氯化钐对大鼠颈上神经节烟碱传递的影响

背景:稀土元素因其独特的理化性质,具有广泛的生物效应,并具有一定的神经毒性。研究已经发现某些稀土元素如镧、钆等对神经肌肉接头和交感神经节突触传递具有一定的影响,但钐对突触传递的影响及机制尚不明确。目的:观察氯化钐对大鼠交感神经节-颈上神经节烟碱型突触传递的影响,分析其可能作用途径。设计:以细胞为观察对象,对照实验。单位:广西医科大学药理教研室。材料:选用成年Wistar大鼠40只,雌雄不拘,体质量250～320g。氯化钐由氧化钐氯化处理后得到。氧化钐由广西医科大学刘达元教授赠送,纯度99.5%,相对分子质量348.7。氯化乙酰胆碱、氨甲酰胆碱均为美国Sigma公司产品。方法:实验于2001-09/2002-12在广西医科大学实验中心神经药理学实验室完成。①将大鼠急性放血处死后,迅速将颈上神经节连同节前神经干离体后固定在浴槽内,节前神经干置于吸引电极内供电刺激。用体积分数0.95的O2和体积分数0.05的CO2混合气饱和,pH为7.4±0.05,恒温(35±0.5)℃的克氏液持续灌流标本。用内充3mol/LKCl、尖端电阻30～60MΩ的玻璃微电极穿刺离体颈上神经节神经元进行细胞内生物电记录。单脉冲(频率0.2～0.5Hz;波宽0.5～1ms;刺激强度2～10V)刺激交感节前神经干,可在颈上神经节细胞内记录到快兴奋性突触后电位。用乙酰胆碱(0.1mmol/L)或氨甲酰胆碱(0.1mmol/L)灌流神经节30～60s可记录到颈上神经节细胞膜除极反应。②比较1×(10-7～10-4)mol/L氯化钐灌流对颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位、膜电位、膜电阻和乙酰胆碱、氨甲酰胆碱膜除极发应的影响;在灌流高钙(10mmol/L)克氏液易化快兴奋性突触后电位后,继用含氯化钐的高钙克氏液灌流,观察氯化钐对高钙易化快兴奋性突触后电位作用的影响。实验中所用药物均用克氏液或改良克氏液配成相应浓度直接灌流神经节。③采用配对t检验比较灌流药物前后生物电差异。主要观察指标:①氯化钐对大鼠颈上神经节的快兴奋性突触后电位的影响。②对颈上神经节细胞膜电位和膜电阻的影响。③对乙酰胆碱和氨甲酰胆碱膜除极化反应的影响。④氯化钐对高钙(10mmol/L)易化快兴奋性突触后电位作用的影响。结果:①1×(10-7～10-4)mol/L的氯化钐能可逆性地抑制大鼠颈上神经节的快兴奋性突触后电位[1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×107mol/L的氯化钐对大鼠颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位幅度抑制百分率分别为(49.78±13.85)%(n=20),(39.05±4.05)%(n=10),(29.83±9.73)%(n=10),(16.30±2.16)%(n=10),P<0.05～0.01]。1×10-4mol/L的氯化钐可使顺行动作电位变成快兴奋性突触后电位(n=5)。②1×10-4mol/L的氯化钐灌流对乙酰胆碱(n=5)和氨甲酰胆碱(n=7)膜除极化反应无明显影响(P>0.05)。③1×(10-7～10-4)mol/L对颈上神经节细胞膜电位、膜电阻无明显影响(n=67,P>0.05)。④1×10-4mol/L氯化钐能拮抗高钙(10mmol/L)对快兴奋性突触后电位的易化作用(n=5,P<0.01)。结论:氯化钐通过突触前机制抑制大鼠交感神经节颈上神经节烟碱传递,可能与抑制突触前钙离子内流有关。     

