有关免疫监视假说的争论和发展(综述)

免疫监视假说正式发表以来已十余年。该假说的主要观点有:①机体内经常发生基因突变,当发生肿瘤性质的突变时,细胞表面可以有新的抗原决定簇出现;②机体的免疫活性细胞可被突变细胞表面上的新抗原所致敏,再通过一系列免疫反应变化而产生具有细胞毒作用的T 淋巴细胞。此后,恶变的肿瘤细胞可被这些致敏的T 细胞破坏消除。免疫监视理论强调胸腺依赖性淋巴细胞在免疫监视作用中的重要作用;③癌肿的发生发展是由于机体的免疫监     

NKG2D受体配体系统介导肿瘤免疫逃逸的研究进展

摘 要：NK细胞作为机体固有免疫的重要组成部分，在肿瘤免疫监视机制中起重要作用。NKG2D是NK细胞重要的激活受体，通过识别位于肿瘤细胞表面的NKG2D配体，介导细胞毒效应清除肿瘤细胞。然而存在多种因素可影响NKG2D受体与配体的表达，阻断了NKG2D信号转导，为肿瘤细胞免疫逃逸提供可能。NKG2D受体配体系统还可作为临床诊疗的靶点，为肿瘤患者诊断、治疗以及评估预后提供依据。本文就NKG2D受体配体系统介导的肿瘤细胞免疫逃逸的机制以及目前已有的针对性免疫治疗方法进行综述，为临床应用提供更多思路。     

急性白血病患者治疗前后骨髓中NK细胞活性及免疫球蛋白的测定及其意义

 NK细胞是天然免疫系统的重要组成部分，绝大部分为大颗粒淋巴细胞，免疫表型为CD3^-、CD16^＋、CD56^＋。它能快速溶解肿瘤细胞、病毒感染细胞、骨髓与胸腺的某些细胞亚群等，无需抗体参与和事先致敏，亦不受MHC限制，是机体免疫监视的主要成分，可以识别和杀伤突变细胞，在机体的抗肿瘤免疫监视中起第一道防线的作用。     

CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞调控肿瘤免疫抑制微环境的研究进展

目的： CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（ Treg ）是肿瘤免疫抑制微环境的主要组成部分,其在肿瘤的免疫抑制微环境中分泌IL－10、IL－35、TGF－β1和FGL2等细胞因子发挥免疫抑制作用。Treg细胞抑制CD4＋T、CD8＋T淋巴细胞和NK细胞,进而抑制特异性抗肿瘤免疫反应使肿瘤细胞更容易逃避免疫监视。进一步研究Treg细胞在肿瘤免疫中的作用机制,对深入了解恶性肿瘤的发病机制及免疫治疗具有重要的理论意义。此外,Treg细胞及其分泌的细胞因子在肿瘤治疗和预后评估等方面也具有广阔的临床应用前景。     

肿瘤的免疫逃逸

肿瘤在人体免疫监视功能作用下仍能发生、发展、转移，表明肿瘤具有逃避机体免疫监视的功能。肿瘤自身释放的抑制因子起到重要作用。肿瘤细胞本身会释放VEGF、IL10、TGFβ、PEG2、IL6、趋化因子、NO等抑制因子使DC分子表面MHC分子或共刺激分子CD80/86表达改变；或是肿瘤细胞表面的标志物Fas、CD44、TAA、MHC分子、B7分子、MCRP在肿瘤表面表达改变，影响DC的抗原提呈过程，致使肿瘤无法被正常识别和杀伤。另外，T细胞应答能力的下降，在肿瘤细胞数量极少时造成漏逸，以及血清中封闭因子的存在，也会造成机体在抗肿瘤方面受到抑制。     

CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3 CD56 NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3 CD56 NKT细胞及CD3-CD56 NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3 CD56 NKT细胞、CD3-CD56 NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3 CD8 T细胞、CD3 CD56 NKT细胞以及CD3-CD56 NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3 CD8 T细胞和CD3 CD56 NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3 CD56 NKT细胞和CD3-CD56 NK细胞明显增加为主。结论CD3 CD56 NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3 CD8 CTL和CD3-CD56 NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。     

固相IL-2的体内活性作用

IL-2做为一种免疫调节因子,其主要功能在于增强T细胞、NK细胞的细胞毒活性,并诱生某些细胞毒因子。现已证明单独使用IL-2或与过继淋巴细胞联用,能使人和动物的肿瘤消退。但问题在于IL-2会导致以毛细血管漏出综合征为主要机理的系统及器官特异性毒性反应,要诱导局部抗肿瘤作用就必须提高整体IL-2水平。一种对策是将IL-2局限于一定的部     

