IL-12siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与分化的影响

目的 观察IL-12 siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响.方法将含有IL-12 siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用MTT法及AO/EB染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况.结果转染后,MTT法显示IL-12 siRNA组中的细胞生长受抑明显,AO/EB染色显示IL-12siRNA组的凋亡率较阴性对照组及空载体组高.结论 IL-12siRNA靶向干扰了IL-12蛋白的表达,并对脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用.     

靶向抑制 DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的：应用靶向 DNA 甲基转移酶1（DNMT1）基因的小干扰 RNA（siRNA）重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以 siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以 siRNA-阴性对照序列。应用 qRT-PCR 分析 DNMT1基因表达变化, Western blot 法分析 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达变化,MTT 法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR 结果表明实验组 DNMT1 mRNA 表达明显减少（ P <0.01）;Western blot 法表明实验组 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达水平明显降低（P <0.01）;MTT 法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组（P <0.05）;细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组（ P <0.01）。结论靶向 DNMT1基因的 siRNA 重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内 DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。     

38例恶性脑胶质瘤并发静脉血栓栓塞分析

2006年6月至2008年9月，我科收治脑恶性胶质瘤（WHO分级Ⅲ／Ⅳ）38例，现将并发静脉血栓栓塞（VTE）的情况分析如下。     

替莫唑胺治疗恶性脑胶质瘤的护理

脑胶质瘤是最为常见的神经系统肿瘤,其年发病率为5-8/10万人,治疗上以外科手术切除及手术后化疗为主,替莫唑胺主要用于治疗脑胶质瘤,特别是多形性胶质母细胞瘸和间变性星形细胞瘤[1].     

恶性脑胶质瘤的局部治疗进展

胶质瘤居颅内肿瘤发病率的首位,且随年龄增大有增高的趋势。统计数字表明,罹患恶性胶质瘤(低度分化星形细胞瘤和胶质母细胞瘤)患者的2年存活率是5％,偏良性胶质瘤患者10年存活率是20％。因恶性脑胶质瘤形成的早期就具有很强的弥散能力,所以即使手术几乎全切强化瘤组织后,仍不能避免其在术腔边缘的复发。人们试用在肿瘤局部或瘤组织切除后的空腔内放置一些可进一步杀灭瘤细胞的物质,或者诱导瘤细胞凋亡的因子,从而延缓或阻止肿瘤的复发,延长存活期。本文从以下7个方面就恶性胶质瘤的局部治疗进展综述。     

双氢青蒿素抗恶性脑胶质瘤作用的研究

目的 研究双氢青蒿素对人恶性脑胶质瘤U87细胞生长的作用. 方法 培养人恶性脑胶质瘤U87细胞,MTT法检测双氢青蒿素作用后U87 细胞的生长抑制率,倒置显微镜观察药物作用后细胞生长的变化.结果 0.5、5.0、50 μmol/L双氢青蒿素均明显抑制U87细胞的生长,倒置显微镜下观察到药物作用后细胞密度明显降低. 结论 双氢青蒿素能明显抑制脑胶质瘤细胞的生长增殖.     

RNA干扰Geminin基因表达对脑胶质瘤恶性生物学行为的影响

目的:探讨Geminin基因沉默对人脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响及可能的发生机制.方法:选取南通大学附属医院脑外科2018-2019年手术切除的20例神经胶质瘤患者的新鲜标本,qRT-PCR结合基因表达谱数据动态分析(gene expression profilling interactive analysis,G...     