氯化钐对大鼠颈上神经节烟碱传递的影响

背景：稀土元素因其独特的理化性质，具有广泛的生物效应，并具有一定的神经毒性。研究已经发现某些稀土元素如镧、钆等对神经肌肉接头和交感神经节突触传递具有一定的影响，但钐对突触传递的影响及机制尚不明确. 目的：观察氯化钐对大鼠受感神经节-颈上神经节烟碱型突触传递的影响，分析其可能作用途径。 设计：以细胞为观察对象，对照实验。 单位：广西医科大学药理教研室。 材料：选用成年Wistar大鼠40只，雌雄不拘，体质量250～320g。氯化钐由氧化钐氯化处理后得到。氧化钐由广西医科大学刘达元教授赠送，纯度99．5％，相对分子质量348．7。氯化乙酰胆碱、氨甲酰胆碱均为美国Sigma公司产品。 方法：实验于2001-09／2002-12在广西医科大学实验中心神经药理学实验室完成：①将大鼠急性放血处死后，迅速将颈上神经节连同节前神经干离体后固定在浴槽内，节前神经干置于吸引电极内供电刺激。用体积分数0．95的O2和体积分数0．05的CO2混合气饱和，pH为7．4&;#177;0．05，恒温（35&;#177;0．5）℃的克氏液持续灌流标本。用内充3mol／LKCl、尖端电阻30-60 MΩ的玻璃微电极穿刺离体颈上神经节神经元进行细胞内生物电记录，单脉冲（频率0．2～0．5Hz；波宽0．5～1ms；刺激强度2～10V）刺激交感节前神经干，可在颈上神经节细胞内记录到快兴奋性突触后电位。用乙酰胆碱（0．1mmol／L）或氨甲酰胆碱（0．1mmol／L）灌流神经节30-60s可记录到颈上神经节细胞膜除极反应。②比较1&;#215;（10^-7-10^-4mol几氯化钐灌流对颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位．膜电位．膜电阻和乙酰胆碱、氨甲酰胆碱膜除极发应的影响；在灌流高钙（10mmol／L）克氏液易化快兴奋性突触后电位后，继用含氯化钐的高钙克氏液灌流，观察氯化钐对高钙易化快兴奋性突触后电位作用的影响。实验中所用药物均用克氏液或改良克氏液配成相应浓度直接灌流神经节。③采用配对t检验比较灌流药物前后生物电差异。 结果：①1&;#215;（10^-7～10^-4）mol／L的氯化钐能可逆性地抑制大鼠颈上神经节的快兴奋性突触后电位[1&;#215;10^-4，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-6，1&;#215;10^7mol／L的氯化钐对大鼠颈上神经节细胞快兴奋性突触后电位幅度抑制百分率分别为（49．78&;#177;13．85）％（n=20），（39．05&;#177;4．05）％（n=10）．（29．83&;#177;9．73）％（n=10），（16．30&;#177;2．16）％（n=10），P〈0．05～0．01]。1&;#215;10^-4mol／L的氯化钐可使顺行动作电位变成快兴奋性突触后电位（n=5）。②1&;#215;10^-4mol／L的氯化钐灌流对乙酰胆碱（n=5）和氨甲酰胆碱（n=7）膜除极化反应无明显影响（P〉0．05）．③1&;#215;（10^-7～10^-4）mol／L对颈上神经节细胞膜电位、膜电阻无明显影响（n=67，P〉0．05）。④1&;#215;10^-4mol／L氯化钐能拮抗高钙（10mmol／L）对快兴奋性突触后电位的易化作用（n=5，P〈0．01）。 结论：氯化钐通过突触前机制抑制大鼠交感神经节颈上神经节烟碱传递，可能与抑制突触前钙离子内流有关。     

羧乙基锗倍半氧化物对神经节烟碱传递的影响

背景羧乙基锗倍半氧化物(carboxyethygermanium sesquioxide,Ge-132)是近30年研究较多的具有多种生物活性的有机锗化合物,临床试验性用于老年痴呆症和及其他多种疾病的预防和治疗.但有机锗对神经系统作用环节及机制尚未见文献报道较少.目的探索Ge-132对大鼠颈上神经节细胞及烟碱传递过程的影响.设计非随机自身对照实验性研究.地点和材料实验在广西医科大学实验中心神经药理学实验室完成.材料成年Wistar大鼠30只,雌雄兼用.干预大鼠急性处死后,迅速将颈上神经节连同节前神经离体,用950mL/LO2和50 mL/L CO2混合气饱和的,pH为7.4±0.05的克氏溶液,恒温(35±0.5)℃持续灌流.用内充灌3M-KCl溶液的玻璃微电极穿刺离体颈上神经节神经元进行细胞内记录.所有的药物均用Kreb液中配成相应浓度直接灌流神经节.主要观察指标快兴奋性突触后电位(FEPSP).结果①Ge-132在1×10-4mol/L或更高浓度,可逆地抑制刺激节前神经引起的FEPSP的幅度,并可使动作电位发放频率减少.②对乙酰胆碱(ACh)引起的膜除极反应无显著的影响.③对细胞膜被动膜性质无明显的影响.结论Ge-132对烟碱传递的抑制作用可能是其使突触前ACh释放减少所至.     

