奥曲肽紫杉醇偶联物靶向治疗小细胞肺癌的实验研究

目的合成奥曲肽紫杉醇偶联物(paclitaxel-octreotide conjugates),探讨偶联物对人小细胞肺癌(SCLC)细胞株H446的细胞毒性和靶向性。方法合成分离并纯化奥曲肽紫杉醇偶联物PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT,实时定量PCR法检测人SCLC细胞株H446及人成纤维细胞中生长抑素受体(SSTR)的表达,四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色(MTT)法检测不同浓度和时间梯度的偶联药物对H446及人成纤维细胞的抑制率,流式细胞术检测1000nmol/L紫杉醇、PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后H446细胞周期和凋亡率的变化。结果 H446细胞中SSTR1～5 mRNA均有较高量的表达,而人成纤维细胞中未检测到SSTR mRNA的表达。奥曲肽紫杉醇偶联物对H446细胞的杀伤作用与紫杉醇相似,具有浓度(1～1000 nmol/L)和时间(24、48、72h)依赖性;而对SSTR阴性的成纤维细胞,偶联药物的毒性作用要明显低于紫杉醇(P<0.05)。流式细胞术分析PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后,H446细胞周期均停滞在G2/M期。结论奥曲肽紫杉醇偶联药物具有较好的靶向性,在SCLC的治疗中具有重要的应用前景。     

生长抑素受体2在小细胞肺癌中的表达及其与患者生物学特征的关系

目的:检测小细胞肺癌(SCLC)标本中生长抑素受体2(SSTR2)的表达,并对SCLC患者的生物学特征(年龄、性别、吸烟、TNM分期、预后)进行统计学分析,旨在判定SSTR2的表达与患者生物学特征是否具有相关性,评估能否将SSTR2作为诊断、治疗的靶点,拓宽SCLC的治疗途径.方法:采用免疫组化方法检测SCLC组织标本...     

非小细胞肺癌患者血清中 microRNA －99a 表达与预后的关系

目的：探讨microRNA－99a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法将50例非小细胞肺癌患者作为观察组,将同期来院体检的健康志愿者作为对照组,收集观察组患者和对照组志愿者血清,以RT－PCR法检测总RNA中microRNA－99a的表达量并进行比较,分析microRNA－99a的表达量和观察组患者临床病理、预后的关系。结果观察组microRNA－99a的表达量明显低于对照组,差异有统计学意义（ P＜0.05）。 microRNA－99a的表达量和观察组患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）;观察组microRNA－99a的表达量低者生存时间低于表达量高者,差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论 microRNA－99a在非小细胞肺癌中的表达下降和病情进展存在相关性,可作为肺癌治疗的观察指标。     

生长抑素受体亚型在人肝星状细胞的表达及其临床意义

目的研究人肝星状细胞系(LX-2细胞)生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)亚型的表达情况,探讨其临床意义。方法选择对数生长期的LX-2细胞,将细胞以8×104个/孔接种于预置入盖玻片的6孔板中,分为LX-2组、中药复方861组、奥曲肽(octreotide)处理组及SSTR亚型阳性细胞(PANC-1)对照组,每组重复2孔。应用免疫细胞化学染色方法,观察LX-2细胞SSTR 2、SSTR5的表达;用RT-PCR方法观察SSTR亚型1~5的表达。结果免疫细胞化学染色结果发现,LX-2细胞SSTR亚型2、5表达阳性,阳性物质呈棕红色,主要位于细胞膜及细胞质,复方861处理组SSTR2、5表达增强,细胞着色较深;RT-PCR结果发现,LX-2细胞SSTR亚型1~5的表达均阳性,阳性表达的高低依次为SSTR1、SSTR4>SSTR2、SSTR5>SSTR3(P<0.05)。结论LX-2表达5种SSTR亚型,肝星状细胞可能是SST及其类似物降低门静脉压力的作用靶点。奥曲肽可能通过SSTR2、SSTR5亚型调节肝星状细胞的舒张与收缩功能,从而影响肝内阻力及门静脉压力。     

