Graves病与CD4^＋CD25^＋CD127^-调节性T细胞相关性研究

Graves病是常见自身免疫性疾病,其发病机制不清楚。CD4^＋CD25^＋T细胞是新近发现的一群调节性T细胞,专职免疫无能和免疫抑制,其与自身免疫性疾病有密切关系。为研究调节性T细胞与Graves病的关系,笔者对33例Graves病患者血中高表达CD25,同时低表达CD127的CD4^＋调节性T细胞进行检测,现报道如下。     

非小细胞肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1的相关性分析e

目的：探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1（血清转化生长因子β1）的相关性及意义。方法：分别采用流式细胞技术和ELISA法检测40例非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量及TGF—β1的表达水平。结果：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF-β1的表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞与TGF—β1的表达成正相关。结论：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量的增多可能诱导TGF—β1表达水平的增高。     

重症肌无力患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达

目的：观察免疫治疗对重症肌无力（MG）患者外周血CD4＋CD25^＋T淋巴细胞表达的影响。方法：应用四色流式细胞术对MG30例（观察组）治疗前后和30例健康者（对照组）外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋、CD25^＋ T淋巴细胞亚群等表达进行检测，以CD2。抗原荧光强度10的细胞定义为CD25^high细胞，分析其百分率和荧光强度，并结合临床资料进行相关分析。结果：观察组治疗前外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^high、CD25^＋占总淋巴细胞的比例与正常对照组无显著差异（P〉O．05），但CD4^＋＋细胞数较正常增高（P〈0．05）；经类固醇激素或经胸腺切除治疗后，外周血CD4^＋CD25^＋、CD／CD25^high与治疗前及对照组比较，差异显著（P〈0．05）。结论：经免疫治疗后的MG患者外周血中存在高比例的CD4^＋CD25^＋表达，可能与病情缓解有关。     

非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25+T细胞和 TGF-β1的相关性分析

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和TGF-β1(血清转化生长因子β1)的相关性及意义.方法:分别采用流式细胞技术和ELISA法检测40例非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞数量及TGF-β1的表达水平.结果:非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和TGF-β1的表达水平明显高于对照组(P＜0.05).肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞与TGF-β1的表达成正相关.结论:非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞数量的增多可能诱导TGF-β1表达水平的增高.     

CD4+CD25+CD127-调节性T细胞在Graves病中的变化及临床意义

目的 通过观察Graves病患者外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)数量的变化,探讨Graves病发生的免疫学机制.方法 采用流式细胞术检测90例Graves病患者和50名正常人外周血中CD4+CD25+CD127-Treg的比例,同时测定甲状腺功能指标及甲状腺自身抗体水平.采用t检验进行组间比较,采用线性相关分析法分析CD4+CD25+CD127-Treg与甲状腺功能指标的关系.结果 90例Graves病患者与50名正常人外周血中CD4+CD25+CD127-Treg的比例分别为1.39％±1.09％和4.59％±1.14％,两者间差异有统计学意义(t=16.4,P＜0.01).CD4+CD25+CD127-Treg数量与促甲状腺激素受体抗体水平呈负相关(r=-0.24,P＜0.05),与总三碘甲状腺原氨酸、总甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、甲状腺球蛋白抗体、甲状腺微粒体抗体水平呈负相关(r=-0.62、-0.65、-0.56、-0.71、-0.50、-0.15,P均＜0.01).结论 Graves病患者CD4+CD25+CD127-Treg 数量减少,且CD4+CD25+CD127-Treg数量与甲状腺功能指标及甲状腺自身抗体水平关系密切,提示CD4+CD25+CD127-Treg数量减少可能与Graves病的发病有关.CD4+CD25+CD127-可能是人CD4+T 细胞中Treg的特异性标志物.     

放射损伤对鼻咽癌外周血CD4+CD25high调节性T细胞的影响

目的通过分析放疗前后鼻咽癌(NPC)患者外周血CD4+CD25high调节T(Tr)细胞比例及其变化规律.初步探讨NPC患者免疫抑制机制和放疗对免疫抑制的影响,为有效提高NPC的治疗疗效提供参考.方法采用流式细胞术检测36例初治的鼻咽癌患者放疗前、放疗后和30例正常健康者(对照组)外周血中T细胞亚群及CD4+CD25high T细胞比例.结果放疗前鼻咽癌患者CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例及CD4/CD8比值接近正常对照组(P＞0.05);而CD4+CD25high Tr细胞比例明显高于正常对照组[分别为(2.76±1.06)%,(2.06±0.98)%,P＜0.05];放疗结束时,与放疗前比较,外周血CD4+T细胞比例减低、但差异无统计学意义(P＞0.05);CD4+/CD8+比值减低(P＜0.05),而CD4+CD25high Tr细胞比例明显升高,差异有统计学意义[(4.88±1.02)%,P＜0.05].结论CD4+CD25high Tr细胞可能是鼻咽癌患者免疫抑制的重要原因之一,与鼻咽癌免疫逃逸有关.放疗后外周血CD4+CD25high Tr细胞比例比CD4+/CD8+比值更能敏感反映免疫功能状态,有可能成为鼻咽癌的更有效的免疫监测指标.     