羧乙基锗倍半氧化物对神经节烟碱传递的影响

背景：羧乙基锗倍半氧化物(carboxyethygermanium sesquioxide，Ge-132)是近30年研究较多的具有多种生物活性的有机锗化合物，临床试验性用于老年痴呆症和及其他多种疾病的预防和治疗。但有机锗对神经系统作用环节及机制尚未见文献报道较少。目的：探索Ge-132对大鼠颈上神经节细胞及烟碱传递过程的影响。设计：非随机自身对照实验性研究。地点和材料：实验在广西医科大学实验中心神经药理学实验室完成。材料：成年Wistar大鼠30只，雌雄兼用。干预：大鼠急性处死后，迅速将颈上神经节连同节前神经离体，用950mL/L O2和50mL／L CO2混合气饱和的，pH为7．4&#177;0．05的克氏溶液，恒温(35&#177;0．5)℃持续灌流。用内充灌3M-KCl溶液的玻璃微电极穿刺离体颈上神经节神经元进行细胞内记录。所有的药物均用Kreb液中配成相应浓度直接灌流神经节。主要观察指标：快兴奋性突触后电位(FEPSP)。结果：①Ge-132在1&#215;10^-6mol／L或更高浓度，可逆地抑制刺激节前神经引起的FEPSP的幅度，并可使动作电位发放频率减少。②对乙酰胆碱(ACh)引起的膜除极反应无显著的影响。③对细胞膜被动膜性质无明显的影响。结论：Ge-132对烟碱传递的抑制作用可能是其使突触前ACh释放减少所至。     

慢性应激对大鼠海马长时程增强和氨基酸神经递质的影响

背景:严重或持久的应激是很多身心疾病的诱发因素,明显损害机体的认知功能。目的:观察应激状态下海马氨基酸的变化及慢性应激对大鼠海马长时程增强的影响。设计:完全随机对照动物实验。单位:汕头大学精神卫生中心。材料:实验于2000-12在汕头大学医学院完成。实验动物为SD成年雄性大鼠16只,随机分为对照组和应激组,每组8只。方法:应激组强迫游泳4周建立慢性应激模型,采用离体海马脑片(500μm)结合电生理的方法观测海马CA1区长时程增强的变化。在海马CA3区Schaffer侧支施加高频刺激后,观察CA1区锥体神经元群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率的改变。应用高效液相色谱紫外检测法对海马氨基酸神经递质进行定量分析。主要观察指标:①以群体峰电位的幅值和场兴奋性突触后电位的斜率作为观察长时程增强变化的指标。②海马氨基酸含量变化。结果:实验第2周应激组大鼠溺水死亡1只,给予补充,其余全部进入结果分析。①对照组的群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率在高频刺激后增大的幅度明显高于应激组(P<0.05)。②对照组天冬氨酸和谷氨酸的水平明显低于应激组,[(2.425±0.211),(4.746±0.609)μmol/g,P<0.01];[(6.016±0.677)(8.094±1.035)μmol/g,P<0.01],而两组间γ-氨基丁酸的含量接近,差异无显著性[(4.229±0.449),(4.249±0.463)μmol/g,P>0.05]。结论:慢性应激抑制海马CA1区长时程增强的形成,提高海马组织天冬氨酸和谷氨酸的水平,而对γ-氨基丁酸的含量没有影响。慢性应激所引起的海马兴奋性氨基酸的堆积可能是学习和记忆能力损害的神经生化基础。     