^99Tc^m-HL91肺显像与非小细胞肺癌恶性程度的相关性

目的探讨99Tcm-HL91(4,9-二氮-2,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟)显像与肺癌恶性程度的关系。方法35例非小细胞肺癌患者,注射99Tcm-HL91,4 h后行胸部前后位、后前位平面及断层显像,利用感兴趣区技术,计算肿瘤与对侧正常组织的放射性比值(T/N)。患者均行细胞学检查,标本做HE染色。结果99Tcm-HL91平面显像:30例显像阳性;断层显像:33例显像阳性。断层显像4 h的T/N比值显著高于平面像的T/N比值(t=10.619,P=0.000);HL91显像的T/N比值与肺癌细胞恶性程度相关(r=0.626,P=0.000)。结论HL91显像的T/N比值与肺癌细胞恶性程度呈中度正相关。HL91显像可以用来预测肿瘤恶性程度。     

99mTc-Sandostatin生长抑素受体显像在肺癌诊治中的临床意义

目的探讨 99m Tc-Sandostatin生长抑素受体显像对肺癌的诊断价值和治疗指导. 方法57例胸部CT疑肺癌患者.静脉注射 99m Tc-Sandostatin (991.6±187.59)MBq后,采用双探头可变角SPECT(Millenium VG,HAWKEYE GE)行平面及胸部断层显像,经重建后同时获得匹配的发射-透射图像,并获得融合图像.勾画肿块感兴趣区(ROI)计算肿瘤和正常肺组织的放射性比值(T/N),所有病灶均经病理及(或)其他检查证实. 结果57例 99m Tc-Sandostatin显像诊断肺癌的灵敏度、特异性和准确性分别为95.7%、90.0%和94.7%.45例患者检查真阳性,9例单个肺小结(SPN,病理证实为良性病变)真阴性,2例鳞癌假阴性,1例结核球假阳性.小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)组T/N分别为3.43±0.66和 2.24±0.31.SCLC与NSCLC相比较,SCLC对 99m Tc-Sandostatin的摄取明显高于NSCLC(t=4.072 ,P＜0.05) . 结论 99m Tc-Sandostatin生长抑素受体显像是一种无创、安全、有效、简便的检查方法,对肺癌均有良好的诊断价值,并对制定化疗方案有一定的指导意义.     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变与癌胚抗原表达水平的关系

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)术前癌胚抗原(CEA)表达水平与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的相关性.方法 NSCLC手术标本EGFR基因19、21外显子基因突变用实时荧光定量PCR检测,术前1个月内静脉血血清CEA浓度用电化学发光法检测.结果 120例NSCLC患者检测出EGFR基因突变者有35例(29.2%),术前血清CEA表达水平增高者56例(46.7%).术前血清CEA浓度为＜5 ng/mL、5～19 ng/mL、≥20 ng/mL时,EGFR基因突变率分别为20.3%、34.3%和47.6%.术前血清CEA表达水平与EGFR基因突变正相关(r=0.208,P=0.023).多变量分析未发现术前血清CEA表达水平是EGFR基因突变的独立预测因素.结论 当术前血清CEA表达水平在一定范围内,EGFR基因突变率随着术前血清CEA浓度的升高而增加.     

