孕期三丁基氯化锡染毒对子代雄性大鼠发育及性激素的影响

目的 探讨孕期三丁基氯化锡(TBTC)暴露对子代雄性大鼠发育及性激素的影响.方法 将健康成年SPF级妊娠Wistar大鼠随机分为5.0、2.5、1.0 mg/kg TBTC染毒组和阴性对照组(玉米油),每组4只.从妊娠第12天起,采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,直至妊娠第20天,灌胃剂量为5.0 ml/kg.出生后第70天,每组随机抽取10只雄性仔鼠,称重后断头取血,分离双侧睾丸及附睾组织,称重,计算睾丸和附睾的脏器系数.测定血清中睾酮(T)浓度、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平.结果 各TBTC染毒组孕鼠产仔数及雌雄比例间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,2.5和5.0 mg/kg组雄性仔鼠断乳后体重降低,睾丸的脏器系数升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).各TBTC染毒组雄性仔鼠附睾脏器系数间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各TBTC染毒组雄性仔鼠血清中T、LH、FSH浓度间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在妊娠中后期TBTC染毒对子代雄性大鼠具有内分泌干扰作用,影响其生长发育,但暴露尚未引起雄性仔鼠血清中性激素的变化.

Abstract：

Objective To explore the effects of tributyltin chloride (TBTC) exposure during pregnancy on development and sex hormone level of male offspring Wistar rats. Methods The healthy pregnant Wistar rats were randomly divided into 4 groups, 4 in each group,they were given doses of TBTC (5.0,2.5,1.0 mg/kg) by gavage from days 12-20 of gestation. On postnatal day (PND) 70,10 male offspring rats were randomly selected in each group and sacrificed, the blood samples were collected. The testis and epididymis were weighed for account of organic coefficient. The concentration of testosterone (T), luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH) in serum was measured. Results There were no significant differences in number and the sex ratio of offspring rats between the control group and the treatments groups (P>0.05). Compared with the control group, an obvious retarded development was observed from PND21-70 and the viscera coefficient of testis were increased significantly in 2.5 or 5.0 mg/(kg·d) group (P<0.01). No significant difference was observed in serum LH,FSH level. Conclusion TBTC exposure during pregnancy can cause retarded development and increase of organic coefficient of testis of male offspring rats.     

三丁基氯化锡对哺乳动物生殖毒性及作用机制

三丁基锡(tributyltin,TBT)曾主要作为船舶防污油漆广泛使用,后来发现TBT对海洋生物产生严重危害,尤其致软体动物发生性畸变,致使种群退化、数量锐减^[1],于2003年禁用.由于其长期残留性,即使在停用相当长时间后,海水和底泥中仍存在TBT,继而在海洋生物中蓄积,其富集因子大约在5 000-25 000之间,且经蒸煮后仍会存在,提示食用海产品可能存在TBT的潜在危害^[2].三丁基氯化锡(tributyltinchloride,TBTC)是TBT在水中的主要存在形式.因而本文就TBTC对哺乳动物的生殖毒性及其作用机制的研究进展作一综述.     

氯化三丁基锡对雄性小鼠睾酮和雌二醇水平的影响

目的探讨不同剂量氯化三丁基锡(TBTCl)对小鼠雌二醇(E2)、睾酮(T)水平的影响。方法将40只24日龄健康雄性SPF级昆明小鼠按体重随机分为4组,分别为1、0.1、0.01 mg/kg TBTCl染毒组和对照(玉米油)组,每组10只。采用腹腔注射方式染毒,每3天染毒1次,连续染毒25 d,染毒容量为10 ml/kg。观察包皮分离时间和体重变化,检测其血清、睾丸内T、E2水平,并对肝脏内脂肪滴进行病理学观察。结果与0.01 mg/kg TBTCl染毒组比较,对照组和1 mg/kg TBTCl染毒组小鼠体重均较低,差异有统计学意义(P0.05)。TBTCl染毒组与对照组小鼠包皮分离时间比较,差异无统计学意义。与对照组比较,1 mg/kg TBTCl染毒组小鼠血清和睾丸内T水平中位数均较低,0.01 mg/kg TBTCl染毒组小鼠睾丸内E2水平较低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。而小鼠血清E2水平全部低于所用试剂盒的检测限(11 pg/ml)。TBTCl染毒未能导致小鼠肝脏内脂肪滴明显增加。结论 TBTCl暴露可导致小鼠睾酮和雌二醇水平降低,而不同剂量的TBTCl对小鼠的靶作用位点可能不同,导致对暴露小鼠体重的影响呈非单调性剂量-反应关系。     

