/kg。在7类样品中,以花生油、玉米粉和花生受污染情况较为严重,其中,花生油的检出率为75.0%,明显高于其他类食品。所采集的266份样品黄曲霉毒素总检出率为:黄曲霉毒素B_1(4.5%)黄曲霉毒素G_1(0.8%)黄曲霉毒素B_2(0.4%)黄曲霉毒素G_2(0.0%)。4种黄曲霉毒素中以黄曲霉毒素B_1的污染情况最为严重,共检出1份花生样品含量为58.4μg/kg,为黄曲霉毒素B_1含量超标样品。结论黄曲霉毒素在食品中的污染情况仍然存在,相关管理部门应加强监控,以保证消费者的身体健康。     

黄曲霉毒素:隐秘的健康隐患

近来一系列的新闻报道中,牛奶、花生油、坚果纷纷检测出黄曲霉素超标,黄曲霉毒素再次成为关注的焦点。为何食品经常受到黄曲霉毒素的污染?我们日常生活当中又有哪些注意的地方呢?黄曲霉毒素,毒性多大?黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉以及特曲霉等真菌的代谢产物,跟青霉素有些类似,目前已发现20余种。黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光,根     

黄曲霉毒素：人类健康的隐形“杀手”

黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的有毒代谢产物,上世纪60年代由于英国发生的十万只火鸡突发性死亡事件而被发现,至今已分离出的黄曲霉毒素及其衍生物有二十多种,在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强,而此次牛奶检测超标的黄曲霉毒素M1则是黄曲霉毒素B1的代谢物。     

光化学衍生-高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉毒素

目的 建立食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的光化学衍生高效液相色谱荧光检测方法。 方法 用乙腈-水提取样品中的黄曲霉毒素,经多功能柱净化,以38/62的甲醇-水为流动相等度洗脱,高效液相色谱分离,光化学衍生器衍生,荧光检测器检测。 结果 4种黄曲霉毒素在24 min内得到良好的基线分离,黄曲霉毒素B1、G1的检出限为0.2 μg/kg,黄曲霉毒素B2、G2的检出限为0.1 μg/kg。在1.0～5.0 μg/kg添加范围内,加标回收率为84.0%～94.6%,相对标准偏差为3.4%～6.5%。 结论 该方法灵敏度高,操作简便,准确可靠,重现性好,适于对食品中黄曲霉毒素的日常检测。     

抗黄曲霉毒素M1抗体制备及检测方法建立

目的制备针对黄曲霉毒素M1的单克隆抗体并建立针对黄曲霉毒素M1的间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。方法利用B细胞杂交瘤技术。建立能分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，建立间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。结果研制出1株能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F2。该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1，亲和常数为2．8×10^-11mol／L。该抗体与黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2和黄曲霉毒素M2等结构类似物有微弱的交叉反应，具有较高的特异性。在此基础上建立了间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。该方法的最低检出浓度为0．07ng／ml。校正曲线的线性范围为0．02～2ng／ml，线性方程y=-0．4364x＋0．2693（R^2=0．9949）。方法的加标回收率为72．5％～131．3％。结论制备了具有高特异性和亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，并建立了快速、灵敏的针对黄曲霉毒素M1的酶联免疫吸附试验检测方法。     

基于黄曲霉毒素国际比对结果的评价及检测关键点

目的分析黄曲霉毒素国际比对考核结果,明确食品中黄曲霉毒素检测的质量控制要求。方法采用Z评分法,分析黄曲霉毒素的考核结果,研究分析实验操作过程中的质量控制关键点。结果经过4轮黄曲霉毒素的比对考核,其结果∣Z∣<2,考核结果均满意。检测样品的取样及检测方法的选择是影响结果的重要因素。结论由黄曲霉毒素的国际比对考核结果提示,加强实验操作关键点的控制可有效提高测定结果的可靠性。     

水产品中黄曲霉毒素总量的免疫亲和荧光光度测定法

黄曲霉毒素常见的一种霉菌——黄曲霉和寄生曲霉中产菌毒株的代谢物。黄曲霉在自然界的存在较寄生曲霉普遍。由于黄曲霉毒素具有毒性大、致癌力强、含量低（通常是0—200μg／kg）和结构相似的特点，这就要求检测灵敏度高，特异性强，集分离与检测为一体，方可达到精确的检测结果。目前黄曲霉毒素检测有多种方法，主要有化学分析法、仪器分析法、生物鉴定法和免疫分析法等，     

总黄曲霉毒素ELISA定量检测试剂盒研制

目的研究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒,并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果该试剂盒对黄曲霉毒素B G标准品的最低检出浓度为0.26 ng/ml,标准曲线的线性范围为0.26-20.00 ng/ml,线性方程y=-0.4463x 0.3532(R2=0.9915);对黄曲霉毒素B G50%的抑制浓度为2.08 ng/ml;试剂盒的条内变异系数为4.18%,条间变异系数为5.21%,抗体亲和力常数为1.52×10-10mol/L;对玉米3个加标水平的平均回收率分别为98.63%,94.56%和1 12.05%;对花生的3个加标水平的平均回收率分别为88.66%,87.50%和85.60%。试剂盒37℃可放置96 h以上;试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100%,57.5%,104%和19%,与其他真菌毒素无交叉反应。结论研制出的ELIS试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。     

新一代黄曲霉毒素B1定性（半定量）检测盒的研制报告

新开发研制的黄曲霉毒素B1(AFB1)定性(半定量)检测盒(AB1-ELISA-l)能够准确、便捷检测食品中黄曲霉毒素B1，其敏感性、特异性和可重复性均十分理想，适合各级食品检验人员掌握和使用，是当前检测食品中黄曲霉毒素B1的较为理想的试剂盒。     