急性淋巴细胞性白血病患者骨髓血νδT细胞的动态分析

νδT淋巴细胞是一群具有特殊功能的T细胞，在机体自身稳定和免疫反应中起着极其重要的作用，业已证实，νδT细胞具有MHC非限制性细胞毒作用，能够杀伤各种肿瘤靶细胞，包括NK敏感和NK抵抗细胞，Wright等已研究证实：从B淋巴瘤患者分离得到的νδT细胞具有特异性识别患者自体肿瘤细胞表面Ig的独特型抗原和杀伤肿瘤细胞的作用。     

HSP70-TKD诱导的NK细胞杀伤肝癌细胞的实验研究

目的:探讨从人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中获得足够数量和高细胞毒活性的CD3-CD56 NK细胞的方法,并观察其对肝癌细胞HepG2杀伤效应.方法:以干细胞培养基(SCGM)为基础培养基,在不同浓度的抗CD3单抗、IL-2和PHA的培养条件下,从健康人PBMC中高效扩增获得CD3-CD56 NK细胞;以不同剂量的HSP70-TKD诱导NK细胞的活性,MTT法测定HSP70-TKD诱导的NK细胞对HepG2和榄香烯处理的HepGZ细胞的杀伤活性.结果:建立了从人PBMC体外扩增CD3-CD56 NK细胞体系:以SCGM为基础培养基,在600 U/mL IL-2、500 μg/L抗CD3单抗和50 mg/L PHA联合作用下,培养14 d细胞扩增了116倍,舍有(66.97±8.76)?3-CD56 NK细胞;HSP70-TKD诱导的NK细胞对HepG2杀伤活性低.与未经TKD诱导的NK细胞之间差异无统计学意义,P=0.298;而对税香烯处理过的HepG2杀伤活性高,诱导组与未诱导组之间差异有统计学意义,P=0.008;当TKD浓度为2.0 mg/L时,杀伤活性最高为(58.8±3.4)%.结论:以干细胞生长培养基为基础培养基,在抗CD3单抗和IL-2协同刺激下体外大量扩增NK细胞,HSP70-TKD诱导的NK细胞对细胞膜HSP70阳性的肿瘤细胞杀伤活性高,而对于细胞膜HSP70低表达的肿瘤细胞杀伤活性低.     

NK/T细胞淋巴瘤

目的：了解和认识NK／T细胞淋巴瘤的临床病理和免疫学特点。方法：选用NK细胞特异性抗体CD56，T细胞特异性抗体CD3E，对117例T细胞淋巴瘤进行标记。结果：117例T细胞淋巴瘤中26例CD56（＋），CD3ε（＋），阳性表达率为22．2％，26例中结外淋巴瘤16例（61．5％），其中15例位于鼻部；淋巴结内10例（38．5％），26例中18例（69．2％）表现为细胞的多形性特点，12例（46．2％）有凝固性坏死。结论：NK／T细胞淋巴瘤免疫学特点是CD56与CD3ε共同表达，NK／T细胞淋巴瘤多发生在结外，以发生于鼻部者为多，少数发生在结内，肿瘤细胞的多形性和肿瘤组织的凝固性坏死是主要的病理学特点。     

鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型和细胞毒颗粒蛋白的表达及其意义

目的 观察鼻NK／T细胞淋巴瘤的免疫表型和细胞毒颗粒蛋白的表达及其意义：方法：采用DAKOEn Vision两步法在44例鼻NK／T细胞淋巴瘤病例中检测CD3、CD20、CD43、CD45、CD45RO、CD56、CD57和CD79α等8种常用淋巴细胞表面标记物和3种细胞毒颗粒蛋白TIA-1、Granzyme-B、perforjn的表达，观察和分析检测结果，并与发生在相同部位的其他常见恶性淋巴瘤的检测结果进行比较分析。结果：44例鼻NK／T细胞淋巴瘤均表达CD45；CD3阳性率为43％，阳性定位在细胞质；CD56、CD43和CD45RO的阳性率分别为52％、45％和52％，CD20、CD79α和CD57均为阴性。TIA-1、Granzyme-B和perfoljn的阳性率分别为100％、93％和95％，对照组的23例鼻腔和鼻咽T、B细胞淋巴瘤中均不表达。结论：鼻NK／T细胞淋巴瘤的免疫表型不一致，并非所有病例显示CD56阳性，石蜡切片中CD3的阳性定位与通常的外周T细胞淋巴瘤不同。细胞毒性颗粒蛋白在肿瘤细胞中的高表达，提示它们可能为NK细胞来源。细胞毒性颗粒蛋白是鼻NK／T细胞淋巴瘤诊断和鉴别诊断重要标志。     