性别分化关键期三丁基氯化锡暴露对大鼠生精功能和睾丸酶活力的影响

目的 探讨性别分化关键期三丁基氯化锡(TBTC)暴露对大鼠性成熟后睾丸酶活力和生精功能的影响.方法 将16只健康成年SPF级妊娠Wistar大鼠随机分为高(5.0 mg/kg)、中(2.5mg/kg)、低剂量(1.0 mg/kg)TBTC染毒组和溶剂对照组(玉米油),每组4只.从妊娠第12天起,采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,直至妊娠第20天,灌胃剂量为5.0ml/kg.出生后第70天,每组随机抽取10只雄性仔鼠,称重后处死,分离双侧睾丸及附睾组织,测定附睾精子数及睾丸酶[乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)、一氧化氮合酶(NOS)]活力.结果 与溶剂对照组比较,各TBTC染毒组孕鼠妊娠第12天及第20天的体重和体重增长量差异无统计学意义(P>0.05).与溶剂对照组比较,高、中剂量TBTC染毒组雄性仔鼠断乳后体重增长较慢,差异均有统计学意义(P<0.01). TBTC染毒组附睾尾精子数随TBTC染毒剂量的升高呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01).与溶剂对照组相比,高、中、低剂量TBTC染毒组雄性仔鼠LDH活力较高,高、中剂量TBTC染毒组雄性仔鼠SDH活力较高,差异均有统计学意义(P<0.01).各TBTC染毒组雄性仔鼠ACP和NOS活力间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).未发现睾丸组织结构发生改变.结论 性别分化关键期TBTC染毒对雄性仔鼠具有内分泌干扰作用,减缓了雄性仔鼠的体重增长,促进了其精子发生和LDH、SDH的活力.

Abstract：

Objective To explore the effects of exposure to tributyltin chloride (TBTC)during the critical period for sex differentiation on activities of enzymes in testis and spermatogenesis function in Wistar rats.Methods Sixteen healthy adult pregnant Wistar rats were randomly divided into four groups(5,2.5 and 1 mg/kg TBTC,vehicle control)with 4 animals per dose group.They were given doses of TBTC by gavage from days 12-20 of gestation once a day.The volume of the vehicle used was 5 ml/kg body weight.On the postnatal day (PND)70,ten male offsping rats were randomly selected in each group and sacrificed by decapitation after weighed.The sperms in epididymis were counted and the activities of enzymes of testis[including lactate dehydrogenase (LDH),succinate dehydrogenase (SDH),acid phosphatase (ACP),nitric oxide synthase (NOS)]were detected.Several testises were chosen for the histopathological examination.Results The body weight gains of pregnant rats from days 12-20 showed no significant difference among the solvent control group and the each TBTC exposure group (P>0.05).Compared with the control group,body weights gains from PND21-70 were decreased significantly in the 5 and 2.5 mg/kg group (P＜0.01).Cauda epididymal sperm counts increased with the increase of TBTC doses (P<0.01).The activities of LDH in all treated groups and the activities of SDH in the 5 and 2.5 mg/kg TBTC group exhibited significant increase compared with the control group (P＜0.01).There were no significant difference in the activities of ACP and NOS between the exposure groups and the control group(P>0.05).No abnormal structure of testis was observed in all exposure groups.Conclusion Exposure to TBTC during critical period for sex differentiation may decrease body gain and increase spermatogenesis and the activities of LDH and SDH.     

围产期低剂量三丁基锡暴露对子代雌性小鼠发育及雌激素水平的影响

目的 探讨围产期低剂量三丁基锡(TBT)暴露对雌性昆明小鼠生长发育及血清雌激素的影响.方法 将清洁级健康成年妊娠昆明小鼠随机分为100、10、1 μg/kg TBT染毒组和对照组(玉米油),每组6只.从妊娠第6天起,采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,染毒剂量为1 ml/kg,直至哺乳期结束.出生后第49天,每组随机抽取10只雌性仔鼠,称重后取血,分离子宫及卵巢,称重,计算子宫及卵巢的脏器系数.采用放射免疫法测定血清中雌二醇的浓度.结果 与对照组比较,各TBT染毒组雌性仔鼠睁眼时间延长,阴道张开时间提前,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);且随着TBT染毒剂量的增加,雌性仔鼠睁眼时间呈延长趋势.各TBT染毒剂量组雌性仔鼠体重、子宫重量及其脏器系数间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,10μg/kg TBT染毒组雌性仔鼠血清中雌二醇的浓度和卵巢重量及其脏器系数升高,差异均有统计学意义(P＜0.01);且仔鼠血清雌二醇水平随着染毒剂量的增加呈递增趋势.结论 围产期低剂量TBT暴露对雌性仔鼠有内分泌干扰作用,影响其生长发育,导致血清雌激素水平升高.     