恶性脑胶质瘤的基因治疗

恶性胶质瘤尽管没有远处转移,但5年生存率仍然很低;目前,对恶性脑肿瘤所采用的常规治疗为手术、放疗和化疗。由于肿瘤与正常脑组织无明显界限,手术切除不可能去除所有的瘤体细胞,因此术后复发几乎是必然结果。神经系统的基因特性决定瘤体组织对射线不敏感;血脑屏障导致药物很难进入瘤体,因此胶质瘤的化疗效果很差。尽管这些治疗方案能够暂时延长患者的生命,但患者预后很差,几乎所有的患者无例外的在1～2年内死亡。因此迫切需要开展新的辅助治疗方法。     

神经细胞粘附分子对人恶性脑胶质瘤细胞株体内外增殖能力的影响

目的：探讨神经细胞粘附分子（neural cell adhesion molecule,NCAM)对人脑胶细胞株U251MG增殖行为的影响。方法：将外源性NACM－140质粒转入U251MG细胞株,采用流式细胞仪及培养细胞增殖动力学方法比较转染前后细胞的细胞周期、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及群体增殖速度;在裸鼠颅内原位接种上述细胞,观察成瘤率及肿瘤大小。结果：NCAM转染后细胞的体外增殖速度减慢（P＜0．05）,S期细胞减少,PCNA表达率下降;裸鼠颅内接种的成瘤率显降低（P＜0．01）,肿瘤体积明显较小。结论：转染外源性NCAM在体外、体内均可抑制人脑胶质瘤细胞株U251MG的增殖。     

MSH5抑制对恶性胶质瘤细胞表型的影响

目的研究MSH5抑制对恶性胶质瘤细胞表型的影响,寻找治疗恶性胶质瘤的新的治疗靶点。方法通过TCGA数据库中查阅MSH5与恶性胶质瘤患者的临床分期和预后的关系;向U251、SHG-44和SNB-19细胞中转染干扰MSH5慢病毒,通过PCR检测MSH5 mRNA的表达,验证干扰效率;通过CCK-8和流式细胞技术检测胶质瘤细胞的增殖和周期;采用平板克隆、划痕实验和Transwell进一步检测敲降MSH5对细胞侵袭和转移能力的影响;最后,通过流式细胞仪检测胶质瘤细胞的凋亡情况。结果随着MSH5表达的升高,胶质瘤患者的预后和生存率是明显下降的;转染MSH5干扰慢病毒后,MSH5 mRNA的表达水平明显下降(P <0.05);敲降MSH5,U251、SHG-44和SNB-19胶质瘤细胞的存活率明显受到抑制(P <0.05);敲降MSH5,U251、SHG-44和SNB-19的细胞周期明显抑制了胶质瘤细胞的S期(P <0.05);敲降MSH5基因明显抑制了胶质瘤细胞的数目(P <0.05);敲降MSH5后,U251、SHG-44和SNB-19胶质瘤的愈合率明显下降(P <... 更多     

恶性胶质瘤中血管生成与肿瘤生长关系的研究

目的探讨血管生成与恶性胶质瘤生长之间的关系,为进一步抗血管生成治疗恶性胶质瘤提供实验依据。方法立体定向尾状核注射C6细胞制作SD大鼠脑胶质瘤动物模型并观察肿瘤生长变化;采用SABC免疫组化法,检测注射C6细胞后第9、15、21天肿瘤组织中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）,检测CD34计算肿瘤组织中的微血管密度（microscope vessel density,MVD）。结果接种C6细胞后,随着天数的增加肿瘤体积逐渐增大;肿瘤组织中PCNA的表达逐渐增强,微血管密度明显增加,与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）。结论恶性胶质瘤是生长活跃、血管增殖明显的肿瘤,血管生成与恶性胶质瘤生长间密切相关。     

siRNA阻抑Survivin基因表达对肝癌细胞周期影响的研究

目的采用RNA干扰（RNAi）技术抑制人肝癌HepG2细胞中Survivin基因表达,观察小分子干扰RNA（siRNA）对肝癌细胞周期的影响。方法构建人肝癌HepG2的survivin-siRNA,将其导入肝癌细胞系后研究。HepG2细胞分为四组：siRNA干扰组、siRNA干扰对照组、未转染的对照组、空白载体组。作用48h后Western印迹检测基因沉默效果,MTT法测量细胞生长情况,流式细胞术分析siRNA对肝癌细胞增殖周期的影响。结果 Western印迹法显示干扰组survivin基因的表达受到明显抑制。MTT法显示经survivin基因干扰后的HepG2细胞相比对照组细胞吸光度A值较低;尤其是24、48小时降低更为明显（P〈0.05）。流式细胞术显示干扰组的G2/M细胞百分率相对干扰对照组显着增大（P〈0.05）。结论 siRNA转染能够抑制细胞survivin基因表达,使人肝癌细胞株HepG2细胞阻滞于G2/M期。     