听觉皮质-丘脑兴奋性突触传递的盲法膜片钳研究

目的:制备包含大鼠听皮质与内侧膝状体及两者间功能联系的脑片,采用盲法膜片钳全细胞记录技术,对听皮质-内侧膝状体兴奋性突触传递的生理和药理学特性进行实验观察。方法:实验于2004-04/06在第三军医大学基础部生理学教研室完成。实验动物选择出生后7～15d健康SD大鼠21只,制备与水平方向呈15°的600μm的内侧膝状体脑片,采用膜片钳全细胞记录。电极内液成分及其浓度(mmol/L)为:甲磺酸铯120、氯化镁2、羟乙基哌嗪乙磺酸10、乙二醇双(2-氨基乙醚)四乙酸0.5、三磷酸腺苷2、QX-3142;灌流液中常规加入γ-氨基丁酸A受体拮抗剂荷包牡丹碱(10μmol/L)。获得内侧膝状体神经元全细胞模式后,在电流钳或电压钳模式下,双极钨丝刺激听皮质颗粒下层(Ⅴ～Ⅵ层),给予时程为100μs的方波刺激,在内侧膝状体分离记录兴奋性突触后电位和兴奋性突触后电流;观察N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂D,L-2-氨基-5磷酸基戊酸(50μmol/L)和α-氨基羟甲基恶唑丙酸受体拮抗剂氰基-2-硝基喹啉-2,3-二酮(20μmol/L)对兴奋性突触后电流的影响。结果:①观察15例内侧膝状体神经元对皮层刺激的反应,其平均膜静息电位为(49±13.5)mV,膜输入阻抗为(432±109)MΩ。电流钳模式下,刺激听皮质,可在80%(12/15)的内侧膝状体神经元记录到兴奋性突触后电位,其幅度与刺激强度在一定范围内呈正相关,在3例记录中采用了不含QX-314的电极内液,可以观察到当刺激达到阈值水平,在兴奋性突触后电位的波峰上爆发了动作电位。②选择电压钳模式;电压钳下,刺激听皮质后可在内侧膝状体神经元记录到兴奋性突触后电流,钳制电位为-70mV时,电流是内向的,加入氰基-2-硝基喹啉-2,3-二酮后,兴奋性突触后电流的幅度显著下降,进一步加入D,L-2-氨基-5磷酸基戊酸后,兴奋性突触后电流几乎完全消失。结论:600μm的旁水平位脑片包含了内侧膝状体与听皮质以及两者之间的功能性纤维联系;刺激听皮质,可在内侧膝状体记录到兴奋性突触后电位和兴奋性突触后电流;兴奋性突触后电流可以被D,L-2-氨基-5磷酸基戊酸和氰基-2-硝基喹啉-2,3-二酮所阻断。听皮质-内侧膝状体突触的兴奋性传递以谷氨酸为神经递质,主要由α-氨基羟甲基恶唑丙酸和N-甲基-D-天冬氨酸受体两种受体介导。     

脑缺血大鼠缺血同侧海马齿状回突触可塑性的变化

目的:观察缺血性脑损伤对缺血同侧海马齿状回突触可塑性的影响。方法:实验于2005-06/2005-08在中国科技大学生命科学院神经毒理实验室完成。24只雄性Wistar大鼠分为假手术2周组和缺血2周组两组,采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型,待大鼠苏醒后(术后3h)及2周后分别观察大鼠行为表现并进行神经功能缺损评分。模型制作14d后进行海马齿状回区反应波形测定和实验参数测定,观察缺血同侧海马齿状回区的I/O曲线,缺血同侧海马齿状回区长时程增强,缺血同侧海马齿状回区长时程抑制。结果:2组各12只大鼠均进入结果分析。假手术组有9只大鼠引出反应波形,缺血组有8只大鼠引出反应波形,排除过高或过低数值,每组有6只大鼠进入数据分析。①缺血2周后缺血同侧海马齿状回兴奋性突触后电位的I/O曲线幅度显著降低穴F=43.95,P<0.05雪,群峰电位的I/O曲线幅度也显著降低穴F=4.58,P<0.05雪。②兴奋性突触后电位的长时程增强幅度在假手术组为(109.0±3.8)%,缺血2周后升高为(114.0±1.9)%穴F=13.79,P<0.05雪。群峰电位的长时程增强幅度在假手术组为穴201±13雪%,而在缺血组群峰电位的长时程增强幅度明显降低为穴179.0±13雪%穴F=4.56,P<0.05雪。③兴奋性突触后电位的长时程抑制幅度在假手术组为(98.7±3.4)%,缺血2周后明显降低为(89.0±3.5)%穴F=18.95,P<0.05雪。群峰电位的长时程抑制幅度在假手术组为(84.7±5.3)%,而在缺血组群峰电位的长时程抑制幅度为(85.6±3.9)%,与假手术组无明显区别穴F=0.63,P>0.05雪。结论:脑缺血降低了海马齿状回区基本的突触传递,同时降低单脉冲刺激海马穿通纤维引起的齿状回颗粒细胞的共同发放幅度;缺血损伤了海马齿状回区群峰电位的长时程增强诱导,而对兴奋性突触后电位的长时程增强诱导有促进作用;缺血损伤了海马齿状回区兴奋性突触后电位的长时程抑制诱导,而对群峰电位的长时程抑制诱导没有明显影响。     

