老年患者大肠埃希菌分离株耐药表型及复方新诺明耐药相关基因研究

目的 了解老年患者大肠埃希菌分离株对复方新诺明(SXT)耐药相关基因的流行状况及与耐药表型的关系.方法 对20株大肠埃希菌进行耐药性分析,采用PCR法对SXT耐药相关基因(sul1、dfrA1、dfrA12和dfrA17)检则,扩增产物纯化后,基因测序分析.结果 20株大肠埃希菌中,SXT耐药19株(95.0%),3种基因sul1、dfrA12和dfrA17阳性率分别为80.0%、20.0%和65.0%,dfrA1基因为阴性,有17株检出dfrA基因(85.0%),共有18株检出sul 1和(或)dfrA基因(90.0%).结论 大肠埃希菌中dfrA基因和sul1基因同时表达或单独表达均可导致SXT耐药,在大肠埃希菌检出sul1、dfrA12和dfrA17基因均为国内首次报道.     

大肠埃希菌耐药基因的聚合酶链反应分析

目的了解临床分离大肠埃希菌中碳青霉烯酶的携带及耐药基因分布,为临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法采用VITEK-2型全自动微生物检测系统鉴定细菌,用微量稀释法筛选耐碳青霉烯类大肠埃希菌30株,通过Hodge试验检测碳青霉烯酶,以EDTA/IMP、EDTA/CAZ复合纸片,亚胺培南和头孢他啶为底物,进行协同试验检测B类碳青霉烯酶(金属酶),用聚合酶链反应(PCR)扩增耐碳青霉烯类抗菌药物的基因,以确定基因的种类。结果 25株大肠埃希菌对头孢菌素、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物耐药,5株大肠埃希菌对阿米卡星敏感;通过Hodge试验对30株大肠埃希菌表型的筛选,阳性菌株共28株,阳性率为93.0%;通过PCR基因分析,30株大肠埃希菌中检出28株KPC基因,阳性率达到93.0%,30株大肠埃希菌中未发现VIM和IMP基因。结论耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌主要在ICU和呼吸科,耐药原因主要是KPC基因,但是不能排除VIM和IMP基因。     

耐碳青霉烯类大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的合酶链反应分析

目的 了解耐碳青霉烯类抗菌药物大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药基因,并通过测序确定耐药基因的碱基序列.方法 36株菌株进行MIC测定,筛选耐碳青霉烯类的多药耐药细菌;用聚合酶链反应(PCR)扩增耐碳青霉烯类菌株的基因,以确定基因的种类.结果 8株大肠埃希菌中4株有KPC基因,阳性率为50.0％;28株肺炎克雷伯菌中26株出现阳性菌株,阳性率为92.8％;36株中未发现VIM和IMP基因.结论 宁波地区这几所医院中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最主要是KPC基因,但是不能排除VIM和IMP基因.     

辽宁省生活饮用水中大肠埃希菌的检测及毒力和血清分析

目的 了解辽宁省部分地区生活饮用水被大肠埃希菌污染的状况，并为水源性疾病的防控和生活饮用水的卫生安全监测和预警提供参考依据。方法 采用多管发酵法对2010—2021年辽宁省各类生活饮用水中的大肠埃希菌微生物指标进行检测，同时采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法对分离出的大肠埃希菌进行致病性毒力基因和O抗原血清分型鉴定并分析。结果 共检出大肠埃希菌78株，总样本检出率为11.84%。水样的处理方式对水样中大肠埃希菌指标检出有明显差异，未消毒样品的合格率明显低于消毒处理的水样。其中检出16株致泻大肠埃希菌，总检出率为0.024%，水源水的致泻大肠埃希菌检出率明显高于其他类样品。16株致泻大肠埃希菌中检出4株肠道致病性大肠埃希菌、5株产肠毒素大肠埃希菌和7株肠道集聚性大肠埃希菌，除5株不能分型外，其余11株分为8种血清型。毒力基因和O抗原均具有优势分型。结论 辽宁省各类生活饮用水中水源水的大肠埃希菌检出率最高，生活饮用水消毒处理对降低大肠埃希菌的检出率至关重要；水源水、分散式供水、集中式供水中均检出致泻大肠埃希菌，其存在优势毒力基因，且热源稳定性...     