99m TC-MIBI动态显像对非小细胞肺癌化疗疗效的预测价值初探

目的 探讨^99mTC-MIBI动态显像对非小细胞肺癌化疗疗效的预测价值。方法 对确诊为不能手术的非小细胞肺癌患者化疗前,静脉注射740mbq ^99mTC-MIBI后分别于30min,2h行SPECT动态扫描,计算早期/晚期肿瘤组织与对侧正常肺组织的放射活性比（T/Ne,T/Nd）,全身采用卡铂/顺铂＋VP16化疗3周期,随后复查胸部CT,评判化疗疗效及其与^99mTC-MIBI动态显像的关系。结果 78例NSCLC符合入选标准,并完成化疗方案,66例呈阳性显像,12例阴性显像,66例阳性显像中化疗有效率为90.7%,阴性显像12例中化疗全部进展,两者比较差异有显著性（P〈0.01）。结论 ^99mTC-MIBI动态显像的放射活性越高,化疗效果越好,对非小细胞肺癌化疗疗效有预测价值,可为合理制定治疗方案提供重要依据。     

趋化因子受体CXCR4在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的探讨CXCR4在肺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测84例肺癌组织、20例正常肺组织中CXCR4的表达,其中84例肺癌中包括36例淋巴结转移。结果 CXCR4蛋白在肺正常组织表达较低,在84例肺癌组织中的阳性表达率高达60.7%(51/84)。CXCR4的表达与肺癌患者的年龄、性别无关,而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移有相关性。低分化组肺癌组织CXCR4阳性表达率(78.95%)明显高于高中分化组(45.65%)。临床Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的肺癌组织CXCR4蛋白阳性表达率分别为50.81%和86.96%;伴淋巴结转移组肺癌CXCR4蛋白阳性表达率为77.78%,没有淋巴结转移组阳性表达率为47.92%;而病理类型中腺癌的阳性表达较高(86.36%)。结论肺癌组织中高表达的CXCR4很可能是促进肺癌侵袭和转移的一个重要分子。     

生长抑素受体与甲状腺眼病

目前认为甲状腺眼病(thyroid eye disease，TED)是一种自身免疫性疾病。临床上判断TED活动性对治疗方法的选择十分重要。目前认为生长抑素受体显像技术(somatostatin receptor scintigraphy，SRS或octreoscan)可使表达生长抑素受体的眼眶组织细胞显像，并认为SRS有助于判断TED活动性和预测TED疗效；也有文献报道生长抑素类似物治疗TED有一定疗效。     

真核细胞起始因子-4E表达与非小细胞肺癌预后的相关性

目的探讨真核细胞起始因子-4E(e IF-4E)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及其与预后的关系。方法选择2009年1月~2010年12月温州医科大学附属黄岩医院外科手术切除的NSCLC组织60例以及30例癌旁正常组织样本作为对照,采用免疫组化法检测NSCLC组织以及癌旁正常肺组织中el F4E的表达。NSCLC患者术后均接受2周以上的榄香烯联合顺铂化疗,对所有患者均进行系统地随访评价,分析e IF-4E的表达与无瘤生存期(DFS)和总生存时间(OS)的关系。结果 e IF-4E在NSCLC癌组织中的表达率为80.00%,显著高于正常癌旁组织(33.33%),差异有高度统计学意义(P<0.01)。年龄≥60岁及TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者的e IF-4E高表达率明显高于年龄<60岁及分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。e IF-4E低表达患者的DFS和OS均显著高于高表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 e IF-4E基因在NSCLC组织中呈高水平表达,榄香烯联合顺铂化疗后e IF-4E低表达患者的DFS和OS明显延长。e IF-4E高表达水平可作为NSCLC不良预后的预测因子。     

非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶-10的表达

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中基质金属蛋白酶-10(matrix metalloproteinase-10,MMP-10)的表达及其与临床参数间的关系.方法:使用RT-PCR法及免疫组化法,检测32对NSCLC癌组织及癌旁正常组织中MMP-10的表达水平,并分析其与性别、年龄、分期、分级、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型之间的相关性.结果:MMP-10 的表达在mRNA水平与蛋白质水平表达有差异:MMP-10 mRNA在NSCLC癌组织中的表达要显著低于癌旁正常肺组织(P＜0.05),MMP-10蛋白在肺癌癌组织中的表达要显著高于癌旁正常肺组织(P＜0.01);在NSCLC癌组织中MMP-10 mRNA 的表达与MMP-10蛋白的表达呈正相关(r=0.4672, P＜0.05),而在癌旁正常肺组织中,两者表达相关性无显著统计学差异(r=-0.003022,P＞0.05).结论:MMP-10 mRNA在肺癌癌组织中表达要低于正常组织,MMP-10蛋白在肺癌癌组织中表达要高于正常组织.     