激动或阻断N-甲基-D天冬氨酸受体对大鼠脑海马兴奋性氨基酸释放的影响

目的:应用清醒大鼠脑微透析技术,观察N-甲基-D-天冬氨酸受体激动剂和阻断剂对大鼠海马兴奋性氨基酸释放的影响,探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体对大鼠海马兴奋性氨基酸释放的自身调节作用。方法:实验于2003-12在锦州医学院药理教研室完成。45只雄性SD大鼠,横跨海马背部植入一自制的透析探头,待大鼠清醒后24h用人造脑脊液,N-甲基-D-天冬氨酸250,500μmol/L,N-甲基-D-天冬氨酸500μmol/L+MK-801100μmol/L,MK-801100μmol/L,甘氨酸500μmol/L,7-氯犬尿烯酸200μmol/L灌流,灌流速度为5μL/min,每20min收集一次透析液,采用邻苯二甲醛-β-巯基乙醇衍生化反相梯度洗脱荧光检测透析液中谷氨酸和天冬氨酸的水平。结果:45只大鼠均进入结果分析。海马内局部灌流N-甲基-D-天冬氨酸250,500μmol/L可明显增加细胞外基础状态下谷氨酸和天冬氨酸的水平。非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801(100μmol/L)可拮抗N-甲基-D-天冬氨酸(500μmol/L)引起的谷氨酸释放增加作用。单独应用MK-801(100μmol/L)对基础状态下谷氨酸的水平没有影响。局部灌流N-甲基-D-天冬氨酸受体协同激动剂甘氨酸500μmol/L也可明显增加细胞外基础状态下谷氨酸的水平。局部灌流N-甲基-D-天冬氨酸上甘氨酸部位的选择性阻断剂7-氯犬尿烯酸200μmol/L可以拮抗甘氨酸引起的谷氨酸释放增加作用。结论:兴奋性氨基酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体的激活增加海马内兴奋性神经递质的释放,这种N-甲基-D-天冬氨酸受体可能存在于突触前膜(兴奋性神经末梢膜上),即自身调节受体正反馈调节兴奋性氨基酸的释放。     

前列腺酸性磷酸酶可能通过突触前机制参与骨癌痛大鼠脊髓镇痛

目的:运用神经电生理学方法,观察前列腺酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)对骨癌痛(cancer-induced bone pain,CIBP)大鼠脊髓背角神经元兴奋性的影响。方法:SD雌性大鼠12只,随机分为两组(n=6):CIBP模型组和假手术组,CIBP组于右侧胫骨骨髓腔内接种5μl大鼠乳腺癌细胞(2×105个),14天后造模完成。运用腰髓薄片全细胞膜片钳记录两组大鼠脊髓背角神经元兴奋性的变化,在灌流液中加入PAP,观察PAP对两组大鼠脊髓背角神经元兴奋性的影响。结果:脊髓薄片全细胞电压钳研究表明,与假手术组大鼠对比,骨癌痛大鼠脊髓背角Ⅱ层神经元自发的兴奋性突触后电流(spontaneous excitatory post-synaptic currents,sEPSCs)和刺激电极诱发的兴奋性突触后电流(evoked excitatory post-synaptic currents,eEPSCs)的幅度显著增大,而sEPSCs的频率未见变化。给予PAP灌流,PAP显著降低骨癌痛大鼠脊髓背角Ⅱ层神经元的sEPSCs发放频率,而对其幅度未见明显影响;且该效应可被腺苷A1R的拮抗剂CPX翻转。PAP对于假手术组大鼠脊髓背角神经元兴奋性没有明显影响。结论:PAP可能通过突触前机制参与骨癌痛模型大鼠的脊髓镇痛过程。     