三丁基锡及多氯联苯对雄性青鲔鱼的受精率和性行为的影响

环境内分泌干扰物（EDCs）包括17β-雌二醇（17β—E2）、壬基苯酚（NP）、双酚A（BPA）、三丁基锡（TBT）和多氯联苯（PCBs）等，尽管对这些化学物采取了严格管理或禁用，但TBT和PCBs还是广泛的分布于底泥、鱼体和哺乳动物内。     

三丁基锡对小鼠脏器组织总氧自由基清除能力的影响

目的探讨三丁基锡(TBT)对小鼠脏器组织的氧化应激的影响。方法雄性NIH小鼠24只,按体重随机分为8组,每组3只。以13%乙醇配制TBT,按照生理盐水、13%乙醇和10、20、40、80、160、320mg/kg体重的TBT灌胃给药,灌胃染毒24h,测定心、脑、肺、肝、肾组织匀浆液的总氧自由基清除能力(TOSC)。结果小鼠所有脏器组织的TOSC值均呈上升趋势,其中心、脑的变化显著,各剂量组与对照组比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),TBT剂量与TOSC的相关系数均为正值。结论24hTBT染毒对小鼠的抗氧化能力影响呈正调作用。     

三丁基锡毒性研究进展

三丁基锡(tributyltin,TBT)是一种重要的有机锡化合物,因其特有的理化性质可用作木材防腐剂,船体涂料的防污剂,纺织业、工业水系统、木浆和造纸系统以及啤酒厂的抑菌剂。大量实验研究表明TBT会对人体及动物造成危害,主要包括神经毒性、免疫毒性、肝毒性和生殖毒性等。本文将对TBT所致的毒性危害及机制进行综述。     

三丁基锡内分泌干扰及生殖毒性研究进展

三丁基锡是一种用途广泛的有机锡化合物,在水体、海洋食品和生活用品中均可检测到三丁基锡.内分泌干扰物成为近年来热议的公共卫生问题.三丁基锡对人体健康具有潜在危害,笔者从三丁基锡环境污染、人体暴露、内分泌干扰和生殖毒性方面,对三丁基锡国内外研究资料进行综述,并探讨三丁基锡生殖毒性机制.     

三甲基氯化锡染毒对大鼠肠道推进功能的影响

将24只SD大鼠分为4组,三甲基氯化锡(TMT)组分别给予4.64 mg/kg、10 mg/kg和21.5 mg/kg TMT染毒,对照组给予生理盐水,染毒后24 h测定肠道推进功能和Na+-K+-ATPase活力;另将24只大鼠分为4组,TMT组给予10mg/kg染毒,对照组给予生理盐水,分别在3 d和6 d测定肠道推进功能和Na+-K+-ATPase活力。结果显示,大鼠小肠不同部位的Na+-K+-ATPase活力不同。经TMT染毒后肠道推进率较对照组明显降低(P0.01),中高剂量染毒组的肠道Na+-K+-ATPase活力明显降低(P0.01)。10 mg/kg TMT染毒大鼠3 d和6 d肠道Na+-K+-ATPase活力亦明显下降(P0.05)。提示TMT染毒可能会抑制小肠推进功能,推进率的下降可能与肠道Na+-K+-ATPase活力抑制有关。     

Decreased Serum Testosterone Response to Gonadotropin-Releasing Hormone in Male Offspring of Diabetic Female Rats

A study was designed to examine the testicular function of male offspring rats produced by diabetic dams. A marked decrease in testosterone response to exogenous administration of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) was found in male offspring of female rats made diabetic by administration of streptozotocin during early pregnancy. Control rats responded to GnRH with a marked increase in serum testosterone within 4-h postinjection. Male offspring of diabetic female rats demonstrated an unexpected decrease in serum testosterone in response to GnRH when compared with saline-injected rats. The results suggest that a defect in Leydig cell function may occur in the male offspring of diabetic female rats. However, a decreased release of pituitary LH in response to exogenous GnRH stimulation cannot be excluded as a cause of the lower testosterone values.     