NK/T细胞浸润对肺鳞癌患者生存与预后的影响

背景与目的:机体组织中自然杀伤细胞和细胞毒T淋巴细胞是构成机体细胞免疫的主导成分,对肿瘤组织必然有影响.本研究探讨NK/T细胞在肺鳞癌组织中的浸润程度及对患者生存与预后的影响.方法:将CD8作为细胞毒T淋巴细胞(CTL)的标记物,CD56作为自然杀伤细胞(NK)的特异性标记物,应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中NK/T细胞的分布和浸润情况.结果:68例肺癌中,CTL无/轻度浸润的者39例,5年生存率为18%;显著浸润者29例,5年生存率为42%;NK细胞无/轻度浸润者46例,5年生存率为14%,显著浸润者22例,5年生存率为45%;NK/T无轻度浸润者48例,5年生存率为33%,均显著浸润的20例,5年生存率为54%.经Log-rank检验,NK/T显著浸润组5年生存率显著高于无/轻度浸润组,差异有显著性(X2=18.62,P=0.00).结论:肺鳞癌组织中NK/T细胞显著浸润组的预后和生存时间明显优于轻度浸润组.其机制与机体细胞免疫有关.     

克隆化的自然杀伤细胞对骨髓移植、肿瘤发生及转移的影响

先天免疫缺陷的裸鼠体内无成熟的T 细胞,但其自发肿瘤的发病率仍较低,这一现象使人们对杀伤性T 细胞在肿瘤免疫监视中的作用产生了怀疑,闪此将注意力集中到所谓非特异的效应细胞,如自然杀伤细胞(NK 细胞)正常鼠和裸鼠体内均有NK 细胞,它可能是机体识别和清除肿瘤的第一道重要防线。     

肿瘤细胞释放因子抑制IL_2生成

已有研究表明,IL:(白细胞间介素_2与淋巴细胞,肿瘤细胞共孵后可诱导肿瘤特异性细胞毒T 细胞活性。肿瘤机体的IL_2生成降低,其细胞毒T 细胞活性也减少或缺乏(可能是由于IL:生成减少之故),鉴于黑色素瘤细胞释放因子可抑制PHA 反应,为此     

细胞因子组合体外扩增人NK细胞的研究

目的：探讨细胞因子IL-2、IL-12、IL-15和IL-18组合对体外扩增人外周血来源的NK细胞受体表达及杀伤肿瘤细胞能力。方法：NK细胞的培养分为cIK组、IL2＋II,15组和IL-2＋IL-12＋IL-15＋IL-18组;流式细胞术检测培养的细胞表型及NK细胞受体表达;LDH法检测不同效靶比NK细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤作用。结果：外周血淋巴细胞经细胞因子IL-2＋IL广12＋IL-15＋IL-18组合作用下,17d后NK细胞（CD3-CD56＋）比例上升至80％以上,NK细胞数扩增〉1000倍,明显高于其他两组,F=37．154,P〈0．001。NK细胞活化标志CD69。‘分子增加（t-21．271,P〈0．001）,NK细胞活化性受体（NKG2D、NKp30、NKp44和NKp46）均有不同程度上调（P值均〈0．05）,而NK细胞抑制性受体CDl58b（t=3．416,P=0．021）和CDl59a（t=4．209,P=0．018）不同程度下调,T淋巴细胞、B淋巴细胞（CD19＋）、单核巨噬细胞（CD14＋）、调节性T细胞（T—reg）等均显著减少,P〈0．001。对扩增的NK细胞杀伤敏感的肿瘤细胞株均高表达MHCI类相关蛋白A（majorhistocompatibility complexclass Ichainrelated moleculesA,MICA）,MICA表达分别为K562（46．2±3．2）％、MCF-7（56．5±4．7）％、HTC-8（52．5±4．1）％和Eca-109（36．5±2．5）％,而对NK细胞抵抗的细胞株均低表达或不表达MICA分子,分别为Raji0、MDA-MB-435s0和HT-29（1．2±0．8）％。结论：细胞因子IL-2＋IL-12＋IL-15＋IL-18组合能有效的扩增外周血来源NK细胞,上调其活化性受体,下调抑制性受体,其数量及功能均满足临床治疗需要。     