采用噬菌体展示技术筛选黄曲霉毒素B_1模拟抗原表位

目的从随机肽库中筛选黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,以建立无需黄曲霉毒素B1偶联抗原的免疫学检测方法。方法利用噬菌体展示技术,以抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体为靶分子,从随机七肽库中进行生物亲和淘选,ELISA鉴定阳性克隆,通过DNA测序对每个阳性克隆进行定性分析。结果通过4轮结合/扩增循环,获得了能与抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体结合的肽,采用间接竞争ELISA,筛选到了4株能抑制黄曲霉毒素B1的阳性克隆子,经DNA测序得到HXXDPXH共有序列,其中X为任意氨基酸。以其中P10噬菌体阳性克隆建立竞争ELISA方法,线性范围为500~2000pg/ml,检测下限为50pg/ml。结论利用噬菌体展示技术筛选到了黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,并以其代替黄曲霉毒素B1偶联抗原建立了免疫学检测方法。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定参苓白术片中黄曲霉毒素

目的 考察参苓白术片中污染黄曲霉毒素的情况,为制订标准和科学管理提供依据,确保公众用药安全。方法 采用免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC)对参苓白术片及其原药材中的黄曲霉毒素进行限量检查,并比较四分法分样与研磨法分样对原药材莲子中黄曲霉毒素测定结果的影响。结果 免疫亲和柱-高效液相色谱法线性关系良好(r> 0.999),回收率为70.32%～85.15%,相对标准差(RSD)为0.49%～9.35%。检测了54批市售参苓白术片,33批检出黄曲霉毒素,检出率为61%,其中2批超过《中国药典》2020年版的限量规定,合格率为96.08%。11味原药材中仅有莲子检出黄曲霉毒素,四分法分样变异系数大,容易造成假阴性的结果。结论 市售参苓白术片中存在黄曲霉毒素污染的风险,原因是生产企业对原药材莲子进行检测时所采用的分样方法不合理,导致黄曲霉毒素检测结果出现假阴性。     

超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测食品中的4种黄曲霉毒素

目的建立具有大体积流通池的荧光检测超高效液相色谱法测定食品中4种黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)的方法。方法食品经乙腈水提取液超声提取30 min,免疫亲和柱净化,氮气吹干,10%乙腈溶液定容,C_(18)反相色谱柱分离,采用具有大体积流通池的荧光检测器检测,激发波长为365 nm,发射波长为450 nm。结果 4种黄曲霉毒素在C_(18)高效液相色谱柱上得到了很好的分离,5 min内完成检测,方法的检出限为0.010μg/kg(黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素G_1)和0.003μg/kg(黄曲霉毒素B_2、黄曲霉毒素G_2),平均回收率为77.55%~102.89%,RSD为1.2%~4.4%,4种黄曲霉毒素在0.1 ng/ml~10 ng/ml时线性关系良好(相关系数r0.999)。采用大体积流通池的荧光检测器后,灵敏度提高5倍~20倍。结论采用免疫亲和柱净化有效去除了基质中的杂质,改用大体积流通池的荧光检测器,省去了衍生步骤,简单快速,提高了黄曲霉毒素检测的灵敏度及准确度,适用于食品中黄曲霉毒素的测定。     

临沂市煎饼类食品中黄曲霉毒素含量测定及分析

目的了解和掌握临沂市煎饼类食品中的黄曲霉毒素含量及其选材情况,为临沂市煎饼类食品及其原材料储存和选择提供科学依据。方法对采自临沂各个县区市面上出售的200份煎饼样本,用高效液相色谱法配荧光检测器进行黄曲霉毒素总量和黄曲霉毒素B1含量的测定。结果 200份煎饼样本中有38份样本黄曲霉毒素含量超过20μg/kg,43份样本中黄曲霉毒素B1含量超过5.0μg/kg;9月份采集的样本中黄曲霉毒素总量和黄曲霉毒素B1含量的检测结果较高的比例要高于3月份。结论临沂市煎饼食品中黄曲霉毒素总量和黄曲霉毒素B1含量检出率和超标率较高,其中玉米及其制品类含量明显高于其他类,9月份明显高于3月份,因此应加强煎饼类制品原材料的选择和储存控制。     

ELISA法检测煎饼类食品中黄曲霉毒素含量

利用ELISA方法对临沂市5个县区的150份煎饼样本进行了黄曲霉毒素的检测,结果在140份样本中检出了黄曲霉毒素,其中有21份样本含量超过20μg/kg,;在102份样本中检出了黄曲霉毒素B1,其中有26份超标;21份黄曲霉毒素B1超标的样本属于小麦、大麦、其他谷物、小麦粉、麦片、其他去壳谷物类型,这为临沂市煎饼类食品的选材敲响了警钟。     

闽北地产红茶叶中黄曲霉毒素B_1污染水平研究

目的了解闽北地产红茶中黄曲霉毒素B_1污染水平。方法从南平各地随机抽取97份红茶样本,经粉碎、浸提、离心后,按GB/T 18979-2003食品中黄曲霉毒素测定,据所使用的免疫亲和柱对样品处理进行优化,用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法检测黄曲霉毒素B_1。结果该法黄曲霉毒素B_1在0.5~20ng/mL范围内线性关系良好,相关系数≥0.9995,检出限为0.13μg/kg。红茶样本黄曲霉毒素B1检出率7.2%(7/97),含量3.2~10.6μg/kg,均值7.4μg/kg。结论闽北地产红茶黄曲霉毒素B_1污染水平较低,污染来源可能是茶树鲜叶有霉菌寄生和储存不当。本研究填补了闽北地区红茶黄曲霉毒素B_1污染的空白,可为茶叶中黄曲霉毒素B_1限量标准的制定提供基础数据。