孕期及哺乳期低剂量三丁基锡暴露对子代小鼠生长发育的影响

目的 探讨孕期及哺乳期低剂量三丁基锡(TBT)暴露对子代昆明(KM)小鼠生长发育的影响.方法 将清洁级健康成年妊娠昆明小鼠随机分为100、10、1μg/kg TBT染毒组和阴性对照组(玉米油),每组6只.从妊娠第6天(GD6)起,采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,直至哺乳期结束,灌胃剂量按照每天称量的体重计算.仔鼠出生后记录仔鼠数量,雌、雄数量及体重,仔鼠出生后第1、3、5、7、14、21天时称量仔鼠体重,出生后第12天(PND12)开始观察仔鼠睁眼情况,出生后第13天开始观察睾丸下降情况,出生后第20天开始观察阴道张开情况.结果 100μg/kg剂量组母鼠孕期体重净增加量显著降低(P＜0.01),各染毒组母鼠哺乳期体重增加量、产仔数量及仔鼠雌、雄比例,差异无统计学意义(P＞0.05).10μg/kg剂量组仔鼠体重在出生后第1天和各染毒组仔鼠在出生后第3、5、21天比对照组显著降低(P＜0.05,P＜0.01),100μg/kg剂量组仔鼠出生后第1天到第3天体重增加量及10μg,kg和100μg/kg剂量组仔鼠在出生后第14到20天体重增加最比对照组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).各TBT染毒组仔鼠的阴道张开时间比对照组显著提前,睁眼时间、睾丸下降时间显著延迟(P＜0.05,P＜0.01)且随着染毒剂量的增加睁眼时间有延迟的趋势.结论 孕期及哺乳期低剂量TBT暴露可以影响仔鼠的生长发育.

Abstract：

Objective To explore the effects of gestation and lactation exposure to low dose tributyltin (TBT)on development of offspring of Kunming mice.Methods The healthy adult pregnant Kunming mice were randomly divided into 4 groups,6 in each group,they were given doses of TBT(100,10 and 1 μg/kg)by gavage from days 6 of gestation(GD6)to the end of lactation.The number of pups and the number of male,female of each dams were determined,and the body weight of pups on PNDs1,3,5,7,14,21 was weighed.The eye opening from PND12 and the testes descent from PND13 and the vagina opening from PND20were examined.Results Compared with the control group,the gestational body weight gain of dams decreased in 100μg/kg group(P＜0.01).The lactational body weight gain,the number of pups and ratio of female and male were no significant difference among groups.The time of eye opening was significantly delayed and the vagina opening was significantly ahead in treatment groups(P＜0.05.P＜0.01),and there was a increasing trend in time of eye opening following the TBT dose rising.Conclusion Gestation and lactation exposure to low-dose TBT may have adverse effects on the growth and development of offspring of Kunming mice.     

L-精氨酸与N-硝基L-精氨酸甲基酯对雄性大鼠睾酮分泌的影响

目的:阐明一氧化氮(NO)对男性生殖轴中睾丸内分泌功能的调节作用。材料与方法:于雄性SD大鼠腹腔内注射不同剂量(0～210mg/kg)的L-ARG(L-arginine,L-ARG,NO前体)与L-NAME(Nw-nitrio-L-arginine-mythel-ester,L-NAME,NO合酶的竞争性抑制剂,0～70mg/kg),每天一次,共8天,最后一次注射后1小时采血 然后将SD大鼠分成4组,分别注射同一剂量的L-ARG(160mg/k8)、L-NAME(50mg/kg)、L-ARG+L-NAME和生理盐水,每天一次,注射13天,每隔3～4天采血一次。用放射免疫同步测定法测定血清中睾酮含量,对所得数据进行统计学处理。结果:L-ARG对睾酮分泌具有抑制作用(P<0.01),而L-NAME则促进睾酮的分泌(P<0.01),两者都具有时间依赖性,并与剂量高度相关。L-ARG和L-NAME混合注射时,睾酮的含量与生理盐水注射组无明显区别(P>0.05)。结论:NO对雄性大鼠的睾酮分泌具有抑制作用。     