内源性大麻素诱发脊髓伤害性回路的去抑制效应

目的:观察内源性大麻素2-AG对脊髓背角浅层伤害性突触传递的影响。方法:选用5~6周雄性SD大鼠,麻醉后用人工脑脊液快速灌注心脏,取出脊髓腰膨大段,制备保留后根的脊髓旁矢状位切片。采用全细胞膜片钳技术,记录脊髓背角II层胶状质神经元,脊髓后根电刺激诱发初级传入和记录神经元之间的突触后电位。在脊髓切片上灌流2-AG,观察其对Aδ和C纤维介导的兴奋性突触后电位(e EPSPs)或抑制性突触后电位(e IPSPs)的影响。结果:2-AG显著抑制Aδ和C纤维介导的e IPSPs的幅度(P<0.01),而对e EPSPs无明显影响。结论:内源性大麻素2-AG可抑制脊髓背角浅层Aδ和C纤维介导的抑制性突触传递,发挥去抑制效应,但对兴奋性突触传递影响不大,提示内源性大麻素可能参与抑制性脊髓回路功能降低导致的中枢敏化过程。     

The presynaptic site of action of norepinephrine in the superior cervical ganglion of guinea pig.

Supramaximal preganglionic volleys did not elicit detectable postsynaptic potential in the curare-treated superior cervical ganglion cell of the guinea pig whereas, a tetanic stimulation (10-30 Hz, 1-5 seconds) consistently evoked a monophasic depolarizing potential resembling the slow excitatory postsynaptic potential. The depolarizing potential was not preceded by a detectable hyperpolarization. In non-curare-treated preparations, norepinephrine in concentrations of 1 to 10 muM consistently and reversibly suppressed the fast excitatory postsynaptic potential elicited by submaximal preganglionic stimulation without appreciably affecting the resting membrane potential, the total membrane resistance or the cell membrane excitability. Pretreating the ganglion with phenoxybenzamine (10 muM) completely prevented, whereas propranolol (30 muM) failed to antagonize, the ganglionic depressant action of norepinephrine. The amplitude and time course of the iontophoretically induced acetylcholine potential were not significantly altered by norepinephrine in concentrations which markedly attenuated the response of the fast excitatory postsynaptic potential. The frequency but not the amplitude of the miniature excitatory postsynaptic potentials was significantly reduced by norepinephrine (1-10 muM). These results demonstrate that norepinephrine inhibits ganglionic transmission in the guinea pig principally by reducing the output of acetylcholine from the presynaptic nerve terminals. These data are discussed with respect to their relation to the presence in the guinea pig superior cervical ganglion of norepinephrine-containing small intensely fluorescent cells which are not connected synaptically with the postganglionic neurons.     

Properties of highly purified leukotriene C4 synthase of guinea pig lung.

To examine whether Cl- is transported via transcellular pathways in the thin ascending limb of Henle's loop (TAL), conventional microelectrode technique was applied in isolated TAL segments of hamsters perfused in vitro. The average basolateral membrane voltage (VB) was -24.5 +/- 1.5 mV (n = 18). Ouabain (10(-4) M) had no effect on VB. Sudden reduction of basolateral Cl- concentration from 165 to 5 mmol/liter caused a large depolarizing spike (+49.1 +/- 2.7 mV, n = 18), while the transepithelial potential (VT) showed lumen positive deflection by 33.4 +/- 1.2 mV, which indicates that a large Cl- conductance exists in the basolateral membrane. Reduction of luminal Cl- concentration caused sustained depolarization of luminal cell membrane from +24.5 +/- 2.1 to -9.7 +/- 3.4 mV (n = 6), which indicates that there is also a Cl- conductance in the luminal membrane. Since we have previously shown that acidification of ambient solution suppresses the transmural Cl- permeability, we tested whether acid pH also inhibits the Cl- conductance of the basolateral membrane. When pH of the bathing fluid was lowered to 5.8, the depolarizing spike of VB and the change of VT upon sudden reduction of basolateral Cl- were almost completely abolished. From these results we conclude: (a) both the luminal and the basolateral membrane of hamster TAL segments have Cl- conductances, and (b) Cl- transport in the TAL takes place, at least in part, via a transcellular route when a transepithelial Cl- gradient is present.     