严重多发伤患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的变化及意义

目的 观察严重多发伤患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg细胞)的变化及意义.方法 40例严重多发伤患者于伤后1,3,5,8 d流式细胞仪检测各组患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的比率的变化,ELASA法检测血清中IL-10、干扰素-γ(IFN-γ)浓度,并与健康组进行对比.结果 CD4+细胞在伤后1～8 d均明显低于健康组(P＜0.01),CD8+细胞在伤后5～8 d明显高于健康组(P＜0.05或P＜0.01).严重多发伤患者伤后5 d外周血中CD4+CD25highTreg细胞比率开始升高,与伤后1,3 d比较,差异有统计学意义(P＜0.01);伤后8 d仍持续升高,与伤后5 d比较,差异有统计学意义(P＜0.05).患者外周血IFN-γ浓度持续下降,而患者外周血IL-10浓度则持续上升.结论 Treg细胞比率在严重多发性创伤后明显升高,更重要的是,其在减少Th1类细胞因子分泌及抑制创伤免疫等方面发挥了重要的作用.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞的研究现状

调节性T细胞(Treg)是体内一类具有免疫调节功能的特殊T细胞群,根据其产生和表型分为不同的亚群,不同的Treg亚群与自身免疫性、移植免疫、肿瘤、感染、呼吸道等疾病的发生和进展密切相关。本文对不同Treg亚群的特征、作用及其与上述疾病的关联进行了介绍。     

子痫前期患者蜕膜中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的Foxp3表达

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在子痫前期患者胎盘附着处蜕膜中表达及其临床意义。方法选择子痫前期30例和正常晚期妊娠30例,采用免疫组化法检测蜕膜CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3的阳性表达率,分析比较两组检测结果。结果蜕膜中Foxp3在子痫病例组及正常对照组的阳性表达率分别为16．67％和66．67％,子痫病例组Foxp3阳性表达率明显低于正常对照组（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3在子痫前期患者蜕膜组织中阳性表达率减低,其免疫抑制功能减弱,从而使母胎免疫耐受失衡、受损,免疫排斥作用增强,导致子痫前期的发生。     

内毒素作用下淋巴细胞中CD4＋CD25＋调节性T细胞变化及连翘对其的影响

目的探讨不同时间点内毒素（LPS）对CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,Treg）的影响及连翘（forsythia suspensa,FS）干预后CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化。方法体外培养Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,分为对照组、LPS（10ng/ml）组、LPS（10ng/ml）＋多黏菌素B组（10ng/ml）、LPS（10ng/ml）＋连翘（12．5、25、50mg／ml）组,分别于3、6、12h收集标本．流式细胞术检测CD4＋CD25＋调节性T细胞在淋巴细胞中的百分比,荧光定量RT—PCR法检测Foxp3mRNA表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测TNF—a、IL-10分泌水平。结果脾脏淋巴细胞中CD4＋CD25＋Treg的百分比和Foxp3mRNA的表达在12h较3、6h明显升高（P〈0．01）;TNF—a、IL-10的分泌随时间点的延长均显著升高（P〈0．01）;随连翘剂量增加,TNF-a、IL-10分泌水平,Foxp3mRNA表达和CD4＋CD25＋Treg百分比均明显降低（P〈0．05）。结论内毒素参与并诱导了CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的变化,其随内毒素作用时间延长呈上升趋势。连翘能显著降低CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的百分比。     

吞噬PUVA处理的同种异基因细胞的树突细胞对抗原特异性CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞的体外诱导作用

目的探讨吞噬体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的树突细胞(DC)对抗原特异性CD4+ CD25 +Foxp3+调节性T细胞的体外诱导作用。方法分离LEW大鼠骨髓细胞,经大鼠重组IL-4和GM-CSF共同诱导培养制备骨髓来源的LEW大鼠DC。分离DA大鼠脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的DA大鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)并用流式细胞仪检测其凋亡率。在体外将DA大鼠的PUVA-SP或SP与LEW大鼠骨髓来源的DC共同培养,得到PUVA-SPDC和SPDC,以Luminex液相芯片法检测PUVA-SPDC和SPDC培养上清中IL-10、IL-12的含量。以CFSE标记PUVA-SP,流式细胞仪检测LEW大鼠DC对DA大鼠PUVA-SP的摄取情况。将LEW大鼠CD4+25-T细胞与PUVA-SPDC或SPDC混合培养5d,流式细胞仪检测诱导形成的CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞,同时分离培养体系中的CD4+ CD25+ T细胞,通过混合淋巴细胞反应(MLR)检测PUVA-SPDC诱生的CD4+ CD25+ T细胞对LEW大鼠CD4+ CD25- T细胞(效应性T细胞)体外增殖的抑制作用...     

抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞的影响

目的 评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞(CD4~+ CD25~(high)Treg)的影响.方法 2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例).其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg.在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml.应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4~+T细胞和CD4~+ CD25~(high)Treg比例的变化,半定量RTPCR检测CD25 mRNA的表达变化.结果 肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05).抗体组术后第17天CD4~+ CD25~(high)Treg占CD4~+ T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4~+ CD25~(high)Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05).抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05).对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4~+ CD25~(high)Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持.     

寻常型银屑病T细胞趋化性的初步分析

目的:初步探讨寻常型银屑病患者外周血T细胞的趋化性及其影响因素。方法:分离患者及健康对照外周血T细胞,应用MicroBoyden微孔膜小室趋化板检测不同浓度、不同时间趋化因子SLC、IL-18、PHA及CCR7单克隆抗体对T细胞趋化性的影响。结果:在较高浓度及较长作用时间下,SLC对于银屑病患者T细胞趋化作用明显高于健康对照(P<0.05),而在较低浓度时两者没有差别(P>0.05);T细胞在SLC作用6 h后趋化作用最大;在相同浓度和作用时间下,PHA(3.67±0.29)和IL-18(5.24±0.41)与空白对照(2.43±0.24)相比可以明显增加T细胞的趋化性(P<0.01),而抗CCR7单克隆抗体(0.98±0.15)可以明显降低T细胞的趋化性(P<0.01)。结论:银屑病患者T细胞趋化性明显高于健康对照。     

Regular tai chi chuan exercise enhances functional mobility and CD4CD25 regulatory T cells

Background

The duration and vigour of physical exercise are widely considered to be critical elements that may positively or negatively affect physical health and immune response.

Objectives

To investigate the effect of a 12 week programme of regular tai chi chuan exercise (TCC) on functional mobility, beliefs about benefits of exercise on physical and psychological health, and immune regulation in middle aged volunteers.

Methods

This quasi‐experimental research design involving one group with testing before and after the programme was conducted to measure the effect of 12 weeks of TCC exercise in 14 men and 23 women from the normal community.

Results

Regular TCC exercise had a highly significant positive effect on functional mobility (p  =  0.001) and beliefs about the health benefits of exercise (p  =  0.013) in the 37 participants. Total white blood cell and red blood cell count did not change significantly, but a highly significant (p<0.001) decrease in monocyte count occurred. A significant (p  =  0.05) increase in the ratio of T helper to suppressor cells (CD4:CD8) was found, along with a significant (p  =  0.015) increase in CD4CD25 regulatory T cells. Production of the regulatory T cell mediators transforming growth factor β and interleukin 10 under specific antigen stimulation (varicella zoster virus) was also significantly increased after this exercise programme.

Conclusions

A 12 week programme of regular TCC exercise enhances functional mobility, personal health expectations, and regulatory T cell function.     

HLA-G~+调节性T细胞在肾移植受者外周血中的比例及其功能研究

目的 确定人类白细胞抗原-G(HLA-G)区别于CD4~+ CD25~+ FoxP3~+ 调节性T细胞的细胞表型特征,观察HLA-G~+ T细胞在混合淋巴细胞培养中的免疫调节作用及其在移植免疫调节中的活性和意义.方法采用流式细胞术检测肾移植受者外周血CD4~+ HLA-G~+ GD8~+ HLA-G~+ T淋巴细胞的含量,分选HLA-G~+ T淋巴细胞,分析细胞表型,采用RT-PCR检测调节性T细胞的特异性标志FoxP3在HLA-G~+ T淋巴细胞的表达情况,以淋巴细胞分离液分离的PBMC、CD4~+ CD25~(high)、CD4~+ CD25~-细胞作为对照.取5对活体肾移植供受者的淋巴细胞进行混合培养,分别加入流式细胞术分选纯化后的HLA-G~+ 、HLA-G~- T淋巴细胞,对照组只加入供、受者淋巴细胞,MTT法观察细胞增殖和抑制情况.结果 肾移植受者外周血CD4~+ HLA-G~+ 、CD8~+HLA-G~+ T淋巴细胞表达率分别为1.95%±0.34%、3.13%±0.56%.流式细胞术分选HLA-G~+ T淋巴细胞后纯度可达55.0%～75.1%.RT-PCR 结果证明上述细胞CD25、FoxP3均为阴性表达.与HLA-G~- 组、对照组比较,混合淋巴培养3d后HLA-G~+ 组细胞增殖率明显受到抑制(P<0.05).结论 在肾移植受者外周血中存在CD4~+ HLA-G~+ 、CD8~+HLA-G~+ T淋巴细胞,这类细胞不同于CD4~+ CD25~+ FoxP3~+调节性T细胞,它们不表达CD25和FoxP3而表达免疫耐受分子HLA-G,在混合淋巴培养体系中,能显著抑制反应性细胞增殖,具有免疫调节功能.