围产期低剂量氯化三丁基锡暴露对子代青春期雄性小鼠发育及性激素水平的影响

目的 探讨围产期低剂量氯化三丁基锡( TBTCl)暴露对子代雄性小鼠发育及血清、睾丸组织中雌激素(E2)和雄激素(T)水平的影响.方法 将20只妊娠6d的SPF级昆明小鼠采用经口灌胃方式进行染毒,剂量为0(对照,玉米油)、1、10、100 μg/kg TBTCl溶液,每组5只,染毒至哺乳期结束.仔鼠断乳后每周称量一次体重.出生49天(PN D49)时,每组随机抽取10只雄性仔鼠,测定睾丸、附睾、脑、肝、肾、胸腺重量,并计算脏器系数.测定血清和睾丸组织中E2和T水平.结果 与对照组相比,除100 μg/kg剂量组在PND21、28、35、42、49时体重显著降低(P＜0.05,P＜0.01)外,其他各组体重均无显著差异;除100μg/kg TBTCl染毒组睾丸系数升高(P＜0.01)外,肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、附睾的脏器系数均无显著差异;除10及100 μg/kg TBTCl染毒组睾丸组织中E2水平降低(P＜0.05,P＜0.01)外,其他各组血清和睾丸组织中E2和T水平均无显著差异.结论 围产期低剂量TBTCl暴露不仅影响雄性小鼠的生长发育,而且降低了睾丸组织中E2水平,并可扰乱小鼠血清、睾丸组织内的雌、雄激素水平的平衡.     

青春后期少女乳房发育状况及 与性激素水平的关系

对湖南省1109名15至18岁少女乳房发育状况调查结果表明,园盘形和半球形分别占38.1％和57％;80.1％少女乳房成熟度已达B_4至B_5期,平均体积181.6±101.11至201.5±120.5cm~3,乳房杯差8.88±3.18(cm,±SD),其中A级占82.6％(即≤10cm),B级～G级占17.4％。多数少女乳房已发育成熟,但体积相形见小。随机抽样101名少女测定血浆睾酮(T)及雌二醇(E_2)、血清三脂酰甘油(TG)。结果发现小乳房组(体积<120cm~3)血浆T值(59.6±10.8ng/dl)显著高于大乳房组(乳房体积>320cm~3)的血浆T值(46.05±10.10ng/dl),两组血浆卵泡期E_2及血清TG水平差异无显著性。推测血浆T值偏高可能是乳房发育不良的重要因素之一。     

丙烯腈对男工性激素水平的影响

目的探讨丙烯腈(ACN)对男工性激素水平的影响,全面评价ACN生殖危害,为保护工人及子代健康提供科学依据。方法选112名职业性接触ACN的男工为接触组,同时选择地理位置和经济条件相近的128名不接触ACN男工为对照组,用放射免疫分析法(RIA)测定其血清中睾酮(T)、黄体生成素(FSH)、卵泡刺激素(LH)和雌二醇(E2)浓度。结果接触组男工血清中T和FSH浓度明显低于对照组(P<0.05),LH和E2浓度两组之间差异无显著性。当按车间分组时,ACN浓度较低的溶剂车间的男工血清中T浓度高于其他3个车间,但差异无显著性。当接触组按个人累计外接触剂量(包括吸烟)分组时,接触组男工血清中FSH和T浓度随接触剂量增加呈下降趋势。当外接触剂量≥50g时,T浓度明显降低(P<0.05),E2浓度明显升高(P<0.05);当外接触累计剂量≥100g时,血清中FSH浓度也明显低于对照组(P<0.05)。结论ACN及其代谢产物(CEO)能诱导男工血清中FSH、T和E2水平发生改变;提示,接触ACN可能对内分泌功能和睾丸中支持细胞和间质细胞有损伤,从而可能引起性功能障碍。     

氰戊菊酯对未成熟雌性大鼠的体液免疫及性激素的影响

目的：了解氰戊菊酸对未成熟雌性SD大鼠性激素分泌和体液免疫功能的影响并探讨其影响，机制。方法：20只4周龄雄性SD大鼠随机分为两组，分别为氰戊菊酯组（以氰戊菊酸LD50的1／10剂量染毒）和对照组，腹腔注射给药4周后取血清，用酶联免疫吸附法测定白细胞介素6（IL－6），肿瘤坏死因子（TNF－α）和免疫球蛋白G（IgG)的水平，用放射免疫法测定血清中17β－雌二醇和睾酮水平，结果：氰戊菊酯实验组小鼠外周血IL－6，TNF－α，IgG的含量分别为2．244mg/ml,0.360ng/ml,4.928μg/ml，对照组小鼠外周血IL－6，TNF－α，IgG的含量分别为2．805ng/ml,0.439ng/ml,3.825μg/ml，实验组与对照组相比，IL－6，TNF－α水平均有所下降，差异有显著性（P＜0．05），而IgG增高，差异有极其显著性（P＜0．01），外周血雌二醇含量实验组（50．785pmol/L)高于对照组（45．029pmol/L)，差异有显著性（P＜0．05），睾酮水平实验组（0．354nmol/L)与对照组（0．323nmol/L)，差异无显著性（P＞0．05），结论：氰戊菊酯可以影响到体液免疫系统和性激素水平，其机制可能是氰戊菊酯通过影响机体雌激素水平，从而影响到整个机体的免疫系统。