有丝分裂激活的蛋白激酶家族基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨有丝分裂激活的蛋白激酶(MAPK)的三个亚族p38,ERK1及JNK1在非小细胞肺癌中表达的意义及ras与三者之间的关系,并判断它们对非小细胞肺癌预后的影响。方法对1992至1997年共73个患者的手术切除的标本蜡块行p38,ERK1,JNK1及ras的免疫组织化学分析,并判断p38,ERK1,JNK1与一些临床病理因素的关系,明确MAPK的不同亚族与ras的相关性,了解影响非小细胞肺癌预后的指标。结果p38表达与淋巴结转移(P=0．000)和TNM分期有关(P=0．001)。JNK1表达与病理类型(P=0．015)、淋巴结转移(P=0．000)、分期有关(P=0．000),ERK1表达与肿瘤位置有关(P=0．005)。p38(P=0．003)、ERK1(P=0．012)显示与ras有相关性。单因素分析显示TNM分期(P=0．0000)、淋巴结转移(P=0．0000)、肿瘤分化(P=0．0000)、p38(P=0．0001)、JNK1(P=0．0232)及ras(P=0．0022)与非小细胞肺癌预后有关。多因素分析显示p38阴性(P=0．035)、临床分期为Ⅰ期(P=0．026)、淋巴结转移阴性(P=0．044)和肿瘤分化较好(P=0．020)的患者预后较好。结论在MAPK的亚族中,p38的表达可以用来评价淋巴结转移和TNM分期,ERK1表达可评估病理类型、淋巴结转移和分期,JNK1与肿瘤位置有关。ras可能促进p38和ERK1的表达,p38的表达和肿瘤分化、临床分期以及淋巴结转移,是非小细胞肺癌独立的预后因素。     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的 检测肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况.并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的92例肺癌组织标本并以20常肺组织作为对照进行了多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达的检测.并对病理类型、分化程度、临床分期、预后等进行统计学分析.结果 （1）92例肺癌组织中MRP、LRP及其两者共表达的阳性率分别为53%、52%和45%,均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）.（2）MRP、LRP蛋白表达在不同病理类型、不同分化程度之间具有统计学差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况等均无明显差异.另外,MRP、LRP蛋白的表达与患者预后密切相关,且随着耐药蛋白表达种类的增加,生存曲线水平下降.结论 NSCLC中MRP、LRP的表达可能在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,检测NSCLC中MRP、LRP在判断患者预后.指导肿瘤化疗方面具有重要的临床意义.     

NSCLC组织中VEGF和Ki67的表达及其与生存时间的相关性

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、细胞核增殖相关抗原 (Ki6 7)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其与患者生存时间的相关性。方法　用SP免疫组织化学方法观察VEGF、Ki6 7在 6 2例NSCLC组织中的表达。用Kaplan Meier法计算生存率。结果　 (1 )VEGF、Ki6 7在NSCLC组织中表达阳性率均明显高于癌旁正常组织 (P <0 0 1 )。 (2 )VEGF、Ki6 7在NSCLC组织的表达与临床分期及有无淋巴结转移明显相关 (P <0 0 5 ) ,有淋巴结转移组VEGF、Ki6 7阳性率明显高于无淋巴结转移组 ,Ⅲ～Ⅳ期的阳性率明显高于Ⅰ～Ⅱ期的阳性率 (P <0 0 5 )。 (3)VEGF、Ki6 7阳性患者的 3年生存率均明显低于阴性者 (P <0 0 5 )。结论　VEGF、Ki6 7在NSCLC组织的阳性表达与NSCLC的临床分期、淋巴结转移有关。VEGF、Ki6 7阳性患者的预后差     