脂多糖对NK细胞结合与杀伤肿瘤细胞的增强作用

众所周知,NK 细胞能自发的溶解肿瘤细胞,在肿瘤免疫监视中起一定作用.但内源性抑制的机理和外源性(细菌、病毒、和肿瘤等)的刺激作用,对NK 细胞活性调节的重要性尚不了解.体外试验证明,干扰素(IFN)能增加鼠和人淋巴细胞抗肿瘤和其它靶细胞的自发性细胞毒作用。脂多糖(LPS)也能增加人类淋巴细胞对肿瘤细胞的活性.作者采用Grimm和Bonavida 改良法做了体外试验,观察大肠杆菌脂多糖对NK 细胞活性的影响。取20～40岁健康者外周血的非粘附(NA)T 淋巴细胞作效应细胞,并将NA 细胞进一步分为Fcr~ 与     

免疫衰老及其在肿瘤中的作用

免疫衰老是指机体随着年龄增长而出现的免疫器官、免疫细胞等的结构与功能性衰退,导致免疫监视能力下降,从而引起肿瘤免疫逃逸发生,促使癌症的发生发展.机体固有免疫功能衰退表现在巨噬细胞和自然杀伤细胞对肿瘤细胞的直接清除作用减弱,树突状细胞的肿瘤抗原呈递能力下降;而获得性免疫功能的衰退主要表现在CD8+T细胞毒性的下降并分泌促肿瘤生长因子.干预免疫衰老可为临床肿瘤防治提供新思路.     

联合自杀基因与IL-2基因转移疗法的抗肿瘤效果及其抗肿瘤免疫应答的诱导作用

单用自杀基因疗法或单用细胞因子基因疗法抗肿瘤效果不理想,本研究中我们观察了大肠杆菌胞嘧啶脱胺酶(CD)基因与白细胞介素2(IL-2)基因联合转移对荷瘤小鼠的治疗效果及其对抗肿瘤免疫的诱导作用。复制荷瘤小鼠模型后在荷瘤部位注射表达CD基因的重组腺病毒(AdCD)及表达小鼠IL-2基因的重组腺病毒(AdIL2),并连续10天、每天1次腹腔注射5氟胞嘧啶(5FC)对荷瘤小鼠进行治疗。结果表明,AdCD/5FC/AdIL2联合基因治疗能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长,并明显延长其生存期(P<0.01)。联合基因治疗组小鼠肿瘤细胞发生明显的坏死,瘤内及瘤周有大量的炎性细胞浸润,瘤内CD4~ 和CD8~ T细胞明显增加,脾细胞NK和CIL杀伤活性明显高于单用AdCD/5FC、对照病毒AdLacZ/5FC或PBS组。实验结果表明,联合应用自杀基因与细胞因子基因治疗可更有效诱导机体的抗肿瘤免疫反应,从而更显著地抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

用瘤内依赖IL_2的淋巴细胞治疗肺癌

瘤细胞表面有诱导细胞免疫的抗原,接种瘤细胞的动物能获得排斥该肿瘤的能力,这种排斥作用在体内由单核细胞、肿瘤特异性T细胞介导。现已知道,肿瘤特异性T细胞、NK细胞及其它非特异性细胞毒细胞在体内均能破坏肿瘤。最近,Rosenberg等用IL-2刺激的PBL治疗人类肿瘤获得明显的效果。从病人活检瘤块中分离的T细胞,能特异地杀伤自身肿瘤,但迄今尚无用瘤内特异性致敏T细胞作过     

乳腺癌患者手术前后外周血免疫细胞亚群FCM检测分析

目的：探讨乳腺癌患者手术前后免疫功能状态变化及临床意义。方法：手术前后3－6d抽取外周静脉血，流式细胞术（FCM）检测CD3^ 总T淋巴细胞、CD4^ 辅助T细胞、CD8^ 杀伤／抑制T细胞、CD4^ /CD8^ 、CD56^ NK细胞、CD19^ 总B淋巴细胞、CD25^ IL-2受体细胞比例。结果：乳腺癌术后外周静脉血CD3^ 总T淋巴细胞、CD4^ 辅助T细胞、CD25^ IL-2受体细胞比例较术前显著增高，CD56^ NK细胞比例显著下降，CD8^ 杀伤／抑制T细胞、CD4^ /CD8^ 比值、CD19^ 总B淋巴细胞变化差异无显著性。结论：乳腺癌术后机体处于正性免调节状态，表现在以T淋巴细胞介导的细胞免疫反应为主，其发生机制及临床意义值得探讨。