3′BS—PCR方法探测氟喹诺酮耐药大肠埃希菌gyrA基因248位点突变的探讨

目的 对3′BS-PCR法用于快速、准确鉴定耐药细菌染色体基因突变进行探讨。方法 3′BS-PCR方法检测喹诺酮耐药大肠埃希菌gyrA基因常见突变点（C－248）是否突变;gyrA基因喹诺酮耐药决定区PCR产物序列分析进行验证;研究菌株包括大肠埃菌野生株Ecs及其实验室诱变药株R2、R256和临床分离耐药株R5、R6。结果 R5、R6和R256均存在gyrA基因第248位C→T的突变;对R2、R5和R6的序列分析显示R5和R6 发生了259位G→A(R5)/T(R256）突变。结论 3′BS-PCR方法具有确定突变碱基特异性高,可靠且简便快速的优点,适合用于细菌发染色体基因耐药突变的快速探测。     

婴幼儿致病性大肠埃希菌的毒力基因检测研究

目的通过对婴幼儿腹泻病例粪便标本进行致病性大肠埃希菌的分离鉴定及毒力基因检测,从分子生物学方面研究致病性大肠埃希菌引起婴幼儿腹泻的分布,以降低婴幼儿致病性大肠埃希菌的感染率。方法收集江西省儿童医院2011-2012年婴幼儿腹泻病例357份粪便标本,按照致病性大肠埃希菌分离鉴定程序用EC肉汤增菌过夜,增菌后用麦康凯琼脂培养基分离培养,可疑菌用API 20E生化鉴定出大肠埃希菌,然后用聚合酶链反应(PCR)检测致病性大肠埃希菌相应的毒力基因。结果 357份腹泻患者粪便标本中,检出37份携带毒力基因的致病性大肠埃希菌,检出率为10.36%,携带毒力基因的肠聚集性大肠埃希菌(EAggEC)、肠道致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠道侵入性大肠埃希菌(EIEC)、肠道出血性大肠埃希菌(EHEC)检出率分别为8.4%、0.56%、1.12%、0.28%,产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)未检出。结论婴幼儿腹泻病例中致病性大肠埃希菌主要由EaggEC引起,其次为EIEC,进一步证实对致泻大肠埃希菌进行PCR毒力基因检测具有重要临床意义。     

老年患者大肠埃希菌分离株Ⅰ类整合子的研究

目的了解老年患者大肠埃希菌分离株Ⅰ类整合子遗传标记携带情况。方法采用微量稀释法做耐药菌株的药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增检测intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3基因,扩增产物纯化后基因测序。结果大肠埃希菌对阿米卡星耐药率为60.0%,对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药率为95.0%,对第三代头孢菌素耐药率为100.0%(均为产ESBLs菌株),且与Ⅰ类整合子的存在密切相关,intⅠ1基因的阳性16株(80.0%),intⅠ2、intⅠ3基因均阴性。结论大肠埃希菌的耐药与耐药基因传递机制-整合子密切相关,Ⅰ类整合子的存在加快了细菌耐药性的传播。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌相关耐药基因研究

目的 了解常州地区大肠埃希菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因.方法 用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头抱噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对大肠埃希菌的最低抑菌浓度,用聚合酶链反应(PCR)检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌TEM、SHV等17种耐药基因,并用DNA测序仪测序.结果 80株大肠埃希菌ESBLs检出率为46.3%,37株大肠埃希菌检出TEM、SHV、CTX-M-1群、OXA-1群和DHA 5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为81.1%、78.4%、21.6%、10.8%、5.4%;37株菌中有36株至少检出1种β-内酰胺酶基因,24株同时检出>2种β-内酰胺酶基因,1株菌最多同时检出4种β-内酰胺酶基因,只有1株未检出β-内酰胺酶基因.结论 大肠埃希菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,成为对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一.     

志贺菌属分离株中发现氯霉素外排泵基因cmlA1

目的 明确志贺菌属(SHI)对氯霉素的耐药基因.方法 采用纸片扩散法进行药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测志贺菌属对氯霉素耐药基因(catB、cmlA);并应用DNA测序确定基因型.结果 20株志贺菌属对氯霉素耐药率为70.0%;检出氯霉素cmlA基因阳性2株(阳性率10.0%),未检出catB基因;cmlA基因阳性产物测序确定为cmlA1.结论 本组志贺菌属中检出氯霉素外排泵基因cmlA1,这是志贺菌属在国内的首次报道.     

老年病区大肠埃希菌分离株消毒剂-磺胺耐药基因携带的研究

目的 了解老年病区大肠埃希菌分离株消毒剂-磺胺耐药基因的存在和耐药性.方法 应用聚合酶链反应技术与稀释法对大肠埃希菌分离株消毒剂-磺胺耐药基因和药敏进行了检测.结果 该医院老年病区患者标本中分离的30株大肠埃希菌检测出携带消毒剂-磺胺耐药基因21株,检出率70.0%.结论 该医院老年病区分离的大肠埃希菌临床株消毒剂-磺胺耐药基因检出率较高,多数对临床常用抗菌药物耐药,提出临床抗药菌株可能同时对消毒剂存在抗性,应引起我国医院消毒界的广泛重视.