血管内皮生长因子受体和AQP1在非小细胞肺癌中的表达

目的 观察血管内皮生长因子受体和AQP1在NSCLC、不典型腺瘤样增生及非肿瘤性病变肺组织中的表达,探讨它们在NSCLC发生发展中的作用及相互关系.方法 NSCLC 20例,不典型腺瘤样增生病变20例、肺良性瘤样病变20例,采用RT-PCR、Western-Blot检测KDR、AQP1在NSCLC肺组织、不典型腺瘤样增生病变和非肿瘤性病变肺组织中的表达变化.结果 ①NSCLC肺组织中的KDR和AQP1表达量高于不典型腺瘤样增生(P＜0.05),显著高于非肿瘤性病变肺组织(P＜0.01).②NSCLC肺组织中KDR和AQP1表达呈正相关(r =0.653,P＜0.05).结论 KDR、AQP1在NSCLC肺组织中的表达增加,在NSCLC的发生和发展中有协同效应.     

核素介导生长抑素类似物对非小细胞肺癌细胞的体外杀伤作用

目的观察核素介导生长抑素类似物对非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)细胞的体外杀伤作用。方法 MTT法测定核素介导生长抑素类似物对人肺癌细胞A549和SPC-A1增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell侵袭实验验证核素介导生长抑素类似物对肿瘤侵袭的影响。结果 2~6 d内,核素介导生长抑素类似物对A549和SPC-A1细胞的抑制率随时间延长明显增加。经核素介导生长抑素类似物处理48 h后,A549和SPC-A1细胞凋亡率分别为23.1%和22.6%。与对照组相比,核素介导生长抑素类似物处理过的A549和SPC-A1细胞侵入胶原的数量减少了约1/3。结论核素介导生长抑素类似物具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,这可能为NSCLC的放射治疗提供了新的思路。     

非小细胞肺癌中DAXX表达及临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌组织中DAXX蛋白表达及其与临床病理参数和患者预后的关系。方法：采用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测135例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织中DAXX蛋白的表达情况,结合患者的临床病理参数以及相关随访资料进行统计学分析。结果：DAXX蛋白在非小细胞肺癌癌组织高表达108例（80.0%）,癌旁组织高表达30例（22.2%）,差异具有统计学意义（P＜0.05）,其表达水平与患者的组织病理学分级、TNM分期、原发肿瘤、淋巴结的转移、远处转移以及胸膜侵犯显著相关（P均＜0.05）,Kaplan-Meier统计分析显示DAXX高表达组患者生存时间明显短于低表达组（P＜0.05）,COX比例风险回归模型分析显示DAXX表达程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移为患者独立的预后因素。结论：DAXX蛋白表达与非小细胞肺癌的发生发展有关,其高表达提示患者预后不良。     

多层螺旋CT灌注成像在非小细胞肺癌肿瘤血管生成评价中的应用

目的探讨多层螺旋CT（MSCT）灌注成像在非小细胞肺癌（NSCLC）肿瘤血管生成评价中的应用。方法利用16层螺旋CT灌注成像技术研究经手术病理证实的42例周围型NSCLC（肺部恶性结节/肿块）,记录MSCT灌注成像参数血流量（BF）、血容量（BV）、平均通过时间（MTT）和毛细血管表面通透性（PS）。对42例NSCLC组织标本采用免疫组织化学染色法测定肿瘤微血管密（MVD）,对NSCLC的MVD计数与CT各项灌注参数进行相关性研究。结果 42例NSCLC的免疫组化MVD计数与BV、BF、PS之间呈显著直线相关关系。结论 NSCLC的CT灌注参数能够评价肿瘤微血管生成情况,是一种无创性、理想的活体肿瘤血管检查方法。