电压依赖性钙通道参与大振幅微小兴奋性突触后电流形成的实验研究

目的观察电压依赖性钙通道是否作用于大鼠脊髓背角胶状质层(SG)神经元大振幅微小兴奋性突触后电流的形成。方法选用成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,2%～3%异氟烷麻醉后,分离其腰骶部的脊髓,然后切片。采用全细胞电压钳技术,玻璃微电极的电阻为4～6 MΩ,钳制电压为70 mV,记录胶状质层神经元微小兴奋性突触后电流(mEPSC)电流。将电流信号用Axopatch 200来放大并储存于电脑。对照组和用药结束后,持续采样mEPSC电流30 s。mEPSC电流的频率和振幅用Clampfit 8.1进行分析。结果钳制电压为70 mV时,所有SG神经元均有自发性的EPSC。辣椒素增加mEPSC发生的频率和波幅。钴离子抑制辣椒素诱导的大振幅mEPSC。钴离子抑制辣椒素诱导的mEPSC的平均振幅,而不抑制其发生频率。结论电压依赖性钙离子通道参与了辣椒素引起的痛觉形成。     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对豚鼠心肌细胞电生理及L-型钙电流的作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对豚鼠心肌细胞动作电位间期及L-型钙电流的作用。方法 分离豚鼠乳头肌的单个心室肌细胞，采用内充3mol／LKCl的玻璃微电极记录心肌动作电位。采用膜片钳全细胞技术，钳制电位-40mV，保持时间200ms，指令电位为0，并记录L-型钙电流的最大峰电流。结果 灌注血管紧张素Ⅱ可致多种机制的心律失常。灌注1min，动作电位振幅、动作电位复极90％的间期（APD90）、静息膜电位（RMP）较对照状态显著降低或缩短；灌注3min，动作电位复极30％和50％的间期（APD30和APD50）及有效不应期均较对照状态显著缩短。膜片钳研究示血管紧张素Ⅱ灌注5min，L-型钙电流较对照状态显著增加，氯沙坦灌注1min L-型钙电流显著降低，灌注3min较1min进一步降低，电压-电流关系曲线形状均无显著变化。结论 血管紧张素Ⅱ降低动作电位幅度，缩短动作电位时程及有效不应期，电压依赖性增加L-型钙电流最大峰电流，具有致心律失常作用，氯沙坦电压依赖性地降低L-型钙电流。     

异丙酚对小鼠海马锥体神经元膜特性和突触后电流的影响

目的观察异丙酚对小鼠鼠海马锥体神经元膜特性和突触后电流的影响。方法用冰冻切片的方法将C57小鼠海马半脑切成300 μm厚度。运用全细胞膜片钳技术记录海马锥体神经元在异丙酚作用前后动作电位反应、I-V曲线及突触后电流反应后变化情况。 结果异丙酚明显减少不同刺激强度下胞体动作电位产生的个数,加入异丙酚后使锥体细胞动作电位发放个数由5±3个降至2±1个（P<0.01）,而对动作电位幅度无显著影响。异丙酚可改变海马锥体神经元对兴奋性电压刺激的I-V曲线平台期反应,使最大电流幅度由1647.63±124.02 pA增加至2955.08±119.10 pA（P<0.01）。异丙酚可降低锥体神经元突触后电流,加入异丙酚前为146.5±25.89 pA,加入异丙酚后为72.8±18.71 pA（P<0.01）,20 min洗脱异丙酚后电流幅度恢复至132.1±30.2 pA（P<0.01）。 结论异丙酚可降低海马锥体神经元动作电位发放数,改变I-V曲线兴奋性平台期反应和可逆地降低神经元突触后电流反应。       

经颅电刺激咀嚼肌诱发电位:非创伤性评估皮质脑干束功能

目的对健康个体进行经颅电刺激咀嚼肌诱发电位的研究,建立评估皮质脑干束的检查方法.方法对56名健康志愿者进行经颅电刺激,在双侧咀嚼肌同时接受,分别记录同侧的根运动诱发电位(root motor evoked potentia1,R-MEP)和对侧的皮层运动诱发电位(cortical motor evoked potential,C-MEP)的潜伏期、波幅.结果R-MEP的潜伏期为(3.55±0.44)ms,波幅为(3.49±2.73)mV;C-MEP的潜期为(5.83±1.40)ms,波幅为(563.84±525.07)μV.C-MEP的潜伏期与年龄无明显相关性(P＞0.1).结论C-MEP是一种非创伤性评估皮质脑干束的检测方法.     