白介素-24抑制胶质瘤细胞生长的体内外实验研究

目的探讨白介素-24基因转染对胶质瘤生长的影响。方法将载有人白介素-24eDNA的新型重组腺病毒（Ad5F35-IL24）感染人胶质瘤细胞系U251,体外观察Ad5F35-IL24对该细胞系生长的影响;建立人胶质瘤动物模型,瘤内注射Ad5F35-IL24,观察肿瘤生长情况;用流式细胞仪检测其凋亡和Bax／Bel-2的表达情况。结果Ad5F35-IL24感染U251细胞和肿瘤组织后,IL-24蛋白高表达,U251细胞和组织的生长受到明显抑制,其凋亡率明显升高,Bax／Bel-2也明显升高。结论白介素-24具有抑制人胶质瘤细胞系U251生长和诱导凋亡作用。Ad5P35-IL24转导白介素-24基因可能是一种有效的胶质瘤基因治疗途径。     

TSG101在人脑恶性胶质瘤中的表达与细胞增殖侵袭的关系

【摘要】 目的 探讨人肿瘤易感基因101（TSG101）在人脑恶性胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤细胞增殖侵袭的关系。方法 收集2015年7月至2016年10月我院神经外科收治的34例恶性胶质瘤患者的临床资料和肿瘤组织标本肿瘤组及同期因脑外伤入院的19例患者的正常脑组织作为对照组。使用Real time PCR技术检测临床样本中TSG101的表达水平,Spearman等级相关分析检测TSG101的表达与患者各临床病理指标间的相关性。Western Bolt检测不同人脑恶性胶质瘤细胞系TSG101的表达水平,选取表达最高的细胞在体外构建干扰TSG101表达的细胞系siTSG101组,Western Bolt及Real time PCR进行验证,MTT法检测细胞增殖能力,transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 Western Bolt结果示U251细胞中TSG101相对其他细胞高表达,体外成功干扰U251细胞TSG101的表达后其增殖能力在48 h、72 h出现升高（P<0.05）。Real time PCR结果示恶性胶质瘤组织中TSG101的表达低于正常脑组织,差异具有统计学意义（P<0.05）;Spearman等级相关分析结果示TSG101表达水平与患者性别、年龄及体重无显著相关,与患者胶质瘤细胞分级存在负相关。transwell侵袭实验结果示干扰TSG101表达的细胞侵袭能力显著增强（P<0.05）。结论 TSG101在恶性胶质瘤组织中低表达,其表达与胶质瘤恶性程度呈负相关,并在胶质瘤的增殖侵袭过程中发挥抑制作用。     

RNA干扰沉默Bmi-1基因观察胶质瘤细胞凋亡状况的初步研究

目的:初步探讨Bmi-1基因对胶质瘤细胞凋亡状况的影响?方法:采用siRNA技术干扰沉默U251胶质瘤细胞中Bmi-1基因,RT-PCR法检测干扰效果,流式细胞仪检测U251细胞的凋亡状况, one way ANOVA 和t检验进行统计学分析?结果:RT-PCR显示U251细胞RNA干扰组Bmi-1 mRNA凝胶电泳条带呈弱阳性, 阴性对照组和未处理组Bmi-1 mRNA条带呈强阳性,灰度比统计分析,差异具有统计学意义,siRNA可以明显降低U251细胞中Bmi-1基因的表达;流式细胞仪显示干扰组U251细胞的凋亡率为(32.53±6.33)%,高于阴性对照组的凋亡率(21.91±5.63)%,统计分析其差异具有统计学意义?结论:Bmi-1基因可以抑制胶质瘤细胞的凋亡,有可能促进了胶质细胞瘤的发生?发展?     