交感神经皮肤反应检查对椎基底动脉供血不足性眩晕的诊断价值

目的:应用交感神经皮肤反应(SSR)检查了解椎基底动脉供血不足性眩晕(VBI)患者交感神经反射活动,并探讨SSR对VBI的诊断价值。方法:对56例VBI患者在急性发作期及恢复期行SSR检查,并与56例健康人作对照。结果:VBI组急性发作期SSR潜伏期(Lat)、波幅(Amp)上肢分别为(1.53±0.35)s,(2.34±1.00)mV;下肢分别为(2.07±0.38)s,(1.21±0.55)mV。恢复期Lat,Amp上肢分别为(1.40±0.20)s,(2.82±1.00)mV;下肢分别为(1.81±0.22)s,(1.74±0.77)mV。正常对照组Lat,Amp上肢分别为(1.35±0.14)s,(2.90±1.29)mV;下肢为(1.78±0.16)s,(1.78±0.80)mV。VBI组急性发作期SSRLat及Amp较正常对照组差异均有显著性意义(q=4.48～7.99,P<0.01),SSR总异常率为66%(37/56)。恢复期Lat和Amp较正常对照组差异无显著性意义(P>0.05),但SSR异常率为9%(5/56)。结论:VBI患者可出现交感神经功能暂时性损害,病情控制后交感神经功能可随之改善,SSR检查可作为VBI诊断的参考指标。     

血浆PLG、AT-Ⅲ、vWF、FIB检测在儿童原发性肾病综合征和紫癜性肾炎鉴别诊断中的临床意义

目的测定原发性肾病综合征（PNS）和紫癜性肾炎（HSPN）患儿血浆中纤溶酶原（PLG）活性（PLG：A）、血管性假血友病因子（vWF）水平、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）活性（AT：A）、纤维蛋白原（FIB）的水平,并探讨其在鉴别诊断中的意义。方法取41例PNS患儿和32例HSPN患儿血浆,采用发色底物法测定PLG：A、AT：A,免疫比浊法测定vWF水平,磁珠凝固法测定FIB水平。结果PNS患儿血浆PLG：A及AT：A水平分别为（69．15±17．61）％及（58．32±26．38）％各自均低于HSPN患儿的水平,后者PLG：A水平为（93．51±15．57）％、AT：A水平为（123．80±26．40）％,差异有统计学意义（P〈0．01）;PNS患儿血浆vWF水平及FIB水平分别为（211．40±62．61）％及（5．11±0．98）g／L各自均高于HSPN患儿的水平,后者vWF水平及FIB水平分别为（119．51±46．30）％及（3．25±0．79）g／L,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PNS患儿血浆凝血活性较HSPN患儿高,检测PLG：A、AT：A、vWF、FIB有助于两者的鉴别诊断。     

三七总皂苷对慢性肾衰竭患者尿白蛋白的影响

目的 观察三七总皂苷治疗慢性肾衰竭(CRF)的临床疗效. 方法 将60例CRF(非尿毒症期)患者按入院顺序1:1随机分为观察组和对照组,每组30例.观察组在一般对症治疗基础上给予三七总皂苷提取物血栓通0.45 g,每日1次;对照组给予百令胶囊1.0 g,每日3次;两组均治疗2个月.观察治疗前后两组肾功能、血红蛋白、24 h尿蛋白定量、甲状旁腺素(PTH)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的变化. 结果 两组患者治疗后血肌酐(SCr)、内生肌酐清除率(CCr)、尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血红蛋白、24 h尿蛋白定量均较治疗前有不同程度改善,以观察组CCr、BUN、血红蛋白、24 h尿蛋白定量变化更为明显[CCr(ml/s):0.36±0.13比0.34±0.12,BUN(mmol/L):15.66±9.05比20.32±8.30,血红蛋白(g/L):101.2±9.4比95.4±8.7,24 h尿蛋白定量(mg):1 040±450比2 360±390,均P<0.05];而两组治疗后PTH、NAG中仅对照组NAG(U/L)较治疗前明显下降(18.2±9.8比28.9±12.0,P<0.05). 结论 三七总皂苷是治疗CRF(非尿毒症期)的有效药物,具有改善肾功能、减少尿蛋白等作用.