Tumstatin transfected into human glioma cell line U251 represses tumor growth by inhibiting angiogenesis

Background Angiogenesis is a prerequisite for tumor growth and plays an important role in rapidly growing tumors,such as malignant gliomas.A variety of factors controlling the angiogenic balance have b...     

去甲二氢愈创木酸对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5生长的影响

目的观察去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5体内外生长的影响.方法采用MTT法、流式细胞仪、光镜等技术观察CHG-5细胞体外增殖、细胞周期、凋亡和裸鼠移植瘤生长情况.结果NDGA可显著抑制CHG-5细胞体外增殖,G0/G1期细胞明显增多,S、G2/M期细胞减少,凋亡细胞增加.采用接种后第5天按50 mg/kg腹腔内注射给药,治疗组移植瘤体积较对照组缩小,未见明显的毒副作用.结论NDGA对CHG-5细胞的体内外生长具有一定的抑制作用,其作用可能与细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡有关.     

Antiangiogenic effect of celastrol on the growth of human glioma: an in vitro and in vivo study

Background Celastrol is a major active component of Tripterygium wilfordii named ＂Thunder God Vine＂, which is widely used to treat rheumatoid arthritis in China. The present study aims to demonstrate that celastrol has potent anticancer activity against glioma in vitro and in vivo. Methods Proliferation, migration, and tube formation of ECV-304 cells were determined by MTT and matrigel assays. The antiangiogenesis effect of celastrol was assessed by the chick chorioallantoic membrane assay and the in vivo matrigel plug assay. Tumor microvessels （MVD） were determined immunohistochemically with anti-CD34 antibody. Vascular endothelial growth factor （VEGF） expression was defined as positive if distinct staining of the cytoplasm was observed in at least 10% of tumor cells at the deepest invasive site, central portion and superficial part of the tumor. MVD was estimated by averaging the counts of three times at a ×200 field in the most vascularized area of the deepest invasive site. Results Celastrol purified from T. wilfordiiinhibited the proliferation of vascular endothelial cells （ECV-304） with an IC50 value of 1.33 μg/ml. Celastrol, at the concentration of 0.2 μg/ml, significantly inhibited cell migration and tube formation. Celastrol inhibited angiogenesis in a dose-dependent manner both in vitro and in vivo. Subcutaneous administration of celastrol 5 days a week for 4 consecutive weeks significantly reduced tumor volume in a dose-dependent manner in the SHG-44 xenograff model. Celastrol at each different dose level lowered the density of MVD significantly in tumor bearing nude mice compared to the control group. Immunohistochemistry experiments further revealed that celastrol also decreased the level of VEGFR-1 and VEGFR-2 expression, but not the level of VEGF expression. Conclusions Celastrol elicits antiangiogenic effects in vitro and in vivo, and could be of potential use in the treatment of malignant cancers such as glioblastoma.     

CD/5-FC自杀基因治疗系统体外杀伤恶性人脑胶质瘤细胞作用的研究

目的：探讨胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶（CD/5-FC）自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法：采用Lipofectamine2000脂质体介导法将CD基因转染U251恶性人脑胶质瘤细胞,G418筛选获得抗性克隆（取名为U251/CD细胞）,使用不同浓度的5-FC作用于U251/CD细胞,MTT法测定活性细胞比率。采用高效液相色谱法（HPLC）检测5-FC培养液内5-FU的浓度。结果：U251细胞获得了质粒的成功转染。基因转染使G418抗性细胞（U251/CD细胞）对5-FC高度敏感。未转染的U251细胞对5-FC不敏感,IC50 约为6 500 μmol/L,而转染基因后 IC50 约为10 μmol/L。并且加入不同浓度的5-FC后,U251/CD细胞培养液内均能检测到5-FU。结论：5-FC对CD基因修饰U251细胞具有杀伤作用;为胶质瘤基因治疗的在体研究提供依据。